王秀敏，李婷，范秋雨, ，李秀梅，劉魏魏，戴小楓

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100081；2.北京農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 102206）

奶牛乳房炎指泌乳期的奶牛乳房受到了多種因素的刺激所引發(fā)的乳房（即乳腺組織）炎癥[1,2]；此病不僅會(huì)導(dǎo)致奶牛泌乳性能受損、產(chǎn)奶量下降、生殖機(jī)能失調(diào)，還會(huì)影響乳汁品質(zhì)[3,4]。根據(jù)乳房和乳汁有無臨床可見的變化，將奶牛乳房炎分為三類：非臨床型或亞臨床型乳房炎（通常稱為隱性乳房炎）、臨床型乳房炎和慢性乳房炎[5]；其中隱性乳房炎雖然在眼觀時(shí)未表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，但是病原菌已入侵奶牛乳房組織，是一種最具有隱患的乳房炎。由于隱性乳房炎很容易被忽視，常常導(dǎo)致未能及時(shí)診斷治療，大多情況可轉(zhuǎn)變成臨床型乳房炎。

因此，防治奶牛隱性乳房炎對(duì)奶業(yè)發(fā)展具有極其重要的意義。自1945年使用青霉素治療奶牛乳房炎取得顯著療效后，使用抗菌藥治療奶牛乳房炎就變成了一種常規(guī)的方法；但是，隨著不合理使用甚至濫用抗菌藥物，不僅導(dǎo)致常用抗生素療效顯著下降，而且乳汁中抗生素殘留以及生物體產(chǎn)生的抗藥性[6,7]，最終可能會(huì)危害食用牛奶人群的身體健康及破壞生態(tài)環(huán)境[8]。因此，尋求改進(jìn)和能夠替代抗生素來治療奶牛隱性乳房炎的藥物成為國內(nèi)外學(xué)者研究和關(guān)注的焦點(diǎn)。近年來，中草藥以其無毒或低毒、低成本、不易產(chǎn)生耐藥性等獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)成為研究熱點(diǎn)。利用中草藥治療奶牛隱性乳房炎不僅能夠避免或降低藥物治療產(chǎn)生的毒副作用和藥物殘留，而且不易產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性，通過提高奶牛機(jī)體免疫力、抑制病原菌，可有效降低隱性乳房炎的發(fā)病率，達(dá)到從根本上治療奶牛隱性乳房炎的目的[9]。因此，為了充分了解奶牛隱性乳房炎的流行情況及中草藥對(duì)奶牛乳房炎的防控作用，本文將近年來應(yīng)用中草藥防治奶牛隱性乳房炎的研究進(jìn)展進(jìn)行簡(jiǎn)要概述和總結(jié)分析。

1 奶牛隱性乳房炎的流行情況和危害性

1.1 流行情況

奶牛隱性乳房炎從發(fā)現(xiàn)至今已經(jīng)有150多年的歷史，幾乎100%奶牛群都有隱性乳房炎患牛，在乳房炎所造成的損失中大約有70%是由隱性乳房炎引起的[10]。據(jù)報(bào)道，奶牛隱性乳房炎的發(fā)生率為15%～75%，奶牛單個(gè)乳區(qū)的感染率為5%～40%[11]。據(jù)國際奶牛聯(lián)合會(huì)統(tǒng)計(jì)，世界范圍內(nèi)奶牛隱性乳房炎的發(fā)病率為50%，臨床型乳房炎的發(fā)病率為20%，其中在丹麥、法國、瑞典與芬蘭，奶牛臨床乳房炎的發(fā)病率分別為21%、20%、11.1%和10.9%[12]；而在我國，由于奶牛養(yǎng)殖主要是農(nóng)戶分散養(yǎng)殖，管理?xiàng)l件及環(huán)境衛(wèi)生狀況差，乳房炎的發(fā)生率相對(duì)更高，臨床型乳房炎的平均發(fā)病率為33.41%，隱性乳房炎的發(fā)病率為46.4%～85.7%，高于國外的發(fā)病率[13]。潘虎等[14]對(duì)我國22個(gè)城市32個(gè)奶牛場(chǎng)的10 371頭成年奶牛進(jìn)行了乳房炎病因及發(fā)病情況等調(diào)查，發(fā)現(xiàn)隱性乳房炎和臨床型乳房炎的發(fā)病率分別為73.91%和33.41%。魏學(xué)良等[15]調(diào)查了重慶地區(qū)奶牛乳房炎的發(fā)病情況，發(fā)現(xiàn)奶牛隱性乳房炎的發(fā)病率為73.91%，乳區(qū)陽性率為56.31%。關(guān)文怡等[16]調(diào)查了北京市某區(qū)及河北省保定地區(qū)4個(gè)奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)1 248頭泌乳奶牛的4 992個(gè)乳區(qū)，結(jié)果表明，以上地區(qū)隱性乳房炎的發(fā)病率高達(dá)43.7%，臨床型乳房炎的發(fā)病率為10.90%。馬博等[17]檢測(cè)了新疆巴州地區(qū)八縣一市規(guī)模化奶牛場(chǎng)1 800頭奶牛的7 200份乳樣，發(fā)現(xiàn)其中有432頭隱性乳房炎奶牛，發(fā)病率為24%。以上數(shù)據(jù)表明，奶牛隱性乳房炎的發(fā)病率較高，給我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，尋找奶牛隱性乳房炎的科學(xué)有效防治方法是當(dāng)前面臨的一項(xiàng)重要任務(wù)。

