楊爽，徐琳,2，黃銳函，許青蓮，李煜洋，楊萍，邢亞閣,2*，劉洪

1(西華大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院，四川 成都，610039)2(宜賓西華大學(xué)研究院，食品非熱技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 宜賓，644000)

工業(yè)肉絲類(lèi)制品是指將肉絲經(jīng)過(guò)碼味、油炸等工藝加工而成的一類(lèi)調(diào)理食品，也是川菜常見(jiàn)的主料制品，包括魚(yú)香肉絲、青椒炒肉等，深受消費(fèi)者歡迎。目前工業(yè)化生產(chǎn)肉絲制品主要采用炒制和普通油炸等，食用較為單一，無(wú)法滿足消費(fèi)者對(duì)現(xiàn)代食品多元化、營(yíng)養(yǎng)化、健康化的需求。真空油炸是近年來(lái)興起的一種食品加工技術(shù)，在遠(yuǎn)低于大氣壓的壓力(<6.65 kPa)下對(duì)食物進(jìn)行低溫油炸和脫水[1]。目前，真空油炸已經(jīng)廣泛應(yīng)用于甘薯[2]、山藥[3]、豌豆[4]、香菇[5]、香蕉[6]等果蔬脆片，以及一些面粉制品和魚(yú)、肉制品[7-9]的加工生產(chǎn)中，但研究的內(nèi)容更多集中在真空油炸工藝的優(yōu)化，對(duì)食品自身風(fēng)味物質(zhì)受真空油炸條件影響的研究還比較少[10]。風(fēng)味是肉制品最重要的食用品質(zhì)之一,它包括滋味和香味，滋味是指味覺(jué)方面的效應(yīng), 其呈味物質(zhì)是可溶于水的小分子物質(zhì)，許多游離氨基酸、鹽和核苷酸是肉制品的滋味呈味物。香味主要依靠揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)體系來(lái)體現(xiàn)[11]?；诖?，本研究通過(guò)測(cè)定感官、質(zhì)構(gòu)、游離氨基酸等指標(biāo)，比較了不同真空油炸時(shí)間對(duì)肉絲制品的影響，并利用全二維氣相色譜(GC×GC-MS)探究真空油炸時(shí)間對(duì)肉絲風(fēng)味的影響。旨在采用低溫真空油炸技術(shù)研制工業(yè)化生產(chǎn)肉絲類(lèi)制品，為肉絲類(lèi)制品提供營(yíng)養(yǎng)健康的新食用方式，進(jìn)而開(kāi)發(fā)口感細(xì)膩、滋味豐富、安全營(yíng)養(yǎng)的油炸調(diào)理食品?？紤]到豬肉中心溫度[12]需達(dá)到71 ℃以及所采用的大豆油在真空度0.086 MPa狀態(tài)下低溫(70～80 ℃)沸騰，因此本實(shí)驗(yàn)設(shè)定真空油炸溫度為75 ℃。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

豬里脊肉、食用鹽、小蘇打、生抽、大豆油、料酒，成都市郫都紅光鎮(zhèn)沃爾瑪超市；正構(gòu)烷烴(C7～C25，≥99%)、領(lǐng)二氯苯，中國(guó)上海Sigma-Aldrich；NaCl(分析純)，成都迪維樂(lè)普科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

TA-XTPLUS質(zhì)構(gòu)儀，英國(guó)Stable Micro Systems公司；TP-214電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)；SSM1810全二維氣相色譜-質(zhì)譜，雪景科技；VF10TS實(shí)驗(yàn)型真空低溫油炸機(jī)，成都世紀(jì)方舟科技有限公司；L-8900游離氨基酸自動(dòng)測(cè)定儀，日立(日本)；75 μm CAR/PDMS固相微萃取萃取頭、20 mL無(wú)色頂空萃取瓶，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 工藝流程

