孟永海，毛宏宇，秦蓁，付敬菊，薛迎鳳，王艷艷，翟春梅

（黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040）

刺玫果（Rosa davuricaPall.）廣泛生長在大、小興安嶺原始森林之中，野生資源豐富，具有抗腫瘤、抗氧化、抗疲勞、抗衰老以及類性激素樣等作用功效［1－4］。中醫(yī)學(xué)對(duì)于人體的衰老、免疫力低下及性功能減退有著深刻的認(rèn)識(shí)，通常以“腎藏精，主生殖”即“腎主生殖”理論為主［5］。目前公認(rèn)“腎虛證”與下丘腦－垂體－甲狀腺、性腺、腎上腺等軸功能失常密切相關(guān)［6－7］。下丘腦－垂體－性腺軸（HPG 軸）在哺乳動(dòng)物的生長、發(fā)育以及生殖、衰老過程中發(fā)揮著重要的作用［8－9］。本研究通過肌內(nèi)注射氫化可的松注射液制備腎陽虛大鼠模型［10］，考察刺玫果對(duì)雌性及雄性腎陽虛模型大鼠HPG 軸的調(diào)節(jié)作用，檢測(cè)血清中相關(guān)激素指標(biāo)，探討其對(duì)雌雄不同性別的類性激素作用特點(diǎn)，為下一步的應(yīng)用和開發(fā)提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與分組

實(shí)驗(yàn)用普通級(jí)Wistar 大鼠（4 月齡）雌、雄各40 只，體質(zhì)量為180～200 g，由青島大任富城畜牧有限公司提供。飼養(yǎng)溫度20～25 ℃，相對(duì)濕度50%～65%，正常晝夜光變化。將以上大鼠進(jìn)行3 d的適應(yīng)性喂養(yǎng)后，雌性大鼠和雄性大鼠分別隨機(jī)分為模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、刺玫果治療組和空白對(duì)照組，每組各10只。

1.2 藥物與試劑

藥材與制備：刺玫果購于大興安嶺加格達(dá)奇區(qū)，稱取刺玫果粉采用8 倍量的70%乙醇回流提取2 次，每次2 h，將濾液合并低溫旋干至無醇味，加適量水冷凍后放入凍干機(jī)中進(jìn)行冷凍干燥，將刺玫果凍干粉保存?zhèn)溆谩４堂倒麅龈煞鄣奶崛÷蕿?6%，1.0 g 凍干粉相當(dāng)于生藥3.85 g/mL。

材料試劑：氫化可的松注射液（天津金耀藥業(yè)有限公司，批號(hào)：1702081）；金匱腎氣丸（哈藥集團(tuán)世一堂制藥廠，批號(hào)：1812702）；五子衍宗丸（北京御生堂集團(tuán)石家莊制藥有限公司，批號(hào)：278023）；睪酮（T）Elisa試劑盒、雌二醇（E2）Elisa 試劑盒（Cloud－Clone Corp 公司，批號(hào)：L191105127、L191105135）；孕酮（P）試劑盒、黃體生成素（LH）試劑盒、促卵泡素（FSH）試劑盒、促性腺激素釋放激素（GnRH）試劑盒（北京博奧拓達(dá)公司，批號(hào)：CK－E30580、CK－E30623、CK－E30597、CK－E30426）。

1.3 儀器

紫外可見分光光度計(jì)（WFZ－900－D4，北京瑞利分析儀器有限公司）；臺(tái)式微量高速離心機(jī)（CT15RE，日本HITACHI）；實(shí)驗(yàn)型冷凍干燥機(jī)（LGJ－10 NS，北京亞星儀科科技發(fā)展有限公司）。

