黃先菊， 申李丹， 柏 遠(yuǎn)， 董 悅， 武宙陽， 李啟恩， 李 竣

1中南民族大學(xué)藥學(xué)院，武漢 430074 2華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院麻醉科，武漢 430022 3青海大學(xué)藏醫(yī)藥研究中心，藏醫(yī)學(xué)院，藏藥新藥開發(fā)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，西寧 840016

鐵棒錘(AconitumpendulumBusch.，APB)為毛茛科植物鐵棒錘的干燥塊根，也被稱為“黑烏頭”，有止痛祛風(fēng)，散瘀消腫、止血等作用[1]；甘青烏頭[Aconitumtanguticum(Maxim.)Stapf.，ATS]為毛茛科植物甘青烏頭的干燥全草，在藏藥中被認(rèn)為是“白種烏頭”的代表性藥物[2]，其性涼、味苦，具有清熱解毒、生肌收口、燥濕之功效[3]。兩者均有不同程度的抗炎鎮(zhèn)痛作用[4-5]。但由于APB治療用量與中毒劑量十分接近，若用量不當(dāng)極易引發(fā)中毒，嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致死亡[5]。鑒于APB和ATS中活性成分區(qū)別很大，其藥效靶點(diǎn)和臨床適應(yīng)證也有較大差別[6]。

TOPSIS法(technique for order preference by similarity to an ideal solution，離散型逼近理想解排序)又稱為優(yōu)劣解距離法，是多目標(biāo)評(píng)價(jià)時(shí)常采用的方法，它通過計(jì)算各指標(biāo)與正負(fù)理想解的距離，來對(duì)各指標(biāo)進(jìn)行排序，從而進(jìn)行相對(duì)優(yōu)劣評(píng)價(jià)[7]。即是以與理想方案相近似的順序選優(yōu)技術(shù)，是系統(tǒng)工程中有限方案多目標(biāo)決策分析的一種常見方法[8]。本研究旨在從藥效-成分角度比較APB與ATS抗炎鎮(zhèn)痛的差異。擬將其二者的安全范圍差異作為衡量因素之一，結(jié)合TOPSIS分析方法，探討APB和ATS兩種植物的醇提物抗神經(jīng)病理性疼痛的藥效，通過比較APB和ATS對(duì)病理性神經(jīng)疼痛作用下的各藥效指標(biāo)，綜合分析后得到治療神經(jīng)病理性疼痛更優(yōu)、安全性更高的神經(jīng)系統(tǒng)類藥物，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探究。

1 材料與方法

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞BV2購(gòu)自武漢大學(xué)中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，CCTCC)，將其培養(yǎng)于含10%胎牛血清、1%抗生素(100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素)的DMEM完全培養(yǎng)液中，再置于95%空氣和5%CO2的37℃加濕培養(yǎng)箱進(jìn)行孵育。

1.2 主要試劑和儀器

甘青烏頭(標(biāo)本號(hào)：LQE-2019-066)；鐵棒錘(標(biāo)本號(hào)：HSN13352)；三磷酸腺苷(ATP，Sigma公司，Lot：SLCF6535)；胎牛血清(FBS，杭州天杭生物科技股份有限公司，Lot：11011-8611)；DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)液(Gibco公司，Lot：8121377)；NO檢測(cè)試劑盒(碧云天生物有限公司)；Trizol Universal總RNA提取試劑盒(天根公司，Lot：W9712)；ABScript Ⅱ RT Master Mix for qPCR(武漢愛博泰克生物科技有限公司，Lot：962103 G2626)；TB GreenTMPremix Ex TaqTM(日本TaKaRa公司，Lot：AL13557 A)；熒光定量PCR儀、7500型定量PCR儀(美國(guó)BD公司)；全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀(美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品制備及液相條件 采用本實(shí)驗(yàn)室前期開展的烏頭類相關(guān)藥材研究中的制備方法提取鐵棒錘醇提物[9]，將鐵棒錘的根粉碎并過篩(65目)，稱取適量藥材粉末，加入無水乙醇使粉末室溫浸泡1周，過濾，合并濾液，減壓濃縮濾液，得到浸膏；將甘青烏頭的全草粉碎并過篩(65目)，稱取適量藥材粉末，以無水乙醇與藥材粉末比例為5∶1加入無水乙醇室溫浸泡24 h，重復(fù)6次，過濾，合并濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮濾液，得到浸膏。