原料肉(豬里脊肉)清洗、修整、切絲→碼味→真空油炸→真空包裝

2.2 操作要點(diǎn)

(1)豬里脊肉：將經(jīng)修整、清洗過(guò)的原料肉，分切成7 cm×0.4 cm×0.4 cm的形狀。

(2)碼味：0.3%小蘇打(以肉質(zhì)比計(jì)算，下同)、0.5%鹽、2.5%大豆油、1%料酒、1%生抽置于室溫(26 ℃)靜置30 min。

(3)真空油炸：向真空低溫油炸機(jī)里倒入新鮮惠宜大豆油約30 L，使得油到達(dá)真空油炸鍋內(nèi)2/3位置，將豬里脊肉平鋪于真空油炸框中。設(shè)置真空油炸溫度參數(shù)：實(shí)際真空度0.086 MPa，油外靜止時(shí)間3 s，油內(nèi)靜止時(shí)間10 s，脫油時(shí)間1 min，設(shè)置溫度75 ℃，時(shí)間設(shè)置4、7、10、13、16 min。

(4)將真空油炸好的肉絲取出，抽真空備用。

2.3 感官的測(cè)定

參考沈清等[13]的方法，略作修改。由20位(10男10女)經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的人員組成評(píng)定小組，嚴(yán)格根據(jù)表1感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)對(duì)樣品進(jìn)行評(píng)分，結(jié)果取平均值。

表1 肉絲感官標(biāo)準(zhǔn)表Table 1 The sensory evaluation standard

2.4 質(zhì)構(gòu)的測(cè)定

參考段虎[14]的方法，略作修改。探頭：P36R，測(cè)試前速度5 mm/s；測(cè)試速度2 mm/s；測(cè)試后速度2 mm/s；壓縮比50%；測(cè)定間隔時(shí)間5 s；觸發(fā)類(lèi)型：自動(dòng)，觸發(fā)力5 g。

2.5 游離氨基酸的測(cè)定

參照GB 5009.124—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氨基酸的測(cè)定》，味覺(jué)活性值(taste activity value，TAV)被廣泛應(yīng)用于評(píng)價(jià)食物中呈味物質(zhì)對(duì)食物味道影響的強(qiáng)弱，在呈味物質(zhì)味覺(jué)閾值一定的情況下，呈味物質(zhì)含量越高，對(duì)食物味感影響越強(qiáng)烈；含量一定的情況下，味覺(jué)閾值越低，其越容易被感知到。TAV計(jì)算[15]如公式(1)所示：

(1)

2.6 風(fēng)味的測(cè)定

2.6.1 頂空固相微萃取

向20 mL的頂空瓶中加入5 g肉絲樣品和1 g NaCl(混合研磨5 min)，加入10 μL質(zhì)量濃度為100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品鄰二氯苯，然后用聚四氟乙烯磁性蓋頭迅速密封，60 ℃水浴加熱40 min。萃取頭(250 ℃老化30 min)在頂空瓶中上部吸附樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)，然后插入GC進(jìn)樣品吸1 min，進(jìn)行GC×GC-MS分析。

2.6.2 檢測(cè)條件

GC條件：色譜柱1：DB-WAX；色譜柱2：DB-17 ms 毛細(xì)色譜柱(1.2 m×0.18 mm×0.18 um)。載氣為He(99.999%)；柱前壓為80.7 kPa；柱箱溫度40 ℃；進(jìn)樣口溫度250 ℃；不分流進(jìn)樣；流速1.2 mL/min；進(jìn)樣時(shí)間1 min；程序升溫：起始溫度40 ℃，保持2 min，然后以5 ℃/min升溫到230 ℃，保持4 min。

MS條件：采用EI電離源，離子源電壓為70 eV，離子源溫度為200 ℃，接口溫度為240 ℃，溶劑延遲時(shí)間為2 min，不分流進(jìn)樣，溶劑延遲時(shí)間為2 min，后采集信號(hào)；檢測(cè)模式為全掃描，質(zhì)量掃描范圍m/z41～330。