1.4 方法

1.4.1 造模與給藥方法

雌性大鼠造模與給藥方法：模型對(duì)照組采用20 mg/（kg·d）氫化可的松肌內(nèi)注射連續(xù)21 d，造模7 d后給予2 mL/d 劑量的蒸餾水灌胃給藥14 d；陽性對(duì)照組采用20 mg/（kg·d）氫化可的松肌內(nèi)注射連續(xù)21 d，造模7 d 后給予1 g/（kg·d）劑量的金匱腎氣丸灌胃給藥14 d；刺玫果治療組采用20 mg/（kg·d）氫化可的松肌內(nèi)注射連續(xù)21 d，造模7 d 后給予2 g/（kg·d）劑量的刺玫果提取物灌胃給藥14 d；空白對(duì)照組采用1 mL/d生理鹽水肌內(nèi)注射連續(xù)21 d，7 d后給予2.0 mL/d 劑量的蒸餾水灌胃給藥14 d。

雄性大鼠造模與給藥方法：模型對(duì)照組采用25 mg/（kg·d）氫化可的松肌內(nèi)注射連續(xù)12 d，按照2 mL/d 劑量的蒸餾水灌胃給藥14 d；陽性對(duì)照組采用25 mg/（kg·d）氫化可的松肌內(nèi)注射連續(xù)12 d，按照1 g/（kg·d）劑量的五子衍宗丸灌胃給藥14 d；刺玫果治療組采用25 mg/（kg·d）氫化可的松肌內(nèi)注射連續(xù)12 d，按照2 g/（kg·d）劑量的刺玫果提取物灌胃給藥14 d；空白對(duì)照組采用1 mL/d 生理鹽水肌內(nèi)注射連續(xù)12 d，按照2 mL/d劑量的蒸餾水灌胃給藥14 d。

造模與給藥方法見圖1。

圖1 造模與給藥方法

1.4.2 測(cè)定指標(biāo)與樣品測(cè)試

在造模灌胃實(shí)驗(yàn)期間，每天對(duì)大鼠進(jìn)行一般狀態(tài)的觀察，包括飲食活動(dòng)、毛發(fā)變化以及精神狀態(tài)等。記錄各組實(shí)驗(yàn)大鼠的體質(zhì)量變化。并在最后一次給藥1 h后進(jìn)行腹主動(dòng)脈取血，在3 000 rpm 的條件下進(jìn)行離心操作20 min，吸出血清后在－20 ℃的冰箱中保存?zhèn)溆?。Elisa試劑盒檢測(cè)各組實(shí)驗(yàn)大鼠血清中睪酮（T）、雌二醇（E2）、孕酮（P）、黃體生成素（LH）、促卵泡素（FSH）和促性腺激素釋放激素（GnRH）的含量。取血后立即摘除大鼠的睪丸、子宮和腎臟，分別用電子天平進(jìn)行精確的稱重，并計(jì)算各組實(shí)驗(yàn)大鼠的臟器指數(shù)。

臟器指數(shù)（%）= 大鼠各組臟器濕重/大鼠體質(zhì)量×100%

1.4.3 組織形態(tài)觀察

采血后迅速摘取睪丸、卵巢和子宮，常規(guī)固定。用石蠟進(jìn)行包埋操作，每份標(biāo)本間斷切為厚度約5 μm的5 張切片，并進(jìn)行常規(guī)HE 染色。在Olympus 生物顯微鏡下，對(duì)其各組織形態(tài)變化進(jìn)行觀察。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 22.0 軟件對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)做進(jìn)一步的統(tǒng)計(jì)分析處理。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)兩兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，以P<0.05代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 動(dòng)物造模情況

隨著實(shí)驗(yàn)中肌內(nèi)注射給藥時(shí)間的逐漸積累，模型對(duì)照組大鼠相繼出現(xiàn)了掉毛、怕冷喜暖、大便稀溏和精神不佳、活動(dòng)量減少以及體質(zhì)量減輕等符合腎陽虛證的癥狀。12 d后，以上癥狀更明顯，個(gè)別動(dòng)物出現(xiàn)死亡的情況，說明模型復(fù)制成功。結(jié)果發(fā)現(xiàn)雌鼠和雄鼠的刺玫果治療組腎陽虛癥狀均得到了較大程度的改善，其精神狀態(tài)稍弱于空白對(duì)照組。模型對(duì)照組的雄性大鼠腎陽虛癥狀比較重，陽性對(duì)照組死亡1只。雌性大鼠刺玫果治療組由于實(shí)驗(yàn)操作失誤，死亡1只，陽性對(duì)照組死亡2只。

