魏 佳，曾華霖，林書穎，高碧珍△，李燦東，3△

(1.福建省立醫(yī)院，福州 350001；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)，福州 350122；3.福建省中醫(yī)健康狀態(tài)辨識重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，福州 350122)

代謝綜合征(metabolic syndrome,MS)是以高血壓、肥胖、高血糖等代謝因素紊亂為特點(diǎn)的臨床綜合征，在我國的發(fā)病率逐年上升，給家庭和社會造成沉重負(fù)擔(dān)。臨床研究表明，中醫(yī)藥治療MS具有顯著優(yōu)勢，諸多學(xué)者從痰論治并取得顯著療效[1，2]，但目前從痰論治的機(jī)制尚不明確，這與缺乏公認(rèn)的MS痰證動物模型及評價標(biāo)準(zhǔn)密切相關(guān)。基于此，本研究收集近30年MS痰證動物模型相關(guān)文獻(xiàn)，歸納分析MS痰證實(shí)驗(yàn)動物模型基本信息、模型評價指標(biāo)、造模方法和以方測證等，探索評價MS痰證動物模型成功的客觀標(biāo)準(zhǔn)和核心診斷指標(biāo)，為制定科學(xué)的模型評價標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)來源

將檢索時間設(shè)定為1988年1月至2020年12月，分別在中國知網(wǎng)、維普、萬方數(shù)據(jù)庫以及英文Pubmed數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行檢索，檢索采用主題詞與關(guān)鍵詞相結(jié)合的方式。中文檢索詞為“代謝綜合征、X綜合征、胰島素抵抗綜合征、Reaven綜合征、中醫(yī)、模型”，英文檢索詞為“metabolic syndrome，syndrome X,insulin resistance syndrome,Reaven syndrome,traditional Chinese medicine,animal”等。

1.2 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)

所有與MS痰證相關(guān)的動物模型文獻(xiàn)。

1.3 文獻(xiàn)排除標(biāo)準(zhǔn)

綜述類文獻(xiàn)；資料不全的文獻(xiàn)；重復(fù)發(fā)表文獻(xiàn)。

1.4 文獻(xiàn)數(shù)據(jù)處理

研究所用的實(shí)驗(yàn)動物名稱、種類等均參照《實(shí)驗(yàn)動物與動物實(shí)驗(yàn)技術(shù)》[3]進(jìn)行規(guī)范，統(tǒng)一處理具有不同名稱的動物種類，將收集的實(shí)驗(yàn)動物模型基本信息、模型評價指標(biāo)、造模方法等信息錄入Excel 2013，建立動物模型的數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行整理分析。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)篩選結(jié)果

初步檢索共獲得250篇文獻(xiàn)，最終納入7篇，其中英文文獻(xiàn)0篇(見圖1)。

圖1 代謝綜合征痰證動物模型文獻(xiàn)篩選流程圖

2.2 動物模型基本信息

納入的7項(xiàng)研究均以封閉群大鼠為研究對象，其中5項(xiàng)為Wistar大鼠，1項(xiàng)為SD大鼠，1項(xiàng)為SHR大鼠(見表1)。

2.3 動物模型造模方法

納入的7項(xiàng)研究均為誘發(fā)性疾病模型，其中單純食物誘發(fā)的模型有4項(xiàng)，食物聯(lián)合化學(xué)物質(zhì)誘發(fā)的模型有3項(xiàng)。造模周期較長，其中4項(xiàng)研究喂養(yǎng)12周，2項(xiàng)喂養(yǎng)16周，1項(xiàng)喂養(yǎng)15周(見表1)。

表1 代謝綜合征痰證動物模型的基本情況

2.4 動物模型評價指標(biāo)

在MS痰證動物模型判斷標(biāo)準(zhǔn)的制定上，主要圍繞動物證候表現(xiàn)、客觀指標(biāo)、藥物反證等3個方面。7項(xiàng)研究中共涉及26個評價項(xiàng)目，其中空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、甘油三酯(tirglyceirde,TG)、體質(zhì)量、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、空腹血清胰島素(fasting insulin,FINS)、胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model assessment insulin resistance index,HOMA-IR)、證候表現(xiàn)等使用的頻數(shù)較高，常用于判斷MS痰證模型建立成功與否。7項(xiàng)研究中共4項(xiàng)涉及證候表現(xiàn)，主要包括體毛光亮度減退、倦怠懶動、形體肥胖(頻數(shù)=4)，及舌象變化(頻數(shù)=3)，食少、糞便時軟時溏、脈率(頻數(shù)=1)(見表2、3)。

