高星 葉甲舟 盧露 李永強(qiáng) 林燕 梁嶸

作者單位：530021 南寧 廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院1化療一科，2肝膽胰外科

Netrins是一類自分泌蛋白和膜結(jié)合蛋白，通過與不同類型的受體結(jié)合，在軸突的導(dǎo)向和神經(jīng)細(xì)胞的遷移、分化和凋亡等發(fā)揮吸引和排斥雙重功能。當(dāng)Netrins僅與結(jié)直腸癌缺失基因（deleted in colorectal carcinomal gene，DCC gene）受體結(jié)合時(shí)可介導(dǎo)軸突吸引作用，即傳遞吸引性信號(hào)，誘導(dǎo)軸突朝向Netrins高濃度的區(qū)域生長(zhǎng)；而當(dāng)Netrins單獨(dú)與UNC5同源物（UNC5 homolog，UNC5H）受體結(jié)合時(shí)可介導(dǎo)短時(shí)程的排斥作用，誘導(dǎo)軸突朝向遠(yuǎn)離Netrins方向生長(zhǎng)。當(dāng)DCC受體與UNC5H受體共同存在時(shí)主要介導(dǎo)長(zhǎng)時(shí)程排斥作用［1-2］。研究還發(fā)現(xiàn)，在大鼠大腦中動(dòng)脈閉塞模型（middle cerebral artery occlusion，MCAO）中過表達(dá)Netrins1（NTN1）后可刺激JNK1/c-Jun信號(hào)通路的激活，誘導(dǎo)腦缺血后突觸的形成與軸突再生，進(jìn)而促進(jìn)神經(jīng)功能的恢復(fù)，提示Netrins對(duì)神經(jīng)損傷具有一定的修復(fù)作用［3］。

除了在上述神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的作用，Netrins還參與調(diào)節(jié)炎癥以及心血管、腎臟和腫瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展。隨著研究的不斷深入，以Netrins為切入點(diǎn)探索腫瘤的分子機(jī)制研究取得了一定進(jìn)展，并受到廣大科研學(xué)者的青睞。目前研究證實(shí)，Netrins在人類多種惡性腫瘤中異常表達(dá)，且其表達(dá)水平與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移以及惡性程度密切相關(guān)。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一種多基因參與的復(fù)雜過程，涉及細(xì)胞的惡化、凋亡、遷移以及微環(huán)境的變化等。因此，研究Netrins在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用具有重要意義。本文就Netrins在調(diào)節(jié)各種腫瘤細(xì)胞生物活性等方面的作用及機(jī)制作一綜述。

1 Netrins蛋白家族分類及結(jié)構(gòu)特性

Netrins家族由ISHII等［4］于1992年首次發(fā)現(xiàn)，可在神經(jīng)前體細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、腎小管細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，屬于分泌蛋白或膜結(jié)合蛋白，在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中可作為趨化性因子，介導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞和軸突的遷移。在哺乳動(dòng)物中，Netrins家族目前已發(fā)現(xiàn)6個(gè)成員，包括4種分泌蛋白NTN1，Netrin-3（NTN3），Netrin-4（NTN4）和 Netrin-5（NTN5）以及2種糖基磷脂酰肌醇（glycosylphosphatidylinositol，GPI）錨定的膜蛋白 Netrin-G1（NTNG1）和 Netrin-G2（NTNG2）［5］。Netrin-2（NTN2）雖然是NTN3的直系同源物，但是僅存在于蠕蟲和魚類中［6］。NTN1和NTN3的N末端與層黏連蛋白γ鏈具有同源性，NTN4的N末端則與層黏連蛋白β鏈具有同源性。此外，NTN1、NTN3、NTN4的其他結(jié)構(gòu)均由3個(gè)EGF樣重復(fù)序列（V-1、V-2和V-3）的層黏連蛋白V結(jié)構(gòu)域以及1個(gè)帶正電的C末端域（NTR/C345C）組成。而NTN5缺少層黏連蛋白的同源性N末端，僅由層黏連蛋白V結(jié)構(gòu)域和C345C結(jié)構(gòu)域組成［6］。NTNG1/NTNG2的N末端與層黏連蛋白γ和β鏈均具有同源性，但與層黏連蛋白γ鏈同源性最強(qiáng)，其余部分由上述層黏連蛋白V結(jié)構(gòu)域和一個(gè)C末端組成。與分泌型Netrins蛋白不同，Netrin-G蛋白的C端序列（稱為域C′）是疏水的，并以GPI脂質(zhì)接頭結(jié)尾，可將蛋白質(zhì)連接到細(xì)胞質(zhì)膜的細(xì)胞外表面［7］。鑒于Netrins結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性與多樣性，Netrins的受體可通過與其不同部位相結(jié)合，從而具有多重生物學(xué)功能，如細(xì)胞遷移、血管生成、免疫炎癥和腫瘤發(fā)生等。