2.2 實(shí)驗(yàn)前后各組大鼠平均體質(zhì)量變化

實(shí)驗(yàn)前后各組雌性及雄性大鼠平均體質(zhì)量變化見表1、表2。刺玫果治療組雌性、雄性腎陽虛大鼠體質(zhì)量均明顯增加，體質(zhì)量增幅稍高于陽性對(duì)照組，稍低于空白對(duì)照組，其中模型對(duì)照組大鼠的體質(zhì)量下降較為明顯。

2.3 各組大鼠臟器指數(shù)比較

雌性大鼠模型中，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組雌性大鼠的子宮臟器指數(shù)呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)（P<0.05）；刺玫果治療組子宮臟器指數(shù)接近于空白對(duì)照組，且稍高于陽性對(duì)照組，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠的腎臟指數(shù)呈極顯著的升高趨勢(shì)（P<0.01），陽性對(duì)照組大鼠腎臟指數(shù)呈現(xiàn)顯著的升高趨勢(shì)（P<0.05）；刺玫果治療組與模型對(duì)照組相比腎臟指數(shù)呈現(xiàn)極顯著的降低趨勢(shì)（P<0.01）。雄性大鼠模型中，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組的大鼠睪丸指數(shù)呈顯著降低的趨勢(shì)（P<0.01）；刺玫果治療組和陽性對(duì)照組的睪丸指數(shù)顯著升高，與腎陽虛模型組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01，P<0.05）；刺玫果治療組大鼠的睪丸指數(shù)與模型對(duì)照組比較呈極顯著的升高趨勢(shì)（P<0.01），與陽性對(duì)照組比較呈現(xiàn)顯著的升高趨勢(shì)（P<0.05）。與模型對(duì)照組的腎臟指數(shù)比較，刺玫果治療組的腎臟指數(shù)呈現(xiàn)顯著的降低趨勢(shì)（P<0.01）；與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組大鼠的腎臟指數(shù)呈現(xiàn)顯著的升高趨勢(shì)（P<0.01）。雌性大鼠及雄性大鼠各組臟器指數(shù)結(jié)果見表1、表2。

表1 各組雌性大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化情況比較（±s）

表1 各組雌性大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化情況比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與模型對(duì)照組比較，**P<0.01。

?

表2 各組雄性大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化情況比較（±s）

表2 各組雄性大鼠體質(zhì)量及臟器指數(shù)的變化情況比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，##P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

?

2.4 各組大鼠HPG軸相關(guān)指標(biāo)比較

雌性各組大鼠血清中E2、P、LH、FSH、GnRH 水平變化情況見表3。雄性各組大鼠血清中T、LH、FSH、GnRH水平變化情況見表4。

如表3 結(jié)果顯示，雌性大鼠中，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、刺玫果治療組血清中的E2和P 含量顯著降低（P< 0.01，P< 0.05），陽性對(duì)照組中的E2極顯著降低（P< 0.01）；與模型對(duì)照組比較，刺玫果治療組中E2和P 的含量極顯著增加（P< 0.01）。說明刺玫果可以有效改善雌性大鼠血清中E2和P 激素的分泌，并且可促進(jìn)雌性大鼠的生殖內(nèi)分泌。

表3 各組雌性大鼠HPG軸相關(guān)指標(biāo)的變化情況比較（±s）

表3 各組雌性大鼠HPG軸相關(guān)指標(biāo)的變化情況比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

