施永海，徐嘉波，嚴(yán)銀龍，張之文，劉永士，于愛清，鄧平平，蔣 飛，袁新程

（上海市水產(chǎn)研究所，上海市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，上海 200433）

美洲鰣（Alosa sapidissima），又名美洲西鯡，屬于鯡形總目（Clupeomorpha），鯡形目（Clupeiformes），鯡科（Clupeidae），西鯡屬，為洄游性魚類，原來主要分布于北美洲大西洋西岸海洋和通海河流中［1-3］，中國于1998年開始從美國引進(jìn)美洲鰣受精卵進(jìn)行人工繁養(yǎng)［4］。由于美洲鰣與中國鰣（Tenualosa reevesii）的外形相似、肉質(zhì)鮮美，美洲鰣也深受國內(nèi)市場的追捧，銷售價(jià)格較高［5-6］。近幾年，隨著美洲鰣全人工繁育技術(shù)的突破，國內(nèi)養(yǎng)殖量也日趨增長，苗種年投放量大概在200多萬尾。雖然美洲鰣人工繁育技術(shù)日趨完善，但在美洲鰣苗種培育早期，特別是仔魚內(nèi)源性營養(yǎng)階段成活率較低，這也成為美洲鰣規(guī)?；斯し庇募夹g(shù)瓶頸。營養(yǎng)支持對魚類早期發(fā)育（特別是內(nèi)源性營養(yǎng)階段和混合營養(yǎng)階段）至關(guān)重要，支撐魚類內(nèi)源性營養(yǎng)階段個(gè)體生長發(fā)育的營養(yǎng)和能量來源主要是儲(chǔ)存在其卵黃囊中的脂類，而且脂類還參與調(diào)節(jié)生理活動(dòng)和構(gòu)建器官組織［7-8］，所以，脂類含量和脂肪酸組分密切關(guān)系著魚類早期生命階段的生長、發(fā)育及存活［8-10］，特別是DHA和EPA是海水魚類早期發(fā)育的必需脂肪酸，仔稚魚階段是腦神經(jīng)和視神經(jīng)迅速發(fā)育的時(shí)期，仔稚魚需要大量的DHA等重要營養(yǎng)物質(zhì)，來滿足腦神經(jīng)和視神經(jīng)發(fā)育的需求［8，10］。了解魚類早期的營養(yǎng)利用有助于探究魚類在該發(fā)育階段的生命生理活動(dòng)，進(jìn)而從營養(yǎng)角度分析其生長和存活規(guī)律。因此，研究仔魚對脂類的利用和消耗有助于探究美洲鰣?jiān)缙诎l(fā)育階段成活率低的原因。

迄今有關(guān)魚類早期生命階段對脂肪酸利用的研究大多集中于海水或者淡水魚類，如：菊黃東方鲀（Takifugu flavidus）［10］、日本鬼鲉（Inimicus japonicus）［7］、條石鯛（Oplegnathus fasciatus）［8］、黃顙 魚（Pelteobagrus fulvidraco）［9］和白鰱（Hypophthalmichthys molitrix）［11］，而海淡水洄游性魚類發(fā)育早期對脂肪酸的利用相對比較特殊［12］，美洲鰣作為典型的溯河繁育、降海育肥的洄游性魚類，其內(nèi)源性營養(yǎng)階段對脂類的利用可能更為特殊。近年來，國內(nèi)外有關(guān)美洲鰣的脂類營養(yǎng)狀況和需求的研究主要集中于開口攝食后的仔魚脂肪酸組成［13］、當(dāng)年魚種的脂肪酸組成變化［4］、幼魚的脂肪需求［14-16］、成魚的肌肉營養(yǎng)成分分析［17-20］等。有關(guān)美洲鰣發(fā)育早期內(nèi)源性營養(yǎng)階段脂類代謝的研究目前尚未見公開報(bào)道。本文檢測了美洲鰣胚胎孵化期間和仔魚開口前的脂肪酸組成及含量，分析了美洲鰣胚胎出膜前后和仔魚開口前對脂肪酸的利用程度，旨在揭示美洲鰣發(fā)育早期對脂肪酸的利用規(guī)律，以期為提高美洲鰣發(fā)育早期仔魚成活率相關(guān)研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與處理

