梁靖蓉，麥鳳怡，李陳廣，廖 翔，張治國(guó)

(1.深圳大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院，廣東 深圳 518060；2.華中科技大學(xué)協(xié)和深圳醫(yī)院疼痛科，廣東 深圳 518052；3.南方科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣東 深圳 518055)

吳茱萸俗稱(chēng)吳萸、米辣子，具有較高的藥用價(jià)值，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品。其味性辛熱，有小毒?！吨袊?guó)藥典》(2020年版)收載的吳茱萸來(lái)源蕓香科植物吳茱萸、石虎及蔬毛吳茱萸的干燥近成熟的果實(shí)，具有散寒止痛、降逆止嘔、寒疝腳氣、助陽(yáng)止瀉及外治口舌生瘡和濕疹等功效。

傳承千年的中醫(yī)藥文化，底蘊(yùn)豐富，集結(jié)了我國(guó)人民在長(zhǎng)期的生產(chǎn)勞動(dòng)、生活實(shí)踐與醫(yī)療實(shí)踐中的智慧。中藥往往是配伍用藥，藥對(duì)是中藥配伍的最小單位，遵循中藥配伍的“七情合和”理論；用藥中常常以相對(duì)固定的配伍形式進(jìn)行使用，起到主次分明又相輔相成的作用。吳茱萸辛熱，黃連苦寒；前者能溫脾暖胃，后者黃連清熱燥濕、瀉火解毒，苦寒易傷脾胃。兩者常常配伍使用，一方面中和吳茱萸的熱性，另一方面中和黃連的苦寒之性。黃連和吳茱萸這一經(jīng)典寒熱藥對(duì)，不同配伍，其功能主治各異，早在《丹溪心法·火六》中，以君藥黃連與佐藥吳茱萸6 ∶1的配伍比例組成左金丸(又稱(chēng)回命丸)，主治肝火犯胃和消化性潰瘍。隨著黃連和吳茱萸配伍比例的變化還創(chuàng)造出運(yùn)用于暑氣證、寒痢證和胃寒證的甘露散(2 ∶1)、茱萸丸(1 ∶1)和反左金丸(1 ∶6)等方劑。僅在配伍比例上略有變化，卻能產(chǎn)生完全不同的藥效作用，可見(jiàn)中藥配伍的神奇之處。

本草記載吳茱萸生品有小毒，且辛香走竄力量較強(qiáng)，因此，煎服多為炮制品。生吳茱萸溫?zé)峥嘣?，能祛寒燥濕，外用時(shí)可以經(jīng)甘草制和水洗能降低毒性。黃連制能降逆止嘔，醋制能疏肝鎮(zhèn)痛，生姜制能散寒止嘔，鹽制能引藥入腎，酒制能治心腹氣滯作痛；說(shuō)明古人對(duì)減輕毒性已經(jīng)有宏觀(guān)的認(rèn)識(shí)。另外，以吳茱萸入藥，還配制成了雪膽丸、華佗再造丸、戊己丸、四神丸、吳藿降壓滴丸和萸黃連飲片等常用中藥制劑。因此，進(jìn)行中藥的相互作用研究，對(duì)發(fā)揮中藥協(xié)同增效作用、提高疾病治療效率、逆轉(zhuǎn)藥物多藥耐藥和降低毒副作用等具有重要意義，為更有效臨床用藥提供依據(jù)。

1 吳茱萸堿概述

通過(guò)成分分析屬蕓香科植物的吳茱萸的化學(xué)成分主要有：生物堿類(lèi)、揮發(fā)油類(lèi)、檸檬苦素類(lèi)、萜類(lèi)、香豆素等。其中生物堿類(lèi)占主要部分，生物堿類(lèi)主要又分吳茱萸堿和吳茱萸次堿等。《中國(guó)藥典》記載兩種堿類(lèi)的總含量決定了吳茱萸藥材質(zhì)量的優(yōu)劣。

