田水鳳

(湘西自治州龍山縣紅巖溪鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)中心，湖南 龍山 416800）

雞異刺線蟲病是一類常見的禽類寄生蟲病[1]，其病原體主要為雞異刺線蟲。雞異刺線蟲為一類小型線蟲，它通常寄生于雞的盲腸，引起雞出現(xiàn)生長發(fā)育不良、消瘦、貧血、下痢及食欲廢絕等一系列臨床癥狀[2]。盲腸腫大、腸壁增厚及產(chǎn)生結(jié)節(jié)病變是雞異刺線蟲病特有的病理特征[3]。各種日齡的雞均能感染雞異刺線蟲，但該蟲主要危害于雛雞，可導(dǎo)致雛雞生長遲緩、極度消瘦和便血[4]。成年雞輕度感染該病不出現(xiàn)任何臨床癥狀，只當(dāng)嚴(yán)重感染時(shí)才導(dǎo)致產(chǎn)蛋量下降或停止[5]。此外，蚯蚓是異刺線蟲的保蟲宿主，而異刺線蟲又是組織滴蟲的保蟲宿主。異刺線蟲攜帶組織滴蟲，雞因吞食含有異刺線蟲的蚯蚓常暴發(fā)組織滴蟲病，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重阻礙全球養(yǎng)禽業(yè)的發(fā)展。

1 發(fā)病情況

2019年7月24日，湖南湘西州龍山縣某養(yǎng)殖戶于林間放養(yǎng)800多只3月齡大的廣西三黃雞。最近，某些雞出現(xiàn)下痢、羽毛松亂而無光澤，食欲廢絕或下降，體重減輕等一系列癥狀。部分病雞排出帶血稀糞，幾天后因衰弱而亡（已死亡156只，病死率達(dá)19.5%）。養(yǎng)殖戶曾以為是某細(xì)菌引起的傳染病，一度使用阿莫西林、環(huán)丙沙星、四環(huán)素等藥物對(duì)病雞進(jìn)行治療，但治療效果不理想。遂邀請(qǐng)筆者前往該養(yǎng)殖場進(jìn)行診治。

2 臨床癥狀

大部分病雞在感染該病的前期，除間歇性出現(xiàn)腹瀉（糞便呈米黃色或褐色）之外無任何明顯的臨床癥狀。因治療不當(dāng)或不及時(shí)逐漸表現(xiàn)出生長發(fā)育不良、下痢、體重減輕、羽毛松亂而無光澤，食欲廢絕或下降等一系列臨床癥狀。后期，病雞排帶血稀糞，體格嚴(yán)重消瘦，胸骨突出，幾天后因衰弱而亡。

3 剖解及病理變化

挑選1只病雞進(jìn)行解剖，可見病雞羽毛雜亂且毫無光澤、體格消瘦、胸骨突出、泄殖腔附近的羽毛粘有糞便。剖開腹腔，可見雞盲腸腫大。剖解腸道及盲腸，可見盲腸黏膜增厚、潮紅出血，部分黏膜出現(xiàn)結(jié)節(jié)病變。整個(gè)盲腸內(nèi)存在大量白色線形、尾端尖細(xì)，長度約為7mm～15mm的線蟲。

4 診斷

4.1 初步診斷

根據(jù)臨床癥狀、養(yǎng)殖戶用藥情況、剖檢所見的蟲體形狀及筆者臨床實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，初步診斷該病為雞異刺線蟲病與組織滴蟲病混合感染。

4.2 分子生物學(xué)診斷

取病雞盲腸道內(nèi)容物及新鮮糞便于自封袋中，收集蟲體于裝滿70%乙醇溶液的小瓶，兩者置于冰盒內(nèi)，拿回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分子生物學(xué)檢測。用糞便DNA提取試劑盒（購買于北京天根生化科技有限公司）提取盲腸內(nèi)容物及糞便中的總DNA；用血液、組織DNA提取試劑盒（購買于北京天根生化科技有限公司）提取蟲體的總DNA。將提取好的DNA樣品，置于-20℃保存，備用。

