汪秀娟 ， 王德平

（1.安徽霍邱縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，安徽六安 237400；2.安徽廣通生物科技有限公司，安徽六安 237000）

犢牛是牧場(chǎng)的未來(lái)和希望，影響著牧場(chǎng)長(zhǎng)遠(yuǎn)的發(fā)展，犢牛的精細(xì)化飼養(yǎng)管理是牧場(chǎng)重要工作。 新生犢牛的瘤胃、 蜂巢胃和重瓣胃發(fā)育尚未成熟較小，而真胃或皺胃相對(duì)較大。初生時(shí)瘤胃-蜂巢胃的容積總計(jì)只有1.2 L，相當(dāng)成年牛的1/150；而真胃的容積達(dá)到2 L，相當(dāng)成年牛的1/4.5。 新生犢牛瘤-蜂巢胃中沒(méi)有與牛共生的細(xì)菌區(qū)系， 大約到49 d時(shí)完整的細(xì)菌區(qū)才開(kāi)始形成。 初生犢牛的腸胃空虛，其第四胃和腸壁上無(wú)黏膜覆蓋，易被病源性微生物侵襲（趙廣永，2012）。犢牛消化酶分泌不足，消化能力很弱，因此，需要提供一些容易消化吸收的預(yù)消化脂肪、糖類和酵解飼料，如乳化脂肪粉、乳清粉、葡萄糖、蔗糖、發(fā)酵豆粕、膨化大豆和酵母培養(yǎng)物等。 張乃鋒等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，代乳粉中植物蛋白質(zhì)小于50%時(shí)，有利于犢牛健康以及由母乳到代乳粉的過(guò)渡。 飼喂富含消化率高、適口性好和抗?fàn)I養(yǎng)因子低的口感化開(kāi)食料時(shí)可以提高哺乳期犢牛的采食量和日增重， 且有助于犢牛提前斷奶（Franklin 等，2003；Warner 等，1990、1973）。

目前，研究大多是在探討乳化脂肪、復(fù)合糖類和酵解飼料對(duì)犢牛生產(chǎn)性能的影響。 但是，乳化脂肪、復(fù)合糖類和酵解飼料在提高犢牛生產(chǎn)性能上是否存在組合效應(yīng)還不清楚。為此，本試驗(yàn)擬探討乳化脂肪、復(fù)合糖類和酵解飼料組合對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率及瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響，旨在為犢牛養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)踐中更好利用預(yù)消化產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料試驗(yàn)品制備 參照專利“一種飼用乳狀速溶脂肪粉的制得方法”（程茂基等，2021）（申請(qǐng)?zhí)枺?02111181315.7）， 將碎米、玉米和豆粕先粗粉后超微粉碎至300 目以上，制得超微粉碎米、超微粉玉米和超微粉豆粕。將微粉碎米、 超微粉玉米和超微粉豆粕先高壓膨化再烘烤爆破后制得膨化烘烤爆破碎米、 膨化烘烤爆破玉米和膨化烘烤爆破豆粕。 將膨化烘烤爆破碎米、膨化烘烤爆破玉米、膨化烘烤爆破豆粕、酵母菌種液、乳酸菌種液、復(fù)合酶、葡萄糖和干凈水混合均勻，在大劑量添加復(fù)合酶制劑和連續(xù)持續(xù)攪拌條件下固態(tài)酶解發(fā)酵后制得速溶酵解飼料。 將大豆油、椰子油、玉米油、乳化劑和干凈水混合均勻后，乳化均質(zhì)后制得乳化油脂。 將速溶酵解飼料、乳化油脂、麥芽糊精、乳清粉、全脂奶粉、蔗糖和低聚糖混合均勻，干燥后制得速溶酶解發(fā)酵乳化飼料。 該速溶酶解發(fā)酵乳化飼料由安徽五糧泰生物工程股份有限公司生產(chǎn)制備并提供。其外觀呈現(xiàn)乳白色不規(guī)則細(xì)小顆粒，100%能夠快速溶于水，水溶液呈現(xiàn)乳白色，粗脂肪含量在10%以上， 乳化脂肪含量在9.5%以上， 蛋白質(zhì)含量在18%以上， 可溶性總糖含量在65%以上，乳酸含量在0.5%以上，無(wú)抗原多肽含量在15.0%以上，益生菌含量在0.5×104cfu/g 以上。 其營(yíng)養(yǎng)成分詳見(jiàn)表1，氨基酸含量見(jiàn)表2，開(kāi)口料日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表3。

