海 江 張海蓮 楊 慧

1.青海省第五人民醫(yī)院核磁共振科(青海 西寧 810000)

2.青海省第五人民醫(yī)院影像科(青海 西寧 810000)

3.青海省第五人民醫(yī)院婦科腫瘤科(青海 西寧 810000)

肺癌屬于死亡率較高的惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅人類生命健康，好發(fā)于男性，以50～70歲最為多見，起病隱匿，患者早期多無明顯臨床癥狀，大多患者確診時已到晚期，因此，對肺癌的早期診斷至關(guān)重要[1-2]。動態(tài)對比增強(qiáng)磁共振成像(dynamic contrast enhanced magnetic resonance imaging，DCE-MRI)是一種功能成像技術(shù)，能夠反映病變微血管生成等血流動力學(xué)信息及腫瘤的微觀病理改變，對肺癌的診斷、鑒別具有重要作用[3]。相關(guān)研究表明，免疫組織化學(xué)和分子生物標(biāo)志物也是影響肺癌發(fā)生、發(fā)展的重要因素。胰島素樣生長因子1(insulin-like growth factor 1，IGF-1)屬于胰島素樣生長因子(insulin-like growth factor，IGF)家族成員之一，具有促進(jìn)細(xì)胞生長、分化、血管形成及抗腫瘤的作用，日益受到人們的關(guān)注[4-5]。研究DCE-MRI參數(shù)與IGF-1的相關(guān)性，能實(shí)現(xiàn)活體組織生理、代謝變化的評估，具有重要的臨床診斷和治療價值。因此，本研究通過探究DCE-MRI參數(shù)容量運(yùn)轉(zhuǎn)參數(shù)(volume transfer constant，Ktrans)、速率常數(shù)(rate constant，Kep)、血管外細(xì)胞外間隙容積百分比(extravascular extracellular space fractional volume，Ve)與IGF-1表達(dá)的關(guān)系，以期為提高肺癌的臨床診療效果提供參考和理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2018年4月至2019年12月入住本院的40例經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)為肺癌的患者，平均年齡為(58.25±10.11)歲，男性27例，女性13例。根據(jù)不同分化程度將患者分為低中分化組24例，高分化組16例。其中低中分化組平均年齡為(56.42±9.53)歲，男17例，女7例，體質(zhì)量指數(shù)為(22.12±2.53)kg/m2，吸煙史18例；高分化組平均年齡為(59.22±10.58)歲，男10例，女6例，體質(zhì)量指數(shù)為(21.69±2.14)kg/m2，吸煙史10例。

納入標(biāo)準(zhǔn)：無DCE-MRI檢查禁忌癥者；影像學(xué)檢查(胸部X線、CT)為肺部占位；組織病理學(xué)確診；知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：具有手術(shù)或穿刺禁忌的患者；體內(nèi)有金屬置入物等不能進(jìn)行DCE-MRI檢查的患者；臨床資料不完整者；重要臟器功能障礙。本研究經(jīng)道德倫理委會批準(zhǔn)通過。