2 Netrins受體

2.1 分泌型Netrins蛋白受體

迄今為止，文獻(xiàn)報(bào)道哺乳動(dòng)物中與分泌型Netrins蛋白結(jié)合的主要受體包括DCC、neogenin（NEO1）、UNC5H、唐氏綜合癥細(xì)胞黏附分子（down syndrome cell adhesion molecule，DSCAM）、腺苷A2b受體以及整合素（integrin）［8］。其中，UNC5H是Netrins受體中最大的家族，由UNC5A、UNC5B、UNC5C和 UNC5D組成。

2.2 膜結(jié)合型Netrins蛋白受體

Netrin-G膜結(jié)合蛋白不與上述的分泌型Netrins蛋白受體相互作用，而是與Netrin-G受體（NGL，又稱為L(zhǎng)RRC4）結(jié)合來調(diào)節(jié)神經(jīng)元之間的相互作用。其中，NGL1選擇性與NTNG1結(jié)合，NGL2也僅與NTNG2相互作用［9］。NGL3均不與NTNG1和NTNG2結(jié)合，而是通過和跨膜受體酪氨酸磷酸酶相互作用來促進(jìn)谷氨酸能的突觸形成［10］。目前，所有已知的Netrins受體中除了A2b和整合素，均為單次Ⅰ型跨膜蛋白，屬于免疫球蛋白超家族（immunoglobulin superfamily，Ig superfamily）成員，由胞外區(qū)、跨膜區(qū)與胞內(nèi)區(qū)3個(gè)功能區(qū)組成。

Netrins受體可以執(zhí)行2個(gè)獨(dú)立的信號(hào)通路。當(dāng)Netrins配體存在時(shí)，Netrins可通過與其受體結(jié)合激活經(jīng)典的信號(hào)通路，提高細(xì)胞的存活率，有助于細(xì)胞存活、遷移和分化等。在Netrins配體缺乏的情況下，受體并不處于失活狀態(tài)，而是啟動(dòng)下游的促凋亡信號(hào)通路，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［11］。

在正常細(xì)胞中，Netrins配體含量較少而受體含量較多。而在腫瘤細(xì)胞中，Netrins配體表達(dá)水平上調(diào)，受體表達(dá)減少，配體與受體結(jié)合調(diào)控癌細(xì)胞存活以及分化，并抑制受體啟動(dòng)凋亡程序。其中，細(xì)胞凋亡紊亂是腫瘤形成的重要機(jī)制，如果細(xì)胞凋亡受到抑制，細(xì)胞死亡減少，細(xì)胞數(shù)目就會(huì)不斷增加，表現(xiàn)為細(xì)胞呈增殖積聚，而這是腫瘤發(fā)生的重要基礎(chǔ)。因此，研究Netrins及其受體相互作用在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制及其調(diào)控機(jī)制對(duì)腫瘤治療具有重要意義。

3 Netrins及其受體在腫瘤中的作用

現(xiàn)有研究表明，Netrins作為潛在的癌基因或抑癌基因，調(diào)控多種腫瘤發(fā)生、發(fā)展，并具有診斷和評(píng)估預(yù)后價(jià)值，其作用機(jī)制是錯(cuò)綜復(fù)雜的生物學(xué)過程，受到眾多腫瘤因子及信號(hào)通路調(diào)節(jié)（圖1）。

