王燕平，劉虹伶，雷應(yīng)華，向 娟，袁 嬌，劉 旭

(四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/農(nóng)業(yè)部西南作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，成都 610066 )

柑橘潰瘍病是世界性植物檢疫的重要對(duì)象，起源于亞洲亞熱帶的中國、印度和印尼等國，隨后擴(kuò)散到中東、澳大利亞等國[1]。我國柑橘種植面積持續(xù)上升，是世界上主要的柑橘生產(chǎn)國[2]。柑橘潰瘍病是柑橘主產(chǎn)區(qū)重要的細(xì)菌性病害，對(duì)柑橘品質(zhì)帶來重大的經(jīng)濟(jì)損失，是由植物病原細(xì)菌柑橘黃單胞菌柑橘亞種(Xanthomonascitrisubsp.citri,Xcc)侵染引起，具有潛伏期長、易爆發(fā)、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)。柑橘潰瘍病在我國主要分布在廣東、廣西、福建以及四川、云南、貴州等南方柑橘主產(chǎn)區(qū)，該病感染柑橘枝條、葉片和果實(shí)，在表面形成似火山口狀的病斑，輕則在果實(shí)、葉片和枝條上形成潰瘍斑，影響果實(shí)品質(zhì)。重則苗木和幼樹受害造成落葉或枯梢，果樹發(fā)病引起大量落葉和落果，甚至毀園。近些年，苗木頻繁調(diào)運(yùn)引種以及生產(chǎn)上的操作疏忽，導(dǎo)致許多柑橘主產(chǎn)區(qū)的潰瘍病有嚴(yán)重發(fā)生的勢頭，應(yīng)在生產(chǎn)管理上引起高度重視。本文旨在總結(jié)柑橘潰瘍病的危害特點(diǎn)，著重對(duì)柑橘潰瘍病快速檢測、生物防治和化學(xué)防治進(jìn)行綜述，以期為田間綜合防控柑橘潰瘍病提供理論知識(shí)作為參考。

1 柑橘潰瘍病的危害特點(diǎn)

1.1 危害

柑橘潰瘍病的發(fā)生危害特點(diǎn)主要是傳播迅速，傳播途徑多樣，危害程度重。柑橘潰瘍病菌主要針對(duì)有氣孔的綠色組織進(jìn)行侵染，該病菌對(duì)柑橘的侵染具有選擇性，傳播迅速，難防難治，輕則帶病斑而降低經(jīng)濟(jì)價(jià)值，重則果裂以及造成落果，如果潰瘍病的防控不當(dāng)造成的經(jīng)濟(jì)損失不可估量。當(dāng)溫濕度條件適宜，大部分只對(duì)柑橘組織的幼嫩部分進(jìn)行侵染，而對(duì)于老熟組織侵染率低。該病菌不僅能為害葉片，對(duì)果實(shí)、枝條以及萼片等地上部分均有侵染。

1.2 地理分布

世界上的柑橘種植區(qū)均有柑橘潰瘍病的報(bào)道，盡管各地都采用嚴(yán)格的檢疫以及加強(qiáng)苗木調(diào)運(yùn)的檢查，但隨著種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，使得柑橘潰瘍病的發(fā)生加重，侵染面積逐步擴(kuò)大，在世界范圍如南美洲、亞洲、中東地區(qū)以及非洲都有發(fā)生。國內(nèi)，在廣東、廣西、湖南、湖北、四川等地區(qū)均發(fā)現(xiàn)柑橘潰瘍病。近年來，我國華南種植區(qū)發(fā)病更為嚴(yán)重。

1.3 癥狀

葉片遭受到潰瘍病菌侵染后，葉片背面呈油漬狀斑點(diǎn)，葉片正面呈圓形病斑，病斑隆起，逐漸擴(kuò)大發(fā)展成組織木栓化的火山口狀。病菌侵染枝梢后，病斑周圍出現(xiàn)黃綠色暈圈，木栓化現(xiàn)象嚴(yán)重，營養(yǎng)供給受阻，危害嚴(yán)重時(shí)造成大部分的葉片脫落甚至引起枝條枯死。對(duì)于果實(shí)的危害，果皮表面病斑變大，木栓化嚴(yán)重，果肉一般不受影響，但會(huì)因潰瘍病菌的侵染而落果，進(jìn)而對(duì)柑橘果實(shí)的產(chǎn)量產(chǎn)生影響。總體來說，受到柑橘潰瘍病的影響，發(fā)病的苗木生長受損，柑橘樹木發(fā)病，導(dǎo)致落葉、枯梢，甚至落果，柑橘果實(shí)的品質(zhì)下降，嚴(yán)重影響柑橘生產(chǎn)上的經(jīng)濟(jì)效益。