1.2 研究方法(1)DCE-MRI掃描方法：取仰臥位，Siemens Verio 3.0 TMRI掃描儀，體部相控陣線圈掃描。掃描開始時注射對比劑馬根維顯(德國Bayer-Schering，0.2 mmol/kg)，生理鹽水(20 mL)沖洗，注射速率為2.0mL/s。全肺掃描約3.4 s，30次，共約2.5分鐘。采用Cine Tool動態(tài)增強(qiáng)分析軟件處理，運(yùn)用藥代動力學(xué)雙室模型進(jìn)行定量分析獲得Ktrans、Kep及Ve值。(2)病理標(biāo)本及免疫組化：經(jīng)手術(shù)切除的肺癌及癌旁組織標(biāo)本經(jīng)固定、石蠟包埋，制作4 μm厚切片，脫蠟，梯度乙醇水化；枸櫞酸鈉緩沖液煮沸熱修復(fù)；滴加3%H2O2，磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗，滴加1%牛血清白蛋白，孵育30 min；滴加兔抗人IGF-1抗體(上海萬疆生物技術(shù)有限公司，P4572Rb-h，1:250稀釋)4℃過夜孵育；PBS沖洗，加入二抗，室溫孵育，PBS沖洗；隨后DAB顯色，10%蘇木素復(fù)染；梯度乙醇脫水，二甲苯透明，封片。(3)免疫組化結(jié)果判定：每張染色片均由三名病理醫(yī)生分別獨(dú)立判斷。根據(jù)陽性細(xì)胞百分比為0、<25%、25%～50%、50%～75%、>75%則對應(yīng)0、1、2、3、4分。細(xì)胞染色強(qiáng)度為無染色、弱染色(淺黃色)、中度染色(黃褐色)、強(qiáng)染色(棕褐色)則對應(yīng)0、1、2、3分。陽性細(xì)胞百分比得分×染色強(qiáng)度得分<3分為陰性，≥3分為陽性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析SPSS 22.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以n(%)表示，采用檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±表示，兩組間行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；Spearman法分析DCE-MRI參數(shù)與IGF1表達(dá)的相關(guān)性。P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 肺癌組織與癌旁組織DCE-MRI參數(shù)及IGF1表達(dá)水平比較肺癌組織Ktrans、Kep、Ve及IGF1陽性表達(dá)率均顯著高于癌旁組織(P<0.05)(見表1)。IGF1主要定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜(見圖1)。

圖1 肺癌免疫組化表達(dá)。圖1A:肺癌組織IGF1陽性表達(dá)(×400)；圖1B:肺癌組織IGF1陰性表達(dá)(×400)。圖2 低分化肺癌DCE-MRI掃描圖像 圖2A為原始圖像，圖2B為Ktrans參數(shù)值圖像(0.341 min-1)，圖2C為Kep參數(shù)值圖像(0.572 min-1)，圖2D為Ve參數(shù)值圖像(0.764)，圖2E為IGF1免疫組化染色陰性圖片(×400)。圖3 高分化肺癌DCE-MRI掃描圖像 圖3A為原始圖像，圖3B為Ktrans參數(shù)值圖像(0.268 min-1)，圖3C為Kep參數(shù)值圖像(0.379 min-1)，圖3D為Ve參數(shù)值圖像(0.628)，圖3E為IGF1免疫組化陽性圖片(×400)。

表1 肺癌組織與癌旁組織DCE-MRI參數(shù)及IGF1表達(dá)水平比較[n(%)]

2.2 不同分化程度肺癌患者一般資料比較高分化組與低中分化組患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)及吸煙史比較差異無顯著性(P>0.05)(見表2)。

表2 不同分化程度肺癌患者一般資料比較[n(%)]

2.3 不同分化程度患者DCE-MRI參數(shù)及IGF1表達(dá)水平比較低中分化組患者Ktrans、Kep、Ve及IGF1陽性表達(dá)率均顯著高于高分化組(P<0.05)(見表3)。

表3 兩組DCE-MRI參數(shù)及IGF1表達(dá)水平比較

2.4 肺癌患者DCE-MRI參數(shù)與IGF1表達(dá)的相關(guān)性Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Ktrans、Kep、Ve與IGF1表達(dá)均呈正相關(guān)(P<0.05)(見表4)。