定性與定量分析：將總離子流色譜圖中的每個(gè)峰與NIST、Wiley和MENALIB數(shù)據(jù)庫(kù)中已知物質(zhì)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行檢索定性，以匹配度>750為鑒定依據(jù)。根據(jù)峰面積歸一法計(jì)算每種風(fēng)味化合物的相對(duì)百分含量，最終單位為ng/g。

2.7 統(tǒng)計(jì)分析

所得數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，運(yùn)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用Origin 8.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)測(cè)定結(jié)果的平均值。采用單因素方差分析樣本間的差異顯著性，P<0.05表示顯著性差異。

3 結(jié)果與討論

3.1 感官的變化

不同真空油炸時(shí)間的肉絲感官評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)圖1。75 ℃真空油炸溫度下，肉絲在質(zhì)地、滋味、香氣和色澤各項(xiàng)得分和總分均隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而提高，說(shuō)明油炸時(shí)間越長(zhǎng)(13 min內(nèi))，肉絲的香氣逐漸濃郁，口感逐漸飽滿，使得成品接受度提高。感官評(píng)價(jià)總分最高的為真空油炸時(shí)間13 min的樣品，總分為(84.33±0.94),其在香氣、滋味方面分?jǐn)?shù)最高，分別為(21.67±0.47)、(22.00±0.82)。真空油炸時(shí)間適中為宜，因?yàn)檎婵沼驼〞r(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使肉絲失水過(guò)多而使肉絲變得干柴，從而在質(zhì)地方面的口感變差，影響最終的感官評(píng)價(jià)總分?？傮w而言，真空油炸時(shí)間為13 min時(shí)，肉絲具有更好的感官，更受消費(fèi)者喜愛(ài)。

圖1 不同真空油炸時(shí)間的肉絲感官評(píng)價(jià)結(jié)果Fig.1 Sensory evaluation of shredded meat in different vacuum frying time

3.2 質(zhì)構(gòu)的變化

肉絲硬度、彈性和咀嚼性等質(zhì)構(gòu)特性是消費(fèi)者評(píng)價(jià)肉制品品質(zhì)好壞的主要依據(jù)。硬度是食品保持原有形狀的內(nèi)部結(jié)合力；彈性表示有外力作用時(shí)變形及撤去外力后形狀的回復(fù)程度；咀嚼性是指將食品咀嚼到可吞咽程度所需做的功，咀嚼性是硬度、彈性和黏聚性的綜合體現(xiàn)，因此咀嚼性和硬度有相似的變化趨勢(shì)[16]。如圖2所示，真空油炸后的肉絲硬度和咀嚼性比生鮮肉顯著增加(P<0.05)，而彈性呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。隨著真空油炸時(shí)間的增加，肉絲的硬度與咀嚼性增加(P<0.05)，肉絲的咀嚼性在真空油炸時(shí)間為16 min時(shí)最高，并且顯著高于其余組(P<0.05)。真空油炸時(shí)間對(duì)肉絲的硬度具有顯著的影響，引起肉絲變硬的原因可能是由于失水迅速、肌肉蛋白變性收縮, 導(dǎo)致肌纖維之間空隙減小，在熱作用下形成干膜，造成肉絲硬度的增加[17]。真空油炸后的各組彈性分別為0.677、0.834、0.861、0.872、0.811，肉絲的彈性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，真空油炸時(shí)間16 min時(shí)，肉絲的彈性下降7.5%。結(jié)合感官可知，真空油炸時(shí)間對(duì)肉絲的硬度、咀嚼性以及彈性有顯著的影響，溫度過(guò)高，油炸時(shí)間長(zhǎng)，會(huì)影響肉絲質(zhì)地，嚴(yán)重影響口感。綜合來(lái)看可知真空油炸溫度為75 ℃，油炸時(shí)間為13 min的處理?xiàng)l件下硬度、咀嚼性適中，彈性較高，品質(zhì)更好。

