何柳艷，梁 艷，唐云麗，潘翠柳，梁臣艷*

（1.廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530023；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200）

眼樹蓮為蘿藦科眼樹蓮屬附生藤本植物眼樹蓮Dischidia chinensisChamp.ex Benth.的全株，又名乳汁藤、望水王仙桃、金瓜核、瓜子藤、上樹鱉、翼魚草、小耳環(huán)、樹上瓜子等［1］，主要分布于廣西、廣東、海南等地［2］。其味甘、微酸，性寒，具有清肺熱、化瘧、涼血解毒之功效，主治肺燥咳血、瘡癤腫毒、小兒疳積、痢疾、跌打腫痛、毒蛇咬傷［3］。眼樹蓮以全株入藥，在廣西部分民間地區(qū)常用于治療肺燥咳痰、咳血、百日咳、支氣管炎及肺癆咳嗽等，有較好的療效［4］?；酐惸莸龋?］研究表明眼樹蓮乙酸乙酯部位具有較強(qiáng)的體外抗氧化作用；楊柳等［6］研究發(fā)現(xiàn)海南眼樹蓮乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物為其抗炎活性部位；洪家立等［7］研究結(jié)果表明，眼樹蓮乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位均對人胃癌SGC 細(xì)胞具有明顯抑制作用；本課題組前期研究表明眼樹蓮乙酸乙酯部位提取物具有一定的止咳、平喘、祛痰作用。為明確眼樹蓮的藥效活性成分，本文對眼樹蓮全草乙醇提取物的乙酸乙酯部位進(jìn)行了化學(xué)成分研究。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試藥與試劑 眼樹蓮藥材采集于廣西橫縣，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院梁子寧教授鑒定為蘿藦科眼樹蓮屬眼樹蓮Dischidia chinensisChamp.ex Benth.的全株。硅膠G 板（青島海洋化工有限公司，批號：20191228），柱層析硅膠（100～200目，青島海洋化工有限公司，批號：20190417）；提取分離用乙醇為食用級酒精，其余試劑均為分析純。

1.2 儀器 AutoSpec Permier P776 質(zhì)譜儀（美國Waters 公司）；AVANCE Ⅲ 500 MHz 核磁共振儀（德國Brucker 公司）；超聲波清洗器（KH-600B，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（CCA-1112A，上海愛朗儀器有限公司）；恒溫水浴鍋（HH-S6，鞏義市與予華儀器有限責(zé)任公司）；電子天平（YP5002，上海佑科儀器儀表有限公司）；三用紫外分析儀（ZF-2 型，上海市安亭電子儀器廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取與分離 稱取7 kg 干燥切碎的全株眼樹蓮藥材放置容器中，加入75%乙醇在常溫下浸泡7 d，過濾，濾液減壓回收乙醇，連續(xù)浸漬提取共4 次，減壓濃縮后得到乙醇粗浸膏947.7 g。取乙醇總浸膏用蒸餾水混懸后，依次加入石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，得到眼樹蓮3個(gè)不同極性部位浸膏，分別為257 g，230 g，200 g。取眼樹蓮乙酸乙酯部位浸膏約80 g，經(jīng)硅膠色譜柱，二氯甲烷∶丙酮（80∶1～1∶1）梯度洗脫，洗脫液減壓回收溶劑，再采用硅膠柱色譜及重結(jié)晶等方法進(jìn)行分離和純化，分別得到化合物1（528 mg）、化合物2（780 mg），化合物3（14 mg）、化合物4（5.0 mg）、化合物5（42 mg），化合物 6（8 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，易溶于氯仿。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ（ppm）：0.88（3H，d，J=6.9 Hz，H-23），0.72（3H，s，H-24），0.87（3H，s，H-25），1.01（3H，s，H-26），1.05（3H，s，H-27），1.18（3H，s，H-28），1.00（3H，s，H-29），0.95（3H，s，H-30）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ（ppm）：22.4（C-1），41.7（C-2），213.5（C-3），58.4（C-4），42.3（C-5），41.4（C-6），18.4（C-7），53.2（C-8），37.6（C-9），59.6（C-10），35.8（C-11），30.6（C-12），39.8（C-13），38.4（C-14），32.9（C-15），36.1（C-16），30.1（C-17），42.9（C-18），35.5（C-19），28.3（C-20），32.6（C-21），39.4（C-22），7.0（C-23），14.8（C-24），18.1（C-25），20.4（C-26），18.8（C-27），32.2（C-28），31.9（C-29），35.2（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］中報(bào)道對照基本一致，鑒定化合物1為木栓酮。

化合物2：白色粉末，易溶于氯仿，與實(shí)驗(yàn)室自制的β-谷甾醇對照品共薄層，用石油醚-乙酸乙酯（5∶1）作為展開系統(tǒng)，Rf值一致，與對照品混合后熔點(diǎn)不下降，鑒定化合物2為β-谷甾醇（β-sitosterol）。