表1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料主要營(yíng)養(yǎng)成分

表2 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料氨基酸含量（實(shí)測(cè)均值）%

表3 犢牛開(kāi)口料日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在安徽某萬(wàn)頭奶牛場(chǎng)進(jìn)行，采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選取100 頭中國(guó)荷斯坦?fàn)倥＃?隨機(jī)分成5 組， 每組20頭牛。 分別自由采食對(duì)照組料、試驗(yàn)1 組料（4.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料）、試驗(yàn)2 組料（8.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料）、試驗(yàn)3 組料（12.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料）和試驗(yàn)4 組料（16.0%速溶酶解發(fā)酵乳化飼料）。對(duì)照組和試驗(yàn)組的日糧營(yíng)養(yǎng)水平基本等同一致。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)犢牛出生后，1 h 內(nèi)飼喂4 L初乳，6 ～8 h 第2 次2 L， 然后放在犢牛島飼喂，試驗(yàn)期為55 d，試驗(yàn)期間犢牛自由飲水，犢牛開(kāi)口料從5 日齡開(kāi)始自由采食， 飼喂至60 日齡結(jié)束。在5 和60 日齡晨飼前進(jìn)行稱重，60 日齡晨飼前胃管法采集瘤胃液。試驗(yàn)期間每天記錄采食量。試驗(yàn)犢牛哺乳期（1 ～60 日齡） 內(nèi)， 總飼喂奶量414 L，具體如表4。

表4 試驗(yàn)犢牛哺乳期喂奶流程

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 于5 日齡和60 日齡早上，以個(gè)體為單位對(duì)所有試驗(yàn)犢牛進(jìn)行空腹稱重；試驗(yàn)開(kāi)始后， 每天記錄每頭牛采食前的投料量及采食后的剩料量， 試驗(yàn)過(guò)程中詳細(xì)觀察與記錄犢牛健康等情況。計(jì)算平均日增重、開(kāi)口料干物質(zhì)采食量等指標(biāo)。

1.4.2 養(yǎng)分消化率的測(cè)定 飼糧采樣采用四分法，每組取500 g 樣品放在樣品袋中并做好記號(hào)，-20 ℃保存。 于試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，每頭犢牛采集糞樣500 g， 同一組所有犢牛糞樣攪拌混合均勻后，加入體積分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸溶液以防止氨氣的揮發(fā)變質(zhì)， 并做好記錄， 將樣品置于-20 ℃保存待用。 飼糧和糞便中干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、粗脂肪（EE）、鈣（Ca）和磷（P）的含量測(cè)定按照飼料常規(guī)分析方法進(jìn)行（張麗英，2003）。養(yǎng)分消化率以鹽酸不溶灰分為指示劑， 測(cè)定方法參照GB/T 23742-2009）進(jìn)行，計(jì)算公式如下：某養(yǎng)分消化率/%=[1-（A1×F2）/（A2×F1）]×100；式中：F1 和F2分別為飼糧和糞便中該養(yǎng)分含量，%；A1 和A2 分別為飼糧和糞便中鹽酸不溶灰分含量，%。