圖1 Netrins及其受體在腫瘤中的信號(hào)通路圖Fig.1 Signaling pathway of Netrins and its receptors in tumors

3.1 Netrins與神經(jīng)母細(xì)胞瘤

神經(jīng)母細(xì)胞瘤（neuroblastoma，NB）患者可分為5個(gè)階段，即1、2、3、4和4S階段［12］，DELLOYE-BOURGEOIS等［13］在兒童第4階段的NB組織中發(fā)現(xiàn)NTN1表達(dá)上調(diào)，且NTN1的表達(dá)水平與第4階段患者的總生存期呈負(fù)相關(guān)。此外，該研究還發(fā)現(xiàn)沉默NB細(xì)胞中NTN1的表達(dá)，不僅抑制了腫瘤轉(zhuǎn)移，還誘導(dǎo)了繼發(fā)部位轉(zhuǎn)移病灶的消退。近年來，JIANG等［12］在NB細(xì)胞和組織中同樣檢測(cè)到NTN3的表達(dá)，并且NTN3在NB患者第4階段中表達(dá)最高，與患者的總生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)；進(jìn)一步提取ZHANG等［14］已公布的498例NB患者的數(shù)據(jù)進(jìn)行驗(yàn)證，同樣證實(shí)了NTN3高表達(dá)是NB預(yù)后不良的標(biāo)志。因此認(rèn)為，NTN1和NTN3對(duì)NB細(xì)胞存活和腫瘤的發(fā)生具有重要作用。

研究還發(fā)現(xiàn)，Netrins參與NB發(fā)生的這一過程中受到腫瘤明星分子及信號(hào)通路的調(diào)節(jié)。DELLOYEBOURGEOIS等［13］在NB細(xì)胞中敲低NTN1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)UNC5H/DAPK信號(hào)通路被激活，細(xì)胞凋亡的數(shù)目增加，同時(shí)抑制了裸鼠體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。MYCN被認(rèn)為是影響患者生存的基因之一，與癌癥侵襲性相關(guān)。隨后，JIANG等［12］進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)在MYCN擴(kuò)增的NB患者中，NTN3表達(dá)升高，NB患者預(yù)后較差；而沉默MYCN后，NTN3表達(dá)則顯著降低。在無MYCN擴(kuò)增的患者中，NTN3則不具備預(yù)后預(yù)測(cè)能力。此外，NTN3啟動(dòng)子基因座中還存在MYCN的結(jié)合位點(diǎn)，提示NTN3是MYCN的靶基因。因此，深入研究并揭示Netrins及其受體在NB中的分子生物學(xué)機(jī)制，可能為NB的靶向治療提供新的方向。

3.2 Netrins與膠質(zhì)母細(xì)胞瘤

膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最常見、最具侵略性的腦惡性腫瘤［15］。有研究報(bào)道，在GBM患者的腫瘤組織中NTN1呈高表達(dá)，且其表達(dá)水平與Ki-67、腫瘤分級(jí)、腫瘤惡性程度呈正相關(guān)，提示NTN1在GBM診斷及預(yù)后評(píng)估中具有一定的應(yīng)用前景［16］。HU等［17］對(duì)TCGA數(shù)據(jù)庫中的425例GBM患者數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)NTN4在GBM患者的腫瘤組織中呈低表達(dá)，且NTN4低表達(dá)預(yù)示患者預(yù)后較差。