組 別空白對(duì)照組模型對(duì)照組陽性對(duì)照組刺玫果治療組n 10 10 8 9劑量（g/kg）——1.0 2.0 E2（ng/mL）2.381 0±0.030 4 0.446 0±0.120 9##2.123 0±0.032 8**##2.276 0±0.129 9**#P（ng/mL）9.648 0±0.769 1 7.622 0±0.440 0##9.222 0±0.732 5**8.941 0±0.492 8**#LH（mIU/mL）14.624 0±0.598 2 25.038 0±2.711 5##16.111 0±1.484 0**##17.089 0±1.079 4**##FSH（IU/L）2.712 0±0.121 6 4.171 0±0.127 5##2.926 0±0.105 6**##2.677 0±0.173 2**GnRH（pg/mL）208.243 0±7.412 4 168.907 0±9.470 4##199.162 0±4.869 9**##217.102 0±18.446 1**

與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組血清中LH、FSH 的含量極顯著升高（P< 0.01），刺玫果治療組中的LH 含量極顯著升高（P< 0.01）。與模型對(duì)照組比較，刺玫果治療組和陽性對(duì)照組血清中所含LH、FSH 的含量極顯著降低（P< 0.01）?？梢姡堂倒委熃M血清中LH、FSH 濃度較模型對(duì)照組顯著增加，說明刺玫果可以下調(diào)雌性大鼠LH、FSH 的分泌。

與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組和陽性對(duì)照組血清中GnRH 的含量極顯著降低（P<0.01）。與模型對(duì)照組比較，刺玫果治療組和陽性對(duì)照組血清中GnRH含量極顯著升高（P< 0.01）。刺玫果治療組血清中GnRH 濃度較模型對(duì)照組顯著增加，說明刺玫果可以上調(diào)雌性大鼠GnRH的分泌。

如表4 結(jié)果顯示，雄性大鼠中，與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、刺玫果治療組血清中T的含量極顯著降低（P< 0.01）。與模型對(duì)照組比較，刺玫果治療組和陽性對(duì)照組血清中T的含量極顯著升高（P<0.01）。說明刺玫果可以有效改善雄性大鼠血清中T 激素的分泌，并且可促進(jìn)雄性大鼠的生殖內(nèi)分泌。

表4 各組雄性大鼠HPG軸相關(guān)指標(biāo)的變化情況比較（±s）

表4 各組雄性大鼠HPG軸相關(guān)指標(biāo)的變化情況比較（±s）

注：與空白對(duì)照組比較，#P<0.05，##P<0.01；與模型對(duì)照組比較，*P<0.05，**P<0.01。

組 別空白對(duì)照組模型對(duì)照組陽性對(duì)照組刺玫果治療組n 10 10 9 10劑量（g/kg）——1.0 2.0 T（ng/mL）4.172 0±0.005 2 3.689 0±0.005 3##4.242 0±0.011 3**##4.208 0±0.003**##LH（mIU/mL）15.513 0±0.529 7 23.808 0±0.624 2##18.039 0±0.889 9**##17.963 0±1.198 6**##FSH（IU/L）2.586 0±0.101 9 3.763 0±0.224 2##2.883 0±0.159 4**##3.015 0±0.045 6**##GnRH（pg/mL）180.867 0±11.053 3 153.403 0±9.135 2##169.359 0±12.564 0**#180.070 0±7.374 6**

與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組、刺玫果治療組、陽性對(duì)照組血清中LH 和FSH 的含量極顯著升高（P< 0.01）。與模型對(duì)照組比較，刺玫果治療組和陽性對(duì)照組血清中LH、FSH 的含量極顯著降低（P<0.01）。刺玫果治療組中所含LH、FSH 的濃度較模型對(duì)照組顯著降低，說明刺玫果可以下調(diào)雄性大鼠LH、FSH的分泌。

與空白對(duì)照組比較，模型對(duì)照組血清中GnRH 的含量極顯著降低（P<0.01），與空白對(duì)照組比較，陽性對(duì)照組血清中GnRH的含量顯著升高（P<0.05），與模型對(duì)照組比較，刺玫果治療組和陽性對(duì)照組血清中GnRH 的含量極顯著升高（P< 0.01）。刺玫果治療組中GnRH 濃度較模型對(duì)照組顯著增加，說明刺玫果可以上調(diào)雄性大鼠GnRH的分泌。