根據(jù)已公布異刺線蟲cox1基因序列及組織滴蟲18SrDNA基因序列設(shè)計(jì)兩對(duì)引物，即cox1-F(CG TCTTGAGTTGGCTAAGC)，cox1-R(CAATAACCAT CGTAGCAGCC)；18SrDNA-F(ACTGTGAACAAATC AGGACG)，18SrDNA-R(CTGGTTCTGGTAAGTTTC CC)，分別對(duì)已提取的蟲體DNA和盲腸內(nèi)容物及糞便DNA進(jìn)行擴(kuò)增。反應(yīng)體系均為50μL，反應(yīng)條件均為：95℃（預(yù)熱），5min；95℃（變性），30s；53℃（退火），30s；72℃（延伸），1min；共35個(gè)循環(huán)；最后72℃（延伸），5min。反應(yīng)完成后，吸取5μLPCR產(chǎn)物在1.5%瓊脂糖上進(jìn)行凝膠電泳檢測，結(jié)果顯示cox1基因擴(kuò)增結(jié)果為陽性，而內(nèi)容物的18S rDNA基因擴(kuò)增結(jié)果為陰性。將陽性PCR產(chǎn)物發(fā)送至上海生工生物有限公司進(jìn)行測序。

將獲得序列進(jìn)行相互比對(duì)，結(jié)果顯示兩者cox-1序列的相似度為100%。將序列在GenBank上進(jìn)行BLAST搜索分析，發(fā)現(xiàn)所獲得的序列與雞異刺線蟲cox-1序列的相似度為99%，從而確定該病病原體為雞異刺線蟲，確診該病為雞異刺線蟲病。

5 治療

根據(jù)確診結(jié)果，我們采用左旋咪唑+甲硝唑兩種藥物對(duì)病雞及健康雞群進(jìn)行驅(qū)蟲。使用左旋咪唑?qū)﹄u群進(jìn)行驅(qū)蟲，按20～25mg/kg比例拌料飼喂，1次/天，連喂5天[6]；甲硝唑按250mg/kg比例拌料飼喂，連喂1周[7]。此外，在水中添加B族維生素和維生素E，以增強(qiáng)雞的抵抗力[8]。

6 預(yù)防措施

6.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖戶在進(jìn)行飼料配比的過程中，應(yīng)當(dāng)注重雞飼料的營養(yǎng)均衡搭配，增加維生素和礦物質(zhì)的含量，以期提高雞的身體素質(zhì)，增強(qiáng)其抵抗力[9]。

6.2 改善養(yǎng)殖場內(nèi)的衛(wèi)生條件

及時(shí)清掃雞舍，對(duì)雞舍進(jìn)行定期消毒，確保雞舍地面干燥，雞糞要置于一偏僻處堆積發(fā)酵[10]。

6.3 定期驅(qū)蟲

作好計(jì)劃性驅(qū)蟲，對(duì)成年雞每季度進(jìn)行1～2次定期驅(qū)蟲，對(duì)雛雞每月進(jìn)行驅(qū)蟲一次。一旦發(fā)現(xiàn)病雞立即隔離、治療，驅(qū)蟲的糞便堆積發(fā)酵。

6.4 殺滅中間宿主

雞異刺線蟲的保蟲宿主為蚯蚓。根據(jù)蚯蚓的生活屬性，在雞場內(nèi)使用殺蟲劑對(duì)蚯蚓進(jìn)行滅殺。

7 小結(jié)

雞異刺線蟲病是由幾種異刺線蟲寄生于雞的盲腸所引起的一種常見的寄生蟲病。該病主要引起雞出現(xiàn)生長發(fā)育不良、消瘦、貧血、下痢及食欲廢絕等一系列臨床癥狀。其主要病理特征為盲腸腫大、腸壁增厚及產(chǎn)生結(jié)節(jié)病變。幼齡雞發(fā)病較成年雞嚴(yán)重，雞大量感染則會(huì)導(dǎo)致死亡。然而，成年雞輕微感染該病一般不出現(xiàn)任何明顯的臨床癥狀，容易被養(yǎng)殖戶忽視，最易成為傳染源。該病常與組織滴蟲病混合暴發(fā)，病雞所表現(xiàn)出來的癥狀也相似于雞球病和大腸桿菌病，極容易誤診。然而，傳統(tǒng)的檢測技術(shù)操作過于繁瑣，造成診治極為不便，但利用分子技術(shù)檢測不僅克服傳統(tǒng)檢測技術(shù)的缺陷，同時(shí)也大大提高了檢測結(jié)果的精確性，為養(yǎng)殖戶對(duì)該病的診斷和治療提供了便捷有效的途徑。此外，本文所采用的診斷和防治方法，也為以后的臨床診療提供技術(shù)參考。 □