1.2 危害

奶牛隱性乳房炎是奶牛常見病之一，很難進(jìn)行防治，其危害主要包括以下幾點(diǎn)：①降低乳汁中的營養(yǎng)成分，甚至?xí)：οM(fèi)者的身體健康[18]。奶牛一旦發(fā)生隱性乳房炎，會(huì)導(dǎo)致牛奶中的營養(yǎng)成分以及理化性質(zhì)發(fā)生改變，乳汁中繁殖的病原體，會(huì)釋放具有感染性的毒素。此外，牛奶中含有大量的炎性因子或者殘留的抗生素，如果食用這樣的牛奶，可引起發(fā)熱、嘔吐、脫水甚至休克，嚴(yán)重危害消費(fèi)者的身體健康。②直接引起產(chǎn)奶量的下降，對(duì)奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。據(jù)文獻(xiàn)記載，患有隱性乳房炎的奶牛在一個(gè)泌乳期內(nèi)其泌乳量可減少110～550kg，患病奶牛平均減奶30%，因使用抗生素治療而導(dǎo)致廢棄的牛奶量平均為62kg/（年·頭），平均損失的各項(xiàng)費(fèi)用合計(jì)為117.35美元/（年·頭）[19]?；疾∧膛Ｈ橄俚姆置诩?xì)胞發(fā)生損傷或者被破壞后，其乳腺血管會(huì)明顯擴(kuò)張，滲透壓發(fā)生變化；牛乳成分發(fā)生多種變化，如乳清蛋白水平升高，酪蛋白水平與干酪產(chǎn)量顯著減少，乳脂肪、乳糖含量與非脂乳固體均發(fā)生不同程度的下降[20]。由此可見，奶牛隱性乳房炎造成的損失不僅包括產(chǎn)奶量的減少，而且還包括治療費(fèi)用與牛群更替成本的增高以及額外勞動(dòng)力等其他經(jīng)濟(jì)損失。其中，產(chǎn)奶量的下降所造成的損失占奶牛乳房炎所造成總損失的69%～80%[21]。③奶牛隱性乳房炎還會(huì)延長(zhǎng)產(chǎn)后發(fā)情和妊娠時(shí)間。這將嚴(yán)重影響奶牛的產(chǎn)犢及下一個(gè)生產(chǎn)周期，給奶牛養(yǎng)殖業(yè)同樣可造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，奶牛隱性乳房炎可摧垮奶牛的健康，破壞奶牛機(jī)體的免疫系統(tǒng)，致使奶牛養(yǎng)殖業(yè)面臨嚴(yán)峻的考驗(yàn)。

