DOI:10.20023/j.cnki.2095-5774.2023.05.007
收稿日期:2023-05-06
基金項目:福建省林業(yè)科技計劃項目(2017FKJ03)
作者簡介:彭金彬(1977-),男,高級工程師,主要從事森林經(jīng)營、種苗培育研究工作,E-mail:1539572250@qq.com
摘要要:【目的】建立紅掌新品種‘陽光紅心種苗繁育技術(shù)體系?!痉椒ā恳躁柟饧t心為試驗材料,開展不同外植體、激素組合對其組織培養(yǎng)過程中誘導(dǎo)、增殖和生根的影響?!窘Y(jié)果】適宜建立陽光紅心無菌系的外植體是葉片,初代誘導(dǎo)培養(yǎng)基為改良MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA,最高誘導(dǎo)率為56.5%;最佳繼代培養(yǎng)基組合為改良MS + 2.0 mg/L BA + 0.5 mg/L NAA + 0.5 mg/L KT,繁殖系數(shù)達(dá)5.8;最佳的生根培養(yǎng)基為1/2 MS+0.5 mg/L NAA,生根率達(dá)100%;泥碳土:珍珠巖:椰糠=532的基質(zhì)組合最有利紅掌的移栽生長,移栽成活率為94.8%?!窘Y(jié)論】建立陽光紅心組織培養(yǎng)快繁技術(shù)體系,為紅掌植物的規(guī)?;敝程峁├碚撘罁?jù)。
關(guān)鍵詞:紅掌;外植體;組織培養(yǎng);快繁技術(shù)
中圖分類號:S682.14? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文章編號:2095-5774(2023)05-0354-04
Tissue Culture and Rapid Propagation Techniques of a New Anthurium andraeanum
Cultivar ‘Yangguang Hongxin
Peng Jinbin
(Natural Resources Bureau of Luojiang District,Quanzhou,F(xiàn)ujian 362010,China)
Abstract:【Objective】Establish a technology system of seedling propagation of a new Anthurium andraeanum ‘Yangguang Hongxin.【Method】Using‘Yangguang Hongxinas the experimental material,the effects of different explants and hormone combinations on the induction,proliferation,and rooting in its tissue culture process were studied. 【Result】Suitable explant for establishing sterile line of‘Yangguang Hongxinwas leaf,and the initial induction medium was improved MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA,the highest induction rate was 56.5%;The optimal combination of subculture medium was improved MS + 2.0 mg/L BA + 0.5 mg/L NAA + 0.5 mg/L KT,
and the propagation coefficient reached 5.8. The optimal rooting medium was 1/2 MS + 0.5 mg/L NAA,and rooting rate reached 100%. The substrate combination of peat soil,perlite and coconut bran with ratio of 532 was the best for transplanting and growth of Anthurium andraeanum,and the survival rate was 94.8%.【Conclusion】 Establishment of a tissue culture and rapid propagation technology system could provide theoretical basis for the large-scale propagation of Anthurium andraeanum plants.
Key words:Anthurium andraeanum L.;Explant;Tissue culture;Rapid propagation techniques
紅掌(Anthurium andraeanum L.)系天南星科花燭屬多年生草本植物,又稱為花燭、火鶴花、安祖花。紅掌原產(chǎn)于南美地區(qū),性喜溫潤氣候,花型奇特,佛焰苞亮麗鮮艷,色彩多樣,花期較長,葉形顏值高,可作觀花亦可作觀葉之用,已成為全世界比較流行的熱帶花卉種類,具有廣闊的市場前景[1-3]?!柟饧t心紅掌是以‘萊尼為親本,進(jìn)行自交育種而得到的紅掌新品種(品種權(quán)號:CNA20110426.9),其株型緊湊,易長吸芽,叢生性好,佛焰位為紅色、小型、高于葉面,肉穗花序為紅色。因其具有較高的觀賞價值,受到廣大消費者的歡迎,已推廣到華東、西南等主要花卉市場,市場供不應(yīng)求。
