文強 韓昀軒 羅麟霜 萬麗瓊 索玉凱 李干鵬

（云南民族大學(xué)民族醫(yī)藥學(xué)院/民族藥資源化學(xué)國家民委-教育部重點實驗室 云南昆明 650500）

松子是紅松、華山松和白皮松等松科植物的球果，我國各地幾乎都有出產(chǎn)，但以東北和西南地區(qū)為主，是重要的農(nóng)林資源。松仁含有多種生物活性物質(zhì)，營養(yǎng)價值較高，其脂質(zhì)含量可以達到60%以上[1]。松仁油中不飽和脂肪酸（油酸、亞油酸和亞麻酸等）、植物甾醇等成分已被證實具有增強免疫、調(diào)節(jié)血脂、抑制腫瘤等功效[2-3]。因此，隨著社會經(jīng)濟的快速發(fā)展，松仁油以其獨特的營養(yǎng)和健康特性愈發(fā)受到廣大消費者的青睞。松子殼作為松仁生產(chǎn)的副產(chǎn)物，其重量可以占到整個球果的70%[4]。研究表明，松子殼中含有豐富的脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、多糖和黃酮類等活性物質(zhì)，如果能夠?qū)ζ溆行Ю茫粌H可以變廢為寶，還可以起到保護環(huán)境的作用[5-6]。本研究對松子殼和果仁中的脂肪酸進行提取，并分析比較兩者的組成成分和理化指標(biāo)，為松子殼油的深加工利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 松子松子收集于東北長白山地區(qū)，經(jīng)鑒定是紅松（Pinus koraiensisSieb.et Zucc.）的果實。

1.1.2 試劑沒食子酸（99%）、福林酚、37 種脂肪酸甲酯混標(biāo)、溴化鉀(99.99%)：Sigma-Aldrich公司;無水硫酸鈉、碳酸鈉、石油醚、正己烷、異丙醇、氫氧化鉀、氯化鈉、無水乙醇、碘化鉀等（分析純）：國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

1.1.3 儀器與設(shè)備分析天平：BSA124S，賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司；循環(huán)水式多用真空泵：SHB-ⅢG，鄭州長城科工貿(mào)易有限公司；恒溫水浴鍋：HH-4 型，江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司；磁力攪拌電熱套：CLT-1A，上海力辰邦西儀器科技有限公司；紫外可見分光光度計：752N，上海精科實業(yè)有限公司；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：THERMOFISHER ISQ，賽默飛世爾科技（中國）有限公司。

1.2 方法

1.2.1 油脂的提取將干燥后的松子果仁（60℃條件下干燥56 h）粉碎，并用50 目的篩子進行篩選；稱取100 g 碎果仁裝入索氏提取器，以石油醚（沸程60～90℃）為提取溶劑，70℃回流提取24 h，最后旋轉(zhuǎn)蒸干溶劑，獲得果仁油脂。采用相同的方法提取松子殼油脂，將提取得到的油脂置于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 理化指標(biāo)的測定以松子果殼和果仁油脂為原料，分別測定酸值[7]（參考《GB/T 5009.229—2016》）、過氧化值[8]（參考《GB/T 5009.227—2016》），皂化值[9]（參考《GB/T 5534—2008》）和碘值[10]（參考《GB/T 5532—2008》），每個樣品每項指標(biāo)平行測定3 次。

1.2.3 脂肪酸組成分析樣品甲酯化：吸取0.2 mL 油脂于100 mL 離心管中，加入20 mL 正己烷，待樣品充分溶解后加入20 mL 硫酸-甲醇溶液（2%），混勻并于60℃水浴鍋中反應(yīng)30 min；隨后加入20 mL 蒸餾水搖勻，靜置分層后吸取上清液，稀釋10 倍并過濾至進樣瓶中待測。

GC-MS 條件：采用THERMOF ISHER ISQ 型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對脂質(zhì)成分進行分析，TR-IMS 型毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；氣相色譜條件：進樣口溫度240 ℃，進樣體積為1.0 μL，分流比1:40，載氣為高純度氦氣。

MS 條件：電離方式EI，電子能量70 eV，傳輸線溫度250℃，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，質(zhì)譜掃描范圍為35～450 amu。升溫程序：初始溫度150℃，以10 ℃/min的速率升至180℃，保持2 min 后，以2 ℃/min升至188℃，保持2 min；隨后以0.2 ℃/min升至190℃，保持2 min，再以5℃/min 升至220℃，保持2 min；最后以10 ℃/min升至260℃。采用wiley7n.1 譜庫進行定性，面積歸一化法進行定量。