2.5 雄性大鼠睪丸組織形態(tài)觀察

將所摘取的睪丸組織進(jìn)行常規(guī)固定，用石蠟包埋后再進(jìn)行切片，常規(guī)HE 染色后，分別在200 倍和400 倍的光學(xué)顯微鏡下觀察各個(gè)組織形態(tài)的變化。生精小管排列較為緊密、間質(zhì)發(fā)達(dá)，有豐富間質(zhì)細(xì)胞，為正常睪丸的組織形態(tài)，同時(shí)可以看到許多排列非常規(guī)則且層次較清晰地分布在生精小管內(nèi)的精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞和次級(jí)精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和精子等各級(jí)生精細(xì)胞。生精小管排列呈疏松狀態(tài)、間質(zhì)退化以及間質(zhì)細(xì)胞較少是模型對(duì)照組的形態(tài)，睪丸的超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了明顯破壞，在組織中可以看見較多的曲精小管內(nèi)有精母細(xì)胞脫落（黑色箭頭），局部間質(zhì)中可見較多嗜酸性物質(zhì)滲出（黃色箭頭），未見明顯炎癥，見圖2 A1～A2；生精小管發(fā)生了萎縮變化，各級(jí)生精細(xì)胞排列呈較松散且不規(guī)則的狀態(tài)，并且精子的數(shù)量極少，見圖2 A3～A4。在刺玫果給藥組中，生精小管的排列較為緊密，間質(zhì)退化的程度得到了改善，間質(zhì)細(xì)胞較為豐富，組織中可見較多曲精小管內(nèi)有精母細(xì)胞脫落（黑色箭頭），間質(zhì)未見明顯異常，未見明顯炎癥，見圖2 B1～B2；各級(jí)生精細(xì)胞在生精小管內(nèi)可見，層次較為清晰，有精子，見圖2 B3～B4。說明刺玫果可以修復(fù)腎陽虛大鼠睪丸組織的退行性改變。

2.6 雌性大鼠卵巢組織形態(tài)觀察

在正常對(duì)照組雌性大鼠卵巢內(nèi)可以看到各級(jí)卵泡，并且有新鮮黃體。在模型對(duì)照組中卵巢內(nèi)只有少數(shù)的原始卵泡，無優(yōu)勢(shì)卵泡，少量的淋巴細(xì)胞浸潤在局部可見（黑色箭頭），未見黃體，見圖3 A1～A4；刺玫果治療組可見各級(jí)卵泡，未見黃體，多見卵泡內(nèi)有顆粒細(xì)胞凋亡，核固縮深染或碎裂（黑色箭頭）；卵細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，未見明顯炎癥見圖2 B1～B4。說明刺玫果可以促進(jìn)大鼠的卵巢發(fā)育。

圖2 雄性大鼠睪丸組織形態(tài)（HE染色）

圖3 雌性大鼠卵巢組織形態(tài)（HE染色）

2.7 雌性大鼠子宮組織形態(tài)觀察

正常對(duì)照組大鼠子宮管徑比較粗，并且其內(nèi)膜較為深厚，分布有豐富的子宮腺體，在單層柱狀上皮細(xì)胞中呈現(xiàn)整齊排列的狀態(tài)；模型對(duì)照組黏膜上皮可見上皮細(xì)胞點(diǎn)狀凋亡，核發(fā)生碎裂或溶解（黑色箭頭）；固有層子宮腺數(shù)量少，少量腺上皮細(xì)胞胞質(zhì)空泡化（黃色箭頭），間質(zhì)致密，伴有少量的淋巴細(xì)胞浸潤（紅色箭頭），并且在局部可見嗜酸性增強(qiáng)（藍(lán)色箭頭），子宮內(nèi)膜變薄，無子宮腺體，見圖4 A1～A4。刺玫果治療組黏膜上皮局部可見增生（黑色箭頭），并可見少量上皮細(xì)胞核固縮深染（黃色箭頭）；固有層子宮腺數(shù)量較少，間質(zhì)致密，伴有較多淋巴細(xì)胞浸潤（紅色箭頭），子宮內(nèi)膜較模型對(duì)照組厚，有少量子宮腺體，見圖4 B1～B4。說明刺玫果可以增強(qiáng)大鼠的子宮發(fā)育。