陽光紅心和其他紅掌品種一樣,不易結(jié)實,一般采用分株繁殖[4],但其肉質(zhì)根系生長緩慢、不易分蘗,繁殖率偏低,難以應(yīng)用到產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)當(dāng)中。而組培快繁方式被認(rèn)為是花卉生產(chǎn)中快速繁殖的理想途徑。目前,通過組培方式繁殖紅掌種苗已有不少報道[5-8],而紅掌品種陽光紅心組培技術(shù)研究方面尚未見報道。本試驗對外植體部位、激素配方進(jìn)行摸索,以期建立陽光紅心組培生產(chǎn)的技術(shù)體系,為其規(guī)?;a(chǎn)提供技術(shù)支撐。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
供試材料為紅掌品種陽光紅心開花株,種植于泉州市泉美生物科技有限公司溫室內(nèi),栽培管理技術(shù)按照常規(guī)方法進(jìn)行。
1.2 試驗方法
1.2.1 外植體的選擇
選取生長健壯、無病蟲害的植株,分別采集新生葉片(未完全展葉)、葉柄和頂芽作為外植體,進(jìn)行消毒處理和初代誘導(dǎo)。外植體先用清水沖洗干凈,再用洗滌劑漂洗,后用流水沖洗20~30 min,在超凈工作臺上用75%酒精消毒10~20 s,再用0.1% HgCl2消毒10 min,最后用無菌水清洗3次。
1.2.2 誘導(dǎo)培養(yǎng)基的篩選
以改良MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,設(shè)計3種不同的外源激素組合,分別為1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA(T1處理)、2.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA(T2處理)、3.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA(T3處理),每處理接種外植體100個,重復(fù)3次。接種后觀察外源激素對初代誘導(dǎo)的影響,30 d后統(tǒng)計誘導(dǎo)率。
1.2.3增殖培養(yǎng)基的篩選
將誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)出的芽體分離成帶芽的單芽,轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基上。以改良MS作為基本培養(yǎng)基,配置1.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA(Z1處理)、2.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA(Z2處理)、
1.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA + 0.5 mg/L KT(Z3處理)、2.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA + 0.5 mg/L
KT(Z4處理)等4組增殖培養(yǎng)基配方。每處理100個單芽,重復(fù)3次。定期觀察其生長狀況并記錄,40 d后統(tǒng)計增殖系數(shù)。
1.2.4生根培養(yǎng)基的篩選
將生長到2.5 cm以上的叢芽進(jìn)行分離,切成單個芽苗,再轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上。以1/2 MS為基本培養(yǎng)基,配置0.5 mg/L NAA(S1處理)、
1.0 mg/L NAA(S2處理)、0.5 mg/L IBA + 0.5 mg/L NAA(S3處理)、0.5 mg/L IBA + 1.0 mg/L NAA(S4處理)等4種生根培養(yǎng)基配方;每處理100個單芽,3次重復(fù)。10 d后幼苗萌發(fā),30 d后統(tǒng)計幼苗生根率。
1.2.5 培養(yǎng)條件
本試驗以改良MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,添加蔗糖3%、卡拉膠6%,培養(yǎng)基pH值5.8,光照強(qiáng)度500~800 lx,光照時間14 h/d,培養(yǎng)溫度21~23℃。
1.2.6 組培苗移栽
在選取生根苗高2 cm以上、生長正常、葉色濃綠、根系發(fā)達(dá)的組培苗,待煉苗后分別種植于田園土(Y1處理)、50%田園土+ 50%河沙(Y2處理)、70%泥炭土+ 30%珍珠巖(Y3處理)、50%泥炭土+ 30%珍珠巖+ 20%椰糠(Y4處理)、80%椰糠+ 20%珍珠巖(Y5處理)等5種栽培基質(zhì)中。
2? 結(jié)果與分析
2.1 不同外植體和培養(yǎng)基對陽光紅心組培苗誘導(dǎo)的影響
不同部位外植體誘導(dǎo)陽光紅心紅掌組培苗的結(jié)果如表1所示,不同外植體的污染率均<2.16%。外植體誘導(dǎo)率大小依次為:葉片>葉柄>頂芽。T1處理是本試驗最佳的誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方,即改良MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA的誘導(dǎo)率最高,為56.5%,形成愈傷組織所需時間約60 d(封二? 圖6)。
表1? ? 不同外植體和培養(yǎng)基對陽光紅心
