張義華 ,朱童娜,周馬云 ,葉夢,李承寶,汪道發(fā),蔡亦紅
1.銅陵市疾病預(yù)防控制中心,安徽 銅陵 244000;2.寧波大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;3.安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院
流感病毒是具有高度傳染性的呼吸道病毒,因其突變頻率高,人群對(duì)新出現(xiàn)的流感病毒亞型普遍缺乏免疫力,易造成流感大流行[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)估計(jì),全球范圍內(nèi)每年流感流行會(huì)導(dǎo)致約500 萬例重癥病例和65 萬例呼吸道死亡病例[2]。流感監(jiān)測對(duì)于流感流行動(dòng)態(tài)、病毒變異趨勢以及疫苗株的推薦具有重要的指導(dǎo)意義[3]。本文通過對(duì)銅陵市兩家哨點(diǎn)醫(yī)院報(bào)告的流感樣病例(influenza-like illnesses,ILI)和病原學(xué)檢測結(jié)果進(jìn)行分析,以了解銅陵市流感流行特征和規(guī)律,為當(dāng)?shù)刂贫鞲蟹揽夭呗院痛胧┨峁┛茖W(xué)依據(jù)。
1.1 病例資料來源 所有ILI病例資料均來源于中國流感監(jiān)測信息系統(tǒng)。哨點(diǎn)醫(yī)院門急診病例資料來源于各哨點(diǎn)醫(yī)院信息管理系統(tǒng)。
1.2 標(biāo)本來源 按照《全國流感監(jiān)測方案(2017版)》[2]要求,2015 年 4 月 1 至 2020 年 3 月 31 日,由銅陵市人民醫(yī)院和銅陵市第五人民醫(yī)院兩家哨點(diǎn)醫(yī)院每周各送檢至少20 份ILI 咽拭子標(biāo)本,要求采集對(duì)象均為發(fā)病3天內(nèi),未給予任何抗病毒藥物治療。
1.3 標(biāo)本運(yùn)送和檢測 置于含有病毒保存液(無菌)的采樣管中,低溫運(yùn)送至銅陵市疾病預(yù)防控制中心微生物實(shí)驗(yàn)室,進(jìn)行流感病毒核酸檢測,核酸陽性的標(biāo)本再鑒定亞型。
1.3 方法
1.3.1 儀器和試劑 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 擴(kuò)增儀(ABI公司,美國);HP Viral RNA Kit-高純度RNA病毒核酸純化試劑盒(Roche,德國)、核酸提取試劑盒(磁珠法)(江蘇碩世,中國);甲型/乙型流感病毒核酸檢測試劑盒(熒光PCR 法)、甲型 H1N1(2009)和流感病毒H3N2 亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)、乙型流感病毒Victoria/Yamagata PCR核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)(江蘇碩世,中國)。
1.3.2 病毒RNA提取與檢測 采用RNA分離試劑盒提取病毒核酸,實(shí)時(shí)熒光聚合酶聯(lián)反應(yīng)(RT-PCR)法檢測核酸。
1.3.3 病毒培養(yǎng) 檢測出的陽性標(biāo)本,分別接種狀態(tài)良好的MDCK 細(xì)胞和9~10 日齡雞胚進(jìn)行分離培養(yǎng),收獲的培養(yǎng)液上清通過紅細(xì)胞凝集(HA)及紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)(HI)鑒定分型。
1.4 數(shù)據(jù)分析 流感樣病例百分比(ILI%)=(ILI病例數(shù)/門急診就診病例總數(shù))×100%;流感樣病例暴發(fā)是指同一地區(qū)或單位內(nèi)在較短時(shí)間出現(xiàn)異常增多的ILI。采用Excel 2007 進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入與整理,SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,率的比較采用χ2檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。