吳茱萸堿(evodiamine，EVO)是吳茱萸次堿(rutecarpine)的衍生物，也是一種色胺吲哚類(lèi)生物堿，其相對(duì)分子質(zhì)量為303.36，分子式為C19H17N3O，溶點(diǎn)278 ℃，其性狀為黃色片狀結(jié)晶。EVO結(jié)構(gòu)比較不穩(wěn)定，溫度超過(guò)60 ℃，pH<5或>9，即在過(guò)熱、酸、堿等情況下結(jié)構(gòu)立即發(fā)生變化。如Fig 1所示，對(duì)比EVO和吳茱萸次堿的結(jié)構(gòu)不難發(fā)現(xiàn)，兩者只有在14位置的N原子上一個(gè)甲基的差別。

Fig 1 Evodiamine and Rutecarpine chemical structural formula

其次，EVO屬生物藥劑學(xué)分類(lèi)系統(tǒng)(Biopharmaceutics Classification System，BCS)中的二類(lèi)藥物。并且是一種難溶性藥物，不溶于水、乙醚和丙酮，能溶于氯仿、醋酸，微溶于酒精。一般來(lái)說(shuō)，溶出速率是制約其生物利用度的關(guān)鍵因素，而EVO生物利用度低，使用時(shí)也面臨這個(gè)難題。

近年來(lái)，嘗試將EVO制備成EVO羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)分子包合物或者采用微乳液遞送等[1]，不但提高了水溶性和溶解度，還提升了它的生物利用度。另外，炮制后吳茱萸的辛散之力和毒性都大大減低，內(nèi)服需選用炮制的吳茱萸，藥典規(guī)定的最大用量為5 g。EVO具有抗炎、抗腫瘤、抗肥胖和抗心血管等多種藥理活性。隨著不斷延展到分子生物學(xué)、藥物化學(xué)和藥物代謝等領(lǐng)域內(nèi)進(jìn)行深入研究，EVO現(xiàn)代藥理作用的挖掘?qū)?huì)達(dá)到一個(gè)新的高度。

2 吳茱萸堿現(xiàn)代藥理學(xué)活性

2.1 抗炎活性近年來(lái)，吳茱萸堿的抗炎作用備受關(guān)注，在細(xì)胞和分子水平上，抑制眾多細(xì)胞相關(guān)的炎癥因子的分泌，主要有以下四個(gè)方面：①抑制巨噬細(xì)胞(macrophage，Mφ)炎癥因子的分泌：EVO通過(guò)抑制NF-κB及其介導(dǎo)的環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)的活性，進(jìn)一步抑制LPS誘導(dǎo)的RAW 264.7細(xì)胞前列腺素E2(PGE2)分泌，影響巨噬細(xì)胞的遷移[2]。②抑制單核細(xì)胞(monocyte，MO)炎癥因子的分泌：EVO可抑制淋巴毒素類(lèi)似物(LIGHT)誘導(dǎo)的人MO分泌炎癥因子及眾多的CCR1、CCR2等趨化因子受體的表達(dá)以及人MO遷移[3]。③抑制中性粒細(xì)胞(neutrophile granulocyte，NE)中活性氧(reactive oxygen species，ROS)的產(chǎn)生：EVO通過(guò)抑制小鼠中NE中還原型輔酶Ⅱ(NADPH)氧化酶的活性，進(jìn)而減少ROS和超氧陰離子的產(chǎn)生[4]。④抑制小膠質(zhì)細(xì)胞(microglial cells，MC)中促炎因子的產(chǎn)生：LPS處理小鼠BV2細(xì)胞后，結(jié)果顯示EVO可明顯抑制誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的合成，進(jìn)而明顯抑制MC中促炎因子的生成[5]。

