張衛(wèi)國(guó)，羅鴻富

嶺南師范學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院（湛江 524048）

蝦青素又稱變胞藻黃素或蝦紅素，是類胡蘿卜素的一種，為一種較強(qiáng)的天然抗氧化劑。常見(jiàn)蝦青素為紫紅色晶體，不溶于水，易溶于氨仿、丙酮、苯和二硫化碳等有機(jī)溶劑。蝦青素是唯一可以穿透血腦和血視網(wǎng)膜屏障并對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)和腦功能有積極作用的類胡蘿卜素，同時(shí)有研究發(fā)現(xiàn)，蝦青素具有極強(qiáng)的抗氧化能力，是維生素E的500倍，被譽(yù)為“超級(jí)維生素E”[1-2]。因此，在水產(chǎn)飼料[3]、保健品、化妝品和醫(yī)藥等領(lǐng)域獲得廣泛應(yīng)用。蝦青素分為2類：一類為天然蝦青素[4-5]，天然存在于自然界中，主要存在于蝦、蟹、藻類等[6-7]生物體內(nèi)；另一類為合成蝦青素[8]，為人工通過(guò)生物、化學(xué)途徑[9]進(jìn)行合成。市面上大多數(shù)蝦青素產(chǎn)品為合成蝦青素，天然蝦青素產(chǎn)品非常少，所以天然蝦青素具有非常好的發(fā)展?jié)摿?。我?guó)沿海地區(qū)水產(chǎn)資源豐富，然而水產(chǎn)品加工中的下腳料中蝦青素回收利用較少，造成較多的資源浪費(fèi)。

天然蝦青素雖然存在多種生物體內(nèi)，如蝦殼、蟹殼、紅色酵母菌[10]內(nèi)，但含量均很低，提取工藝復(fù)雜。試驗(yàn)采用蝦殼為原材料，使用不同溶劑提取蝦殼中蝦青素，以求達(dá)到最大限度提取蝦青素。

1 材料與方法

1.1 主要試驗(yàn)儀器與設(shè)備

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（TU-1810DASPC，廣州市紅圖儀器有限公司）；豆?jié){機(jī)（KS-996，廣州市祈和電器有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（HH-6，常州榮華儀器制造有限公司）；電熱鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9035A，上海一恒鼓風(fēng)干燥箱）；電子分析天平（GH-120，廣州市紅圖儀器有限公司）；電子天平（LQ-A20002，瑞安市安特稱重設(shè)備有限公司）；100～1 000 μL移液槍（Transferpette數(shù)字可調(diào)，德國(guó)普蘭德有限公司）；200 μL移液槍、20 μL移液槍（Research plus，寶予德有限公司）。

1.2 試驗(yàn)材料與試劑

蝦殼（廣東省湛江市北橋菜市場(chǎng)）；茶油、無(wú)水乙醇、氫氧化鈉、丙酮、食用乙醇、石油醚（均為分析純，廣東化學(xué)試劑工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心）；夏盛酸性蛋白酶（分析純，維諾信中國(guó)銷售代理廣州明曜公司）。

1.3 蝦青素的測(cè)定方法

蝦青素提取液，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定476 nm處的吸光度，計(jì)算蝦青素的含量。

1.4 丙酮和乙醇提取蝦青素

取6份每份5 g的樣品于燒杯中，其中3份加入25 mL乙醇浸泡，另外3份用25 mL丙酮浸泡，6份均用保鮮膜封好，浸泡3 h，期間每隔30 min搖晃一下，使用雙層濾紙將其過(guò)濾，濾液定容于容量瓶中，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定476 nm處吸光度，計(jì)算蝦青素含量。

1.5 玉米乙醇提取蝦青素

取3份每份3 g的樣品于燒杯中，加入15 mL玉米乙醇浸泡，3份均用保鮮膜封好，每隔10 min搖晃一下，分別取0.5，1.0，2.0，3.0和4.0 h時(shí)的提取液，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定476 nm處的吸光度，計(jì)算蝦青素含量。