采用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，HPLC)對(duì)本批次的甘青烏頭中烏頭類生物堿的含量進(jìn)行檢測(cè)。色譜條件：進(jìn)樣體積20 μL，檢測(cè)波長(zhǎng)235 nm，流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃。流動(dòng)相由乙腈和0.2%冰醋酸(三乙胺調(diào)pH至6.2)組成，梯度洗脫模式如下：0～25 min，21%～27%乙腈；25～60 min，27%乙腈等度洗脫。

1.3.2 細(xì)胞毒性檢測(cè) 將BV2細(xì)胞在含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)，置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，待細(xì)胞長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)，用含胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液吹打使其脫落制成細(xì)胞懸液，以1×105個(gè)/mL細(xì)胞接種于96孔板中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細(xì)胞貼壁增殖到80%左右融合度時(shí)，棄去培養(yǎng)液，分別加入5、25、50、100、150、200 μg/mL的APB和ATS孵育12 h，另外設(shè)置空白對(duì)照組。孵育結(jié)束后用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力[10]，并計(jì)算給藥后細(xì)胞存活率，利用GraphPad軟件中Analyze-Transform-Nonlinear regression程序計(jì)算IC50值。

1.3.3 藥效檢測(cè) 待BV2細(xì)胞長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，用0.25%胰酶消化后，用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，以1×105個(gè)/mL細(xì)胞接種于96孔板中，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。待細(xì)胞融合度達(dá)到80%左右時(shí)，分別加入1 ng/mL～25 μg/mL的APB和ATS預(yù)給藥12 h，棄去藥液，加入ATP(300 μmol/L)孵育12 h，另外設(shè)置空白對(duì)照組和模型對(duì)照組(ATP，300 μmol/L)。孵育結(jié)束后用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力。使用GraphPad軟件中的Analyze-Transform-Nonlinear regression程序計(jì)算EC50值。

1.3.4 一氧化氮檢測(cè) 按1.3.3項(xiàng)下藥效濃度探索方法，選取其中藥效最顯著時(shí)所對(duì)應(yīng)的濃度給藥，給藥結(jié)束后，另外設(shè)置空白對(duì)照組和模型對(duì)照組，每孔收集細(xì)胞上清液50 μL置96孔板中，用Griess法試劑盒測(cè)定給藥組及模型對(duì)照組NO釋放量[10]。

1.3.5 實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)iNOS、IL-6、P2X4、P2X7基因表達(dá) 將BV2細(xì)胞以1×105個(gè)/mL細(xì)胞接種在6孔板中，按1.3.3項(xiàng)下藥效濃度探索選藥效最顯著所對(duì)應(yīng)的濃度預(yù)給藥12 h，棄去藥液，加入ATP(300 μmol/L)孵育12 h，使用Trizol試劑從細(xì)胞中提取總RNA。用ABScript Ⅱ RT Mix for qPCR with gDNA Remover(購(gòu)于ABclonal公司)試劑盒將總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，最終取cDNA 2 μL，TB Green Premix Ex Taq Ⅱ(購(gòu)于TaKaRa公司)試劑盒反應(yīng)液18 μL，PCR反應(yīng)總體積為20 μL。使用以下擴(kuò)增體系進(jìn)行PCR擴(kuò)增：95℃預(yù)熱變性30 s，循環(huán)體系95℃ 15 s，56℃ 1 min，循環(huán)40次。引物序列見表1。

表1 qRT-PCR相關(guān)引物列表Table 1 List of qRT-PCR related primers

1.3.6 TOPSIS法歸一化綜合評(píng)價(jià)藥效 將1 μg/mL APB和ATS干預(yù)病理性疼痛狀態(tài)下的BV2細(xì)胞所測(cè)得的細(xì)胞活力、NO釋放量、iNOS、IL-6、P2X4、P2X7 mRNA水平等數(shù)據(jù)，利用SPSSAU在線分析軟件(https：//spssau.com/index.html)進(jìn)行數(shù)據(jù)趨勢(shì)統(tǒng)一化，以空白組趨近于0，數(shù)值越小藥效越強(qiáng)作為統(tǒng)一趨勢(shì)進(jìn)行歸一化(MMS)處理，并使用Microsoft Excel作雷達(dá)圖進(jìn)行數(shù)據(jù)可視化。最后將歸一化后的數(shù)據(jù)使用SPSSAU在線分析中的TOPSIS分析模塊進(jìn)行綜合分析排序。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 APB和ATS醇提物中烏頭堿的對(duì)比分析

研究報(bào)道，APB和ATS物質(zhì)基礎(chǔ)的差異是造成其毒性大小的關(guān)鍵。產(chǎn)生毒性和發(fā)揮生理活性物質(zhì)的關(guān)鍵性成分為烏頭堿。HPLC結(jié)果顯示，APB醇提物中含有烏頭堿，而ATS醇提物中未檢測(cè)到烏頭堿，與康慧等[11]的檢測(cè)結(jié)果一致(圖1)。

