2023年11月,華中農(nóng)業(yè)大學(xué)果蔬園藝作物種質(zhì)創(chuàng)新與利用全國重點實驗室張俊紅教授課題組在《Plant Biotechnology Journal》上發(fā)表了題為“EARLYFLOWERINGis a dominant gain-of-function allele ofFANTASTICFOUR1/2cthat promotes early flowering in tomato”的研究論文。該研究克隆了1個番茄早花新基因FANTASTICFOUR1/2c(FAF1/2c),并解析了該基因調(diào)控番茄開花時間的作用機制。研究結(jié)果豐富了番茄開花時間調(diào)控網(wǎng)絡(luò),為番茄花期改良提供了新的基因資源和理論指導(dǎo)。
本研究通過對番茄一個T-DNA插入突變體EF(EarlyFlowering)進行表型鑒定,發(fā)現(xiàn)其開花時間比野生型Wild-Type(WT,AC)提早至少10 d,遺傳學(xué)分析發(fā)現(xiàn)該突變體為顯性功能獲得性突變體。利用TAILPCR鑒定T-DNA插入到FAF1/2c基因終止密碼子下游139 bp的3′ -UTR區(qū)域,導(dǎo)致FAF1/2c基因在EF突變體中表達水平顯著提高。在番茄Ailsa Craig(AC)中過表達FAF1/2c,轉(zhuǎn)基因植株表現(xiàn)出和EF突變體一樣的早花表型;而在EF突變體中敲除FAF1/2c,可使EF突變體的早花表型恢復(fù)“正?!?。這些結(jié)果表明,F(xiàn)AF1/2c是一個新的促進番茄開花的關(guān)鍵基因。進一步生化試驗(Y2H、Pull-down、Split-LUC、Co-IP)發(fā)現(xiàn)FAF1/2c與COP9信號復(fù)合體亞基5B(CSN5B)蛋白互作,轉(zhuǎn)基因敲除CSN5B導(dǎo)致番茄植株開花。過表達FAF1/2c和突變CSN5B都導(dǎo)致番茄早花,說明FAF1/2c和CSN5B在番茄開花調(diào)控中發(fā)揮相反作用;因此,猜測FAF1/2c和CSN5B在蛋白水平上可能存在拮抗作用。進一步的研究證實FAF1/2c與CSN5B蛋白互作,影響CSN5B蛋白穩(wěn)定性,降低CSN5B蛋白的積累,上調(diào)SINGLEFLOWERTRUSS(SFT)、JOINTLESS(J)和UNIFLORA(UF)等番茄促花基因的表達,進而調(diào)控番茄開花時間。