2 中草藥防治奶牛乳房炎的作用機(jī)理

2.1 抑菌、殺菌作用

為了解決集約化飼養(yǎng)的奶牛由于持續(xù)使用抗生素造成的細(xì)菌耐藥性問題，中草藥替代抗生素治療方法的研究越來越多。截至目前，國內(nèi)外大量研究均證明了中草藥對(duì)奶牛乳房炎病原菌（包括耐藥菌）具有很好的殺菌或抑菌功效。無論是中草藥單方或組方還是中草藥提取物均對(duì)奶牛隱性乳房炎主要致病菌有較明顯的抑制作用，特別是以清熱解毒類的藥物和清熱燥濕類的藥物較為突出，可以有效地防治奶牛乳房炎疾病的發(fā)生。郝景鋒等[8]研究了20味中草藥（包括魚腥草、蒲公英等）對(duì)從隱性乳房炎奶牛乳汁中分離的金黃色葡萄球菌、鏈球菌以及大腸桿菌的體外抑菌效果。結(jié)果顯示，魚腥草、蒲公英、金銀花、紅花和益母草對(duì)上述3種病原菌均具有很好的體外抑菌效果。劉珂飛等[22]將魚腥草、金銀花和蒲公英等5味中草藥有效成分組成10個(gè)組方，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)10個(gè)組方對(duì)無乳鏈球菌和金黃色葡萄球菌均有明顯的抑制作用，并發(fā)現(xiàn)復(fù)方10（配方如下：1mg/mL魚腥草提取物、2.2mg/mL金銀花提取物、6mg/mL蒲公英提取物、7.63mg/mL甘草甜素提取物、8.75mg/mL黃芩提取物）的體外抑菌活性效果最佳。徐忠贊等[23]研究發(fā)現(xiàn)六茜素對(duì)奶牛乳房炎主要致病菌——金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌等具有較強(qiáng)的抑制作用，其最小抑菌濃度（MIC）為12.5～19.5μg/mL，表明病原菌對(duì)六茜素高度敏感。白峰等[24]通過平板挖孔灌藥法發(fā)現(xiàn)黃芩、蒲公英、丹參與桉葉4味中草藥對(duì)患有乳房炎的奶牛乳樣中分離的金黃色葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌3種病原菌抑制效果較好。吳國娟等[25]發(fā)現(xiàn)8味中草藥及復(fù)方對(duì)奶牛乳房炎的6種致病菌具有抑菌作用，其中抑菌作用最強(qiáng)的為瓜蔞、金銀花，其次為連翹、白附子和天花粉。瓜蔞、金銀花、連翹對(duì)奶牛乳房炎致病菌的MIC值和最小殺菌濃度（MBC）值分別為1.87～53.13g/L、3.28～53.13g/L。紀(jì)志輝[26]研究了由黃芩、蒲公英和連翹組成的復(fù)方對(duì)奶牛隱性乳房炎的治療效果。結(jié)果顯示，該復(fù)方在生藥濃度為1/64～1/32g/mL時(shí)對(duì)誘發(fā)奶牛乳房炎的大腸桿菌、葡萄球菌、無乳鏈球菌均表現(xiàn)出抑制作用，該復(fù)方對(duì)奶牛乳房炎的治愈率和有效率分別為81.3%和90.6%。宋毓民等[27]經(jīng)藥敏試驗(yàn)研究表明，90%和40%的蒲公英乙醇洗脫液中含有主要的抑菌成分，它們對(duì)奶牛隱性乳房炎主要病原菌——金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、停乳鏈球菌、無乳鏈球菌和乳房鏈球菌等均具有顯著的抑菌效果。Shang等[28]從茶灰粉中提取了一種名為茶皂素的活性物質(zhì)，發(fā)現(xiàn)茶皂素對(duì)從乳房炎患牛乳中分離的多重耐藥病原菌——無乳鏈球菌（抗紅霉素、克林霉素、氯霉素和慶大霉素）具有一定的抗菌活性，并能抑制其生物膜的形成。Zeedan等[29]發(fā)現(xiàn)蒙大拿茉莉、白蒿的丙酮提取物對(duì)青霉素和四環(huán)素等多重耐藥菌——無乳鏈球菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、克雷伯氏菌和凝固酶陰性葡萄球菌等奶牛乳房炎病原菌均有較好的抑菌活性，其MIC值為0.01～1.56mg/mL，效果明顯優(yōu)于恩諾沙星。Silva等[30]研究發(fā)現(xiàn)小葉鴨跖草的細(xì)根皮和葉子的粗乙醇提取物對(duì)從乳房炎患牛中分離的60株葡萄球菌分離株有抗菌作用；樹皮粗提物的MBC值較低，為781.2μg/mL。此外，發(fā)現(xiàn)小葉鴨跖草的細(xì)根皮和葉子的粗乙醇提取物能夠干擾葡萄球菌生物膜形成的初始階段。Cho等[31]用0.9mL牛至精油軟膏單、雙劑量處理患乳房炎的奶牛乳腺后，發(fā)現(xiàn)體細(xì)胞數(shù)（SCC）和白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）明顯減少，在乳汁中未檢出金黃色葡萄球菌或大腸桿菌?？梢?，牛至精油軟膏對(duì)隱性乳房炎病原菌有顯著抑制效果。Gomes等[32]將藍(lán)桉和胡桃提取物組合應(yīng)用時(shí)，發(fā)現(xiàn)它們可以使耐藥性金黃色葡萄球菌ATCC25923和臨床分離菌株金黃色葡萄球菌Log值分別降低3個(gè)數(shù)量級(jí)與5個(gè)數(shù)量級(jí)。Ksouri等[33]發(fā)現(xiàn)牛至、迷迭香和胸腺纖毛蟲的精油對(duì)從臨床乳房炎奶牛分離的10株白色念珠菌具有良好的抗菌活性，其MIC值為15.02～31.08mg/mL。Claudia等[34]發(fā)現(xiàn)橡苔、苦艾和薰衣草的提取物對(duì)從乳房炎患牛分離的多耐藥性病原菌——金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等均具有顯著的抗菌效果，其MIC值分別為0.09～6.25μg/mL、0.09～3.12μg/mL與0.09～6.25μg/mL，橡苔、苦艾提取物的MBC值為0.75～25μg/mL，薰衣草提取物的MBC值為0.39～25μg/mL。綜上所述，中草藥具有獨(dú)特的抑菌或殺菌作用，將是克服奶牛乳房炎致病菌的重要武器。中草藥作為我國獨(dú)有的天然資源，可能是克服細(xì)菌耐藥性的最佳途徑之一，可將其進(jìn)一步開發(fā)為純天然高活性的細(xì)菌耐藥性抑制劑，以達(dá)到抑制或消滅耐藥菌的目的。