2.1 ILI監(jiān)測
2.1.1 一般情況 2015—2020 年,銅陵市2 家哨點(diǎn)醫(yī)院門急診就診病例總數(shù)為862 671 例,其中報(bào)告ILI 26 862 例,ILI%為3.11%。各監(jiān)測年度報(bào)告ILI分別為 3 703、4 522、6 382、5 615、6 640 例,ILI%分別為2.24%、2.81%、3.50%、3.42%、3.50%。2017—2018年ILI呈現(xiàn)上升趨勢,2018年以后趨于平穩(wěn),各年度 ILI%差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=941.478,P<0.05)。見表1。
2.1.2 時(shí)間分布 監(jiān)測年度內(nèi),ILI%共出現(xiàn)8 次高峰,分別為2015 年第30 周(6.11%),2016 年第18 周(4.91%),2017 年第 36 周(6.44%),2018 年第 6 周(6.53%)、24 周(5.98%),2019 第5 周(5.77%)、53 周(7.08%)和2020 第8 周(9.13%)。各年度就診高峰有所不同,主要在冬春季出現(xiàn),而2017—2018 年、2018—2019 年分別出現(xiàn)夏季、秋季的次要高峰。見圖1。
圖1 2015—2020年銅陵市ILI%年度變化趨勢
2.1.3 年齡分布 ILI 中,0~4 歲組占 46.04%(12 367/26 862),5~14歲組占23.45%(6 299/26 862),15~24 歲組占 6.77%(1 818/26 862),25~59 歲組占17.94%(4 818/26 862),≥ 60 歲年齡組占 5.81%(1 560/26 862)。見表1。
表1 2015-2020年銅陵市哨點(diǎn)醫(yī)院ILI監(jiān)測情況
2.2 病原學(xué)監(jiān)測
2.2.1 年度分布 2015—2020年,共檢測標(biāo)本8 490份,檢出陽性1 082 份,平均陽性率為12.74%,其中2017—2018 年度陽性率最高,為 20.63%,2016—2017年度陽性率最低,為6.46%,年度陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=941.478,P<0.5)。陽性標(biāo)本中,最多的是甲型H1N1,為417 份(38.54%);其次是B(Victoria)系(331 份 ,30.59%)、A(H3N2)(253 份 ,23.38%)、B(Yamagata)系(81 份,7.49%)。其中,2015—2016 年主要為甲型 H1N1 和 A(H3N2),2016—2017 年主要為 B(Victoria)系,2017—2019 年主要為甲型H1N1,2019—2020 年度主要為B(Victoria)系。見表2。
表2 2015-2020年銅陵市2家哨點(diǎn)醫(yī)院ILI標(biāo)本核酸檢測結(jié)果
2.2.2 人群分布 監(jiān)測年度中,男性流感標(biāo)本陽性率為14.44%(586/4 059),女性為11.19%(496/4 431);不同年齡段中,5~14 歲年齡組流感檢出率較高,達(dá)到22.41%(322/1 437),≥60 歲年齡組較低,為6.05%(77/1 273),不同性別、年齡組標(biāo)本陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.038、249.020,P均<0.05)。優(yōu)勢毒株分布中,5~14 歲年齡組B(Victoria)系占比較高(45.03%);其他年齡組甲型H1N1 占比均超過30.00%,各年齡組病毒亞型構(gòu)成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=82.060,P<0.05)。見表3。
表3 銅陵市流感病毒核酸監(jiān)測人群分布