實(shí)驗(yàn)用美洲鰣的受精卵和仔魚來自上海市水產(chǎn)研究所奉賢科研基地，于2018年6月底到7月初全人工繁育獲得，親本培育和人工繁育方法參照張根玉等［1］和施永海等［5-6］。選取人工促產(chǎn)、自然交配、產(chǎn)卵受精的魚卵作為實(shí)驗(yàn)材料，魚卵從集卵箱收集、清洗后轉(zhuǎn)移到孵化池，孵化池為錐形底，水體為1.6 m3，每個(gè)孵化池內(nèi)設(shè)置2個(gè)氣石，孵化池上方約2 m處覆蓋雙層遮蔭率為90%的遮蔭膜，連續(xù)曝氣，靜水孵化，孵化密度為8～10萬?！こ?1，每天換水1次，每次換水總水體的2／3，溫度控制為（18.98±0.32）℃，仔魚孵化出膜后，還繼續(xù)在孵化池內(nèi)暫養(yǎng)至魚苗開口；采用解剖鏡吸管吸取的方法［12］分別獲取胚胎（原腸期）、0日齡和4日齡仔魚（攝食前），隨機(jī)取樣，用濾紙吸干表面水分，每個(gè)發(fā)育階段算一組，每組樣品分3個(gè)平行，每個(gè)平行按胚胎（15～17 g）和仔魚（2～3 g）取樣，再測算每組樣品單位質(zhì)量的個(gè)體數(shù)。樣品用離心管密封保存，先在-20℃的冰箱冷凍24 h，而后轉(zhuǎn)移到-76℃的冰箱保存。

1.2 樣品測定方法

用SIM冷凍干燥機(jī)（型號：FD5-3，產(chǎn)地：美國）采用真空凍干法測定水分，用真空干燥箱（型號：DZF-6020，產(chǎn)地：中國上海）采用氯仿甲醇法提取粗脂肪，用氣相色譜儀（型號：Agilent 6890，產(chǎn)地：美國）測定及色譜峰峰面積歸一法計(jì)算出脂肪酸相對含量（GB／T22223-2008）［4］。

1.3 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)

所有數(shù)據(jù)用mean±SD表示，采用Excel 2003和SPSS19.0處理數(shù)據(jù)。采用oneway ANOVA對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，如數(shù)據(jù)是百分?jǐn)?shù)，先用反正弦函數(shù)轉(zhuǎn)換后再方差分析，用Duncan法多重比較，以P＜0.05表示有顯著差異［4］。

1.4 計(jì)算公式［12］

單個(gè)個(gè)體的脂肪酸絕對含量（Mn，μg）：

胚胎出膜階段脂肪酸減少量（Mg，μg）：

胚胎出膜階段脂肪酸減少率（Rg，%）：

仔魚開口攝食前脂肪酸利用量（Mf，μg）：

仔魚開口攝食前脂肪酸利用率（Rf，%）：

式中，Mwt是單位鮮重的粗脂肪含量（%），C是各脂肪酸的相對含量（%），N是各發(fā)育時(shí)期每克鮮重的生物體個(gè)數(shù)，Mu、M0和M4分別是胚胎、0日齡仔魚、4日齡仔魚個(gè)體的脂肪酸絕對含量（μg）。