圖4 雌性大鼠子宮組織形態(tài)（HE染色）

3 討論

臨床腎陽虛患者的腎上腺皮質(zhì)功能較低，進(jìn)行治療時(shí)需要長期使用大劑量的外源性皮質(zhì)激素，過量使用腎上腺皮質(zhì)激素，可對(duì)下丘腦－垂體－腎上腺的反饋調(diào)節(jié)產(chǎn)生抑制，若突然停用皮質(zhì)激素治療，會(huì)暴露HPG 軸所導(dǎo)致的抑制狀態(tài)，表現(xiàn)出不同程度的HPG 軸功能低下的狀態(tài)，出現(xiàn)腎陽虛的癥狀［11－12］。本研究以此為依據(jù)復(fù)制了腎陽虛大鼠模型。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為腎藏精，主生殖，在人類的生長及發(fā)育中發(fā)揮著非常重要的作用，且腎中陽氣是生殖功能的主要?jiǎng)恿碓础ＤI中陽氣的興衰由性激素的水平變化所反映，腎虛發(fā)生的基礎(chǔ)是內(nèi)分泌環(huán)境的改變［12］。在臨床中發(fā)現(xiàn)，多數(shù)腎虛患者會(huì)在病程中伴見性激素水平的變化［13］，在男性血清中T水平會(huì)顯著降低，女性血清中E2、P 水平也呈現(xiàn)顯著降低，在中老年腎陽虛證患者中更是主要表現(xiàn)為較嚴(yán)重的性激素紊亂癥狀［14］。下丘腦接受上級(jí)神經(jīng)系統(tǒng)傳來的信息后，可以促進(jìn)GnRH 釋放，而后GnRH 被運(yùn)輸?shù)较俅贵w，起到促進(jìn)FSH 以及LH 釋放的作用，LH 可進(jìn)一步刺激睪酮的分泌和合成［15］。卵巢組織具有排卵和內(nèi)分泌的功能，在女性的生殖功能及性特征中發(fā)揮著非常重要的作用。許多婦科內(nèi)分泌疾病，如不孕癥等，都是由卵巢功能的失調(diào)所導(dǎo)致的［16－17］。女性生殖與腎功能關(guān)系密切，不孕癥的病機(jī)本質(zhì)是腎虛，使內(nèi)分泌失常，機(jī)體不能正常排卵，如腎陽虧虛，命門火衰，或沖任二脈及胞宮中陰寒內(nèi)滯，都將使女性難以進(jìn)行攝精受孕［18］。

人體內(nèi)分泌系統(tǒng)主要有三大分支，即下丘腦－垂體－甲狀腺軸、下丘腦-垂體-腎上腺軸、下丘腦－垂體－性腺軸［19］。下丘腦和垂體可以說是人體內(nèi)分泌的控制中心，下丘腦－垂體－性腺軸則是控制人體性激素分泌的分支。人體內(nèi)分泌系統(tǒng)中HPG軸機(jī)體調(diào)節(jié)機(jī)制示意圖見圖5。下丘腦分泌GnRH，GnRH可促進(jìn)垂體分泌LH、FSH和泌乳素（PRL），PRL作用在乳腺上，促進(jìn)乳腺發(fā)育及乳汁的產(chǎn)生。LH和FSH作用在女性的卵巢上，促進(jìn)卵巢分泌P和E2；作用在男性的睪丸上，促進(jìn)睪丸分泌T。當(dāng)然女性的卵巢也會(huì)分泌少量的睪酮，男性的睪丸也會(huì)分泌少量的P和T。E2可促使女性生殖系統(tǒng)的發(fā)育及第二性征的出現(xiàn)及維持。T是重要的雄性激素，同時(shí)可以促進(jìn)骨骼和肌肉的發(fā)育。其中血清PRL、P、E2和T的含量又會(huì)有一個(gè)反饋機(jī)制到達(dá)下丘腦，當(dāng)血中這些激素的含量升高或降低時(shí)，下丘腦收到這個(gè)反饋信息后會(huì)調(diào)整GnRH的分泌，以調(diào)整LH、FSH、PRL的分泌，最終調(diào)整P、E2、T的含量［19－21］。

