王歌平 李君艷 馬曉 王珍珍 陳國榮

近年來,肺癌的發(fā)病率和死亡率逐漸升高,在所有癌癥中居世界第1 位,其中80%新診斷的肺癌為非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)［1］,其起病隱匿,通常在早期無明顯癥狀,發(fā)現(xiàn)時已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,失去手術(shù)機(jī)會,因此,對于NSCLC 高危人群進(jìn)行早期篩查、早期診斷、評估監(jiān)測等很有必要。血清標(biāo)記物的檢測因其方便快捷的獨(dú)特優(yōu)勢,在肺癌的輔助診斷中有一定的應(yīng)用價值,但單一檢測血清標(biāo)志物的敏感度和特異度均較低,往往需要聯(lián)合檢測幾種血清標(biāo)記物彌補(bǔ)這一不足［2］。本文主要研究血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及C 反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)在中晚期NSCLC 患者血清中的表達(dá)水平及意義,探討其對中晚期NSCLC 診斷的價值?，F(xiàn)將新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院2017 年11 月～2021 年3 月收治的80 例初診為中晚期NSCLC 患者和50 例健康體檢者作為研究對象,分析血清VEGF、IL-6、CRP 的診斷價值,結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院2017 年11 月～2021 年3 月收治的80 例初診中晚期NSCLC 患者作為觀察組,另選取同時期本院體檢中心50 例體檢健康者作為對照組。觀察組男42 例,女38 例,平均年齡(67.39±11.21)歲；按照第8 版國際肺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)［3］：Ⅰ期0 例,Ⅱ期13 例,Ⅲ期31 例,Ⅳ期36 例；病理類型：腺癌53 例,鱗癌27 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理診斷及影像學(xué)證實(shí)的患者；②均為喪失手術(shù)機(jī)會或拒絕手術(shù)的患者；③臨床資料完整的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有嚴(yán)重心、肝、肺、腎功能障礙的患者；②入院前曾有抗腫瘤治療史的患者；③存在急、慢性感染的患者；④臨床資料不完整的患者；⑤既往接受過手術(shù)、放化療、靶向治療、免疫治療等抗腫瘤治療的患者。對照組男23 例,女27 例；平均年齡(69.72±10.50)歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2方法 采集兩組研究對象清晨空腹靜脈血4 ml,詳細(xì)記錄其基本信息,并將標(biāo)本送至本院檢驗(yàn)科,在1.5 h 內(nèi)室溫以3000 r/min 的速度離心3 min,分離出血清,采用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測VEGF 水平,采用電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測IL-6 水平,采用免疫比濁法檢測CRP水平；測量儀器分別為Lumo 單機(jī)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、Cobas e801 電化學(xué)發(fā)光分析儀、Beckman AU5800 全自動生化分析儀。

1.3觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 比較兩組血清VEGF、IL-6、CRP 水平,分析VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測的ROC 曲線,比較血清VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測的診斷效能。VEGF 參考范圍為0～160 pg/ml,IL-6 參考范圍為＜7 pg/ml,CRP 參考范圍為0～5 mg/L。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 ()表示,采用t 檢驗(yàn)；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)；繪制ROC 曲線評價VEGF、IL-6、CRP 單獨(dú)及聯(lián)合檢測對NSCLC 的診斷價值。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組VEGF、IL-6 和CRP 水平比較 觀察組VEGF、IL-6 和CRP 水平均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組VEGF、IL-6 和CRP 水平比較()

表1 兩組VEGF、IL-6 和CRP 水平比較()

注：與對照組比較,aP＜0.05

2.2VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)及聯(lián)合檢測的ROC 曲線分析 VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)檢測及VEGF+IL-6、VEGF+CRP、IL-6+CRP、VEGF+IL-6+CRP 檢測的靈敏度分別為82.5%、62.8%、86.3%、85.0%、87.5%、86.3%、90.0%,特異度分別為85.0%、94.5%、87.5%、87.5%、85.0%、92.5%、96.2%；VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)檢測及VEGF+IL-6、VEGF+CRP、IL-6+CRP、VEGF+IL-6+CRP 檢測的曲線下面積(A)分別為0.877［95%CI=(0.816,0.938)］、0.785［95%CI=(0.704,0.866)］、0.876［95%CI=(0.814,0.939)］、0.913［95%CI=(0.862,0.965］、0.933［95%CI=(0.889,0.977)］、0.922［95%CI=(0.875,0.968)］、0.945［95%CI=(0.905,0.985)］。VEGF+IL-6+CRP 檢測的靈敏度、特異度均優(yōu)于VEGF、IL-6、CRP單項(xiàng)檢測及VEGF+IL-6、VEGF+CRP、IL-6+CRP 檢測,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見圖1,表2,表3。

表2 ROC 曲線下區(qū)域

表3 VEGF、IL-6 和CRP 單項(xiàng)或聯(lián)合檢測的診斷效能比較

圖1 VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)檢測及聯(lián)合檢測的ROC 曲線

3 討論

肺癌是在全球范圍內(nèi)發(fā)病率和死亡率都在迅速上升的惡性腫瘤。在中國國家癌癥登記年報中,每年新發(fā)肺癌病例約為787000 例,男性發(fā)病率和女性發(fā)病率分別位于第1 位和第2 位。每年因肺癌死亡的例數(shù)約為631000 例,男性和女性的死亡率均排名世界第1 位［4］。NSCLC 約占所有肺癌的80%［5］。在肺癌的發(fā)展過程中,腫瘤生長環(huán)境的重要性被越來越多的研究學(xué)者所熟知。腫瘤微環(huán)境是一個包含多種細(xì)胞和細(xì)胞因子的復(fù)雜系統(tǒng),由腫瘤細(xì)胞、多種炎癥細(xì)胞、細(xì)胞因子等介質(zhì)形成,會產(chǎn)生大量促進(jìn)血管生成、支持腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的細(xì)胞因子和生長因子,在血管生成、慢性炎癥和免疫抑制之間相互作用和平衡［6］。