2 結(jié)果與分析

2.1 內(nèi)源性營養(yǎng)階段的水分和粗脂肪含量變化

美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段水分相對含量隨著個(gè)體的發(fā)育而顯著降低（P＜0.05），每個(gè)發(fā)育階段的水分含量均顯著高于下個(gè)階段（P＜0.05）（表1）。美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段干物質(zhì)的粗脂肪相對含量隨個(gè)體發(fā)育微弱升高，各階段之間無顯著性差異（P＞0.05）（表1）；鮮質(zhì)量的粗脂肪相對含量從胚胎的0.58%顯著上升至4日齡仔魚的2.25%（P＜0.05）（表1）；然而，由于個(gè)體發(fā)育消耗了體內(nèi)大量的營養(yǎng)物質(zhì)，單個(gè)個(gè)體質(zhì)量迅速下降，導(dǎo)致單個(gè)個(gè)體的粗脂肪絕對含量隨個(gè)體發(fā)育呈現(xiàn)顯著下降趨勢（P＜0.05），從胚胎的60.04μg顯著下降到4日齡仔魚的41.91μg（P＜0.05）（表1）。

表1 美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的水分和粗脂肪含量（n＝3）Tab.1 Moisture and crude fat content of Alosa sapidissima during endogenous nutrient stage（n＝3）

2.2 內(nèi)源性營養(yǎng)階段脂肪酸的組成變化

2.2.1 單個(gè)脂肪酸相對含量的變化

美洲鰣胚胎、0日齡和4日齡仔魚檢測到的22種脂肪酸相對含量見表2，內(nèi)源性營養(yǎng)階段各時(shí)期相對含量排前4的脂肪酸均分別是C16∶0、C18∶1n9c、C22∶6n3（二十二碳六烯酸，docosahexaenoic acid，DHA）和C18∶2n6c（表2）。

C16∶0相對含量較高（21.65%～23.06%），0日齡仔魚的C16∶0相對含量顯著高于胚胎和4日齡仔魚（P＜0.05），且胚胎和4日齡仔魚之間無顯著性差異（P＞0.05）；C18∶1n9c的相對含量豐富（19.02%～20.93%），其相對含量隨著個(gè)體的發(fā)育而顯著降低（P＜0.05）；C18∶2n6c相對含量相對較穩(wěn)定（12.33%～14.43%），其相對含量隨著個(gè)體的發(fā)育而顯著降低（P＜0.05），4日齡仔魚的C18∶2n6c相對含量顯著低于胚胎和0日齡仔魚（P＜0.05），而胚胎和0日齡仔魚之間的差異不顯著（P＞0.05）（表2）。

美洲鰣胚胎、0日齡和4日齡仔魚的C22∶6n3（DHA）均較豐富（15.02%～18.20%），其相對含量隨著個(gè)體的發(fā)育而顯著升高（P＜0.05），4日齡仔魚的C22∶6n3（DHA）相對含量顯著高于胚胎和0日齡仔魚（P＜0.05），而胚胎和0日齡仔魚之間無顯著性差異（P＞0.05）（表2）。美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的C20∶5n3（二十碳五烯酸，eicosapentaenoic acid，EPA）雖然相對含量不高（1.05%～1.49%），但其相對含量也隨個(gè)體發(fā)育而顯著上升（P＜0.05）（表2）。DHA和EPA含量均隨個(gè)體發(fā)育而上升的相似變化規(guī)律也使DHA+EPA隨個(gè)體發(fā)育呈現(xiàn)顯著的上升趨勢（P＜0.05），4日齡仔魚的DHA+EPA（19.69%）顯著高于胚胎和0日齡仔魚（P＜0.05），而胚胎和0日齡仔魚之間（分別是16.07%和16.63%）的差異不顯著（P＞0.05）（表2）。

2.2.2 SFA、MUFA和PUFA相對含量的變化

美洲鰣胚胎的SFA相對含量（32.39%）顯著低于4日齡仔魚的（33.53%）（P＜0.05），而0日齡仔魚SFA相對含量（33.39%）分別與胚胎以及4日齡仔魚的均無顯著變化（P＞0.05）（表2）。MUFA 的相對含量相對較低（20.92%～22.82%），且隨個(gè)體發(fā)育而顯著下降（P＜0.05）（表2）。美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的PUFA含量豐富且穩(wěn)定（44.76%～45.55%）（表2），胚胎、0日齡和4日齡仔魚之間的PUFA含量無顯著變化（P＞0.05）（表2）。