1.4.3 犢牛腹瀉率的測(cè)定 試驗(yàn)過(guò)程中， 于每天早晨7 點(diǎn)對(duì)每頭犢牛進(jìn)行糞便評(píng)分， 參照王建紅等（2011）采用的五分制糞便評(píng)分法，以評(píng)分≥3記為一次腹瀉，并根據(jù)以下公式計(jì)算腹瀉率：腹瀉率/%=腹瀉頭次數(shù)/（犢牛頭數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）×100。

1.4.4 瘤胃液的采集與測(cè)定 分別于犢牛35 和60日齡早晨飼喂前，采用胃管法采集瘤胃液，并立即測(cè)定pH，然后經(jīng)4 層無(wú)菌紗布過(guò)濾，分裝于5 mL 離心管中，于-20 ℃冰箱保存，用于測(cè)定揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度和氨態(tài)氮含量（毛宏祥等，2019）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），多重比較用Duncan’s 法進(jìn)行。 數(shù)據(jù)結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P＜0.05 表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響 由表5 可知，試驗(yàn)1 組末重、日增重和采食量與對(duì)照組比差異不顯著（P＞0.05），腹瀉率比對(duì)照組降低71.40%（P＜0.05）；試驗(yàn)2 組末重與對(duì)照組比差異不顯著（P＞0.05），日增重、采食量分別比對(duì)照組提高2.71%和6.31%（P＜0.05），腹瀉率比對(duì)照組降低92.20%（P＜0.05）；試驗(yàn)3 組和試驗(yàn)4 組末重分別比對(duì)照組提高4.57%和6.48%（P＜0.05），日增重分別提高10.81%和13.38%（P＜0.05），采食量分別提高19.02%和24.43%（P＜0.05），腹瀉率分別降低94.26%和95.54%（P＜0.05）。

表5 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響

2.2 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛養(yǎng)分消化率的影響 從表6 結(jié)果可知， 試驗(yàn)1 組干物質(zhì)消化率和粗蛋白質(zhì)消化率分別比對(duì)照組提高3.37%和4.91%（P＜0.05），試驗(yàn)1 組粗脂肪、鈣和磷消化率與對(duì)照組相比有提高趨勢(shì)，但差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)2 組、試驗(yàn)3 組和試驗(yàn)4 組干物質(zhì)消化率分別比對(duì)照組提高5.73%、8.57%和10.77%（P＜0.05）， 粗蛋白質(zhì)消化率分別比對(duì)照組提高7.95%、9.59%和11.60%（P＜0.05），粗脂肪消化率分別比對(duì)照組提高4.00%、5.90%和7.67%（P＜0.05），鈣消化率分別比對(duì)照組提高5.54%、8.34%和13.39%（P＜0.05）， 磷消化率分別比對(duì)照組提高6.91%、9.40%和11.94%（P＜0.05）。

表6 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛養(yǎng)分消化率的影響%

2.3 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 從表7 結(jié)果可知，與對(duì)照組相比，日糧中添加速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，犢牛瘤胃所有發(fā)酵參數(shù)均有改善。試驗(yàn)1 組35 和60 日齡丁酸含量較對(duì)照組提高3.08%和3.37%（P＜0.05），35 和60 日齡乙酸和乙酸/丙酸含量較對(duì)照組降低5.88%和6.45%（P＜0.05），其他指標(biāo)與對(duì)照組比差異不顯著（P＞0.05）； 試驗(yàn)2、3、4 組的35 和60 日齡所有指標(biāo)與對(duì)照組比均具有顯著性差異（P＜0.05），其中試驗(yàn)2、3、4 組60 日齡氨態(tài)氮含量分別較對(duì)照組降低4.56%、5.67%和8.92%（P＜0.05），60 日齡揮發(fā)性脂肪酸含量較對(duì)照組提高3.33%、4.88%和7.21%（P＜0.05），60 日齡乙酸/丙酸含量較對(duì)照組降低10.48%、15.32%和18.55%（P＜0.05）。