2.2.3 季節(jié)分布 2015—2020 年,銅陵市甲型H1N1、A(H3N2)和B 型在不同年度呈交替流行。其中甲型H1N1 和B(Yamagata)系高峰期主要集中在冬春季節(jié)(1—4 月)。A(H3N2)和B(Victoria)系沒有明顯季節(jié)性,全年均有流行。見圖2。
圖2 2015—2020年銅陵市流感病毒陽性病原學(xué)分型
2.3 暴發(fā)疫情監(jiān)測 2015—2020 年銅陵市共報(bào)告ILI 暴發(fā)疫情20 起,均發(fā)生在中小學(xué)校。其中流感A(H3N2)型暴發(fā) 5 起,甲型 H1N1 暴發(fā) 3 起,B(Yamagata)系暴發(fā)2起,B(Victoria)系暴發(fā)9起。
2015—2020 年,銅陵市ILI%總體上較為穩(wěn)定,平均ILI%為3.11%,低于全省平均水平[4]。但2017—2018 年度ILI%上升至3.50%,流感樣病例人數(shù)較上年度增加,且病原學(xué)檢測陽性率為20.63%,這可能與2017 年11 月份開始B(Yamagata)系流行,但這一型別與當(dāng)年WHO 推薦的三價(jià)流感疫苗中所含B 型系別不匹配有關(guān)[5]。另外,也可能因該年度銅陵市出現(xiàn)人感染H7N9禽流感疫情[6],流感患者更傾向去醫(yī)院就診,導(dǎo)致就診率提高。
流感在我國北方和南方的流行規(guī)律有明顯差異:北方每年通常只有1個(gè)流感高峰,多為初春和冬季;南方則包括冬季流感高峰和夏季流感次高峰,有明顯的季節(jié)性雙峰現(xiàn)象[7]。部分亞熱帶地區(qū)也有冬、夏兩季的雙峰現(xiàn)象[8-9]。銅陵市屬于亞熱帶地區(qū),本研究中,該市每個(gè)監(jiān)測年度出現(xiàn)1個(gè)流感高峰,且多在冬春季,2017—2018 年則出現(xiàn)夏季、冬季雙高峰。
ILI主要集中在5 歲以下人群,但是該年齡組流感病毒檢出率相對(duì)較低,僅為6.47%,這與文獻(xiàn)[8,10]報(bào)道一致。從標(biāo)本采集數(shù)量來看,可能與患兒配合度差導(dǎo)致咽拭子采集質(zhì)量不高,以及家長放棄采樣等原因有關(guān)。≥60歲組人群ILI最少,標(biāo)本陽性率也最低,但老年人并發(fā)癥的比例高,這可能會(huì)增加流感病毒感染的風(fēng)險(xiǎn)及加重病情程度[11]。社區(qū)應(yīng)加大對(duì)老年群體流感知識(shí)宣傳力度,鼓勵(lì)60歲以上及患有慢性心肺疾病者接種流感疫苗,降低老年人疾病負(fù)擔(dān)。
2015—2020年銅陵市流感病毒呈現(xiàn)A(H3N2)、甲型H1N1 和B 型流感混合流行的狀態(tài),每種型別占比不同。夏季高峰主要以A(H3N2)為主,而冬季高峰以 B 型和 A 型(甲型 H1N1 和 H3N2)流感共同流行,這與其他地區(qū)的監(jiān)測結(jié)果一致[12-13]。研究發(fā)現(xiàn),B 型流感病毒部分基因型突變致使體外復(fù)制能力增強(qiáng)和體內(nèi)致病性增加[14],本研究中,2016-2017年、2019-2020 年均出現(xiàn)了 B(Victoria)系流行高峰,且5~14 歲年齡組B(Victoria)系流感占比達(dá)到45.03%,可能是由于B(Victoria)系比B(Yamagata)系更容易感染年輕患者[15]。
監(jiān)測期間報(bào)告的ILI 暴發(fā)疫情均發(fā)生在中小學(xué)校,與曾曉旭等[16]報(bào)道一致,這主要由于學(xué)校人口密度高,班級(jí)環(huán)境較為封閉,為流感病毒的傳播創(chuàng)造條件。為做好學(xué)校ILI 暴發(fā)疫情的防控,應(yīng)加強(qiáng)學(xué)校流感監(jiān)測工作,倡導(dǎo)學(xué)生積極接種流感疫苗。
此外,今后還應(yīng)加強(qiáng)對(duì)流感監(jiān)測以及流感病毒HA 和NA 基因的變異性分析及耐藥分析,以掌握流感病毒毒株變化情況,為制定流感防控和疫苗接種策略提供更準(zhǔn)確的科學(xué)依據(jù)。