2.2.3 ∑SFA／∑UFA和∑n3PUFA／∑n6PUFA比率的變化

美洲鰣4日齡仔魚的∑SFA／∑UFA比例（0.50）顯著高于胚胎的（0.48）（P＜0.05）（表2）。美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的∑n3PUFA／∑n6PUFA比例隨生長發(fā)育而明顯上升（P＜0.05），其數(shù)值從0.69上升到0.94（表2），胚胎和0日齡仔魚的∑n3PUFA／∑n6PUFA比例顯著低于4日齡仔魚的（P＜0.05），而胚胎和0日齡仔魚之間的差異不顯著（P＞0.05）（表2）。

表2 美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的脂肪酸組成及相對含量（n＝3，%）Tab.2 Fatty acid composition and content of Alosa sapidissima during endogenous nutrient stage（n＝3，%）

2.3 內(nèi)源性營養(yǎng)階段單個(gè)個(gè)體的主要脂肪酸的絕對含量變化及利用

美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段單個(gè)個(gè)體中各脂肪酸的絕對含量見表3。由表3中各發(fā)育階段的脂肪酸絕對含量，依據(jù)公式可分別獲得主要脂肪酸在胚胎孵化出膜階段的減少量和減少率，以及在仔魚內(nèi)源營養(yǎng)階段的利用量和利用率（表4）。

美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的單個(gè)個(gè)體的脂肪酸絕對含量前4的分別為C16∶0、C18∶1n9c、C22∶6n3（DHA）和C18∶2n6c（表3）。隨著美洲鰣的個(gè)體發(fā)育以及卵膜的脫落，除了C24∶1n9絕對含量先略微下降（P＞0.05）再顯著上升（P＜0.05），C15∶0的絕對含量呈現(xiàn)顯著的先降后升趨勢（P＜0.05），C17∶1絕對含量先略微上升（P＞0.05）再顯著下降（P＜0.05），C17∶0、C20∶0、C20∶4n6、C20∶5n3（EPA）及C22∶6n3（DHA）的絕對含量無顯著變化外（P＞0.05），其余的14個(gè)脂肪酸絕對含量均呈現(xiàn)顯著的下降趨勢（P＜0.05）（表3）；多數(shù)脂肪酸下降的疊加效應(yīng)造成了單個(gè)個(gè)體的SFA、MUFA和PUFA絕對含量隨個(gè)體發(fā)育呈現(xiàn)顯著的下降趨勢（P＜0.05）（表3）。另外，EPA+DHA和∑n3PUFA絕對含量隨個(gè)體發(fā)育均無顯著性變化（P＞0.05），而∑n6PUFA絕對含量呈現(xiàn)顯著的下降趨勢（P＜0.05）（表3）。

表3 美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段單個(gè)個(gè)體的脂肪酸絕對含量（n＝3，μg）Tab.3 Fatty acid absolue content of individual Alosa sapidissima during endogenous nutrient stage（n＝3，μg）

美洲鰣胚胎孵化脫膜，由于個(gè)體發(fā)育、出膜以及卵膜的脫落等因素造成主要脂肪酸實(shí)際減少量前4的分別是C18∶1n9c（256.31μg）、C16∶0（154.55μg）、C18∶2n6c（141.93μg）和DHA（132.23μg）（表4）。比較單個(gè)個(gè)體中SFA、MUFA和PUFA 的實(shí)際減少量，PUFA 為最高（429.99μg）；從各主要脂肪酸的實(shí)際減少率來看，除了C20∶5n3（EPA），其他的主要脂肪酸減少率相對較均衡（11.72%～23.28%）（表4）；SFA、MUFA和PUFA減少率也較均衡，數(shù)值分別為13.22%、19.45%和15.98%。綜合減少量和減少率，胚胎孵化破膜以及卵膜的脫落過程中，C18∶1n9c的減少較多（分別為256.31μg和20.40%），更值得注意的是，C20∶5n3（EPA）減少量和減少率分別為-6.32μg和-10.00%（表4）。