表7 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

3 討論

3.1 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料制造工藝特色與優(yōu)勢(shì) 近年來(lái)，飼料體外預(yù)消化技術(shù)在世界范圍內(nèi)倍受關(guān)注（權(quán)志中等，2011；章世元等，2002）。玉米、碎米、 豆粕和大豆油是廣泛應(yīng)用的植物性飼料原料，但是由于其中存在的抗?fàn)I養(yǎng)因子和難以消化成分限制了其在仔豬、犢牛和羔羊日糧中的應(yīng)用。 飼料酶解發(fā)酵可以提高飼料中蛋白質(zhì)溶解度，降低飼料中蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量，其中一部分已達(dá)到小肽水平甚至氨基酸水平，可以直接被動(dòng)物吸收，提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能（袁衛(wèi)東等，2013）。 油脂乳化將大分子油脂變成乳糜微粒，能夠防止油脂氧化酸敗，提高油脂適口性和消化率（朱榮生等，2009）。 大豆分離蛋白在酶解開(kāi)始10 min 后， 抗原活性有明顯下降的趨勢(shì)，大多數(shù)分子質(zhì)量在30 Ku 以下的多肽中的抗原已經(jīng)被破壞消除。 但是，β-伴大豆球蛋白中的α-亞基中分子質(zhì)量21 Ku 的多肽抗原剩余率仍然達(dá)到15.7%。 結(jié)果表明，酶解是難以破壞消除大豆抗原的（王章存等，2019）。 本試驗(yàn)產(chǎn)品速溶酶解發(fā)酵乳化飼料是采用納米超微粉碎、 高壓雙螺桿膨化、高壓烘烤爆破、差溫酶解異步發(fā)酵、植物油蛋白糖酸菌基均質(zhì)乳化、摻拌糖粉包被和氣流閃蒸干燥等工藝裝備生產(chǎn)制造，油脂微囊化包被壁材選取麥芽糊精、蔗糖、果糖、葡萄糖、低聚糖、全脂奶粉、乳清粉、大豆分離蛋白和大米蛋白。因此，速溶酶解發(fā)酵乳化飼料產(chǎn)品中既含有乳化油和復(fù)合糖，又含有酵解蛋白，既含有乳酸和膳食纖維，又含有益生活菌，乃是一種富含包被乳化脂肪、可溶性蛋白、活性小肽、麥芽糊精、麥芽糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、低聚糖、乳糖、有機(jī)酸、可溶性膳食纖維、益生菌、生物酶等生物活性養(yǎng)分和具有入口即化無(wú)渣、 醬香濃郁、抗?fàn)I養(yǎng)因子含量低、適口性好、采食量高、易消化吸收、促生長(zhǎng)性能好等特點(diǎn)的生物預(yù)消化產(chǎn)品。

3.2 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響 犢牛開(kāi)口料中的蛋白原料， 乳蛋白利用率往往高于植物蛋白， 植物蛋白中以大豆蛋白消化率最高。黃開(kāi)武等（2015）在21 日齡荷斯坦?fàn)倥Ｈ占Z中用植物蛋白替代乳蛋白后， 結(jié)果表明植物源蛋白質(zhì)的消化率低于乳源蛋白質(zhì)， 但相對(duì)于乳源蛋白質(zhì)， 植物源蛋白質(zhì)可以促進(jìn)犢牛瘤胃盡早發(fā)育。楊亮等（2017）分別以葡萄糖、乳清粉和熟化玉米粉為主要糖源配制黑安格斯?fàn)倥４榱希?結(jié)果顯示，乳糖效果最好，葡萄糖次之，熟化玉米粉則在前期效果不佳， 但隨著犢牛日齡的增加效果逐漸改善。關(guān)于犢牛開(kāi)口料中的脂肪來(lái)源，往往乳脂消化率最好，乳化植物油次之，植物油效果最差。胡鳳明等（2018）在哺乳期犢牛日糧，以椰子油和棕櫚油替代代乳品中的乳脂， 椰子油和棕櫚油替代乳脂改變了代乳品中的脂肪酸組成， 但不同脂肪酸組成的代乳品對(duì)哺乳期犢牛生長(zhǎng)性能和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝無(wú)顯著影響。 張蓉等（2008）研究顯示，13%脂肪犢牛代乳粉組日增重最高，17%脂肪組犢牛的采食量受到抑制。 對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物單方面處理，在替代乳制品后，效果往往達(dá)不到理想效果， 但是對(duì)三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)整體預(yù)處理后，效果往往會(huì)有累加效應(yīng)。本試驗(yàn)所用速溶酶解發(fā)酵乳化飼料系整體預(yù)消化原料，是乳化脂肪、復(fù)合糖類和酵解飼料的組合。試驗(yàn)結(jié)果顯示，在犢牛開(kāi)口料中替代乳制品、發(fā)酵豆粕、淀粉糖等優(yōu)質(zhì)原料后，犢牛生產(chǎn)性能隨著添加量的增大，各指標(biāo)都得到顯著性提高。