EVO可以在多種炎癥模型中發(fā)揮抗炎作用。例如，在酵母多糖(zymosan，ZYM)誘導(dǎo)的小鼠急性腹膜炎中，EVO能顯著改善模型小鼠體內(nèi)的“炎癥風(fēng)暴”，減少血清和腹腔中炎癥因子(IL-6、TNF-α、IL-1β和角化細(xì)胞來(lái)源趨化因子等)的分泌、減輕腹腔液NE的浸潤(rùn)，并抑制NE中ROS的產(chǎn)生，此作用有可能是通過(guò)EVO抑制NF-κB的p65入核而起作用[6]。其次，發(fā)現(xiàn)EVO能減輕氣管滴注LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷大鼠和小鼠模型肺水腫癥狀，同樣可以抑制肺組織細(xì)胞中NF-κB p65和p50的入核，從而減輕NE的浸潤(rùn)、降低炎癥水平，發(fā)揮對(duì)急性肺損傷炎癥模型的保護(hù)作用[6]。此外，在灌胃干預(yù)之后，吳茱萸明顯改善動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)模型大鼠的血清膽固醇四項(xiàng)指標(biāo)，能顯著降低主動(dòng)脈弓和肝臟組織中炎癥性細(xì)胞的浸潤(rùn)，且當(dāng)EVO(25 mg/kg/day)灌胃時(shí)效果最為明顯[7]。同樣EVO灌胃后后可以明顯降低經(jīng)典的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型結(jié)腸組織中炎癥因子的水平。有趣的是，EVO還可以降低胞內(nèi)的LPS含量以及重新平衡大腸桿菌和乳酸菌的數(shù)量。還有報(bào)道表明EVO不僅能減輕葡聚糖硫酸鈉(Dextran sodium sulfate，DSS)誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，且能維持腸道的完整性及腸道菌群的穩(wěn)態(tài)，為臨床治療潰瘍性結(jié)腸炎提供了新的方向[8]。

2.2 抗腫瘤活性研究證實(shí)，EVO通過(guò)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、遏制腫瘤細(xì)胞周期和遷移而起到抗腫瘤作用。其中，誘導(dǎo)凋亡主要經(jīng)內(nèi)源性途徑、外源性途徑及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑實(shí)現(xiàn)，在這些途徑中常常涉及眾多重要的信號(hào)通路(NF-κB、mT0R/S6Kl、JNK等)[9]。目前有研究報(bào)道EVO對(duì)多種腫瘤細(xì)胞有積極的抗腫瘤作用，例如黑色素瘤A375、人胰腺癌細(xì)胞PANC-1、人宮頸癌細(xì)胞Hela、乳腺癌細(xì)胞MCF-7、胃癌細(xì)胞SGC-7901等。另外EVO除了自身的抗癌作用，在聯(lián)合紫杉醇或黃連素等也能發(fā)揮較好的協(xié)同增益功能，降低化療藥物的使用量，進(jìn)而減低對(duì)正常細(xì)胞的毒副作用，將為臨床提供更好的治療方案。

2.3 抗肥胖活性脂肪細(xì)胞的分化是研究肥胖癥和糖尿病的關(guān)鍵點(diǎn)。Wang等[10]觀(guān)察使用EVO處理脂肪細(xì)胞發(fā)現(xiàn)EVO可以抑制脂肪細(xì)胞分化的功能，其機(jī)制與EGFR-pKCa-ERK信號(hào)通路的激活密切相關(guān)；Kobayashi等[11]證實(shí)EVO發(fā)揮抗肥胖活性可能是通過(guò)增加棕色脂肪組織中β3腎上腺素的分泌來(lái)增強(qiáng)解偶聯(lián)蛋白1(UCP-1)的產(chǎn)熱作用；另有研究報(bào)道，黃連與吳茱萸(1 ∶1)的配伍，也能改善高脂血癥模型大鼠血清四項(xiàng)指標(biāo)的水平，同時(shí)激活JAK2/STAT3通路，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，這也可能是黃連與吳茱萸的配伍后治療高血脂癥大鼠的機(jī)制之一[12]；Shi等[13]在研究實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)灌胃給藥之后，EVO可以達(dá)到抑制肥胖的作用，機(jī)制可能是其抑制下丘腦弓狀核內(nèi)促食欲肽NPY的表達(dá)，這個(gè)機(jī)制值得進(jìn)一步深入研究。