2 柑橘潰瘍病病原

2.1 病原分類

病原菌主要是由柑橘黃單胞菌柑橘亞種的致病變種引起，革蘭氏陰性細(xì)菌，主要包括A、B、C、D、E共5個(gè)菌系。其中致病力最強(qiáng)的亞洲菌系為A菌系，寄主很廣泛，對(duì)大多數(shù)柑橘品種均具有較強(qiáng)的侵染能力，對(duì)甜橙、葡萄柚、蜜柑等為害最嚴(yán)重。研究表明我國的南方柑橘主產(chǎn)區(qū)的病株系均屬于A菌系，如今人們普遍使用X.citrisubsp.citri代表致病性最強(qiáng)的A菌系[3]。由X.axonopodispv.aurantifolii引起的B 菌系潰瘍病造成巴拉圭、阿根廷、烏拉圭檸檬上嚴(yán)重所損。C菌系是由X.axonopodispv.aurantifolii引起的，分離的A菌系是從巴西的墨西哥酸橙中得到，發(fā)病癥狀與A菌系很相似。D菌系是在墨西哥的科馬利地區(qū)萊檬上發(fā)現(xiàn)的菌株，主要對(duì)墨西哥萊檬和柚子樹以及波斯萊檬造成危害。E菌系在美國佛州發(fā)現(xiàn)與之前的菌系有差別，由X.axonopodispv.citrumelo引起。

2.2 病原特征

柑橘潰瘍病菌屬薄壁菌門的一種好氧性革蘭氏陰性菌，在NA培養(yǎng)基上菌落呈蠟黃色、圓形、有光澤、微隆起粘稠狀，菌體呈短桿狀，兩端圓，極生單鞭毛，能游動(dòng)，有莢膜，無芽孢，病菌最適生長溫度為28～30℃，菌體致死溫度為49～65℃，最適pH 6.6，病菌耐低溫干旱。在正常情況下，病原菌在寄主組織內(nèi)可存活幾個(gè)月。

3 柑橘潰瘍病菌的侵染循環(huán)

3.1 傳播途徑

病菌通過氣孔或傷口侵染植株，傷口為病原菌的侵染提供了有利條件。在果園的日常生產(chǎn)中，嫁接、修剪和噴灌等農(nóng)事操作也能傳播柑橘潰瘍病。遠(yuǎn)距離的傳播，主要通過帶菌的苗木、接穗和砧木的調(diào)運(yùn)來完成。昆蟲傳播是柑橘潰瘍病菌傳播的途徑之一，柑橘潛葉蛾的通過取食葉片形成傷口有利于病原菌的侵染，可以侵染葉子，莖和果實(shí)，沿取食通道形成大而不規(guī)則的病灶，從而加劇潰瘍病的發(fā)生。

3.2 病害流行條件

柑橘潰瘍病病原菌潛伏在受侵染的組織內(nèi)部(病葉、病梢、病果)進(jìn)行越冬，秋季枝梢上的病斑組織是其主要進(jìn)行越冬的場所，每年病害的高發(fā)期是5～9月的春梢、夏梢和秋梢，尤其是夏梢的危害最為嚴(yán)重。在適宜的溫濕度條件下，柑橘潰瘍病菌可以在植株體內(nèi)繁殖，病斑組織處出現(xiàn)溢出的菌膿，借助風(fēng)和雨、昆蟲和枝葉等接觸傳播到幼嫩的枝梢、嫩的葉片及幼小的果子上，高溫以及多雨的條件更有利于柑橘潰瘍病的發(fā)生。

4 防治技術(shù)