替莫唑胺（temozolomide，TMZ）是目前治療GBM的一線化療藥物，通過觸發(fā)DNA損傷誘導(dǎo)GBM細(xì)胞凋亡和衰老，從而發(fā)揮作用［18］。研究發(fā)現(xiàn)，NTN4可與整聯(lián)蛋白 β4（integrin β4，ITGB4）共同作用，誘導(dǎo)PI3K-AKT-mTOR信號(hào)通路的激活，刺激AKT和mTOR磷酸化水平增加，進(jìn)而保護(hù)細(xì)胞免于TMZ誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老，提高GBM細(xì)胞對(duì)TMZ的耐藥性［17，19］。LI等［20］進(jìn)一步的GBM細(xì)胞測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NTN4與EGFR表達(dá)呈正相關(guān)，與使用TMZ治療的GBM患者預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。而用EGF刺激GBM細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，NTN4的表達(dá)上調(diào)，ERK、AKT、Src和mTOR磷酸化水平升高，導(dǎo)致GBM細(xì)胞中的DNA損傷減少［20］。因此，EGF/EGFR調(diào)節(jié)了NTN4的表達(dá)，靶向EGFR/NTN4軸的組合方法在GBM治療中可能是有效的干預(yù)策略。此外，NTN1還可通過激活NTN1/NEO1/FAK/Intergrin β1和NTN1/UNC5B/NEO1/Gsk3α/Gsk3β兩條信號(hào)通路調(diào)節(jié)c-Myc表達(dá)，從而參與對(duì)GBM新生血管形成過程的控制，進(jìn)而促進(jìn)GBM細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移［21］?？傮w來說，Netrins在GBM細(xì)胞中的復(fù)雜功能由不同受體和多種信號(hào)通路介導(dǎo)，因此闡明其關(guān)鍵分子機(jī)制，可能為GBM的靶向治療提供有效靶點(diǎn)。

3.3 Netrins與乳腺癌

乳腺癌（breast cancer，BC）是威脅女性健康的主要惡性腫瘤之一［22］。WISCHHUSEN等［23］使用USMI對(duì)NTN1差異表達(dá)的裸鼠模型進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)NTN1高表達(dá)裸鼠的USMI信號(hào)更強(qiáng)，而NTN1低表達(dá)裸鼠的USMI信號(hào)減弱。因此，NTN1為BC的診斷和基因治療提供了新思路，可能成為BC患者分層診斷的輔助診斷方法。此外，LARRIEU-LAHARGUE等［24］通過裸鼠模型發(fā)現(xiàn)過表達(dá)NTN4促進(jìn)了乳腺癌腫瘤細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子AKT、ERK和S6的磷酸化，誘導(dǎo)了肺部腫瘤轉(zhuǎn)移灶明顯增多及腫瘤血管生成，進(jìn)而加速了小鼠的死亡，提示NTN4在BC中扮演癌基因的角色。隨后，又有研究發(fā)現(xiàn)過表達(dá)NTN4可誘導(dǎo)EMT相關(guān)蛋白N-cadherin和vimentin表達(dá)下調(diào)，進(jìn)而減弱BC細(xì)胞的遷移和侵襲能力［25］，說明NTN4在BC中亦是抑癌因子。由此可見，在同種腫瘤的發(fā)展過程中，NTN4可能發(fā)揮不同的調(diào)控作用。

在乳腺癌細(xì)胞中Netrins依賴性受體對(duì)腫瘤細(xì)胞的凋亡也具有調(diào)控作用。DCC的第5個(gè)纖連蛋白Ⅲ型結(jié)構(gòu)域DCC-5Fbn，可通過NTN1觸發(fā)受體多聚化的能力，進(jìn)而影響NTN1的活性和抗凋亡作用。FITA-MANT等［26］將 DCC-5Fbn 添加到人乳腺癌T47D和SKBR7細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞無顯著變化；而將DCC-5Fbn注射到BALB/C小鼠中，小鼠顯示出肺轉(zhuǎn)移的腫瘤顯著減少，提示NTN1可自分泌表達(dá)，當(dāng)抑制DCC/NTN1或UNC5H2/NTN1的多聚化能力后，賦予了轉(zhuǎn)移性BC腫瘤細(xì)胞存活的選擇性優(yōu)勢(shì)?？傮w來說，未結(jié)合Netrins配體的促凋亡活性受體已被認(rèn)為是一種消除腫瘤細(xì)胞的機(jī)制，失去其依賴性受體的促凋亡活性將有利于腫瘤細(xì)胞的存活，并且可以通過至少2種機(jī)制來實(shí)現(xiàn)：⑴降低受體水平；⑵抑制下游促凋亡信號(hào)通路的激活。以上研究表明，Netrins及其受體在BC的發(fā)生和發(fā)展過程中起協(xié)同作用。