表4 美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段單個(gè)個(gè)體的主要脂肪酸的利用程度Tab.4 Utilization degree of main fatty acids of individual Alosa sapidissima during endogenous nutrient stage

美洲鰣仔魚開口攝食前，單個(gè)個(gè)體的各主要脂肪酸的利用量前3的分別是C16∶0（256.35 μg）、C18∶2n6c（207.48μg）和C18∶1n9c（201.86 μg），利用量最少的兩個(gè)脂肪酸是EPA和DHA（分別是7.28μg和10.98μg）（表4）；比較單個(gè)個(gè)體SFA、MUFA和PUFA的實(shí)際利用量，PUFA為最高（355.49μg）。單個(gè)個(gè)體各主要脂肪酸的利用率前4的分別是C18∶2n6c（28.64%）、C18∶3n6（26.53%）、C16∶0（22.02%）和C18∶1n9c（20.18%），利用率最少的3個(gè)脂肪酸是DHA、C18∶0和EPA（分別是1.42%、2.96%和10.47%）（表4）。SFA、MUFA和PUFA利用率較均衡，數(shù)值分別為16.59%、20.37%和15.73%（表4）。綜合利用量和利用率，仔魚開口攝食前，利用較多的單個(gè)脂肪酸是C16∶0、C18∶2n6c和C18∶1n9c；值得注意是，美洲鰣開口前仔魚對∑n6PUFA的占用較多（295.41μg和23.81%），對∑n3PUFA的占用較少（38.67μg和4.19%），尤其對DHA+EPA的占用更少（18.26μg和2.17%）（表4）。

3 討論

3.1 美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的粗脂肪含量及脂肪酸組分的特征

美洲鰣受精卵和開口前仔魚的干物質(zhì)粗脂肪相對含量（16.33%～19.13%）與其他一些海水魚類早期發(fā)育階段干物質(zhì)粗脂肪含量相似：如，條石鯛（9.27%～23.77%）［8］、日本鬼鲉（13.85%～11.66%）［7］和菊黃東方鲀（21.27%～31.70%）［10］；美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段的干物質(zhì)粗脂肪含量遠(yuǎn)低于同是洄游性魚類的長江刀鱭（Coilia nasus）（53.10%～60.97%）［12］，但由于美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段個(gè)體較大：受精卵的直徑［（4.03±0.25）mm］［2］遠(yuǎn)大于長江刀鱭的［（0.91±0.02）mm］［21］，造成美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段單個(gè)個(gè)體的粗脂肪量（41.91 μg～60.04 μg）高于長江刀鱭（16.27μg～43.62μg）。另外，相對于長江刀鱭單個(gè)個(gè)體在開口攝食前消耗掉62.70%的粗脂肪，美洲鰣單個(gè)個(gè)體開口前（4日齡仔魚）只消耗掉30.20%的粗脂肪，這說明美洲鰣仔魚開口攝食時(shí)，其體內(nèi)還有較多脂類（41.91μg，占原有的69.80%）被留存，這從理論上解釋了美洲鰣仔魚開口攝食后混合營養(yǎng)階段較長的原因。