化合物3：無色針狀晶體，易溶于丙酮、二氯甲烷，微 溶 于 水 。 EI-MS m/z：199［M+1］+。1H-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：7.31（2H，s，H-2，6），3.87（6H，s，2-OCH3）；13C-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：121.4（C-1），108.0（C-2，6），148.2（C-3，5），141.5（C-4），167.4（C-7），56.5（3，5-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］中報(bào)道對照基本一致，鑒定化合物3為丁香酸。

化合物4：無色透明針晶，1H-NMR（500 MHz，Acetone）δ（ppm）：7.59（1H，d，J=1.7 Hz，H-2），7.55（1H，dd，J=1.7，8.2 Hz，H-6），6.89（1H，J=8.2 Hz，H-5），3.89（3H，s，-OCH3）；13C-NMR（500 MHz，Acetone）δ：124.7（C-1），115.4（C-2），147.9（C-3），147.9（C-3），151.9（C-4），113.3（C-5），124.7（C-6），56.2（-OCH3），167.3（COOH）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］中報(bào)道對照基本一致，鑒定化合物4為異香草酸。

化合物5：白色粉末結(jié)晶，溶于丙酮，氯仿，不溶于石油醚。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：5.16（1H，s，H-23a），4.91（1H，s，H-23b），3.76（1H，m，H-3a），3.65（1H，m，H-3b），2.38（2H，m，H-7），1.94（3H，s，H-24）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：20.6（C-1），34.2（C-2），61.6（C-3），149.7（C-4），76.7（C-5），20.9（C-6），42.3（C-7），53.5（C-8），39.3（C-9），60.2（C-10），34.3（C-11），30.3（C-12），39.6（C-13），38.4（C-14），32.5（C-15），39.1（C-16），29.9（C-17），42.7（C-18），35.3（C-19），28.1（C-20），32.7（C-21），36.0（C-22），114.5（C-23），23.5（C-24），15.5（C-25），20.1（C-26），18.7（C-27），32.2（C-28），34.9（C-29），31.8（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］中報(bào)道對照基本一致，鑒定化合物5為眼樹蓮二醇。

化合物6：白色針狀結(jié)晶，易溶于氯仿，難溶于水。EI-MS m/z：426［M］+。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ（ppm）：4.68（1H，d，J=2.3 Hz，H-29）、4.56（1H，d，J=2.3 Hz，H-29）、1.68（3H，s，H-30）、1.02（3H，s，H-26）、0.97（3H，s，H-23）、0.91（3H，s，H-25）、0.79（3H，s，H-28）、0.76（3H，s，H-24）。13C-NM（125 MHz，CDCl3）δ（ppm）：38.9（C-1），27.5（C-2），79.0（C-3），38.8（C-4），55.3（C-5），18.3（C-6），34.3（C-7），40.8（C-8），50.4（C-9），37.2（C-10），20.9（C-11），25.1（C-12），38.1（C-13），43.0（C-14），27.4（C-15），25.2（C-16），42.8（C-17），48.3（C-18），48.0（C-19），151.0（C-20），29.9（C-21），40.0（C-22），28.0（C-23），15.9（C-24），16.1（C-25），16.0（C-26），14.5（C-27），18.0（C-28），109.3（C-29），19.3（C-30）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］中報(bào)道對照基本一致，鑒定化合物6為羽扇豆醇。

3 小 結(jié)

本實(shí)驗(yàn)通過反復(fù)柱色譜、重結(jié)晶等現(xiàn)代中藥化學(xué)分離手段和NMR、MS 等波譜技術(shù)，結(jié)合文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，對眼樹蓮全草乙醇提取物的乙酸乙酯部位化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從中共分離得到6個(gè)化合物，分別鑒定為木栓酮（1）、β-谷甾醇（2）、丁香酸（3）、異香草酸（4）、眼樹蓮二醇（5）、羽扇豆醇（6），其中化合物 1～5 首次從該植物中分離得到。目前有關(guān)眼樹蓮的研究主要側(cè)重于藥理作用研究，而藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的研究比較薄弱，國內(nèi)外相關(guān)的研究報(bào)道也較少。已經(jīng)證實(shí)，羽扇豆醇有抗氧化、抗炎癥、促進(jìn)皮膚愈合等作用，且對乳腺癌、前列腺癌以及小鼠的黑色素瘤有一定的抑制作用［13］。推測羽扇豆醇是眼樹蓮的抗氧化和抗腫瘤藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。前期的實(shí)驗(yàn)研究為眼樹蓮的生物活性成分篩選和研究提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和技術(shù)支持，下一步應(yīng)對眼樹蓮的化學(xué)成分進(jìn)行更深入的研究，探索藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為眼樹蓮的進(jìn)一步開發(fā)研究提供依據(jù)和參考。