1.6 溫度對(duì)茶油提取蝦青素的影響

取6份每份1 g的樣品于離心管中，每份加入3 g茶油浸泡，3份于50 ℃水浴加熱1 h，3份于90 ℃水浴加熱1 h，每隔10 min搖晃一下，取50 μL提取液于試管中，用石油醚定容，用紫外分光光度計(jì)測(cè)定476 nm處的吸光度，計(jì)算蝦青素含量。

1.7 茶油多次提取蝦青素

取3份每份1 g的樣品于離心管中，每份加入3 g茶油浸泡，于90 ℃水浴加熱，每隔10 min搖晃一下，測(cè)定0.5，1.0和2.0 h的提取液中蝦青素含量。

1.8 時(shí)間對(duì)茶油提取蝦青素的影響

取3份每份2 g的樣品于離心管中，每份加入3 g茶油浸泡，于90 ℃水浴加熱，每隔10 min搖晃一下，測(cè)定1，2，3，4，5，6，7，8，9和10 h的提取液中蝦青素含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 丙酮和乙醇提取蝦青素

由圖1可以看出，在相同條件下，第1次提取中丙酮提取液中蝦青素含量比乙醇提取液中的要高，說(shuō)明蝦青素在丙酮中的溶解度更大，在第2次提取完后，丙酮提取液中蝦青素含量整體要高于乙醇提取液中蝦青素含量，說(shuō)明在丙酮和乙醇2種溶劑中，選擇丙酮能更好地提取蝦殼中的蝦青素。

圖1 乙醇和丙酮提取液中的蝦青素含量

2.2 玉米乙醇提取蝦青素

由圖2可以看出，使用玉米乙醇提取蝦青素，隨著時(shí)間的變化，提取液中蝦青素含量發(fā)生不斷變化，但總體趨于3 000～5 000 μg/mL范圍內(nèi)。由圖1和圖2可以看出，提取3 h時(shí)玉米乙醇提取液中的蝦青素含量比乙醇提取液中的蝦青素含量相對(duì)要高一些，所以使用玉米乙醇比使用乙醇要更好一些，而玉米乙醇提取液中的蝦青素含量和丙酮提取液中的蝦青素含量相差不大，但丙酮具有毒性，相對(duì)而言使用玉米乙醇更好。

圖2 玉米乙醇中的蝦青素含量

2.3 溫度對(duì)茶油提取蝦青素的影響

由圖3可以看出，在相同時(shí)間下，在溫度90 ℃下的茶油提取液中的蝦青素含量比50 ℃下提取液中的蝦青素含量要穩(wěn)定，且含量要更高，所以使用茶油提取蝦青素時(shí)溫度控制在90 ℃，可更好地提取蝦青素。

圖3 不同溫度下茶油中的蝦青素含量

2.4 茶油多次提取蝦青素

由圖4可以看出，在相同的溫度下，第2次提取時(shí)茶油提取液中的蝦青素含量基本到達(dá)最高，所以在3 g茶油中可以加入2 g的酶解蛋白質(zhì)，以達(dá)到最好的提取，在第2次后隨著時(shí)間的推移，茶油提取液中的蝦青素含量有降低趨勢(shì)。

圖4 多次提取下茶油中的蝦青素含量

2.5 時(shí)間對(duì)茶油提取蝦青素的影響

由圖5可以看出，在相同溫度下，茶油提取液中蝦青素含量隨著時(shí)間的推移在不斷降低，所以在90 ℃下使用茶油提取蝦青素，提取時(shí)間控制在1 h左右最優(yōu)。

圖5 不同時(shí)間下茶油中的蝦青素含量

3 結(jié)論

試驗(yàn)主要研究丙酮、乙醇、玉米乙醇和茶油提取蝦青素的效果。結(jié)果表明：丙酮和玉米乙醇的提取效果相近，提取能力要高于乙醇和茶油，因此在丙酮、乙醇、玉米乙醇和茶油這4種提取溶劑中最好選用玉米乙醇，提取效果最好。在提取過(guò)程中，茶油的提取溫度90 ℃，提取時(shí)間要控制在1 h左右，因?yàn)槲r青素在茶油中的溶解度隨著時(shí)間的增加而不斷減少。