組培苗誘導(dǎo)的影響
材料部位 培養(yǎng)基 污染率/% 誘導(dǎo)率/%
葉片 T1 1.27±0.10 bA 56.0±3.3 aA
T2 2.10±0.06 aA 38.0±1.2 bB
T3 0 cA 35.0±1.6 cB
葉柄 T1 0 bB 55.2±0.6 aA
T2 1.34±0.02 aA 20.0±1.1 bB
T3 1.06±0.02 aA 20.0±1.7 bB
頂芽 T1 1.19±0.02 aA 12.0±0.6 bB
T2 0 bB 10.0±0.2 cC
T3 1.25±0.02 aA 14.0±0.3 aA
注:同一列數(shù)據(jù)后不同字母表示處理間的差異達(dá)5%和1%顯著水平
2.2 不同激素組合對陽光紅心不定芽增殖的影響
不同濃度6-BA和NAA組合對陽光紅心不定芽增殖的影響如圖1所示,改良MS +2.0 mg/L BA + 0.5 mg/L NAA+ 0.5 mg/L KT培養(yǎng)基(Z4處理)最適合陽光紅心增殖,增殖率最高,達(dá)5.8倍,芽壯,葉色綠,無畸形,節(jié)間伸長(封二? 圖7)。
圖 1? ?不同濃度6-BA和NAA組合
對陽光紅心不定芽增殖的影響
2.3 不同激素組合對陽光紅心繼代苗生根的影響
當(dāng)繼代苗長到2.5 cm以上時,接種到生根培養(yǎng)基,放在弱光下培養(yǎng)10 d左右,小苗的基部形成白色突起,并逐漸伸長,形成明顯幼根,長成完整小植株,之后逐步增加散射光照強(qiáng)度使小苗更粗壯(封二? 圖8)。不同激素濃度和組合對陽光紅心生根的影響如圖2所示,生根培養(yǎng)基以1/2 MS + 0.5 mg/L NAA (S1處理)或1/2 MS + 1.0 mg/L NAA(S2處理)為佳,生根率100%,根數(shù)多,根系發(fā)達(dá),小苗生長好。而當(dāng)添加IBA時,陽光紅心生根苗的葉片出現(xiàn)偏黃,芽切口易變黑,長勢較差,且生根率略有下降。出于對生產(chǎn)成本的考量,最終選擇1/2 MS + 0.5 mg/L NAA作為生根培養(yǎng)基配方。
圖 2? ?不同激素濃度和組合對陽光紅心生根的影響
2.4 移栽基質(zhì)對陽光紅心組培苗移栽成活的影響
移栽30 d后的統(tǒng)計分析結(jié)果表明,陽光紅心組培苗在不同基質(zhì)中的移栽存活率存在較大差異。如圖3所示,陽光紅心更喜歡疏松、半干燥、濕潤的土壤,以50%泥炭土+ 30%珍珠巖+ 20%椰糠(Y4處理)為最佳移栽基質(zhì)組合,移栽存活率達(dá)94.8%,幼苗生長良好(封二? 圖9)。此外,
圖 3? ?栽培基質(zhì)對陽光紅心移栽成活的影響
研究還發(fā)現(xiàn),在含椰糠多的基質(zhì)處理,如80%椰糠+ 20%珍珠巖(Y5處理)中,小苗生長良好,成活率較不加椰糠的好,但容易發(fā)生霉病,導(dǎo)致小苗死亡,這可能與椰糠難以完全滅菌引起的污染有關(guān)。
3 討論與結(jié)論
外植體的篩選是關(guān)系到紅掌組培快繁能否成功的關(guān)鍵因素。本試驗中陽光紅心紅掌的不同外植體誘導(dǎo)率大小依次為葉片>葉柄>頂芽。何貴整等[9]認(rèn)為,以莖段為外植體,用以芽繁芽誘導(dǎo)無菌芽技術(shù)比通過愈傷組織獲得無菌增殖芽材料更快、更容易,且能有效避免繼代增殖過程中出現(xiàn)的變異;不同部位外植體的污染程度不同,頂芽污染率最高、超過80%,其次為莖段。關(guān)麗霞等[10]研究表明,紅掌愈傷組織增殖以改良MS + 1.5 mg/L
6-BA為紅掌愈傷組織的誘導(dǎo)和分化為最佳激素比。朱強(qiáng)等[11]發(fā)現(xiàn)紅掌愈傷組織增殖以改良MS + 0.60~1.0 mg/L 6-BA為宜;而本試驗中改良MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA為陽光紅心紅掌的最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基。在增殖培養(yǎng)方面,本研究在添加6-BA的基礎(chǔ)上增加NAA進(jìn)行增殖培養(yǎng),結(jié)果表明MS + 2.0 mg/L BA + 0.5 mg/L NAA + 0.5 mg/L KT最適合陽光紅心紅掌增殖培養(yǎng),增殖率達(dá)5.8倍,達(dá)到芽壯、節(jié)間伸長,葉片正常、葉色綠的生長狀態(tài)。
本試驗結(jié)果中陽光紅心紅掌在1/2 MS + 0.5 mg/L NAA和1/2 MS + 0.5 mg/L NAA生根培養(yǎng)基生根率達(dá)到100%。朱強(qiáng)等[11]研究表明,壯苗生根以1/2 MS + 0.5 mg/L NAA為最佳,與本試驗結(jié)果一致。移栽試驗發(fā)現(xiàn),泥碳土:珍珠巖:椰糠=532的基質(zhì)對紅掌移栽生長最好,陽光紅心移栽成活率達(dá)94.8%,小苗生長良好。謝曉瓊等[12]研究表明對高山地區(qū)紅掌品種進(jìn)行栽培基質(zhì)優(yōu)化,結(jié)果表明裁培基質(zhì)以草炭土、泥炭土、珍珠巖的混合基質(zhì)(體積比為223或231)最適合紅掌生長,其株高、葉片數(shù)、面積、植株鮮重等指標(biāo)均優(yōu)于其他基質(zhì)處理組合。本試驗認(rèn)為,泥炭土、椰糠等富含營養(yǎng)物質(zhì),且通透性好,有利于紅掌生長。
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(責(zé)任編輯:馮? ? 新)