表4 肺癌患者DCE-MRI參數(shù)與IGF1表達(dá)的相關(guān)性

3 討 論

近幾年，磁共振影像在肺癌等腫瘤的診斷和鑒別中應(yīng)用逐漸增多，發(fā)揮著越來越重要的作用[6-7]。常規(guī)磁共振成像主要是觀察病灶大小、位置等形態(tài)學(xué)變化，以此來進(jìn)行疾病診斷，但對早期疾病及微觀病理改變的檢出率較低，且易受主觀因素干擾。DCEMRI對肺部病變診斷的符合率更高，通過向病人注入對比劑，對病變部位進(jìn)行連續(xù)不斷的掃描，病灶的影像改變通過計(jì)算機(jī)軟件分析后，計(jì)算出半定量參數(shù)及定量參數(shù)，以此來描述腫瘤的生物學(xué)特征。DCE-MRI是一種非侵入性的檢查方法，具有無創(chuàng)、活體、可重復(fù)性強(qiáng)的特點(diǎn)，不僅可以提供病灶的形態(tài)學(xué)信息，也可反映病灶內(nèi)微血管分布情況及血流動力學(xué)特征，評價肺癌組織的微觀病理改變，對肺癌的早期診斷意義重大[8-10]。

DCE-MRI的定量參數(shù)分析常用的有Ktrans、Kep、Ve，能夠定量測定微血管的通透性。Ktrans主要用來反映對比劑由血管內(nèi)運(yùn)動到血管外細(xì)胞間隙的速度，其數(shù)值大小與細(xì)胞間隙、組織間血流灌注等有關(guān)，Ktrans值越大，則說明血管的通透性越高。Kep是反映對比劑從組織血管外回流至血管內(nèi)的速率。Ve則可反映血管外細(xì)胞的密集程度[11,12]。癌變組織新陳代謝旺盛，會增加細(xì)胞間隙及組織血管的通透性，因此與正常組織相比，對比劑的運(yùn)動更為活躍，各定量參數(shù)數(shù)值增大。DCE-MRI定量參數(shù)分析顯示Ktrans、Kep、Ve值有助于對肺癌等疾病的診斷鑒別。王大勇等[13]研究指出，肺癌患者癌灶的Ktrans、Kep、Ve均高于周圍正常胸壁組織。本研究結(jié)果顯示，肺癌組織Ktrans、Kep、Ve均顯著高于癌旁組織，低中分化組患者Ktrans、Kep、Ve均顯著高于高分化組，表明DCE-MRI定量參數(shù)Ktrans、Kep、Ve值可能通過反映腫瘤血管生成情況在肺癌篩查中發(fā)揮重要作用，且提示其數(shù)值高低與肺癌的分化程度有關(guān)，對于不同分化程度的肺癌鑒別具有重要意義。謝禮冰等[14]研究指出DCE-MRI曲線和相關(guān)血流動力學(xué)參數(shù)，對肺癌有重要診斷價值。

IGF1可與其受體結(jié)合，參與激活磷酸肌醇3激酶(PI3K)信號通路等，并可調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡等生物學(xué)行為。已證實(shí)IGF1在多種惡性腫瘤中表達(dá)上調(diào)，且IGF1高表達(dá)與肺鱗癌進(jìn)展有關(guān)[15,16]。孫宇等[16]研究顯示，肺鱗癌組織中IGF1陽性表達(dá)率高達(dá)60%。本研究結(jié)果顯示，肺癌組織IGF1陽性表達(dá)率50%，低中分化組患者IGF1陽性表達(dá)率顯著高于高分化組，表明IGF-1表達(dá)可能參與肺癌的發(fā)生、發(fā)展，且與分化程度具有一定的關(guān)系。推測IGF-1高表達(dá)可能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲，抑制凋亡，促進(jìn)腫瘤血管生成。Spearman分析顯示，Ktrans、Kep、Ve與IGF1表達(dá)均呈正相關(guān)，表明DCE-MRI相關(guān)參數(shù)與免疫組織化學(xué)標(biāo)記物IGF1存在明顯的關(guān)聯(lián)性。

綜上所述，DCE-MRI參數(shù)Ktrans、Kep、Ve與IGF1表達(dá)均呈正相關(guān)，均對肺癌臨床病理特征的評估具有重要意義。但DCE-MRI參數(shù)與IGF1表達(dá)的具體作用關(guān)系及其在肺癌臨床診斷的價值，仍待進(jìn)一步研究。