1.2.4 紅外光譜分析

將干燥的溴化鉀粉末在紅外燈照射下研磨，用液壓擠壓器將其壓成透明平整的小圓塊；在小圓塊中心滴加一滴油脂，采用Nicolet 5700 紅外光譜儀，在4 cm-1的分辨率下重復(fù)掃描128 次，光譜掃描為4 000～500 cm-1；用Omnic 8.2 軟件采集紅外光譜數(shù)據(jù)，并用Origin 2021 軟件繪制紅外光譜曲線。

2 結(jié)果與分析

2.1 松子果殼與果仁油脂的理化性質(zhì)分析

如表1 所示，松子果仁油的過氧化值和酸價均在國家食用油標(biāo)準(zhǔn)要求的范圍內(nèi)，且具有較高的碘值，說明果仁油是一種優(yōu)質(zhì)的植物油。與果仁油相比，果殼油的過氧化值較高。在皂化值和碘值方面，果殼油有較好表現(xiàn)，說明其親水性較強，雜質(zhì)含量高于果仁油。然而，果殼油和果仁油的酸值差異十分明顯，果殼油的酸值（117.62 mg/g）極高，是果仁油酸值的100 多倍，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了食用油標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 2716—2005》的要求（≤4.0 mg/g），說明其含有過多的雜質(zhì)或酸性物質(zhì)，可能在儲存的過程中受到光線、高溫、氧氣等作用，致使游離脂肪增加，油脂酸值隨之增加，導(dǎo)致酸敗。

表1 東北松子果殼和果仁中油脂的主要理化性質(zhì)對比

2.2 油脂的脂肪酸組成

使用GC-MS 對松子果殼和果仁中油脂成分進行分析，結(jié)果如圖1、2、表2 所示。果殼和果仁油脂中分別檢測到17 和15 種脂肪酸，且都以不飽和脂肪酸為主，含量分別達到86.4%和89.7%。果殼油脂中含有月桂酸和二十一碳酸，其余脂肪酸的種類與果仁油脂相同；兩者都是亞油酸含量最多，分別達到了51.5%和55.2%，其次為油酸，含量分別為32.2%和31.8%。近年來，研究表明，不飽和脂肪酸具有抑制各種炎癥介質(zhì)的致炎作用，可促進乳腺癌、前列腺癌和結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡，預(yù)防心腦血管疾病等[11-12]。亞油酸能在人體合成重要的必需脂肪酸——花生四烯酸，進而能直接合成重要的前列腺素，具有一定的藥用價值[13]，同時具有降低人體內(nèi)的膽固醇、血壓及抗脂肪肝、預(yù)防動脈粥樣硬化等生理作用[14-15]。通過以上分析結(jié)果可以看出，松子果殼和果仁油中均含有豐富的亞油酸和油酸，這為開發(fā)利用松子果殼油脂提供了一定的依據(jù)。

表2 松子果殼和果仁油脂肪酸組成

2.3 紅外光譜分析

利用紅外光譜對松子果殼和果仁油脂結(jié)構(gòu)進行分析，如圖3 所示。3 000～2 700 cm-1處吸收帶代表的是—CH3、—CH2、—CH 特征吸收峰，1 700～1 650 cm-1處吸收帶代表的是長鏈脂肪酸中酮類和醛類的特征吸收蜂，1 450～1 250 cm-1處吸收帶代表的是醇類、酯類的特征吸收峰,950～750 cm-1處吸收帶是苯環(huán)雙取代吸收峰。同時，從圖3 中可以發(fā)現(xiàn)，紅外光譜圖在2 900、1 650、720 cm-1處具有較強吸收，這與REDA 等[16]報道（不飽和脂肪酸中雙鍵的功能基團（C—H 和C═O）在2 900、1 600、750 cm-1處具有較強的特征吸收）基本吻合，說明松子果殼和果仁油均含有大量的不飽和雙鍵，這也驗證了脂肪酸組成分析結(jié)果。

3 結(jié)語

我國的松子資源豐富，且消費者對松子果仁的需求量日益增加，這直接導(dǎo)致大量的松子殼作為廢棄物被丟棄。為了實現(xiàn)對松子殼的有效利用，本實驗對松子殼和果仁中油脂成分進行了對比分析。結(jié)果表明，松子殼油的過氧化值較高；在皂化值和碘值方面，果殼油有較好表現(xiàn)；但果殼油酸值遠(yuǎn)超食用油標(biāo)準(zhǔn)，說明其含有過多的雜質(zhì)或酸性物質(zhì)，可能在儲存的過程中受到光線、高溫、氧氣等作用，致使游離脂肪增加，油脂酸值隨之增加，導(dǎo)致酸敗。油脂脂肪酸組成分析表明，松子殼和果仁中油脂的組成大體相同，均以不飽和脂肪酸為主，含量分別達到 86.4%和89.7%，且亞油酸、油酸等人體必需脂肪酸含量豐富，營養(yǎng)價值高。因此，如果能夠解決酸值等主要理化指標(biāo)過高的問題，松子殼油也是一種優(yōu)質(zhì)的植物油脂。