林啟存，蔡麗娟，王宇希，許寶青，戴瑜來(lái)

(杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，浙江 杭州 310024)

裸藻屬又稱眼蟲(chóng)藻屬，含有葉綠素、能進(jìn)行光合作用，同時(shí)又具鞭毛、能運(yùn)動(dòng)，且無(wú)細(xì)胞壁，多為單細(xì)胞浮游植物。它們喜生活在靜水且有機(jī)質(zhì)豐富的小水體環(huán)境中，在養(yǎng)殖池塘中較易形成綠色或鐵銹色水華。

裸藻水華呈膜狀，不僅黏性強(qiáng)、色彩強(qiáng)烈、感觀度差，大量繁殖時(shí)還能覆蓋水體表層，阻擋光線照入，影響中下層浮游植物的光合作用，且藻類大量死亡時(shí)容易敗壞水質(zhì)，分泌的物質(zhì)還可能對(duì)魚(yú)產(chǎn)生毒害作用。因此，裸藻水華對(duì)池塘養(yǎng)殖生產(chǎn)有潛在的危害。

氯化鈉是在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用的常見(jiàn)產(chǎn)品，目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于氯化鈉對(duì)魚(yú)的毒性作用已有較多研究，但對(duì)裸藻屬植物的毒性研究報(bào)道很少。本文嘗試用不同濃度的氯化鈉對(duì)裸藻進(jìn)行殺滅試驗(yàn)，期望為裸藻水華的科學(xué)防治提供一定依據(jù)。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)裸藻

試驗(yàn)用裸藻取自大宗淡水魚(yú)養(yǎng)殖池塘，池水綠色，透明度45厘米，pH7.30。直接用5升的礦泉水桶，取表層帶有綠色膜狀裸藻水華的池水4升，蓋上瓶蓋，上下?lián)u晃數(shù)次，盡量讓膜狀裸藻散開(kāi)，裸藻密度不少于100萬(wàn)個(gè)/升。

2.氯化鈉

氯化鈉為分析純，純度＞99%，由生工生物工程(上海)股份有限公司生產(chǎn)。

3.試驗(yàn)場(chǎng)地和器材

試驗(yàn)在杭州市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院水產(chǎn)研究所實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，試驗(yàn)瓶容量380毫升；用普通光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)。

4.試驗(yàn)方法

參照李學(xué)軍等(2003)控制羅非魚(yú)池塘中裸藻的海水試驗(yàn)鹽度，在試驗(yàn)瓶中加入含5個(gè)氯化鈉濃度梯度的裸藻試驗(yàn)液200毫升進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，觀察24小時(shí)死亡率，在裸藻有明顯殺死和全部致死的最低質(zhì)量濃度之間，確定正式試驗(yàn)濃度為10～20克/升。按等對(duì)數(shù)間距設(shè)計(jì)氯化鈉濃度試驗(yàn)梯度組，即10.00、11.50、13.23、15.21、17.49克/升。同時(shí)設(shè)立1個(gè)空白對(duì)照組。每組設(shè)置2個(gè)平行。試驗(yàn)開(kāi)始后，分別作4、24、48、72小時(shí)的存活記錄。試驗(yàn)期間，水溫為(18±1)℃。

5.裸藻計(jì)數(shù)和存活標(biāo)準(zhǔn)的確定

在顯微鏡(10×10)下隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)裸藻，觀察裸藻是否存在游動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)或鞭毛擺動(dòng)等活動(dòng)狀態(tài)，若3秒內(nèi)未出現(xiàn)明顯活動(dòng)，則判裸藻死亡。統(tǒng)計(jì)裸藻的存活數(shù)，計(jì)算裸藻的存活率、死亡率和處理組的殺滅率。計(jì)算公式為：

存活率(%)＝存活數(shù)/100×100；

死亡率(%)＝(1－存活率)×100；

殺滅率(%)＝(處理組死亡率－對(duì)照組死亡率)/對(duì)照組存活率×100。

二、結(jié)果與分析

1.不同濃度氯化鈉處理對(duì)裸藻死亡率的影響

不同濃度氯化鈉處理試驗(yàn)的結(jié)果見(jiàn)圖1。從圖1可看出，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)期間試驗(yàn)組存活率低、死亡率高，4小時(shí)內(nèi)對(duì)照組裸藻死亡率在50%以下，而試驗(yàn)組裸藻死亡率都在80%以上，17.49克/升濃度組死亡率達(dá)100%；48小時(shí)內(nèi)15.21克/升濃度組死亡率達(dá)100%；72小時(shí)內(nèi)，其他試驗(yàn)組死亡率隨氯化鈉濃度的升高而升高，隨試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)而升高。

圖1 氯化鈉處理對(duì)裸藻存活率(左)和死亡率(右)的影響

2.不同濃度氯化鈉處理對(duì)裸藻的殺滅率

不同濃度氯化鈉處理對(duì)裸藻的殺滅率見(jiàn)表1。從表1可看出，試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，各氯化鈉處理組對(duì)受試裸藻均有較強(qiáng)的殺滅效果，4小時(shí)內(nèi)裸藻殺滅率均達(dá)70%以上，17.49克/升濃度組殺滅率達(dá)100%；48小時(shí)內(nèi)15.21克/升濃度組殺滅率達(dá)100%。