表2 代謝綜合征痰證動物模型評價指標(biāo)的使用頻數(shù)

因此本研究認(rèn)為，判定MS痰證動物模型的評價標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)以動物證候表現(xiàn)與客觀指標(biāo)為主，以藥物反證作為佐證評價證候模型可靠性的手段。模型判定標(biāo)準(zhǔn)中證候表現(xiàn)包括大鼠體毛光亮度減退、倦怠懶動、形體肥胖，客觀指標(biāo)包含體質(zhì)量、腹圍、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、血壓、HDL、TG、FBG、HOMA-IR等，其中以腹圍、HOMA-IR異常為痰證核心診斷指標(biāo)，藥物反證多選用二陳湯以方測證進(jìn)行評價。

3 討論

本研究結(jié)果表明，MS痰證模型以Wistar大鼠為主要造模動物，其性格溫順，且與遺傳與原發(fā)性高血壓大鼠相關(guān)，更易形成高血壓模型[11]；此外有研究比較發(fā)現(xiàn)，在構(gòu)建糖尿病模型方面，Wistar大鼠成模率高于SD大鼠[12]。因此，近年來諸多學(xué)者構(gòu)建MS動物模型多選擇Wistar大鼠。7項(xiàng)研究均采用食物誘發(fā)的造模方法，與單純食物誘發(fā)模型比較，食物聯(lián)合鏈脲佐菌素誘發(fā)性模型雖然制作簡單、成模率高、模型較為穩(wěn)定，但由于與臨床MS發(fā)病機(jī)制存在差異，具有一定的局限性。中醫(yī)認(rèn)為過食肥甘厚膩是MS痰證發(fā)生的重要誘因，《素問·通評虛實(shí)論篇》載：“消癉、仆擊、偏枯、痿厥、氣滿發(fā)逆，肥貴人，則高粱之疾也?！边^食肥甘厚膩損傷脾胃，脾虛則水谷精微不得運(yùn)化，以致濕聚成痰。采用高糖高鹽高脂飲食造模符合中醫(yī)理論，越來越多的學(xué)者傾向以單純食物誘發(fā)為主要造模方式[13-15]。

關(guān)于模型評價標(biāo)準(zhǔn)，由結(jié)果可知MS痰證模型主要圍繞動物證候表現(xiàn)、客觀指標(biāo)、藥物反證等3個方面進(jìn)行評價，有4項(xiàng)研究涉及證候表現(xiàn)，均包含體毛光亮度減退、倦怠懶動、形體肥胖等。近年來諸多學(xué)者針對MS痰證的診斷標(biāo)準(zhǔn)展開研究，整理“十五”至“十三五”《中醫(yī)診斷學(xué)》有關(guān)痰證診斷標(biāo)準(zhǔn)，均涉及痞滿、嘔吐、惡心、苔膩、脈滑、肥胖、納呆等7個證候[16]；2016年制定的《中醫(yī)痰證診斷標(biāo)準(zhǔn)》指出苔膩、頭身困重、脈滑、咯痰、鼻鼾、胸腹?jié)M悶、頭昏等可作為判斷痰證的證候表現(xiàn)[17]。鑒于動物與人在解剖、生理代謝、病理等方面存在的差異及目前臨床對痰證的共識，結(jié)合文獻(xiàn)研究結(jié)果，本研究認(rèn)為體毛光亮度減退、倦怠懶動、形體肥胖等可作為判定MS痰證大鼠的證候表現(xiàn)。

表3 代謝綜合征痰證動物模型證候表現(xiàn)