2.4 阿爾茨海默病阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)，由于大腦內(nèi)β-淀粉樣蛋白(amyloid β protein，Aβ)的產(chǎn)生和降解機(jī)制失衡而對(duì)大腦神經(jīng)元造成極大性破壞，神經(jīng)元內(nèi)的神經(jīng)纖維、皮層動(dòng)脈和小動(dòng)脈發(fā)生改變，引起大腦神經(jīng)元數(shù)量減少，出現(xiàn)記憶學(xué)習(xí)功能障礙。通過(guò)微量注射器ICV(側(cè)腦室)注射Aβ蛋白，誘導(dǎo)AD小鼠模型，EVO灌胃21 d后，發(fā)現(xiàn)灌胃EVO組較AD組能明顯抑制小鼠海馬體細(xì)胞的凋亡，且這種抑制作用有可能通過(guò)降低p53的表達(dá)和其磷酸化的水平實(shí)現(xiàn)的。研究發(fā)現(xiàn)，雖然EVO對(duì)Aβ的沉積無(wú)明顯作用，但是它可以明顯降低AD模型小鼠腦中炎性細(xì)胞因子的表達(dá)以及增加其腦部組織對(duì)葡萄糖的攝取而明顯地改善AD的癥狀，說(shuō)明EVO通過(guò)抗炎作用發(fā)揮抗老年癡呆的作用[14]。另外，通過(guò)Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)EVO組能明顯減少平均潛伏期，能顯著改善AD小鼠的空間認(rèn)知和學(xué)習(xí)能力，減少了測(cè)試中的逃避潛伏時(shí)間，保護(hù)腦組織[15]。這些研究說(shuō)明EVO可能成為治療及預(yù)防AD的候選天然藥物。

2.5 抗菌活性吳茱萸提取物的體外抗菌實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)對(duì)常見(jiàn)的幽門(mén)螺旋桿、菌金黃色葡萄球菌等有明顯的抑制作用。然而，很多中藥的成分在體外表現(xiàn)較為顯著的抗菌抑菌作用，但是在進(jìn)入體內(nèi)后由于諸多因素的影響下效果卻不佳，甚至作用消失?？咕鷮?shí)驗(yàn)中，檢測(cè)中藥給藥后的含藥血清能準(zhǔn)確反映中藥的抗菌功效。Wu等[16]預(yù)先對(duì)家兔進(jìn)行灌胃，連續(xù)給藥3 d，3次/天，然后收集血清，發(fā)現(xiàn)收集的血清中EVO的含量最高；進(jìn)一步用含EVO的血清處理各種細(xì)菌(傷寒桿菌、福氏志賀菌等)，結(jié)果顯示都有較好的抑菌作用，但是對(duì)于EVO的抗菌抑菌機(jī)制仍需進(jìn)一步探索。

3 吳茱萸堿與蛋白之間的作用

EVO分子靶點(diǎn)的確定為實(shí)現(xiàn)對(duì)其藥理的深入研究提供了絕佳的時(shí)機(jī)。到目前為止，TRPV1和拓?fù)洚悩?gòu)酶作用靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)是EVO藥理學(xué)的研究的階段性成果。這兩個(gè)藥物作用靶點(diǎn)在炎癥和癌癥等發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有不可忽視的重要地位。眾多研究致力于闡明EVO與其靶點(diǎn)相互作用的復(fù)合物結(jié)構(gòu)，這些復(fù)合物結(jié)構(gòu)將是研究多靶點(diǎn)藥物的前提，注定是研究的焦點(diǎn)。