2.2 增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能

中草藥有效的免疫活性成分主要包括多糖類、苷類、生物堿類、揮發(fā)性成分和有機(jī)酸，它們可以增強(qiáng)動(dòng)物的非特異性免疫反應(yīng)及抗體的產(chǎn)生，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能及提高淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率。中草藥不僅能夠促進(jìn)動(dòng)物免疫器官如胸腺、脾臟等發(fā)育，還能有效提高機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫水平，從而改善奶牛的免疫功能。已有研究表明，中草藥如黃芪、人參、黨參、白術(shù)、當(dāng)歸、金銀花、淫羊藿等均能提高血液中白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞的數(shù)量，從而提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力[35]。孫敏[36]發(fā)現(xiàn)黃芪、黨參、白術(shù)等及其復(fù)方制劑能夠顯著提高奶牛淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率、單核細(xì)胞數(shù)量和中性粒細(xì)胞的吞噬率；此外，該中草藥制劑還提高了血清α-、β-與γ-球蛋白的含量。血清球蛋白含量是衡量動(dòng)物機(jī)體感染情況和體液免疫水平的重要標(biāo)準(zhǔn)。張淼濤等[37]研究了中草藥添加劑——黃芪、蒲公英、益母草等對(duì)患有隱性乳房炎奶牛的影響，每頭牛每天飼喂量為60g，飼喂60d后，發(fā)現(xiàn)黃芪、蒲公英、益母草等可顯著提高中性粒細(xì)胞的吞噬力（P＜0.05）和淋巴細(xì)胞的刺激指數(shù)（P＜0.05），使奶牛隱性乳房炎的發(fā)病率降低5%，每頭奶牛的產(chǎn)奶量增加0.788kg。

動(dòng)物機(jī)體免疫反應(yīng)受環(huán)核苷酸的調(diào)節(jié)，環(huán)化腺核苷一磷酸（cAMP）增多時(shí)能增強(qiáng)免疫，而環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）增多時(shí)則抑制免疫。川芎的有效成分為川芎嗪，可通過抑制磷酸二酯酶活性提高環(huán)核苷酸水平，從而參與動(dòng)物機(jī)體的免疫反應(yīng)[38]。陳永慶等[39]研究表明，黃芪、黨參、女貞子等中草藥復(fù)方制劑可以顯著提高健康奶牛和隱性乳房炎奶牛的紅細(xì)胞-抗體-補(bǔ)體復(fù)合物（EAC）花環(huán)形成率、T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、中性粒細(xì)胞吞噬率與吞噬指數(shù)（P＜0.05或P＜0.01），說明由黃芪、黨參等組成的中草藥復(fù)方制劑能夠增強(qiáng)奶牛的細(xì)胞免疫與體液免疫功能，促進(jìn)并恢復(fù)動(dòng)物機(jī)體的免疫機(jī)能。宋華容等[40]選用胡桃仁、白術(shù)、白芍、當(dāng)歸等中藥進(jìn)行組方，每頭牛每天口服量為300g，每天1次，外用涂膜劑，連續(xù)3～8d。研究發(fā)現(xiàn)，該中藥制劑顯著提高了奶牛的細(xì)胞免疫功能（P＜0.05）、細(xì)胞吞噬能力（P＜0.05），每頭牛每天的產(chǎn)奶量增加了0.163kg。經(jīng)分析，奶產(chǎn)量的增加可能與中藥復(fù)方制劑顯著增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的免疫功能有關(guān)。王秋芳等[41]在患有隱性乳房炎奶牛的精料中添加了中草藥方劑（包括黃芪、白芍、蒲公英、當(dāng)歸、益母草、川芎、王不留行等），每頭牛每天飼喂量為100g，連續(xù)30d。結(jié)果顯示，中草藥方劑顯著提高了奶牛中性粒細(xì)胞吞噬率、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化指數(shù)，提高了紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率（E-C3bRP），降低了免疫復(fù)合物花環(huán)率（E-ICR），表明該中藥方劑具有顯著改善奶牛紅細(xì)胞免疫功能的作用。另外，該中藥方劑能夠降低隱性乳房炎的發(fā)病率，其有效率為83%?？傊?，以上研究為揭示中草藥調(diào)控動(dòng)物機(jī)體免疫機(jī)制提供了重要的理論依據(jù)。中草藥作為既能清除耐藥性細(xì)菌，又能增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體免疫力的藥物，為其臨床應(yīng)用提供了新的預(yù)防與治療思路。

