枸杞是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴中藥材，其果實(shí)為枸杞子，屬于茄科枸杞屬。枸杞子作為藥食同源的可食用品種，具有很高的綜合價(jià)值

?！吨袊?guó)藥典》中記載，枸杞子功能主治為滋補(bǔ)肝腎、益精明目

。近年來(lái)，隨著國(guó)內(nèi)外大量科學(xué)的研究，枸杞子的多種功效也被進(jìn)一步挖掘，例如，服用枸杞子多糖的糖尿病患者，紅細(xì)胞異形率與溶血脆性均基本恢復(fù)正常，同時(shí)還能有效保護(hù)四氧嘧啶損傷的胰島細(xì)胞，并且能抑制由四氧嘧啶造成的MDA生成量上升

；枸杞子能增強(qiáng)機(jī)體呼吸系統(tǒng)的免疫功能，從而提高呼吸系統(tǒng)的免疫能力

；枸杞提取物通過(guò)誘導(dǎo)SKN-1介導(dǎo)的抗氧化系統(tǒng)來(lái)抑制過(guò)量活性氧的產(chǎn)生，從而抑制Aβ的產(chǎn)生并抑制線(xiàn)粒體損傷，提示其具有神經(jīng)保護(hù)作用，可用于阿爾茨海默病的預(yù)防和治療

。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，枸杞子提取液還能增強(qiáng)小鼠皮膚內(nèi)SOD活性，增加皮膚中膠原蛋白量，并減少脂質(zhì)過(guò)氧化物丙二醛的含量

。枸杞子提取物還可以通過(guò)激活PKA-CREB信號(hào)通路，增加IIa型氧化肌纖維和有氧呼吸的比例來(lái)提高小鼠的平均跑步距離，增強(qiáng)小鼠肌肉耐力

。在臨床上，枸杞子的用法非常多，可單味煮服，也可以制作成藥酒應(yīng)用，或者與其他藥物配伍同服。枸杞子還可以做成丸子、藥膏、藥散服用，而且枸杞子具有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，保健價(jià)值受到人們的高度關(guān)注，其作為膳食補(bǔ)充劑可以通過(guò)調(diào)節(jié)腸道微生物組的組成變化預(yù)防炎癥性腸病

。

根據(jù)《社會(huì)救助暫行辦法》，有些應(yīng)該納入扶貧兜底的對(duì)象不符合現(xiàn)行農(nóng)村低保評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)與中央《打贏脫貧攻堅(jiān)戰(zhàn)的決定》保障兜底要求有效銜接，扶貧與低保“兩線(xiàn)合一”有待明確，另外在脫貧時(shí)間上省市縣區(qū)不一致，有些市區(qū)縣甚至提出提前兩三年建成小康社會(huì)，這意味著脫貧攻堅(jiān)任務(wù)也要提前，兜底工作如果嚴(yán)格按照中央脫貧時(shí)間節(jié)點(diǎn)實(shí)現(xiàn)“兩線(xiàn)合一”，極易引發(fā)新的社會(huì)矛盾。

以寧夏枸杞來(lái)說(shuō)，平均每100 g枸杞中含有粗蛋白4.5 g、粗脂肪2.3 g、碳水化合物9.1 g、類(lèi)胡蘿卜素0.096 g等，同時(shí)還含有多種氨基酸，微生物，鈣、鉀等微量元素

。枸杞酸也是唯一一種從天然資源提取的穩(wěn)定維生素C前體

。2004年，日本學(xué)者Toyoda-Ono等從寧夏枸杞和北方枸杞的干果中分離純化得到枸杞酸，即2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸。枸杞酸是枸杞特有的天然成分，是從天然資源中發(fā)現(xiàn)的一種新型、穩(wěn)定、純天然L-抗壞血酸(維生素C)前體物質(zhì)。研究表明，枸杞中的枸杞酸含量可以和新鮮檸檬中的維生素C含量相媲美，且抗氧化能力相比抗壞血酸更持久，能夠長(zhǎng)時(shí)間存在于體內(nèi)發(fā)揮抗氧化活性，具有更高效的清除自由基能力，有效抑制黑色素的生成

。枸杞酸在抗衰老、抗腫瘤和改善結(jié)腸炎等方面也發(fā)揮了藥理作用

，其顯著增強(qiáng)了秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)中SOD和CAT等抗氧化酶的活性，同時(shí)顯著降低了脂褐質(zhì)水平并減輕了蛋白質(zhì)毒性

。目前，枸杞中枸杞酸測(cè)定方法研究較少，對(duì)枸杞酸在枸杞子中含量分布也研究不多。因此，本研究通過(guò)分析枸杞子中枸杞酸的檢測(cè)方法，并檢測(cè)不同批次中枸杞酸的含量，為枸杞子的質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

枸杞，均為市售品；枸杞酸對(duì)照品(含量按99.7%計(jì))，上海詩(shī)丹德標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司；乙腈(色譜純)，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技有限公司；乙酸銨(分析純)，國(guó)藥試劑；水為本實(shí)驗(yàn)室自制超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent1290高效液相色譜(帶Chemstation色譜工作站)，美國(guó)安捷倫科技有限公司；島津十萬(wàn)分之一電子天平，日本島津公司；ELGA純水機(jī)，英國(guó)埃爾格公司；超聲機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司；Fresco-21常溫離心機(jī)，美國(guó)賽默飛世爾科技公司。

