宋維芳,劉文先,簡(jiǎn)瑩娜，李世雙,李秀萍,馬利青

(1.青海門源縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，門源 810300；2.青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，西寧 810016)

羊黑疫，又稱羊傳染性壞死性肝炎，是由B型諾維氏梭菌引起綿羊、山羊的一種急性高度致死性毒血癥，本病以肝實(shí)質(zhì)發(fā)生壞死性病灶為特征，死羊尸體迅速腐敗，皮下靜脈充血、發(fā)黑，使羊皮膚呈現(xiàn)暗黑色，故名“黑疫”[1]。本病以2～4歲、營(yíng)養(yǎng)好的綿羊多發(fā)，山羊也可患病，主要發(fā)生于低洼、潮濕地區(qū)，以春、夏季節(jié)多發(fā)，發(fā)病常與肝片吸蟲(chóng)的感染侵襲密切相關(guān)。由于羊黑疫發(fā)病急、死亡快，養(yǎng)殖戶不易察覺(jué)，一旦羊群感染該病，均會(huì)對(duì)養(yǎng)殖戶造成不小的經(jīng)濟(jì)損失。

2021年1月23日，門源馬場(chǎng)永安城郭永錄家的4只綿羊突然死亡，接到疫情報(bào)告后，我們立即到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行診斷及調(diào)查，經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、現(xiàn)場(chǎng)剖檢和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，診斷為羊黑疫。經(jīng)采取一系列綜合防控措施，現(xiàn)已恢復(fù)穩(wěn)定，并對(duì)疫情進(jìn)行了追蹤調(diào)查，現(xiàn)將診斷情況報(bào)告如下。

1 發(fā)病區(qū)調(diào)研

發(fā)病區(qū)位于門源馬場(chǎng)永安城，該地區(qū)是納子峽水庫(kù)的濕地，馬場(chǎng)的牛羊在秋后就在此草場(chǎng)上放牧，門源縣夏秋兩季氣候溫暖，加之近幾年門源縣降雨量增多，羊群經(jīng)常在地勢(shì)低洼地區(qū)放牧，羊通過(guò)吃草、飲水等方式，吞噬囊蚴而感染肝片吸蟲(chóng)，低洼和沼澤地帶是螺的滋生地，在感染季節(jié)，牲畜在這些地帶放牧，就造成肝片吸蟲(chóng)病的普遍流行。在冬春季節(jié)，天寒地凍，牧草枯黃，如無(wú)飼草補(bǔ)飼，常使羊體質(zhì)下降，即使感染不重也會(huì)成為羊黑疫的主要誘因。

2 剖檢變化

對(duì)上述4只病死羊逐一進(jìn)行剖檢，其中心包積液(3/4)；肝臟表面有肝片吸蟲(chóng)爬行的蟲(chóng)道(4/4)；膽囊壁有陳舊性出血灶(2/4)；脾臟點(diǎn)狀出血(3/4)；小腸潮紅(3/4)；肺臟實(shí)變(1/4)；腎臟髓質(zhì)淤血(3/4)；瓣胃干(2/4)；十二指腸膨大部腫脹，內(nèi)壁有出血斑(3/4)；大網(wǎng)膜呈黑色斑塊，疑似腹膜炎(1/4)；胃中有毛球和未消化的奶疙瘩(1/4)；小腸鼓氣，腸壁變薄，內(nèi)容物呈黃色；初步懷疑為奶結(jié)未消化導(dǎo)致的酸中毒(1/4)。

3 病原分離鑒定

3.1抹片鏡檢

取病死普氏原羚的肝臟抹片，瑞特氏染色、鏡檢發(fā)現(xiàn)單個(gè)、散在、兩端鈍圓的大桿菌。

3.2細(xì)菌分離培養(yǎng)

無(wú)菌接種病死普氏原羚的心、肝、脾、肺、腎和腸淋等臟器組織至普通肉湯，鮮血斜面和厭氣肉肝湯(加新鮮生肝)培養(yǎng)基中，37 ℃培養(yǎng)72 h后，在接種肝組織的厭氣肉肝湯中，分離得到兩端鈍圓的大桿菌，并有芽胞存在。

4 分子生物學(xué)檢測(cè)

將以上組織進(jìn)行 DNA 提取，然后進(jìn)行 B 型諾魏氏梭菌與溶血梭菌雙重 PCR，出現(xiàn)694 bp 片段為溶血梭菌陽(yáng)性，出現(xiàn) 427 bp 片段為 B 型諾魏氏梭菌陽(yáng)性。

5 結(jié)論

羊場(chǎng)中，1#、2#羊中檢出B 型諾魏氏梭菌。

6 討論

6.1對(duì)于羔羊要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，飼喂消維康可助羔羊消化，減少疾病發(fā)生；

6.2隔離病羊，防治疾病傳播，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，對(duì)于成年羊要加強(qiáng)羊四聯(lián)疫苗的接種，定期驅(qū)蟲(chóng)，減少肝片吸蟲(chóng)的感染、羊黑疫的發(fā)生；對(duì)于咳嗽、消瘦羊只，疑似綿羊肺炎支原體感染的，要用敏感抗生素進(jìn)行治療；

6.3羊黑疫的綜合防治應(yīng)以預(yù)防為主，在疫病流行季節(jié)應(yīng)加強(qiáng)羊群管理，通過(guò)疫苗接種、定期驅(qū)蟲(chóng)能有效降低感染，一旦發(fā)病要及時(shí)隔離治療，以防發(fā)生大規(guī)模流行感染[2]。

6.4在防治過(guò)程中，同時(shí)指導(dǎo)牧戶對(duì)圈舍內(nèi)的糞便進(jìn)行堆肥發(fā)酵，對(duì)有嚴(yán)重病變的肝臟及尸體及時(shí)進(jìn)行放入無(wú)害化處理池進(jìn)行銷毀處理，不在河道中清洗肝臟，可減少肝片吸蟲(chóng)病的感染機(jī)會(huì)，降低羊黑疫誘發(fā)因素的影響[3]。

6.5羊肝片吸蟲(chóng)病的感染是發(fā)生羊黑疫的前提，通過(guò)驅(qū)蟲(chóng)羊肝片吸蟲(chóng)可以切斷發(fā)生羊黑疫的威脅，一旦發(fā)現(xiàn)羊肝片吸蟲(chóng)病和羊黑疫混合感染的疫情，病羊早期治療效果很好，驅(qū)蟲(chóng)和對(duì)癥治療通用[4,5]。