3.1 TRPV1眾多周知，瞬時(shí)感受器電位香草酸受體l(transient receptor potential vanilloid 1，TRPV1)作為一種非選擇性的配體門(mén)控的陽(yáng)離子通道蛋白激活后主要引起細(xì)胞外的Ca2+向細(xì)胞內(nèi)的流動(dòng)。正因?yàn)門(mén)RPV1在炎癥進(jìn)程中有著舉足輕重的作用，EVO通過(guò)激活TRPV1受體才能達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)的作用[17]。其機(jī)制是通過(guò)抑制IL-4誘導(dǎo)的M2型巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生的細(xì)胞因子TGF-β而抑制炎癥。同樣報(bào)道過(guò)吳茱萸和其提取物具有抗肥胖的作用，機(jī)制與辣椒素相似，通過(guò)不斷消耗熱量而降低脂肪的堆積。在結(jié)構(gòu)水平上，通過(guò)分子對(duì)接，計(jì)算機(jī)模擬分析發(fā)現(xiàn)EVO的環(huán)1與TRPV1活性位點(diǎn)Tyr511發(fā)生疏水作用，環(huán)5與Tyr555形成π-π鍵相互作用。因此，EVO可以作為骨架結(jié)構(gòu)研發(fā)作用于TRPV1新的藥物或者配體[17]。

3.2 DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶研究發(fā)現(xiàn)，EVO可以抑制大腸桿菌中被拓?fù)洚悩?gòu)酶I(topoisomerase I，TOPI)催化的超螺旋質(zhì)粒DNA的松弛達(dá)到抗菌的作用，可以與TOPI的Arg161和Asp551殘基相互作用[18]。另外，發(fā)現(xiàn)EVO對(duì)多藥耐藥的肺炎克雷伯菌(KlebsiellaPneumoniae)具有明顯的殺菌作用[18]。EVO可能作為抗耐藥菌的天然藥物值得深入研究。有報(bào)道發(fā)現(xiàn)由于EVO可以抑制TOPI，與DNA形成共價(jià)復(fù)合物，并且與依立替康(Irinotecan)相似，能誘導(dǎo)DNA的損傷，但TOPI抑制劑Irinotecan等會(huì)抑制在S期。而在研究人前列腺癌、小鼠結(jié)腸癌的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，EVO處理后將細(xì)胞周期阻滯在G2/M期，這與以往的TOPI抑制劑的作用有所差別，因此有研究進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)EVO可以影響人乳腺癌細(xì)胞的微管解聚與聚合之間的平衡，抑制人乳腺癌細(xì)胞的增值，其中分子機(jī)制的發(fā)現(xiàn)豐富了EVO的抗癌機(jī)制。另外，根據(jù)EVO在TOPI結(jié)合口袋中的結(jié)合模式，采用苯甲?；鶊F(tuán)替代EVO的吲哚氮原子，能夠表現(xiàn)出更好的抗腫瘤活性。

3.3 微管蛋白研究證實(shí)，過(guò)表達(dá)的去乙?；?histone deacetylases，HDACs)顯著增加患者發(fā)生腫瘤的風(fēng)險(xiǎn)[19]。因此，HDACs是一個(gè)潛在的腫瘤治療靶點(diǎn)。而EVO可抑制HDAC6的活性，激活MAPK信號(hào)通路，活化caspase-3，誘導(dǎo)人白血病細(xì)胞K562周期阻滯和凋亡[20]。同時(shí)，EVO可以明顯抑制Burkitt淋巴瘤細(xì)胞系Raji和T淋巴系白血病細(xì)胞株Jurkat的增殖，可能為臨床治療淋巴瘤和白血病帶來(lái)了新的希望[21]。