1.3 方法

1.3.3 供試藥材溶液的制備 取粉碎后的枸杞樣品粉末約1 g，精密稱(chēng)定，加水25 mL，稱(chēng)定重量，超聲處理25 min，冷卻至室溫，加水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密移取續(xù)濾液1 mL，至10 mL量瓶中，加水定容至刻度，搖勻，過(guò)0.45 μm微孔濾膜，作為供試品溶液。

（1）DPPH·自由基清除能力測(cè)定參考等SLin的方法[28]。谷光甘肽作為標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程 為 ：y=0.301x+0.203（0.301～1.81 mg/mL，R 2=0.996）；y為DPPH自由基清除率，x為谷光甘肽濃度。

取枸杞酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，每隔0、1、2、4、8、12、24 h進(jìn)樣1次，每次1 μL，測(cè)得枸杞酸峰面積RSD為0.55%，表明枸杞酸對(duì)照品溶液在放置24 h內(nèi)穩(wěn)定。

取枸杞酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，每次1 μL，測(cè)得枸杞酸峰面積RSD為0.18%，表明儀器的精密度好。

1.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取枸杞酸對(duì)照品14.01 mg置于25 mL容量瓶中，加流動(dòng)相液稀釋至刻度，搖勻，得枸杞酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液濃度為0.560 4 mg/mL。

1.3.1 色譜條件 色譜柱：ACQUITY UPLC Glycan BEH Amide Column 130A(2.1×150，1.7μm)。流動(dòng)相：乙腈(A)，0.05 mol/L乙酸銨溶液(B)；0～10 min 78%A～65%A；10～12 min 65%A～55%A；12～15 min 55%A。體積流量為0.30 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為260 nm，柱溫25 ℃。

2 結(jié)果與分析

2.1 線(xiàn)性范圍的考察

精密量取枸杞酸對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用流動(dòng)相分別稀釋成濃度為5.6、28.0、56.0、140.1、280.2 μg/mL的5個(gè)工作液，按照上述色譜條件分別進(jìn)樣1 μL，測(cè)定。以峰面積值(

)為縱坐標(biāo)、對(duì)照品進(jìn)樣量(

)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，枸杞酸的回歸方程為：

=6.832 0

-0.283 7(

=1.000 0)，枸杞酸在5.6～280.2 μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.2 精密度試驗(yàn)

氣缸處于收縮狀態(tài)時(shí)（見(jiàn)圖1a），扭簧作用下4桿機(jī)構(gòu)處于內(nèi)收狀態(tài)，活動(dòng)窗扇重疊與固定窗扇內(nèi)側(cè)，有效降低空氣阻力對(duì)活動(dòng)扇頁(yè)及聯(lián)動(dòng)機(jī)構(gòu)的沖擊。此時(shí)車(chē)窗凈開(kāi)度不為220mm。

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

管理者樂(lè)觀情緒、研發(fā)支出與企業(yè)成長(zhǎng)性..................................................................................................................江新峰 張敦力 汪曉飛（22）

2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取同一批次枸杞樣品粉末6份，按上述供試品制備方法制得供試品溶液，按色譜條件檢測(cè)，進(jìn)樣量為1 μL，計(jì)算枸杞酸的含量，枸杞酸含量平均值為97.5 mg/g，RSD為1.32%。

2.5 加樣回收率試驗(yàn)

取已知含量的枸杞樣品粉末9份，精密稱(chēng)定，分別準(zhǔn)確加入枸杞酸80%、100%、120%各3份，按上述供試品制備方法制得供試品溶液，按色譜條件檢測(cè)，進(jìn)樣量為2 μL，測(cè)得枸杞酸加樣回收率為94.5%，RSD為1.63%。

2.6 不同產(chǎn)地的枸杞酸的含量測(cè)定

取市售不同產(chǎn)地的枸杞樣品，按上述供試品制備方法制得供試品溶液，按色譜條件檢測(cè)，進(jìn)樣量為1 μL，樣品進(jìn)樣2次，測(cè)定枸杞酸的含量，典型供試品與標(biāo)準(zhǔn)品圖譜見(jiàn)附圖，不同產(chǎn)地分析結(jié)果見(jiàn)附表。

3 結(jié)論與討論

采用超高效液相色譜法對(duì)4個(gè)主要產(chǎn)地、8種不同批次枸杞中的枸杞酸含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，枸杞中枸杞酸的含量變化差異大，這種差異在不同產(chǎn)地之間均存在，可能與種類(lèi)及種植過(guò)程有較大的關(guān)系。整體而言，寧夏產(chǎn)的枸杞酸含量較其他產(chǎn)地高，但是批次間差異也較大。本研究通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證，證明該方法有較好的線(xiàn)性、精密度和回收率，與前期研究方法相比

，受枸杞中其他類(lèi)物質(zhì)干擾較少，分離度較好，具有很好的準(zhǔn)確性，可作為枸杞中枸杞酸的質(zhì)量控制方法。

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