魚類為變溫動(dòng)物，其脂肪中含有能降低脂肪酸熔點(diǎn)的n3PUFA，可維系細(xì)胞膜的滲透性和流動(dòng)性［22］。海水魚類因需要調(diào)節(jié)滲透壓，其脂肪中含有較高n3PUFA以更好地維系良好的細(xì)胞膜通透 性［10，23］。相對于淡水魚類，海水魚類的∑n3PUFA／∑n6PUFA較高，在內(nèi)源性階段，其比值一般高于2，如：日本鬼鲉（2.74～3.98）［7］、條石鯛（6.18～7.62）［8］和菊黃東方鲀（5.26～6.55）［10］。而美洲鰣發(fā)育早期內(nèi)源性階段的∑n3PUFA／∑n6PUFA較低（0.69～0.94），其特征更接近淡水魚類，如：黃顙魚的受精卵（1.22～1.35）和開口前仔魚（1.19～2.26）［9］、鰱（Hypophthalmichthys molitrix）受精卵及仔魚（0.65～2.68）［11］、刺鲃（Spinibarbus caldwelli）魚卵（0.45）［24］、鯉（Cyprinus carpio）魚 卵（0.43）［25］和鯽（Carassius auratus）魚卵（0.88）［25］，美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段較低的∑n3PUFA／∑n6PUFA比值也符合其生態(tài)洄游的習(xí)性，美洲鰣親魚從海里上溯到江河淡水環(huán)境中繁育，其早期發(fā)育階段均生活在淡水環(huán)境中，一般到當(dāng)年的秋冬季，幼魚隨江河流水進(jìn)入海洋越冬［4］。但美洲鰣幼魚進(jìn)入海洋越冬前，為了適應(yīng)外界鹽度和低水溫，需要更多的n3PUFA來維系細(xì)胞膜良好的滲透性和流動(dòng)性。因此，美洲鰣仔稚幼魚發(fā)育期間有必要增加投喂富含n3PUFA的飼料，讓魚體內(nèi)提前積累n3PUFA，提高美洲鰣對外界鹽度和低水溫的耐受力。

3.2 美洲鰣各生長發(fā)育階段的脂肪酸組分比較

美洲鰣魚卵［26］、胚胎、開口前仔魚、當(dāng)年魚種魚體［4］、江蘇養(yǎng)成的成魚肌肉［20］之間的大多數(shù)脂肪酸組成及含量相近，而與攝食飼料的仔魚、攝食鹵蟲的仔魚［13］以及廣東養(yǎng)殖的成魚肌肉［18］差異較大：美洲鰣魚卵、胚胎、開口前仔魚、當(dāng)年魚種魚體、江蘇養(yǎng)成的成魚肌肉之間的脂肪酸含量較多的均是C18∶1n9c、C16∶0、C18∶2n6c和C18∶0［4，20，26］。仔魚分別攝食鹵蟲和配合飼料后，其脂肪酸組分差異較大，如：C18∶1n9c（分別為32.54%和19.66%）、C16∶0（分別為10.41%和24.52%）和DHA（分別為0.26%10.71%）［13］，美洲鰣當(dāng)年魚種魚體和江蘇養(yǎng)殖的成魚肌肉的∑ n3PUFA、∑ n6PUFA、∑ SFA／∑ UFA、∑n3PUFA／∑n6PUFA（分別是3.65%～6.99%和3.65%、21.22%～27.12%和18.04%、0.40～0.58和0.45、0.15～0.29和0.20）［4，20］與廣東養(yǎng)殖成魚肌肉［18］（分別是0.93%、44.06%、0.85和0.02）相差較大，同時(shí)廣東養(yǎng)殖成魚肌肉脂肪酸主要是C16∶0和C18∶2n6c，兩者加起來的百分含量達(dá)到67.66%，其C18∶0和C18∶1n9c的百分含量非常少，分別是0.79%和0.95%［18］，造成這些現(xiàn)象的原因可能與飼料的脂肪酸組成有關(guān)。