圖5 人體內(nèi)分泌系統(tǒng)中HPG軸機(jī)體調(diào)節(jié)機(jī)制示意圖

睪丸間質(zhì)細(xì)胞以膽固醇為原料合成雄激素，主要包括下列步驟：①膽固醇從線粒體膜外轉(zhuǎn)運(yùn)到膜內(nèi)參加類固醇合成，轉(zhuǎn)運(yùn)過程中需要類固醇急性反應(yīng)蛋白（StAR）參與，StAR 加速膽固醇向膽固醇側(cè)鏈裂解酶細(xì)胞色素P450（P450scc）的傳遞，這是睪酮合成的限速步驟。②膽固醇轉(zhuǎn)到線粒體內(nèi)膜后，在P450scc 催化下變成孕烯醇酮，P450scc是類固醇合成的限速酶。③孕烯醇酮可直接變?yōu)樵型?，兩者?7－羥化酶/17－20裂解酶細(xì)胞色素P450（P450c17）作用下依次轉(zhuǎn)變?yōu)?7-羥孕烯醇酮（17－羥孕酮）和去氫表雄酮（雄烯二酮），P450c17 是另一個(gè)限速酶。④去氫表雄酮在17β－羥基類固醇脫氫酶（17β－HSD）催化下可轉(zhuǎn)變?yōu)樾巯┒?。?β－HSD 可催化雄烯二酮轉(zhuǎn)變?yōu)椴G酮，3β－HSD 也是類固醇生物合成的限速酶。影響睪酮合成環(huán)節(jié)的因素最終可引起睪酮合成的變化。另外，少量雄激素也可經(jīng)芳香化酶作用轉(zhuǎn)化為雌激素［11，21］。

本研究中，大鼠造模后出現(xiàn)明顯的腎陽虛證表現(xiàn)，且體質(zhì)量明顯減輕，在雄鼠血清中T、GnRH 的含量呈顯著下降（P< 0.01），LH、FSH 的含量呈顯著升高（P<0.01），垂體、下丘腦以及睪丸組織均發(fā)生退行性改變，在給藥后的陽性對(duì)照組、刺玫果治療組大鼠血清中T、GnRH 的含量顯著升高（P<0.01），LH、FSH 的含量顯著下降（P<0.01），體質(zhì)量也有所增加，體內(nèi)垂體、下丘腦以及睪丸組織的退行性改變均得到了有效改善；雌鼠血清中E2、P、GnRH 的含量顯著下降（P<0.01），LH、FSH的含量顯著升高（P<0.01），下丘腦、垂體和卵巢以及子宮組織發(fā)生了退行性改變，陽性對(duì)照組、刺玫果治療組血清中E2、P、GnRH 的含量顯著升高（P<0.01），LH、FSH的含量顯著下降（P<0.01），體質(zhì)量增加，卵巢和子宮臟器指數(shù)高于模型對(duì)照組，下丘腦、垂體、卵巢和子宮組織退行性改變得到改善。

綜上，刺玫果可有效上調(diào)腎陽虛大鼠血清中T、E2、P、GnRH 的含量，下調(diào)LH、FSH 的含量，并且可使腎陽虛模型大鼠的下丘腦、垂體以及性腺組織形態(tài)的退行性改變得到有效的改善。本研究結(jié)果表明，刺玫果對(duì)雌性及雄性大鼠的生殖及內(nèi)分泌功能均具有較好的促進(jìn)作用，為刺玫果臨床應(yīng)用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。