3.4 Netrins與胃癌

胃癌（gastric cancer，GC）是消化系統(tǒng)最高發(fā)的癌癥之一，近年來學(xué)者們不斷探索標(biāo)志物對(duì)胃癌診斷及預(yù)后的價(jià)值。CHEN等［27］研究顯示，在GC組織中NTN1蛋白的表達(dá)與Ki-67、浸潤(rùn)深度、淋巴轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。進(jìn)一步敲低GC細(xì)胞中NTN1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)GC細(xì)胞的侵襲和遷移能力降低，裸鼠成瘤能力削弱［28］。此外，LV等［29］發(fā)現(xiàn)在GC患者的腫瘤組織和血清中NTN4也呈高表達(dá)，且與病理分期的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，與患者的OS呈負(fù)相關(guān)。因此，NTN1和NTN4可能是GC患者的腫瘤標(biāo)志物。

Netrins受體在GC不同時(shí)期的表達(dá)水平也具有明顯差異性。在早期胃癌中，DCC和UNC5C基因均發(fā)生異常的甲基化現(xiàn)象導(dǎo)致自身的基因轉(zhuǎn)錄水平升高，而在晚期胃癌中，這種現(xiàn)象又逐漸消失，并且發(fā)現(xiàn)NTN1水平會(huì)進(jìn)一步升高［30-31］。研究還發(fā)現(xiàn)，NTN1和NTN4可通過結(jié)合其受體NEO1，刺激Jak/Stat、PI3K/AKT或ERK/MAPK等信號(hào)通路的激活，進(jìn)而促進(jìn)體內(nèi)外GC細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移［29，32］。以上結(jié)果提示，NTN1和NTN4在GC發(fā)生和發(fā)展中作為一種新型腫瘤誘導(dǎo)劑發(fā)揮作用。此外，Netrins通過其受體NEO1調(diào)節(jié)GC細(xì)胞增殖和侵襲的關(guān)鍵機(jī)制還為GC的治療提供了新的切入點(diǎn)。

3.5 Netrins與胰腺癌

胰腺癌（pancreatic adenocarcinoma，PAAD）是消化系統(tǒng)常見的腫瘤，惡性程度極高。研究顯示在早期（Ⅰ/Ⅱ期）胰腺導(dǎo)管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC）患者的腫瘤組織中，NTN1低表達(dá)且與低分化PDAC患者的預(yù)后不良呈正相關(guān)［33］。在胰腺癌細(xì)胞系PANC-1和CFPAC-1中過表達(dá)NTN1后，Mdm2表達(dá)水平上調(diào)，p53蛋白泛素化增強(qiáng)，表達(dá)量下降，導(dǎo)致p21、p27表達(dá)升高，Cyclin D1表達(dá)下降，促進(jìn)了PAAD細(xì)胞的體外增殖［34］。提示NTN1可作為PAAD的腫瘤標(biāo)志物，并通過調(diào)節(jié)Mdm2和p53信號(hào)通路，促進(jìn)PAAD的發(fā)生、發(fā)展。

Netrins在泛癌的生信研究中，PAAD患者血液中NTN4的表達(dá)較高而NTNG2的表達(dá)較低，且NTN4高表達(dá)和NTNG2低表達(dá)的PAAD患者預(yù)后均較差［5］。隨后，F(xiàn)RANCESCONE等［35］通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)，NTNG1在PDAC組織中呈高表達(dá)，其表達(dá)水平與生存時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。敲低NTNG1的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)裸鼠體內(nèi)的成瘤能力減弱。此外，過表達(dá)NTNG1還可增強(qiáng)低營(yíng)養(yǎng)條件下PDAC細(xì)胞的存活能力，減少了自然殺傷細(xì)胞誘導(dǎo)的死亡；同時(shí)激活成纖維細(xì)胞中AKT/4E-BP1和p38/FRA1信號(hào)通路，從而產(chǎn)生免疫抑制作用，進(jìn)而促進(jìn)PDAC 的進(jìn)展［35］。以上研究提示，Netrins可作為PAAD新的治療靶標(biāo)，具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。