魚卵脂類不僅是內(nèi)源性營養(yǎng)階段的主要能量來源，還參與構(gòu)建機(jī)體的組織和調(diào)節(jié)生理活動(dòng)，因此，脂類及脂肪酸的含量與內(nèi)源性營養(yǎng)階段的發(fā)育及存活有著密切的關(guān)系［10］。同時(shí)，美洲鰣（特別是親本）肌肉的營養(yǎng)蓄存與其所產(chǎn)魚卵的營養(yǎng)水平存在密切關(guān)系［10］。美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段（魚卵［26］、胚胎和開口攝食前仔魚）的∑n3PUFA含量（13.16%～21.16%），特別是EPA+DHA的含量（12.02%～19.69%）遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于江蘇［20］和廣東［18］養(yǎng)殖成魚肌肉的含量（分別為3.65%和0.93%、0.69%和0.65%），同時(shí)美洲鰣魚卵［26］、胚胎和開口前仔魚的∑n3PUFA／∑n6PUFA雖然已經(jīng)很低（0.51～0.94），但還是明顯高于其養(yǎng)殖成魚肌肉的（0.02～0.20）［18，20］（表5）。因此，美洲鰣人工繁殖前，要挑選營養(yǎng)狀況優(yōu)良的成魚作為后備親本，同時(shí)在親本培育期間，增加喂食富含n3PUFA（如DHA）的飼料，以加強(qiáng)美洲鰣親本營養(yǎng)積累。

3.3 美洲鰣胚胎出膜階段脂肪酸變化的特點(diǎn)

魚類的胚胎發(fā)育和出膜期間，脂類下降包括兩個(gè)方面：一方面是胚胎發(fā)育及出膜等生理和生命活動(dòng)需要消耗大量體內(nèi)能量，脂類作為魚卵中能量儲(chǔ)存的主要營養(yǎng)物質(zhì)也隨之消耗；另一方面是卵膜的脫落造成結(jié)合在卵膜的脂類也跟隨丟失［11-12］。本研究中，美洲鰣干物質(zhì)的粗脂肪含量在胚胎和0日齡仔魚之間的差異不顯著，而個(gè)體的粗脂肪含量顯著下降。從單個(gè)脂肪酸來看，主要脂肪酸中實(shí)際減少量前4的分別是C18∶1n9c、C16∶0、C18∶2n6c和DHA。綜合減少量和減少率，胚胎孵化破膜過程中，C18∶1n9c的減少較多（分別為256.31μg和20.40%），DHA也有較大程度的減少（分別為132.23 μg和14.64%）；更值得注意的是，C20∶5n3（EPA）有所增加（減少量和減少率分別為-6.32μg和-10.00%）。因此，可以推斷，美洲鰣胚胎出膜階段，EPA被先行留存，而DHA被大量利用。雖然有研究表明有些魚類品種的發(fā)育初期有先期留存n3PUFA的征象，如：大黃魚（Pseudosciaena crocea）［23］、菊黃東方鲀［10］和長江刀鱭［12］等；但美洲鰣胚胎發(fā)育期間出現(xiàn)EPA暫存、DHA被大量利用的現(xiàn)象還比較少見，這也說明DHA在美洲鰣胚胎發(fā)育中的重要性。另外，EPA有所增加的原因，除了由于脂肪消耗對EPA的蓄留外，也可能是美洲鰣胚胎具有把短鏈的18C-PUFA轉(zhuǎn)變成長鏈的20C或22C-HUFA的功能［9，11］。

3.4 美洲鰣仔魚開口攝食前階段對脂肪酸利用的特點(diǎn)