4.1 植物檢疫

加強(qiáng)對(duì)柑橘潰瘍病的檢驗(yàn)檢疫，嚴(yán)禁從疫區(qū)引入帶病苗木，在種苗管理上要著重加強(qiáng)檢疫，是防控該病害的重要措施。顧淵[4]通過對(duì)柑橘潰瘍病菌基因組中一段保守序列進(jìn)行分析，設(shè)計(jì)LAMP引物, 該試驗(yàn)方法檢出柑橘潰瘍病菌DNA最低濃度為100 pg和每微升菌液中的4個(gè)細(xì)菌，是一般的普通PCR靈敏度的1250倍。馬志敏[5]創(chuàng)新了柑橘潰瘍病菌重組酶聚合酶擴(kuò)增檢測相關(guān)的方法，不需要PCR儀相關(guān)的專業(yè)實(shí)驗(yàn)設(shè)備，通常反應(yīng)條件39 ℃恒溫反應(yīng)30 min，就可快速完成對(duì)潰瘍病菌的檢測。

4.2 抗病品種

培育柑橘潰瘍病抗性品種是較為理想的防控途徑，柑橘絕大多數(shù)栽培品種均可感染柑橘潰瘍病，其中甜橙、柚類、枳為高感品種，而金柑、四季橘普遍認(rèn)為對(duì)柑橘潰瘍病有較強(qiáng)抗性。陳芝琳[6]從柑橘野生資源中篩選柑橘潰瘍病抗性材料，采用離體針刺接種方法，兩種野生柑橘PR2、LOB1基因應(yīng)答潰瘍菌入侵時(shí)的表達(dá)差異，為野生柑橘在抗性遺傳改良中的利用奠定基礎(chǔ)。歐智濤[7]對(duì)11個(gè)柑橘品種離體葉片進(jìn)行潰瘍病菌接種，接種12d潰瘍病抗性高低是長安金柑、貢柑、紅肉蜜柚、砂糖橘、金橘蜜柚、馬家柚、沙田柚、橘紅、紐荷爾臍橙、沃柑、茂谷柑。張婧蕓[8]研究CiNPR4的超量表達(dá)減輕了轉(zhuǎn)基因柑橘葉片上潰瘍病的癥狀，轉(zhuǎn)基因CiNPR4植株葉片上Xcc的生長比較緩慢。

4.3 物理防治

在無病區(qū)搭建苗圃，培育健康的幼苗。無病苗圃設(shè)立位置要遠(yuǎn)離病區(qū)，一般是設(shè)立在無病區(qū)或者距離病區(qū)3km以外。種子幼苗都需要確保沒有被病菌污染，幼苗出圃前須先進(jìn)行檢測。加強(qiáng)對(duì)果園的管理，定期對(duì)果園的落葉進(jìn)行清理，剪除染病的枝葉。加強(qiáng)施肥，果樹營養(yǎng)充足才能抵御外來的侵染，根據(jù)不同季節(jié)環(huán)境施打不同的肥料。在果園周圍建立防風(fēng)林防護(hù)帶來減少病原體的傳播。

4.4 化學(xué)防治

為了高效安全的防治柑橘潰瘍病的發(fā)生，通過試驗(yàn)篩選出高效防治柑橘潰瘍病的藥劑，為保障柑橘產(chǎn)業(yè)健康可持續(xù)的良性發(fā)展。李雪蓉[9]試驗(yàn)對(duì)比3%細(xì)剎(噻霉酮)可與銅制劑輪換使用，對(duì)柑橘潰瘍病有良好的防治效果，99% 綠穎在臍橙幼果及春梢期使用防治效果較好。宋曉兵[10]通過室內(nèi)毒力測定以及田間防治相關(guān)的試驗(yàn)，對(duì)比發(fā)現(xiàn)3%噻霉酮微乳劑和77%氫氧化銅水分散粒劑均對(duì)柑橘潰瘍病菌有較強(qiáng)的抑制效果和田間防效。陸冬菊[11]試驗(yàn)對(duì)比3種殺菌劑對(duì)柑橘潰瘍病的防治效果的差異，結(jié)果表明47%春雷·王銅WP 500倍液防治柑橘潰瘍病的效果為84.25%。楊玉麗[12]篩選柑橘潰瘍病防治藥劑，結(jié)果表明20%噻唑鋅、20% 噻森銅、20%噻菌銅3種藥劑防效較好。蔣運(yùn)寧[13]探究橙皮精油助劑 2000 倍液、1500倍液與 33%春雷·喹啉銅懸浮劑1500倍液混配對(duì)沃柑和臍橙潰瘍病的防控有明顯增效作用。黃偉年[14]采用 8% 春雷·噻霉酮 WG 750倍液、46% 氫氧化酮 WG 1500倍液和47%春雷·王酮WP 600倍防治柑橘潰瘍病，對(duì)柑橘潰瘍病均有較好的防效86.3%、94.7%和85%，均可作為農(nóng)戶選擇防治柑橘潰瘍病的合適藥劑。