ATS：白種烏頭；APB：黑種烏頭圖1 ATS醇提物和APB醇提物中烏頭堿的對(duì)比分析Fig.1 Comparative analysis of aconifine in ATS alcohol extract and APB alcohol extract

2.2 APB和ATS對(duì)BV2細(xì)胞活力的影響

將5～200 μg/mL的APB和ATS作用于BV2細(xì)胞后，通過MTT法檢測(cè)，計(jì)算細(xì)胞活力。結(jié)果顯示(圖2)，APB和ATS的濃度小于25 μg/mL時(shí)對(duì)BV2細(xì)胞無明顯毒性。濃度超過50 μg/mL時(shí)開始對(duì)BV2細(xì)胞的活力有不同程度的抑制作用。50 μg/mL的APB可使BV2細(xì)胞活力明顯下降至75%，利用GraphPad軟件中Analyze-Transform-Nonlinear regression程序計(jì)算得出其IC50值為268 μg/mL；用50 μg/mL的ATS作用于BV2細(xì)胞，細(xì)胞活力下降至80%，其IC50值為923 μg/mL，相較于APB其安全范圍更廣。

與APB空白對(duì)照組比較，**P<0.01；與ATS空白對(duì)照組比較，##P<0.01；ATS：白種烏頭；APB：黑種烏頭圖2 APB和ATS對(duì)BV2神經(jīng)細(xì)胞毒性的影響Fig.2 Effects of APB and ATS on BV2 cell toxicity

2.3 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)BV2細(xì)胞活力的影響

經(jīng)實(shí)驗(yàn)前期安全濃度范圍摸索，最終統(tǒng)一選擇1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL、1 μg/mL、10 μg/mL、25 μg/mL的濃度探索APB和ATS提取物對(duì)BV2細(xì)胞病理性疼痛模型的作用，通過MTT法，檢測(cè)給藥后細(xì)胞存活率。結(jié)果如圖3所示，與空白對(duì)照組比較，ATP模型對(duì)照組的細(xì)胞活力顯著下降(均P<0.01)，說明已成功建立ATP誘導(dǎo)BV2細(xì)胞的神經(jīng)病理性疼痛模型。如圖3A所示，與模型對(duì)照組比較，APB在濃度10 ng/mL～10 μg/mL之間，有不同程度的抗ATP所致神經(jīng)細(xì)胞活力變化的作用；如圖3B所示，與模型對(duì)照組對(duì)比，ATS在濃度1 μg/mL～25 μg/mL之間，有抗ATP所致神經(jīng)細(xì)胞活力變化的作用。分別通過GraphPad中的Analyze-Transform-Nonlinear regression程序計(jì)算兩者EC50值，得到APB的EC50為0.014 μg/mL，ATS的EC50為0.148 μg/mL。

A：APB對(duì)ATP誘導(dǎo)BV2細(xì)胞活力變化的影響(F值：16.51，P<0.01)；B：ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)BV2細(xì)胞活力變化的影響(F值：25.08，P<0.01)；NC：空白對(duì)照組，MC：模型對(duì)照組；與空白對(duì)照組比較，**P<0.01；與模型對(duì)照組比較，#P<0.05 ##P<0.01；ATS：白種烏頭；APB：黑種烏頭圖3 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)BV2細(xì)胞活力變化的影響Fig.3 Effects of APB and ATS on the viability of ATP-induced BV2 cells

2.4 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)細(xì)胞NO釋放的影響

結(jié)果如圖4所示，與空白對(duì)照組比較，300 μmol/L的ATP作用于BV2細(xì)胞12 h可顯著增強(qiáng)NO釋放量(P<0.01)；與模型對(duì)照組比較，1 μg/mL的APB和ATS組細(xì)胞上清液中NO含量明顯降低(P<0.05，P<0.01)，表明APB和ATS均可不同程度抑制ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞上清液中NO的釋放，均有不同程度的抗神經(jīng)病理性疼痛作用。

NC：空白對(duì)照組，MC：模型對(duì)照組；與空白對(duì)照組比較，**P<0.01；與模型對(duì)照組比較，#P<0.05 ##P<0.01；ATS：白種烏頭，1 μg/mL；APB：黑種烏頭，1 μg/mL圖4 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)細(xì)胞NO釋放的影響Fig.4 Effects of APB and ATS on the NO release of ATP-induced BV2 cells