研究證實(shí)，海水魚類自身一般不能合成n3PUFA，n3PUFA是需要通過食物鏈來攝食獲取的，n3PUFA 被認(rèn)為是海水魚類的必需脂肪酸［10］，如在魚類發(fā)育早期就必須要有足夠量的DHA等脂肪酸來滿足神經(jīng)系統(tǒng)快速發(fā)育的需求［10］。本研究中，美洲鰣仔魚開口攝食前，對脂肪酸的消耗是有先后順序的：n6PUFA＞MUFA＞SFA＞n3PUFA，特別是n6PUFA中的C18∶2n6c和C18∶3n6、SFA中的C16∶0、MUFA中的C18∶1n9c優(yōu)先被仔魚利用，證明n6PUFA對美洲鰣開口前仔魚提供能量的重要性，而n3PUFA利用量和利用率極低（38.67μg和4.19%），尤其是EPA+DHA（18.26μg和2.17%），造成這種現(xiàn)象的原因可能有兩個(gè)方面：一方面是美洲鰣?jiān)缙谧恤~對DHA和EPA的暫存，DHA和EPA未被動(dòng)用可能因?yàn)樗羌?xì)胞膜的必需成分，對維系細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性極為重要［9］；另一方面是美洲鰣仔魚可能啟動(dòng)了生物轉(zhuǎn)化功能（即把短C鏈的脂肪酸轉(zhuǎn)化合成為長C鏈的PUFA），仔魚把18C-PUFA（如：C18∶2n6c、C18∶3n6）轉(zhuǎn)變成20C或22C-HUFA［9］，美洲鰣開口前仔魚 對C18∶2n6c、C18∶3n6的利用量和利用率數(shù)據(jù)上也有體現(xiàn)：C18∶2n6c（207.48μg和28.64%）和C18∶3n6（48.77μg和26.53%）。美洲鰣仔魚的生物轉(zhuǎn)化能力在其他淡水和河口性魚類上也已經(jīng)有發(fā)現(xiàn)，如黃顙魚［9］和鰱（Hypophthalmichthys molitrix）［11］，但海洋魚類是不具備的［11］。這也說明美洲鰣?jiān)缙谧恤~具有對脂肪酸的生物轉(zhuǎn)化能力，呈現(xiàn)了淡水魚類的特點(diǎn)。

3.5 美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段脂肪酸利用特點(diǎn)與仔魚存活

DHA與EPA是公認(rèn)的動(dòng)物生長發(fā)育的必要脂肪酸［27］，魚類內(nèi)源性營養(yǎng)階段是魚類神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的快速期，此階段就需要消耗大量的DHA來維系和支持其需求［9］。本研究中，美洲鰣胚胎發(fā)育期間對DHA的大量消耗，可能會(huì)造成初孵仔魚體內(nèi)DHA的匱乏，較低水平的DHA可導(dǎo)致剛出膜的仔魚對環(huán)境響應(yīng)水平的下降，以至于仔魚的死亡［28］，這或許是造成美洲鰣胚胎出膜后到仔魚開口前的階段成活率較低的一個(gè)原因。因此，在美洲鰣親本培育和促產(chǎn)期間，要投喂富含DHA的飼料，以及時(shí)將DHA補(bǔ)充到親本體內(nèi)及轉(zhuǎn)化到卵巢及魚卵中。

4 小結(jié)

美洲鰣內(nèi)源性營養(yǎng)階段，單個(gè)個(gè)體的粗脂肪含量較高，仔魚開口前只消耗掉其中的30.20%。各時(shí)期的相對含量排前4的脂肪酸均分別是C16∶0、C18∶1n9c、C22∶6n3（DHA）和C18∶2n6c，其∑n3PUFA／∑n6PUFA較低。胚胎出膜階段，EPA被先期暫存；開口攝食前，仔魚對脂肪酸利用的先后順序?yàn)椋簄6PUFA ＞MUFA ＞SFA ＞n3PUFA，n3PUFA被優(yōu)先保存，尤其是EPA+DHA。因此，建議美洲鰣親本培育和促產(chǎn)期間，增加投喂富含∑n3PUFA（特別是DHA）的飼料，以增強(qiáng)親本營養(yǎng)積累和及時(shí)補(bǔ)充∑n3PUFA（特別是DHA）到親本體內(nèi)，增加魚卵營養(yǎng)儲(chǔ)備，進(jìn)而提高美洲鰣開口前仔魚的成活率。