2.3 抗炎作用

在健康奶牛乳房的乳汁中，巨噬細(xì)胞是主要的細(xì)胞部分[42]，通過釋放炎癥介質(zhì)，如一氧化氮（NO）和促炎癥細(xì)胞因子，包括腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）和白細(xì)胞介素8（IL-8）在炎癥過程中發(fā)揮作用[43]。由于奶牛隱性乳房炎沒有明顯的臨床癥狀，因此檢測(cè)時(shí)只能通過微生物學(xué)或牛奶中SCC進(jìn)行診斷。奶牛隱性乳房炎與乳汁中IL-8水平升高有關(guān)，可以作為判斷奶牛乳房炎炎癥的指標(biāo)。前期研究表明，很多中草藥具有消炎的功能，可用于治療奶牛隱性乳房炎。伍清林等[44]在奶牛的日糧中添加消炎泌乳沖劑（包含連翹、蒲公英、路路通等10味中草藥），每頭牛每天飼喂量為300g～400g，連續(xù)30d。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該沖劑可以顯著地降低血清中的促炎因子TNF-α、IL-8的含量（P＜0.05或P＜0.01），使之恢復(fù)到正常水平，這表明消炎泌乳沖劑對(duì)奶牛隱性乳房炎具有良好的治療效果。馮士彬等[45]研究發(fā)現(xiàn)，由黃連、七葉一枝花、紫花地丁等組方的中草藥復(fù)方透皮貼劑能夠改善臨床型乳房炎奶牛乳房組織內(nèi)部微循環(huán)，顯著降低血清中TNF-α、IL-β、IL-8的含量（P＜0.01或P＜0.05）。由此可見，中草藥復(fù)方透皮貼劑可以抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，并能消除炎性介質(zhì)對(duì)奶牛機(jī)體的影響。鐘凱等[46]對(duì)患有乳房炎的大鼠按每千克體重100mg的劑量灌喂黃芪多糖，發(fā)現(xiàn)黃芪多糖能夠抑制乳腺組織內(nèi)促炎因子TNF-α的過度釋放，并能改善動(dòng)物機(jī)體的細(xì)胞免疫功能，減輕炎癥反應(yīng)，表明黃芪多糖能夠保護(hù)內(nèi)毒素誘發(fā)的大鼠乳房炎。Zhan等[47]發(fā)現(xiàn)茶樹油（tea tree oil,TTO）添加量為0.025%、0.05%時(shí)，能夠提高金黃色葡萄球菌接種的奶牛乳腺上皮細(xì)胞存活率；0.05%TTO與多形核白細(xì)胞（PMNL）孵育后，可降低葡萄球菌引起的促炎細(xì)胞因子IL-1β、白細(xì)胞介素6（IL-6）和TNF-α的表達(dá)（P＜0.001），同時(shí)，0.05%TTO提高了PMNL細(xì)胞因子IL-8表達(dá)水平（P＜0.05）。此外，0.05%TTO降低PMNL的核因子κB（NF-κB）抑制蛋白α和TNF-α的表達(dá)水平。Xu等[48]在奶牛乳腺內(nèi)淋巴結(jié)區(qū)域注射16～48mg白術(shù)多糖RAMP-O，三周后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，RAMP-O顯著地降低了奶牛乳汁內(nèi)SCC（下降45.3%～46.0%）；同時(shí)，RAMP-O使N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性下降了55.2%～60.3%。Shah等[49]選擇24個(gè)患有奶牛隱性乳房炎的養(yǎng)殖基地，在罹病奶牛乳腺內(nèi)注射10mL的1%牧豆樹生物堿制劑，每天1次，連續(xù)5d，結(jié)果發(fā)現(xiàn)0.25%～5%牧豆樹生物堿在體外、體內(nèi)分別對(duì)金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌與大腸桿菌等具有較強(qiáng)的抗菌活性，并通過增強(qiáng)IL-1β、IL-6、IL-8和干擾素γ（IFN-γ）基因表達(dá)調(diào)控免疫功能。Mukherjeea等[50]通過乳頭注射100mg圣羅勒水提取物，研究了它對(duì)健康奶牛、隱性乳房炎奶牛的炎性細(xì)胞及牛乳中細(xì)菌總數(shù)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，用藥3d后，圣羅勒水提取物使隱性乳房炎奶牛牛乳中的細(xì)菌總數(shù)降低25%，中性粒細(xì)胞數(shù)量增加29.03%，淋巴細(xì)胞數(shù)量增加39.3%，吞噬細(xì)胞活性提升62.6%，吞噬指數(shù)提高93.59%。綜上所述，中草藥在治療奶牛隱性乳房炎中具有一定的免疫調(diào)節(jié)功能及抑制炎癥的潛力。