VEGF 作為一種促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子,具有高度特異性,能夠刺激內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖,促進(jìn)血管通透性增加,誘導(dǎo)細(xì)胞新生和細(xì)胞外基質(zhì)變性,其水平的升高可能反映了腫瘤生長和播散的狀態(tài),與腫瘤的增殖、遷移緊密相關(guān)［7］。有研究［8］指出,NSCLC 細(xì)胞可以產(chǎn)生和分泌VEGF,促進(jìn)血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移進(jìn)展。此外,另有研究［9］表明,VEGF 能夠誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞除VEGF 外的不同血管生成因子的分泌,如肝細(xì)胞生長因子(HGF)、集落刺激因子(CSF)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、粒細(xì)胞刺激因子(LEP)和人粒細(xì)胞刺激因子(GCSF)等,這表明VEGF 信號通路能夠激活參與肺癌進(jìn)展的各種促血管生成通路。一項(xiàng)對4477 名肺癌患者和4346 名健康對照者的Mata 分析［10］表明,VEGF基因多態(tài)性在亞洲人群中與肺癌易感性顯著相關(guān)。本研究通過對比中晚期NSCLC 患者和健康體檢者VEGF的表達(dá)水平,結(jié)果顯示,觀察組VEGF 表達(dá)水平顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。這與任寶恒等［11］的研究一致,由此可見,VEGF 與NSCLC 的發(fā)生密切相關(guān),這可為中晚期NSCLC 患者制定個體化治療方案和改善預(yù)后提供支持。

炎癥微環(huán)境與腫瘤有著密切的聯(lián)系。有研究［12］發(fā)現(xiàn),慢性炎癥病變往往繼發(fā)于惡性腫瘤,提示腫瘤與慢性炎癥反應(yīng)緊密相關(guān)。Lim 等［13］研究發(fā)現(xiàn),阿司匹林等非甾體類抗炎藥具有保護(hù)作用,能夠降低肺癌發(fā)生的風(fēng)險。細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)是連接炎癥微環(huán)境和腫瘤細(xì)胞的橋梁。IL-6 是腫瘤微環(huán)境中主要的細(xì)胞因子之一,由淋巴細(xì)胞和非淋巴細(xì)胞產(chǎn)生和分泌,參與惡性細(xì)胞的增殖和分化,包括促進(jìn)癌前細(xì)胞的生長和存活,刺激血管生成,抑制炎癥部位的凋亡及促進(jìn)腫瘤進(jìn)展、侵襲和轉(zhuǎn)移等［14,15］。有研究［16］發(fā)現(xiàn),IL-6 作為一個多效性炎性細(xì)胞因子,在腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮了相對獨(dú)立的作用。IL-6 在體外可以刺激多數(shù)腫瘤細(xì)胞的生長,腫瘤細(xì)胞自分泌大量IL-6,進(jìn)而促進(jìn)自身增殖［17］。據(jù)報道［18］,IL-6 在肺癌細(xì)胞中高表達(dá),通過核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)上調(diào)T 細(xì)胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白(TIM)-4,促進(jìn)NSCLC 的轉(zhuǎn)移。Shang 等［18］發(fā)現(xiàn),IL-6 通過誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)肺癌轉(zhuǎn)移。另一項(xiàng)研究［19］發(fā)現(xiàn),IL-6 可以誘導(dǎo)NSCLC 細(xì)胞的去分化和增殖。本研究中,通過比較中晚期NSCLC 患者和健康體檢者的IL-6 表達(dá)水平,結(jié)果顯示,觀察組的IL-6 表達(dá)水平高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。這與張靜等［20］的研究結(jié)果一致,說明IL-6 與NSCLC 發(fā)生的關(guān)系密切,提示IL-6 可作為輔助早期診斷NSCLC 的參考依據(jù)。CRP 是一種急性期蛋白,在肝臟通過IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)等細(xì)胞因子誘導(dǎo)生成,在應(yīng)激、感染、組織損傷等環(huán)境中升高,是最常用的炎癥標(biāo)志物之一［21］。在一些回顧性研究中均顯示CRP 水平與肺癌風(fēng)險增加相關(guān)［22,23］。吳振永［24］選取經(jīng)病理活檢診斷為肺癌的42 例患者作為觀察組,同時選取30 例健康體檢者作為對照組,比較兩組的CRP 表達(dá)水平,結(jié)果顯示,排除其他無關(guān)因素后,觀察組的CRP 表達(dá)水平明顯高于對照組。這與本文的研究結(jié)果一致,提示CRP 對NSCLC 具有較高的診斷價值。本研究進(jìn)一步通過ROC 曲線分析顯示,VEGF+IL-6+CRP 聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度均顯著高于VEGF、IL-6、CRP 單項(xiàng)指標(biāo)檢測,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。由此說明與單一指標(biāo)檢測相比,聯(lián)合檢測的診斷效能更高,因此三項(xiàng)聯(lián)合檢測能避免單一標(biāo)志物檢測引起的假陰性和假陽性,能及早發(fā)現(xiàn)疾病,降低肺癌的發(fā)病率,有助于早期診斷和治療。

綜上所述,聯(lián)合檢測VEGF、IL-6 和CRP 水平對及時診斷中晚期NSCLC 具有重要的臨床意義,可用于早期NSCLC 的篩查和診斷,有助于制定個體化用藥方案,改善預(yù)后。