圖2 不同真空油炸時(shí)間的肉絲質(zhì)構(gòu)的影響Fig.2 Effects of different vacuum frying time on shredded meat texture注：不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)

3.3 游離氨基酸變化

游離氨基酸是非揮發(fā)性呈味物質(zhì)的主要組成成分之一，可作為肉類(lèi)食品的特征滋味物質(zhì)，也可作為揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的前體物質(zhì)，當(dāng)某些氨基酸的濃度足夠高時(shí)，對(duì)真空油炸后肉絲的風(fēng)味起作用。不同的游離氨基酸可以呈現(xiàn)出一定的滋味，其滋味總體分為鮮味、甜味和苦味，其中天冬氨酸和谷氨酸被定義為呈鮮味；包括蘇氨酸、絲氨酸、丙氨酸、精氨酸、甘氨酸和脯氨酸在內(nèi)的6種游離氨基酸被證明具有甜味；苦味源自纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸和蛋氨酸。由于這些氨基酸的味覺(jué)閾值和含量有所差異，因此導(dǎo)致食物呈現(xiàn)出不同的復(fù)雜滋味，常用TAV對(duì)這些氨基酸的味覺(jué)強(qiáng)度進(jìn)行比較評(píng)估[18]。由表2可知，經(jīng)過(guò)真空油炸后的豬肉絲游離氨基酸低于鮮肉，一方面可能是因?yàn)檎婵兆饔靡种屏思∪獾鞍姿饷?、氨肽酶的活性使得游離氨基酸的生成量減少；另一方面也可能是因?yàn)榇a味過(guò)程中游離氨基酸進(jìn)入碼味液中，從而導(dǎo)致真空油炸肉絲中游離氨基酸低于鮮肉[19-21]。隨著真空油炸時(shí)間的延長(zhǎng)，由于蛋白質(zhì)受熱分解產(chǎn)生游離氨基酸，使得游離氨基酸含量逐漸增加[22]。

表2 不同真空油炸時(shí)間肉絲游離氨基酸含量及TAV(干基)Table 1 Contents of free amino acids and TAV (dry base) in shredded meat under different vacuum frying time

真空油炸后肉絲滋味的鮮美程度與肌肉中呈味氨基酸的含量和組成有關(guān)，不同處理方式的真空油炸肉絲游離氨基酸中，含量最高的為谷氨酸、天冬氨酸。鮮味氨基酸中，谷氨酸含量最高，其TAV也最大，對(duì)鮮味的貢獻(xiàn)最大。天冬氨酸含量也較高，對(duì)鮮味影響也較大，可看出真空油炸肉絲中游離氨基酸的鮮味來(lái)源主要是谷氨酸。甜味氨基酸中丙氨酸和精氨酸含量較高，且TAV遠(yuǎn)高于其他甜味氨基酸，表明這2種氨基酸是真空油炸肉絲中游離氨基酸甜味的主要來(lái)源。真空油炸后肉絲中苦味氨基酸的含量雖然比鮮味氨基酸含量低，但纈氨酸、蛋氨酸、賴氨酸、組氨酸等氨基酸的TAV也較高，對(duì)整體滋味產(chǎn)生一定影響。

對(duì)不同呈味氨基酸的TAV進(jìn)行加和，得到鮮肉、4、7、10、13、16 min的鮮味氨基酸TAV分別為128.31、115.93、133.73、136.87、138.38、150.15，甜味氨基酸的TAV分別為67.05、57.97、64.15、65.42、67.34、72.57，苦味氨基酸的TAV分別為108.84、71.21、86.87、90.72、92.60、109.11。通過(guò)各組TAV值比較分析可得，總體表明真空油炸后的肉絲滋味偏鮮。隨著真空油炸時(shí)間的增加，鮮味氨基酸、甜味氨基酸、苦味氨基酸的TAV值均呈上升趨勢(shì)，真空油炸16 min后的肉絲苦味氨基酸TAV最高。結(jié)合感官可知，此時(shí)真空油炸后的肉絲鮮味降低，略帶苦味，已不適合消費(fèi)者食用。綜合分析各烹制方式的呈味氨基酸TAV，可以認(rèn)為真空油炸13 min時(shí)，肉絲滋味較好，苦味氨基酸TAV較低，其鮮味以及甜味TAV高。