2.4 其他功能

乳房炎患牛乳汁中的白蛋白（SA）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、乳酸脫氫酶（LDH）與天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）主要來自于受損害的乳腺上皮細(xì)胞和白細(xì)胞，因此，SA、LDH、ALT與AST含量的變化可間接地反映奶牛乳房炎的發(fā)生和乳腺細(xì)胞的修復(fù)情況[51,52]。王希春等[53]研究了當(dāng)木芙蓉、紫花地丁、半枝蓮等中草藥復(fù)方提取物對(duì)小鼠乳腺細(xì)胞的影響，發(fā)現(xiàn)濃度為8～200mg/mL的中草藥復(fù)方提取物顯著地促進(jìn)了小鼠乳腺上皮細(xì)胞的增殖（P＜0.01或P＜0.05）。羅瑩等[54]研究紫花地丁、黃芪、澤蘭等中草藥復(fù)方灌注液及其中的單味中藥澤蘭、雞血藤提取物對(duì)奶牛乳腺細(xì)胞的影響。結(jié)果顯示，10mg/mL中草藥灌注液顯著地促進(jìn)了奶牛乳腺上皮細(xì)胞的增殖（P＜0.01）。孟慶娟等[55]研究了甜地丁、紫花地丁、黃芪等11味組方的復(fù)方中草藥灌注劑對(duì)乳房炎奶牛SA、ALT、LDH與AST的影響，結(jié)果顯示復(fù)方中草藥灌注劑明顯降低了乳房炎奶牛乳清中SA、LDH、ALT與AST含量，表明該中草藥灌注劑可促進(jìn)乳房炎奶牛受損乳腺上皮細(xì)胞的再生和修復(fù)，還能修復(fù)受損害的乳腺血管系統(tǒng)。綜上，中草藥能夠促進(jìn)奶牛乳腺上皮細(xì)胞的增殖，加強(qiáng)乳腺的代謝活動(dòng)，改善機(jī)體的造血機(jī)能、血液循環(huán)和消化吸收功能，提高奶牛的生產(chǎn)性能和飼料利用率。

3 中草藥在防治奶牛乳房炎中的應(yīng)用

3.1 中草藥方劑

中藥復(fù)方是指在辨證審因決定治法以后，選擇合適的藥物酌定用量，按照組成原則妥善配伍而成的一組藥物，其所含化學(xué)成分復(fù)雜，藥理作用具有多靶點(diǎn)、多層次的特點(diǎn)[56]。李成應(yīng)等[57]通過牛津杯法、試管2倍稀釋法等檢測(cè)了30種中草藥對(duì)奶牛乳房炎主要致病菌的抑菌活性，發(fā)現(xiàn)組方Ⅰ（包含蒲公英、秦皮、大青葉、丹參、川芎、皂刺與紅花）及加味后（秦公散）對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC值均為0.125g/mL，對(duì)大腸桿菌的MIC值均為0.25g/mL；組方I與秦公散對(duì)混合菌（金黃色葡萄球菌與大腸桿菌）感染的小鼠保護(hù)率分別為50%、50%～60%，組方II（金烏散：蒲公英、烏梅、大青葉、連翹、敗醬草、金銀花與皂刺）對(duì)以上2種病原菌的MIC值為0.25g/mL，但在小鼠體內(nèi)無活性。這表明中藥復(fù)方I及秦公散具有良好的體內(nèi)、外抗菌活性。王紅連等[58]測(cè)定了中草藥復(fù)方II（包含升麻、白芷、連翹、蒲公英、魚腥草、玄參、紅花、甘草與通草）對(duì)奶牛乳清和血清N-乙酰-β-氨基葡萄糖酶（NAG）、LDH、堿性磷酸酶（ALP）活性的影響，發(fā)現(xiàn)在給藥后3種酶的活性均出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，表明中草藥復(fù)方II對(duì)奶牛乳房炎具有一定的抗炎作用。王娜等[59]發(fā)現(xiàn)中草藥組方（黨參40g、白術(shù)60g、金銀花30g、蒲公英60g、黃芪60g、甘草60g、茯苓30g、連翹40g和王不留行30g）水煎液顯著地降低了隱性乳房炎患牛乳中的SCC和細(xì)菌數(shù)，奶牛臨床癥狀得到了改善，奶牛皮毛變得有光澤，表明該中草藥方劑對(duì)奶牛隱性乳房炎具有很好的防控作用。