表1 不同濃度氯化鈉處理對(duì)裸藻的殺滅率

三、討論

裸藻屬植物是一類容易變形且以單細(xì)胞為主的浮游植物，李學(xué)軍等(2003)在做裸藻的控制試驗(yàn)時(shí)，將試驗(yàn)裸藻分紡錘形、陀螺形和圓形3種形態(tài)，其中紡錘形為一般正?；顒?dòng)狀態(tài)，陀螺形為受外界刺激后不活動(dòng)的應(yīng)激狀態(tài)，圓形為不可恢復(fù)死亡狀態(tài)。由于裸藻種類不同，受外界刺激所表現(xiàn)的活動(dòng)狀態(tài)也可能有所不同，綠色裸藻可在降溫、干燥等簡(jiǎn)單刺激下誘導(dǎo)成圓形可轉(zhuǎn)動(dòng)的包囊(陳建琴等，2003)。本文試驗(yàn)所用的裸藻為綠色水華裸藻，在顯微光照條件下，可能受樣品水分蒸發(fā)等刺激影響，觀測(cè)中無(wú)論是試驗(yàn)組還是對(duì)照組，大部分原處于紡錘形狀態(tài)的裸藻會(huì)較迅速地變?yōu)樵剞D(zhuǎn)動(dòng)的圓形包囊，如僅根據(jù)形態(tài)判別存活會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此本文以活動(dòng)與否為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行裸藻存活判別。

在淡水養(yǎng)殖中，氯化鈉常以浸浴、潑灑等外用方式進(jìn)行養(yǎng)殖對(duì)象疾病預(yù)防或環(huán)境消毒，處理效果與處理濃度、處理時(shí)間有關(guān)。本文試驗(yàn)顯示，10.00克/升以上的氯化鈉濃度對(duì)試驗(yàn)裸藻有明顯的殺滅作用，4小時(shí)內(nèi)10.00克/升氯化鈉處理組對(duì)裸藻殺滅率可達(dá)70%以上、17.49克/升濃度處理組殺滅率可達(dá)100%，48小時(shí)內(nèi)15.21克/升濃度組對(duì)試驗(yàn)裸藻殺滅率也達(dá)100%。淡水魚(yú)對(duì)氯化鈉雖有一定的耐受性，如鰱魚(yú)魚(yú)種能耐受鹽度3.84達(dá)24小時(shí)而未發(fā)生死亡，黃顙魚(yú)稚魚(yú)能耐受6.00克/升的氯化鈉溶液24小時(shí)而未發(fā)生死亡，高體鳑鲏幼魚(yú)能耐受7.50克/升的氯化鈉溶液24小時(shí)而未發(fā)生死亡，團(tuán)頭魴魚(yú)種能耐受鹽度10.00達(dá)96小時(shí)而未發(fā)生死亡，青魚(yú)魚(yú)種能耐受鹽度11.40達(dá)96小時(shí)而未發(fā)生死亡(楊廣等，2006；陳萬(wàn)光等，2010；臧維玲等，1989)。但多數(shù)淡水魚(yú)的鹽度安全濃度不高，低于有效殺滅目標(biāo)裸藻濃度10.00克/升，且不同種類間耐受性存在一定差異，以鰱魚(yú)耐鹽能力相對(duì)較弱，其魚(yú)種的鹽度安全濃度為1.50克/升(臧維玲等，1989)。因此，常規(guī)魚(yú)養(yǎng)殖中不宜直接采取全池潑灑氯化鈉方法防控裸藻水華，可在池塘下風(fēng)口裸藻水華聚集區(qū)域使用氯化鈉化水后局部潑灑防控，其用量以不超過(guò)池中最敏感魚(yú)(如鰱魚(yú))的安全濃度計(jì)算的全塘潑灑劑量為宜。

2022年4月中旬，杭州市農(nóng)科院水產(chǎn)所基地養(yǎng)殖池出現(xiàn)綠色藻類水華。該池為長(zhǎng)方形，長(zhǎng)20米、寬14米，水深1.5米左右，主要養(yǎng)殖朱紋錦魚(yú)，套養(yǎng)少量鰱鳙魚(yú)。綠色藻類呈膜狀，漂浮于水面，無(wú)風(fēng)時(shí)基本覆蓋全池，有風(fēng)時(shí)常會(huì)被吹到池子一角或一側(cè)。挑取該膜狀藻類，放到載玻片上并置顯微鏡下檢查，發(fā)現(xiàn)樣品中裸藻密密麻麻，有圓形的，也有梭形的，且大多能變形，因此該水華被確定為裸藻水華。在裸藻水華被吹到較小的角落時(shí)，計(jì)算該三角形水域體積，并根據(jù)以上氯化鈉試驗(yàn)結(jié)果，按每立方米水體10千克氯化鈉的用量進(jìn)行局部潑灑處理。經(jīng)1周的觀察，池中魚(yú)活動(dòng)無(wú)明顯異常，水面僅有少量膜狀物，裸藻水華已基本得到控制。