此外，EVO能夠通過(guò)抑制HDAC6的活性參與微管的乙?；{(diào)節(jié)過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)EVO濃度為4 μmol·L-1時(shí)可以促進(jìn)體外微管蛋白的聚合，發(fā)現(xiàn)了EVO具有紫杉醇樣活性[22]，同時(shí)應(yīng)用計(jì)算機(jī)析分析出EVO在β-tubulin蛋白內(nèi)紫杉醇結(jié)合位點(diǎn)有較大的對(duì)接活性，并推測(cè)出EVO與β-tubulin蛋白的Thr276形成氫鍵，與Leu371和Ala233形成范德華力相互作用而到達(dá)與微管蛋白相互穩(wěn)定結(jié)合的效應(yīng)。提示了β-tubulin可能是EVO的作用靶點(diǎn)，且可能與紫杉醇有競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的作用[23]。這些結(jié)果都表明，由于EVO參與微管的調(diào)節(jié)過(guò)程，可能作為新的微管抑制劑用于抗腫瘤治療的探索。

另外，Liao等[22]和Huang等[24]的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室都提到了EVO對(duì)微管蛋白的潛在活性，但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻恰恰相反。首先，兩者都進(jìn)行了通過(guò)invivo微管聚合實(shí)驗(yàn)，Liao發(fā)現(xiàn)在體內(nèi)EVO可以增加聚合型微管蛋白，然而Huang的實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻相反，因此，EVO對(duì)微管蛋白的潛在活性需要進(jìn)一步論證。除了β-tubulin外，EVO處理肝癌細(xì)胞HepG-2后，通過(guò)共聚焦發(fā)現(xiàn)微管蛋白α-tubulin分布形態(tài)紊亂，由長(zhǎng)條型變?yōu)椴灰?guī)則型或圓型；EVO濃度越高時(shí)，α-tubulin的排列方式改變就越顯著。通過(guò)向細(xì)胞的一側(cè)聚合，從原先的輻射狀變換成束狀分布，顏色呈亮綠色。表明EVO阻遏腫瘤細(xì)胞周期和增殖可能與改變細(xì)胞微管蛋白的聚合態(tài)密切相關(guān)。細(xì)胞骨架微管通過(guò)調(diào)控NLRP3炎癥小體成分(ASC和NLRP3)的空間重排和轉(zhuǎn)運(yùn)，在調(diào)節(jié)NLRP3炎癥小體活化過(guò)程中起著關(guān)鍵作用[25]。而Li等[23]研究發(fā)現(xiàn)EVO能夠明顯增強(qiáng)巨噬細(xì)胞中α-tubulin(K40)的乙?；剑艺T導(dǎo)線(xiàn)粒體的運(yùn)輸，最后乙?；⒐苁o靠微管組織中心(microtubule organizing centers，MTOCs)，說(shuō)明EVO通過(guò)誘導(dǎo)α-tubulin乙?；欣诰€(xiàn)粒體上的ASC朝向MTOCs的運(yùn)輸，小鼠體內(nèi)發(fā)生NLRP3炎癥小體活化而發(fā)生細(xì)胞焦亡。而通過(guò)α-tubulin乙?；囊种苿┌邹继J醇和NAD+或者siRNA敲低αTAT1(α-tubulin乙酰化關(guān)鍵酶)的表達(dá)，能夠明顯逆轉(zhuǎn)EVO促進(jìn)ATP或nigericin誘導(dǎo)的NLRP3炎癥小體活化和細(xì)胞焦亡。因此，這些研究結(jié)果提示對(duì)微管蛋白的乙酰化修飾也是EVO的一個(gè)新的及重要的藥理學(xué)活性。

3.4 mTOR蛋白哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOR)通路參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、遷移，在卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、結(jié)腸癌等腫瘤中高度活化。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明，EVO可明顯增加細(xì)胞內(nèi)自噬體及ROS的產(chǎn)生，上調(diào)細(xì)胞內(nèi)LC3、同時(shí)抑制p62等蛋白的表達(dá)，同時(shí)能上調(diào)AMPK/mTOR信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白的表達(dá)，激活自噬，抑制結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞增殖[26]。研究發(fā)現(xiàn)EVO可以作用mTOR信號(hào)通路，抑制mTOR的磷酸化，促進(jìn)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡[27]。