2.5 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞IL-6、iNOS mRNA水平的影響

如圖5A所示，與空白對(duì)照組比較，ATP模型對(duì)照組可以使BV2細(xì)胞IL-6 mRNA的水平顯著上調(diào)(P<0.01)；與模型對(duì)照組比較，1 μg/mL的APB和ATS均能抑制IL-6水平上調(diào)(均P<0.05)。如圖5B所示，與空白對(duì)照組比較，ATP模型對(duì)照組可以使BV2細(xì)胞iNOS mRNA的水平顯著上調(diào)(P<0.01)；與模型對(duì)照組相比，1 μg/mL的APB和ATS均能不同程度地抑制iNOS mRNA水平上調(diào)(P<0.05，P<0.01)，表明APB和ATS均有不同程度的抗炎鎮(zhèn)痛作用。

A：APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞IL-6基因表達(dá)的影響(F值：60.05，P<0.01)；B：APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞iNOS基因表達(dá)的影響(F值：27.87，P<0.01)；NC：空白對(duì)照組，MC：模型對(duì)照組；與空白對(duì)照組比較，**P<0.01；與模型對(duì)照組比較，#P<0.05 ##P<0.01；ATS：白種烏頭，1 μg/mL；APB：黑種烏頭，1 μg/mL圖5 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞iNOS和IL-6基因表達(dá)的影響Fig.5 Effect of APB and ATS on gene expression of iNOS and IL-6 in ATP-induced BV2 cells

2.6 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞P2X4、P2X7 mRNA水平的影響

由圖6可知，ATP可以使BV2細(xì)胞中P2X4、P2X7 mRNA水平顯著上調(diào)(均P<0.01)。1 μg/mL的APB可抑制P2X7 mRNA水平上調(diào)，而1 μg/mL的ATS能不同程度地抑制P2X4、P2X7 mRNA水平上調(diào)，表明APB和ATS可顯著抑制P2X7受體介導(dǎo)的神經(jīng)性疼痛和炎癥反應(yīng)。

A：APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞P2X4基因表達(dá)的影響(F值：15.56，P<0.01)；B：APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞P2X7基因表達(dá)的影響(F值：30.45，P<0.01)；NC：空白對(duì)照組，MC：模型對(duì)照組；與空白對(duì)照組比較，**P<0.01；與模型對(duì)照組比較，#P<0.05 ##P<0.01；ATS：白種烏頭，1 μg/mL；APB：黑種烏頭，1 μg/mL圖6 APB和ATS對(duì)ATP誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞P2X4和P2X7基因表達(dá)的影響Fig.6 Effect of APB and ATS on gene expression of P2X4 and P2X7 in ATP-induced BV2 cells

2.7 TOPSIS法歸一化綜合評(píng)價(jià)藥效

根據(jù)前期設(shè)置的數(shù)值越小藥效越強(qiáng)的趨勢(shì)，則空白對(duì)照組(NC組)為理想方案趨勢(shì)方向，那么C值(相對(duì)接近度，即各評(píng)價(jià)對(duì)象與最優(yōu)方案的接近程度)接近NC組的為目標(biāo)優(yōu)勢(shì)品種。由表2中可知ATS組的C值與APB組相比更接近NC組，同時(shí)這一點(diǎn)從圖7的雷達(dá)圖上也有更直觀的體現(xiàn)，圖7表明，ATS曲線上的點(diǎn)更靠近原點(diǎn)。故TOPSIS法分析得，ATS與APB相比，在抗神經(jīng)疼痛方面更具優(yōu)勢(shì)。