3.6 Netrins與結(jié)直腸癌

近年來,學(xué)者們不斷探索標(biāo)志物在結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）患者復(fù)發(fā)和預(yù)后中的價(jià)值。LI等［36］在CRC受試者的血清中發(fā)現(xiàn)，NTN1呈高表達(dá)且NTN1高表達(dá)的晚期腺瘤患者進(jìn)展為CRC的風(fēng)險(xiǎn)更高。此外，EVENO等［37］研究證實(shí)，NTN4過表達(dá)降低了結(jié)直腸肺轉(zhuǎn)移及其相關(guān)的淋巴結(jié)受累的風(fēng)險(xiǎn)，減少腹水的形成及術(shù)后的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移概率。該研究結(jié)果表明，NTN4可能是CRC及主要部位轉(zhuǎn)移瘤的治療靶標(biāo)，具有臨床應(yīng)用潛力。隨后，SHO等［38］通過生信分析發(fā)現(xiàn)，在CRC患者中NTNG1存在高甲基化突變的現(xiàn)象，且其EGF結(jié)構(gòu)域的EGF-3（V3）位點(diǎn)處的突變頻率最頻繁。與未突變組相比，NTNG1突變組的患者存在高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)且預(yù)后更差。因此，在CRC中檢測(cè)Netrins的表達(dá)水平有助于評(píng)估CRC患者的預(yù)后。

與GC類似，UNC5C的失活主要發(fā)生在結(jié)直腸癌形成的早期階段，而DCC缺失則主要發(fā)生在CRC晚期［39］。在DCC缺陷型CRC細(xì)胞中，NTN1激活了cAMP/PKA和Rho/ROK信號(hào)通路，細(xì)胞的侵襲能力增強(qiáng)；而在野生型（DCC過表達(dá)）CRC細(xì)胞中，NTN1與DCC相互作用，細(xì)胞凋亡數(shù)量增多，侵襲和遷移能力減弱［40］。其機(jī)制可能是DCC主要調(diào)控細(xì)胞周期和凋亡途徑相關(guān)基因的表達(dá)，而Netrins則對(duì)與細(xì)胞表面信號(hào)傳導(dǎo)和細(xì)胞黏附、運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)的基因表現(xiàn)出更大的選擇性影響。此外，NTN1與DCC和UNC5B直接結(jié)合，還可激活Hippo信號(hào)通路促進(jìn)轉(zhuǎn)錄共激活因子（yes-associated protein，YAP）去磷酸化，導(dǎo)致YAP泛素化和降解減少，細(xì)胞核中YAP蓄積增加，進(jìn)而促進(jìn)CRC細(xì)胞的增殖和遷移［41］。上述研究從不同的角度提示，Netrins及其受體相互作用，調(diào)控CRC細(xì)胞的增殖和凋亡。

3.7 Netrins與肺癌

非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）是肺癌中最主要的病理類型。DELLOYE-BOURGEOIS等［42］對(duì) 92例NSCLC（45例腺癌和47例鱗狀細(xì)胞癌）患者的臨床樣本進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，NTN1在這兩種肺癌中均呈高表達(dá)，且NTN1表達(dá)水平與NSCLC細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)，而與預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。此外，在小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）組織中還檢測(cè)到NTN3呈高表達(dá)；敲低NTN3的表達(dá)可減弱裸鼠的成瘤能力［12］。HAO等［5］基于數(shù)據(jù)挖掘和深層生物學(xué)信息分析發(fā)現(xiàn)，NTNG1在肺腺癌和肺鱗狀細(xì)胞癌中差異表達(dá)，肺腺癌中NTNG1的低表達(dá)和肺鱗狀細(xì)胞癌中NTNG1的高表達(dá)均與較差的生存率相關(guān)，表明NTNG1也參與了肺癌的發(fā)生發(fā)展過程。隨后，有研究［43-44］證實(shí)，NTN1過表達(dá)可誘導(dǎo)NSCLC細(xì)胞EMT的發(fā)生，細(xì)胞侵襲、遷移及血管生成擬態(tài)（VM）的能力增強(qiáng)；而敲低NTN1則達(dá)到相反的效果。此外，NTN1還可促進(jìn)PI3K/AKT和ERK信號(hào)通路的激活。用拮抗劑LY294002或U0126阻斷上述信號(hào)通路后，能逆轉(zhuǎn)NTN1對(duì)肺癌細(xì)胞上述惡性表型的促進(jìn)作用?？偟膩碚f，目前的研究結(jié)果突出了Netrins在缺氧條件下在NSCLC發(fā)展中的新作用，并為使用Netrins作為治療靶點(diǎn)提供了進(jìn)一步的證據(jù)，有望作為一種針對(duì)NSCLC治療有前途的新藥物。