3.4 不同真空油炸時(shí)間對(duì)肉絲風(fēng)味特征的變化

真空油炸肉絲揮發(fā)性風(fēng)味成分的GC×GC-MS鑒定結(jié)果如表3所示。共鑒定出66種揮發(fā)性成分，包括醇類(lèi)18種、醛類(lèi)8種、酯類(lèi)8種、酮類(lèi)5種、酚類(lèi)2種、酸類(lèi)6種、醚類(lèi)5種、烯烴類(lèi)7種、含硫含氮及雜環(huán)類(lèi)7種，其中從鮮肉，4、7、10、13、16 min檢出24、28、29、32、39、41種風(fēng)味物質(zhì)。

表3 真空油炸肉絲中揮發(fā)性物質(zhì)及其相對(duì)含量 單位：%Table 3 Volatile substances and their relative contents in vacuum fried shredded meat

續(xù)表3

續(xù)表3

由圖3、圖4可知，真空油炸時(shí)間的不同使肉絲的揮發(fā)性物質(zhì)不同，主要體現(xiàn)在風(fēng)味種類(lèi)以及含量不一致上。由于鮮肉不具備芳香性，一般只有咸味、金屬味和血腥味，因而鮮肉中的風(fēng)味物質(zhì)較少，這與馬菲等[18]的研究結(jié)果一致。

圖3 不同真空油炸時(shí)間肉絲揮發(fā)性化合物數(shù)量Fig.3 Volatile compounds in shredded meat at different vacuum frying times

圖4 不同真空油炸時(shí)間肉絲揮發(fā)性化合物含量Fig.4 Volatile compounds content in shredded meat at different vacuum frying times

由圖3可知，真空油炸后的肉絲風(fēng)味物質(zhì)主要來(lái)源于醇類(lèi)、醛類(lèi)、酯類(lèi)、酮類(lèi)、酚類(lèi)、酸類(lèi)、醚類(lèi)、烴類(lèi)、含氮含硫及雜環(huán)類(lèi)。在真空油炸溫度為75 ℃條件下，油炸時(shí)間越長(zhǎng)，揮發(fā)性物質(zhì)被檢出越多。

醇類(lèi)風(fēng)味物質(zhì)主要是由肉中的共軛亞油酸被脂肪氧合酶和氫過(guò)氧化酶降解以及羰基化合物還原而來(lái)，氣味柔和，可賦予產(chǎn)品植物香味[23]，真空油炸后肉絲的醇類(lèi)含量增加，這可能與碼味添加的料酒有關(guān)。醇類(lèi)物質(zhì)在感官分析上具有較高的閾值，對(duì)肉品風(fēng)味貢獻(xiàn)很小，但它們對(duì)總體氣味有協(xié)同效應(yīng)，占總揮發(fā)性風(fēng)味成分的4.28%～9.14%。與肉制品中的其他風(fēng)味物質(zhì)相比，主要來(lái)源于脂肪降解、微生物作用以及糖類(lèi)美拉德反應(yīng)的醛類(lèi)物質(zhì)，由于直鏈飽和醛的閾值較低，對(duì)產(chǎn)品最終的風(fēng)味影響較大。