表2 TOPSIS評(píng)價(jià)計(jì)算結(jié)果Table 2 TOPSIS evaluation results

3 討論

神經(jīng)病理性疼痛是損傷或疾病影響軀體感覺神經(jīng)系統(tǒng)所致的疼痛，是一種常見且嚴(yán)重的慢性疾病[12]。主要表現(xiàn)為自發(fā)痛、持續(xù)痛或爆發(fā)痛，以及由傷害性刺激或非傷害性刺激誘發(fā)的放大的疼痛。流行病學(xué)研究表明，7%～10%的普通人群患有神經(jīng)病理性疼痛，在我國(guó)有近9000萬病患遭受困擾[13]，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。烏頭屬植物，如附子、川烏、草烏、雪上一枝蒿、鐵棒錘等，大多具有祛風(fēng)除濕、溫經(jīng)止痛的作用，可用于治療風(fēng)濕麻痹、關(guān)節(jié)疼痛、心腹冷痛、寒疝作痛及麻醉之痛[14]?，F(xiàn)代醫(yī)藥也表明，烏頭屬植物藥用價(jià)值極高，具有顯著鎮(zhèn)痛作用[15]，臨床上常用于多種痛證，如頭痛、心痛、脘腹脅痛、痹痛、癌痛[5]。但由于其毒性較大，臨床上使用時(shí)頗受限制。中醫(yī)理論中，烏頭屬植物多性味辛、大熱，有大毒，《本草綱目》將其列入草部毒草類。而中藏醫(yī)理論中對(duì)烏頭屬植物的分類有所不同，如《晶珠本草》中將烏頭屬植物按顏色分為白、黃、紅、黑4種，其中白、黃、紅種為藥物，黑種既為藥物亦為毒物[2]?，F(xiàn)代藏醫(yī)藥研究已經(jīng)證明白、紅、黃及黑4種烏頭類藏藥均有毒性，只是毒性大小有差異。研究指出白種烏頭類藏藥為毒性較低的一種。從現(xiàn)代藏醫(yī)藥本草資料來看，黑種烏頭以毛茛科植物鐵棒錘為代表；白種烏頭則以毛茛科植物甘青烏頭為代表[2]。因此本研究選用這2種代表性藥材，以藏醫(yī)藥長(zhǎng)期的習(xí)用經(jīng)驗(yàn)理論作為基礎(chǔ)，從二者的藥效-成分角度出發(fā)，旨在探究二者的毒效關(guān)系及作用機(jī)制。

NC：空白對(duì)照組，MC：模型對(duì)照組；APB：1 μg/mL黑種烏頭;ATS：1 μg/mL白種烏頭圖7 TOPSIS法歸一化綜合評(píng)價(jià)藥效雷達(dá)圖Fig.7 Pharmacodynamic radar chart of normalization and comprehensive evaluation by TOPSIS method

當(dāng)炎癥、缺血、神經(jīng)系統(tǒng)變性等神經(jīng)損傷發(fā)生時(shí)可引起局部神經(jīng)細(xì)胞死亡，并釋放出大量ATP，從而過度激活P2嘌呤受體，加重小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，持續(xù)的活化會(huì)分泌過量的炎癥因子如白介素(IL-6等)和神經(jīng)毒性分子，并進(jìn)一步激活iNOS，產(chǎn)生過量NO導(dǎo)致正常細(xì)胞死亡，進(jìn)而對(duì)機(jī)體造成損害[16]。在整個(gè)進(jìn)程中，活化的小膠質(zhì)細(xì)胞上表達(dá)的ATP受體在神經(jīng)性疼痛和幾種炎癥因子介導(dǎo)的神經(jīng)退行性疾病中發(fā)揮重要作用，其中P2嘌呤受體對(duì)ATP的反應(yīng)性較強(qiáng)[17]。P2嘌呤受體包括離子型受體(P2X)和代謝型受體(P2Y)。P2X受體通道的打開和隨后的膜去極化通常被認(rèn)為是細(xì)胞外ATP濃度升高而產(chǎn)生疼痛的關(guān)鍵因素。已經(jīng)有研究表明，P2X4和P2X7受體在小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生損傷時(shí)都可發(fā)揮一定作用[18]。

本研究結(jié)果顯示，高濃度的ATP刺激BV2細(xì)胞后，細(xì)胞活力顯著下降，NO釋放量明顯增多，且IL-6和iNOS mRNA水平均顯著上調(diào)，說明BV2細(xì)胞發(fā)生了極顯著的病理性疼痛反應(yīng)。而使用APB和ATS醇提物對(duì)其干預(yù)，結(jié)果顯示，APB和ATS均能顯著逆轉(zhuǎn)上述反應(yīng)，使細(xì)胞活力升高，抑制細(xì)胞上清液中NO含量，下調(diào)IL-6和iNOS mRNA水平，說明APB和ATS均有抗神經(jīng)疼痛的作用。同時(shí)，有研究表明，靶向抑制嘌呤受體的各種亞型在阿片類藥物耐受的發(fā)生和維持中也發(fā)揮著重要的作用[19]，這說明APB和ATS均能通過抑制P2X7受體而緩解阿片耐受。因此，我們有理由相信APB和ATS可作為P2X7拮抗劑潛力藥物與傳統(tǒng)阿片類鎮(zhèn)痛藥物聯(lián)合使用，共同發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用。值得注意的是，本研究雖已證明APB和ATS的醇提物均有抗神經(jīng)病理性疼痛作用，但并未在其具體物質(zhì)基礎(chǔ)水平上進(jìn)行深入研究，這也是今后將繼續(xù)探索的方向。

綜上所述，APB和ATS均可顯著抑制ATP誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛，且通過TOPSIS法綜合分析可得，ATS在抗神經(jīng)病理性疼痛方面更具優(yōu)勢(shì)。