3.8 Netrins與其他腫瘤

除了以上腫瘤外，還在膀胱癌、前列腺癌、黑色素瘤、肝癌和腎細(xì)胞癌的腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)NTN1呈高表達(dá)而UNC5B呈低表達(dá)［45-48］。在黑色素瘤細(xì)胞中敲低NTN1后誘導(dǎo)了UNC5B的表達(dá)增加，細(xì)胞的遷移和侵襲能力減弱［48］。在肝癌細(xì)胞中，NTN1與UNC5B結(jié)合可誘導(dǎo)YAP信號(hào)通路的激活，從而介導(dǎo)EMT的發(fā)生，進(jìn)而促進(jìn)肝癌細(xì)胞的侵襲和腫瘤血管的生成［47，49］。此外，在缺氧條件下敲低前列腺癌細(xì)胞中NTN1的表達(dá)后，抑制YAP的激活，細(xì)胞侵襲和遷移能力減弱，阻礙了EMT的發(fā)生［50］。但是，目前NTN4在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用仍然存在爭(zhēng)議。如也有研究發(fā)現(xiàn)，在宮頸癌組織中NTN4呈低表達(dá)，敲低NTN4表達(dá)后宮頸癌細(xì)胞的增殖和遷移能力增強(qiáng)［51-52］。然而，在成纖維肉瘤細(xì)胞中NTN4呈高表達(dá)，且體內(nèi)外研究結(jié)果表明NTN4有抑制成纖維肉瘤細(xì)胞增殖和促進(jìn)遷移、侵襲的作用，且此作用可能受NEO1的介導(dǎo)［53］。綜上所述，NTN4在調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞惡性生長(zhǎng)中的作用值得進(jìn)一步研究。

4 小結(jié)與展望

Netrins是目前研究的一種熱點(diǎn)蛋白，該蛋白能在神經(jīng)遷移導(dǎo)向中發(fā)揮重要作用。作為一種重要的腫瘤參與基因，Netrins在很多惡性腫瘤細(xì)胞中均呈高表達(dá)，有望作為腫瘤診斷、治療監(jiān)測(cè)及預(yù)后判斷標(biāo)志物。分子靶向治療是近年隨著基礎(chǔ)研究不斷進(jìn)展而發(fā)展起來的治療領(lǐng)域。Netrins在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中起關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用，尤其是抗凋亡和促血管生成作用，這使Netrins可能成為腫瘤治療的一個(gè)重要靶點(diǎn)。進(jìn)一步研究Netrins在腫瘤細(xì)胞中的調(diào)控機(jī)制，發(fā)現(xiàn)Netrins可與其受體結(jié)合并通過相關(guān)信號(hào)傳導(dǎo)通路調(diào)控腫瘤的增殖、遷移能力及腫瘤血管的形成，為研制抗腫瘤新藥提供了可能性。

綜上，Netrins可能是一種新的腫瘤標(biāo)志物，并可能成為腫瘤治療有前景的新靶點(diǎn)，但是由于Netrins調(diào)控機(jī)制和惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的復(fù)雜性，仍需要進(jìn)一步的基礎(chǔ)和臨床研究來闡明Netrins在惡性腫瘤中的作用和機(jī)制。相信隨著對(duì)Netrins的深入研究，未來將進(jìn)一步明確其作用機(jī)制，有望為腫瘤生物治療提供新的策略。