4.5 生物防治

生物防治因其安全、高效、污染少、成本低，在柑橘潰瘍病防治上有很大的前景。顏楨靈[15]從健康植株的柑橘抗病品種中分離純化出一批內(nèi)生真菌，發(fā)現(xiàn)其發(fā)酵提取物對(duì)柑橘潰瘍病菌具有很好的抑制作用，特有菌屬對(duì)柑橘潰瘍病菌的抑制活性高于優(yōu)勢菌屬，鐮刀菌屬在不同柑橘抗病品種中對(duì)潰瘍病菌均有明顯的抑菌效果。閆建芳[16]從大連新港海底沉積物中分離獲得1株海洋放線菌B80，菌株揮發(fā)性氣體對(duì)柑橘潰瘍病菌菌落抑制率100%。王鑫[17]從柑橘果園土壤中分離鑒定一株F9拮抗菌株，確定其為解淀粉芽孢桿菌，推測抑菌活性可能為脂肽類物質(zhì)，其成分是Bacillomycin L。周亮亮[18]從贛南臍橙葉片中分離的一株生防菌B.velezensisQC-J，該菌株合成碳水化合物活性酶的能力，推測是抑制柑橘潰瘍病病原菌的毒力的重要因素。錢佳琳[19]從臍橙葉片中分離出兩株生防菌，能明顯抑制柑橘潰瘍病，QC-Y為解淀粉芽孢桿菌，QC-J枯草芽孢桿菌，測試生防菌株對(duì)14種常用殺菌/蟲劑的抗性，結(jié)果表明甲基硫菌靈、波爾多液、春雷霉素、吡蟲啉、氨基酸、苯醚甲環(huán)唑等對(duì)生防菌株QC-Y、QC-J均無抑制作用。

5 討論

我國是柑橘種植大國，柑橘在滿足人們食品需求的同時(shí)，也作為果農(nóng)們經(jīng)濟(jì)收入的重要來源，在受到柑橘潰瘍病的危害后經(jīng)濟(jì)遭受很大損失。柑橘潰瘍病的傳播速度快，一旦發(fā)生很難得到防治，在國內(nèi)南方柑橘主產(chǎn)區(qū)發(fā)生危害，已被列為重要的檢疫對(duì)象，防治柑橘潰瘍病主要依靠使用化學(xué)藥劑進(jìn)行防治，雖然化學(xué)藥劑對(duì)柑橘潰瘍病的防治效果很好，但是，它所帶來的問題也是不容小覷的?；瘜W(xué)藥劑作用在農(nóng)作物的時(shí)候通常是沒有選擇性的殺死所有微生物，這樣施加化學(xué)藥劑的同時(shí)也殺死了對(duì)農(nóng)作物有益的微生物。化學(xué)藥劑殘留對(duì)環(huán)境和農(nóng)作物的危害一直是關(guān)鍵問題，無機(jī)殺菌劑如銅劑藥劑和農(nóng)用抗生素等的施加可能對(duì)農(nóng)作物造成損害。生產(chǎn)上長期使用同種化學(xué)農(nóng)藥不僅會(huì)產(chǎn)生抗藥性，而且農(nóng)藥殘留會(huì)污染壞境，對(duì)糧食安全造成不良影響。當(dāng)前，柑橘潰瘍病發(fā)生后不能快速根除，在我們國家對(duì)柑橘上的潰瘍病采取綜合防治，應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)植物檢疫，保護(hù)好無病苗圃區(qū)，把農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治相結(jié)合，更好的遏止柑橘潰瘍病的發(fā)生。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，選育抗病品種、生物防治、新型防治藥劑的出現(xiàn)，柑橘潰瘍病能得到很好的解決。