中草藥作為動(dòng)物飼料添加劑兼有藥物和營養(yǎng)的雙重功效，既能防病，又能提高其生產(chǎn)性能。張淼濤等[60]將黃芪、蒲公英、當(dāng)歸、丹參、川芎、益母草等中草藥配制成飼料添加劑，添加到患有隱性乳房炎的奶牛日糧中進(jìn)行飼喂，并檢測(cè)牛乳中的中性粒細(xì)胞吞噬力與淋巴細(xì)胞刺激指數(shù)的變化。研究發(fā)現(xiàn)，此中草藥添加劑通過抗體及補(bǔ)體等作用提高了奶牛中性粒細(xì)胞的吞噬力，刺激了淋巴細(xì)胞的增殖，從而達(dá)到防控奶牛隱性乳房炎的目的。張善芝等[61]在圍產(chǎn)期健康奶牛日糧中添加蒲公英、黃芪、花椒等組方的中草藥添加劑，每頭牛每天飼喂量為200g，連續(xù)飼喂35d；結(jié)果顯示，試驗(yàn)組中的奶牛隱性乳房炎檢出率比對(duì)照組的乳房炎檢出率下降了57.1%（P＜0.05），表明此方劑對(duì)奶牛隱性乳房炎具有明顯的預(yù)防作用。王子敬等[62]在奶牛日糧中添加蒲公英、王不留行、黃芩等組方的復(fù)方中草藥添加劑，每頭牛每天飼喂量為200g，連續(xù)飼喂7d后結(jié)果顯示，該中草藥制劑對(duì)奶牛隱性乳房炎的治愈率高達(dá)80%，其產(chǎn)奶量比對(duì)照組（未添加中草藥）提高了20.71%（P＜0.05）。張乃峰等[63]在奶牛的日糧中添加2.5%忍冬藤、蒲公英、川斷等組方的中草藥添加劑，其目的是替代抗生素防治乳房炎，結(jié)果顯示，中草藥添加劑組中的奶牛乳房炎發(fā)病率從41.48%下降至3.13%，總有效率達(dá)到了92.45%（P≤0.05），其產(chǎn)奶量提高了3.81kg/d，乳脂率提高了0.28%，優(yōu)于抗生素組。

3.2 中草藥提取物

近年來，通過中草藥提取物進(jìn)行奶牛乳房炎防治的研究已成為熱點(diǎn)，推動(dòng)了復(fù)方中草藥涂搽劑、乳房注射劑、乳房透皮吸收劑、肌肉注射劑、穴位埋置劑、微膠囊等新劑型的研究進(jìn)程。唐興剛等[64]研究了由蒲公英、金銀花與紫花地丁等提取物組成的復(fù)方噴霧劑對(duì)奶牛隱性乳房炎的防治作用，發(fā)現(xiàn)該復(fù)方噴霧劑對(duì)奶牛隱性乳房炎的治愈率為88.9%，有效率為97.2%。潘佳亮等[65]檢測(cè)了由紫黃連、花地丁、蒲公英等18味中草藥隨機(jī)組方的7種復(fù)方提取物對(duì)奶牛乳房炎致病菌——金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌與停乳鏈球菌的體外抑菌效果，發(fā)現(xiàn)黃連、連翹、紅花與黃芩組方提取物的殺菌效果最好（P＜0.05）。Khan[66]使用余甘子提取物治療30頭隱性乳房炎水牛，治療14d后，乳房炎治愈率達(dá)到了64.7%，僅次于普魯卡因（青霉素）治療組（80.95%），說明余甘子果實(shí)提取物可以用于治療奶牛隱性乳房炎。王海梅等[67]比較了中草藥提取物軟膏劑與乳室灌注抗生素（由青霉素鉀240萬IU、硫酸鏈霉素1g、慶大霉素10mL與地塞米松5mL組成）對(duì)奶牛臨床型乳房炎的治療效果。結(jié)果表明，在給藥第4天時(shí)，中草藥提取物軟膏劑對(duì)奶牛乳房炎的治愈率比灌注抗生素高了40.1%（P＜0.01），平均治愈時(shí)間縮短了5.7d（P＜0.01），復(fù)發(fā)率降低了36.9%（P＜0.05），其效果明顯優(yōu)于抗生素組。葉文初等[68]檢測(cè)了苦豆草提取物對(duì)奶牛乳房炎病原菌的體外抗菌作用，發(fā)現(xiàn)它對(duì)金黃色葡萄球菌與表皮葡萄球菌的MIC值均為2.34mg/L，對(duì)停乳鏈球菌和致病性大腸桿菌的MIC值分別為0.585mg/L與4.687mg/L，其MBC值均為9.375mg/L，這表明苦豆草提取物在體外對(duì)奶牛乳房炎致病菌具有明顯的抑菌作用。侯昆等[69]研究了竹葉黃酮與青蒿提取物對(duì)隱性奶牛乳房炎的防控作用，發(fā)現(xiàn)2種提取物均能夠降低隱性乳房炎患牛乳中SCC的數(shù)量和血清中MDA含量，提高了血清SOD活性，產(chǎn)奶量分別提高了8.95%和13.24%。由此可見，竹葉黃酮與青蒿提取物能夠增強(qiáng)奶牛的抗氧化能力與免疫功能，并能提高產(chǎn)奶性能。綜上，將中草藥與藥效學(xué)、藥劑學(xué)、藥物化學(xué)、藥物代謝動(dòng)力學(xué)、免疫學(xué)及臨床獸醫(yī)學(xué)等學(xué)科相結(jié)合，能夠促進(jìn)其在防治奶牛乳房炎方面新產(chǎn)品的開發(fā)及提高中草藥的臨床應(yīng)用價(jià)值。