3.5 毒性及安全性用藥藥典記載吳茱萸有小毒，EVO也具有潛在的毒性作用。例如，肝毒性、腎毒性、心臟毒性等。在研究EVO藥理學(xué)活性和蛋白互作靶點(diǎn)時(shí)，也應(yīng)更加重視對(duì)吳茱萸毒性的研究。例如，Cai等[28]研究發(fā)現(xiàn)EVO具有肝毒性可能與誘導(dǎo)線(xiàn)粒體腫脹、空泡化、MPT孔開(kāi)放和線(xiàn)粒體電位顯著降低，導(dǎo)致ATP耗竭和CytC釋放，最終觸發(fā)細(xì)胞死亡信號(hào)有關(guān)。Wu等[29]研究顯示EVO-7和EVO-8，但不是EVO-1或EVO-6，可以誘導(dǎo)人腎細(xì)胞癌A498細(xì)胞中Bcl-2蛋白的聚合酶(PARP)切割和磷酸化，促進(jìn)A498的凋亡?？梢?jiàn)，EVO對(duì)腫瘤細(xì)胞具有毒性作用，也可以用于腫瘤的干預(yù)治療。EVO對(duì)心血管疾病的治療，但是也可能促進(jìn)氧化應(yīng)激介導(dǎo)心血管的損壞，在運(yùn)用中注意監(jiān)測(cè)其用量和劑型的使用。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上，大量研究證實(shí)了EVO的抑瘤活性，可見(jiàn)抗腫瘤作用將是EVO發(fā)揮的主要藥理作用之一，其抗腫瘤特性比較廣泛，值得基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)進(jìn)一步挖掘，它可能作為一種天然抗癌新藥為患者的抗腫瘤治療帶來(lái)新的希望。最近研究發(fā)現(xiàn)使用誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的化療藥物處理后，能激活caspase-3進(jìn)而切割GSDME的267-270位點(diǎn)產(chǎn)生GSDME-NT片段，并在膜上形成孔洞，誘導(dǎo)細(xì)胞二次壞死[30]。因此，探索EVO是否能影響GSDME的相關(guān)機(jī)制，將有待發(fā)現(xiàn)EVO又一新的抗癌機(jī)制。

EVO的毒性和用藥安全也是在關(guān)注其藥理學(xué)活性的同時(shí)更加關(guān)注的。一方面在臨床合理用藥中，減少不良反應(yīng)，減少對(duì)患者的健康的危害；另一方面也要通過(guò)對(duì)其毒理機(jī)制的深入認(rèn)識(shí)，擴(kuò)展EVO在臨床上應(yīng)用范圍，特別是EVO衍生物的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用。

中醫(yī)常將吳茱萸用于治療喉舌口瘡、癰疽發(fā)背和腳氣等感染相關(guān)炎癥性疾病，但其藥理機(jī)制未明。對(duì)于這些慢性遷延性感染(如瘡癰、腳氣等)或其他慢性疾病(如肥胖等)而言，已活化的巨噬細(xì)胞會(huì)不斷釋放炎癥因子，導(dǎo)致反復(fù)的慢性炎癥性癥狀的發(fā)生，促使其快速焦亡可能是最好的策略，然而至今也沒(méi)有找到明確的、可逆轉(zhuǎn)已活化巨噬細(xì)胞的辦法。因此，吳茱萸中的有效成分EVO可以促進(jìn)NLRP3炎癥小體活化，將可用于各種現(xiàn)代意義上的感染相關(guān)炎癥性疾病(如消化性潰瘍、痢疾等)的臨床治療，而在未來(lái)的研究中可能將中醫(yī)術(shù)語(yǔ)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)術(shù)語(yǔ)一一對(duì)應(yīng)。