客觀指標(biāo)上，橫向比較7項(xiàng)研究模型評價指標(biāo)的異同，指標(biāo)多包含F(xiàn)BG、TG、體質(zhì)量、HDL、FINS、HOMA-IR等。參考2017 年版《中國2型糖尿病防治指南》，體質(zhì)量、FBG、TG、HDL、血壓等異?？勺鳛樵u價MS的診斷指標(biāo)。《中醫(yī)痰證診斷標(biāo)準(zhǔn)》指出身體質(zhì)量指數(shù)(body mass index,BMI)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、TG、LDL等可作為判斷痰證的主要理化指標(biāo)[17]；臨床比較MS各證型與TC、TG、HDL、LDL的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)TG、LDL、HDL與痰濁阻遏證和痰瘀互結(jié)證密切相關(guān)[18]，而FINS在MS痰濕氣虛、氣陰兩虛、痰瘀腎虛等3個證型中無明顯差異[19]，作為評價MS痰證的指標(biāo)可能不存在特異性。本課題組前期研究證實(shí)，MS患者中醫(yī)證素痰僅與脾和HOMA-IR顯著相關(guān)[20]，HOMA-IR與中醫(yī)證素痰在MS發(fā)病機(jī)制中存在著基本共性，因此本研究認(rèn)為其可作為MS痰證的核心診斷指標(biāo)。中心性肥胖較均勻性肥胖者更易患MS[21]。近年來，MS診斷指南更將腰圍作為主要診斷指標(biāo)之一，前期研究亦發(fā)現(xiàn)MS患者腰圍變化僅與中醫(yī)證素痰相關(guān)[22]，因此本研究認(rèn)為腰圍可作為MS痰證的核心診斷指標(biāo)。

藥物反證方面，3項(xiàng)研究涉及以方測證，藥物包括黃連溫膽湯、二陳湯合桃紅四物湯等，均以二陳湯為底方加減。二陳湯是化痰理氣基礎(chǔ)方，“以方測證”是在建立穩(wěn)定的動物模型后，采用相對應(yīng)的基本方藥進(jìn)行治療，若能改善或消除模型的相應(yīng)癥狀和指標(biāo)則，佐證證的模型成立，反之則不成立[23]。由于方證之間并非一對一的關(guān)系，一方可治療多證，且臨床常存在同證多方等問題，以方測證方法的合理性存在爭議。另有學(xué)者認(rèn)為，由于目前中醫(yī)證的微觀指標(biāo)尚未明確，以方測證存在將無關(guān)聯(lián)指標(biāo)納入治療效應(yīng)來判斷證的可能[23]。因此，采用藥物反證作為判斷模型的依據(jù)，應(yīng)注重證模型研究中排他性的設(shè)計，設(shè)置其他方藥組用于鑒別診斷，此外應(yīng)進(jìn)一步研究證的微觀實(shí)質(zhì)，為藥物反證提供支持，增加以方驗(yàn)證的可信度。

縱觀上述諸項(xiàng)研究目前仍存在以下問題：一是實(shí)驗(yàn)動物物種單一。目前常用的內(nèi)分泌代謝研究動物主要有Wistar大鼠、SD大鼠、C57BL/6J小鼠、家兔、Gottingen小豬等[24]，不同品系動物存在差異性遺傳基因，因其生理病理特點(diǎn)表現(xiàn)各異，選擇動物造模應(yīng)考慮研究目的選擇合適的物種；二是造模方法不統(tǒng)一。研究雖皆以食物誘發(fā)為主要造模方法，但造模的飼料配方、實(shí)驗(yàn)動物、造模時長等皆不同，可重復(fù)性差，彼此間不能充分比較研究，不利于中醫(yī)基礎(chǔ)科研的推廣和發(fā)展；三是中醫(yī)證候特征研究不足。MS痰證病位涉及到多個臟腑，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣。本研究涉及的研究中，動物表現(xiàn)較為單一，與臨床實(shí)際證候之間存在一定差異，有待進(jìn)一步研究；四是缺乏統(tǒng)一的病證評價標(biāo)準(zhǔn)。納入的研究在評價方法上存在人為分開證候和疾病、兩者各一套標(biāo)準(zhǔn)等問題，一定程度上忽視了病證的內(nèi)在聯(lián)系，今后應(yīng)在遵循“以病統(tǒng)證”框架下，構(gòu)建病證一體化模型，以疾病為線、以證候?yàn)辄c(diǎn)開展研究[25]。