4 中草藥防治奶牛乳房炎的應(yīng)用前景

奶牛乳房炎致病菌對(duì)抗生素具有高度耐藥性，如何有效防治奶牛隱性乳房炎是當(dāng)前科研工作者面臨的一項(xiàng)重要任務(wù)。中草藥由于具有高效、安全、純天然、無殘留、無污染、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)成為奶牛乳房炎防控道路上一個(gè)新的研究方向。利用中草藥防治奶牛隱性乳房炎能夠避免或降低藥物治療過程中所產(chǎn)生的毒副作用及藥物殘留，不易使細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性。中草藥能夠抑制病原菌及提高奶牛機(jī)體的免疫力。相對(duì)于其他抗菌藥物，中草藥被認(rèn)為是對(duì)動(dòng)物、微生物和環(huán)境更安全的藥物。然而，中草藥在防治奶牛乳房炎應(yīng)用中仍然存在一定的問題，主要表現(xiàn)為：①物質(zhì)基礎(chǔ)的不確性。由于中草藥提取物成分復(fù)雜，導(dǎo)致其有效成分、構(gòu)效及量效關(guān)系尚不明確；②作用效果不穩(wěn)定及作用機(jī)制不清晰；③原料和產(chǎn)品質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法不完備；④劑型較單一，主要是散劑和煎劑，給藥不便。

為了解決以上問題，在今后的工作中，應(yīng)著重開展：①基于液相/色譜-質(zhì)譜、NMR、組學(xué)、計(jì)算機(jī)虛擬篩選等技術(shù)手段對(duì)中草藥化學(xué)成分進(jìn)行提取、分離、體內(nèi)外活性篩選及結(jié)構(gòu)鑒定，確定有效成分，闡明物質(zhì)基礎(chǔ)及構(gòu)效關(guān)系；②從分子、細(xì)胞及動(dòng)物不同層面探究中草藥對(duì)奶牛乳房炎病原菌的抑菌機(jī)理、對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)控作用及抗炎等功能，明確其作用機(jī)理及量效關(guān)系；③依據(jù)《中國藥典》與《獸藥典》制定符合畜牧業(yè)行業(yè)特點(diǎn)的中草藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法。建立多種質(zhì)量檢測(cè)方法，嚴(yán)格把控檢測(cè)關(guān)，加強(qiáng)中草藥原料及制劑的質(zhì)量控制；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)包含有效性指標(biāo)，檢測(cè)方法應(yīng)能體現(xiàn)中藥活性成分，質(zhì)控指標(biāo)應(yīng)確保其可控性、專屬性；④根據(jù)現(xiàn)代制藥技術(shù)與方法，大力開展中草藥新制劑、新劑型的研究，研制出適合臨床應(yīng)用的劑型。

總之，中草藥在防控奶牛乳房炎方面具有巨大的潛力，開展中草藥防治奶牛乳房炎的研究不僅可以滿足可持續(xù)畜牧業(yè)發(fā)展的要求，也能滿足人們對(duì)提高生活質(zhì)量和綠色食品消費(fèi)的需求與渴望。