由圖4可知，真空油炸時(shí)間為13 min時(shí)，己醛的化合物濃度含量最高為718.59 ng/g，己醛是亞油酸氧化的基本產(chǎn)物，來(lái)自ω-6不飽和脂肪酸，具有青草氣味[22]。真空油炸后肉絲中醛類(lèi)物質(zhì)主要以正辛醛、壬醛、正己醛、苯甲醛為主，其中正己醛占1.77%～11.17%。酯類(lèi)風(fēng)味物質(zhì)主要是通過(guò)脂肪酸分解、過(guò)酶促反應(yīng)、酯化和醇解等途徑生物合成的，占總揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的0.49%～1.78%，主要以乙酸乙烯酯為主(0.43%～1.23%)，其中真空油炸時(shí)間為13 min的酯類(lèi)含量最高，為45.86 ng/g。酮類(lèi)物質(zhì)主要來(lái)自于脂肪氧化和美拉德反應(yīng)，占總揮發(fā)性成分的0.63%～2.60%，主要為3-羥基-2-丁酮。3-羥基-2-丁酮是由檸檬酸代謝產(chǎn)生的二乙酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，可賦予熟肉清香味和奶香味，由于閾值遠(yuǎn)高于其同分異構(gòu)體的醛類(lèi)，一般認(rèn)為對(duì)風(fēng)味貢獻(xiàn)不大[24]，且該類(lèi)物質(zhì)相對(duì)含量較低，隨著油炸溫度的升高，變化較小。烴類(lèi)是由脂肪酸的烷氧基均裂形成，占總揮發(fā)性風(fēng)味成分的0.20%～4.94%，各組樣品烴類(lèi)物質(zhì)含量差異較大。烴類(lèi)風(fēng)味物質(zhì)的閾值較大，對(duì)產(chǎn)品風(fēng)味的影響較小[25]。主要來(lái)源于氨基酸、多肽等物質(zhì)熱解后與還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng)的含硫、含氮、雜環(huán)化合物的相對(duì)含量較少，隨著油炸時(shí)間的延長(zhǎng)變化不明顯，但由于閾值較低，是熟肉類(lèi)風(fēng)味中重要的特征成分[26]。其他揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)占總揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)比例較低，在肉絲中含量也較低。綜合來(lái)看，真空油炸時(shí)間為13 min時(shí)的醛類(lèi)和酯類(lèi)物質(zhì)含量最高，物質(zhì)種類(lèi)也較多。這可能是因?yàn)榇穗A段豬肉絲完全熟化，一些芳香前體物質(zhì)產(chǎn)生了揮發(fā)性物質(zhì)，賦予熟肉特有的芳香性。雖然真空油炸16 min時(shí)的物質(zhì)種類(lèi)最多，但從感官以及硬度指標(biāo)來(lái)看，此時(shí)的肉絲硬度偏硬，不適合消費(fèi)者食用。

4 結(jié)論

對(duì)不同真空油炸時(shí)間的肉絲感官品質(zhì)進(jìn)行比較分析。結(jié)果表明，真空油炸時(shí)間為13 min的感官評(píng)價(jià)相對(duì)較好；利用游離氨基酸的TAV進(jìn)行滋味分析，發(fā)現(xiàn)肉絲整體滋味偏鮮，鮮味主要來(lái)源為谷氨酸、天冬氨酸，真空油炸時(shí)間越長(zhǎng)，苦味氨基酸越明顯，影響肉絲的整體風(fēng)味；通過(guò)質(zhì)構(gòu)分析可知，真空油炸會(huì)使肉絲的硬度、咀嚼性升高，隨著真空油炸時(shí)間的延長(zhǎng)，彈性會(huì)呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。對(duì)揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的含量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，真空油炸時(shí)間為13 min時(shí)，肉絲的醛類(lèi)以及醇類(lèi)物質(zhì)含量最高，風(fēng)味物質(zhì)種類(lèi)也較多。因此，綜合分析可以認(rèn)為，真空油炸時(shí)間為13 min時(shí)肉絲的感官品質(zhì)最好，最適宜進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。