3.3 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛養(yǎng)分消化率的影響 本試驗(yàn)在犢牛日糧中按照不同比例添加發(fā)酵乳化飼料后，結(jié)果顯示，干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)消化率均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)1 組粗脂肪、鈣和磷消化率高于對(duì)照組， 但差異不顯著 （P＞0.05），其他處理組粗脂肪、鈣和磷消化率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。 說(shuō)明整體預(yù)化技術(shù)在犢牛日糧中可提高養(yǎng)分利用率。 另有研究表明，在犢牛日糧中使用乳清粉、葡萄糖和熟化玉米粉，熟化玉米組干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)消化率顯著低于乳清粉組和葡萄糖組， 說(shuō)明養(yǎng)分的消化利用率與能量來(lái)源有關(guān)（張蓉等，2008）。犢牛體內(nèi)乳糖酶含量較高，犢牛對(duì)乳清粉中乳糖利用率高（Bernard 等，2013），葡萄糖為單糖，不需要消化酶，可直接被犢牛消化吸收。張蓉等（2008）研究結(jié)果表明，10%的復(fù)合葡萄糖可替代乳糖應(yīng)用于整個(gè)哺乳期犢牛飼養(yǎng)，而10%的復(fù)合淀粉最好用于飼喂1 月齡以上的犢牛。

3.4 速溶酶解發(fā)酵乳化飼料對(duì)犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 氨態(tài)氮是瘤胃微生物蛋白質(zhì)合成的主要氮源，微生物對(duì)飼糧蛋白質(zhì)的利用率隨微生物活性的增加而增加（Hosseini 等，2019）。 本試驗(yàn)飼喂速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后， 瘤胃中氨態(tài)氮含量降低，說(shuō)明瘤胃微生物活躍度增加， 對(duì)氨態(tài)氮的利用增加，隨著日齡的增加，氨態(tài)氮含量整體降低，可能是瘤胃細(xì)菌增加了利用氨態(tài)氮合成菌體蛋白的能力。總揮發(fā)性脂肪酸（VFA）來(lái)自于飼糧中碳水化合物的發(fā)酵，是碳水化合物分解的終物質(zhì)，也是反芻動(dòng)物維持和生產(chǎn)的主要養(yǎng)分和能量來(lái)源，可為反芻動(dòng)物供給總能量的70%~80%（毛宏祥等，2019）。 本研究在添加速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后， 各處理組VFA 含量均得到提高， 且隨著速溶酶解發(fā)酵乳化飼料添加量的增多，提高幅度越大，這與前面犢牛日增重提高相吻合。 另有研究表明，犢牛熟化顆粒料效果優(yōu)于普通顆粒料（付瑤等，2020），發(fā)酵豆粕和玉米蛋白粉等蛋白原料可提高犢牛生長(zhǎng)性能且能降低斷奶應(yīng)激（姜鑫等，2020；王曉平等，2019；張?jiān)獞c等，2010）， 玉米和大豆經(jīng)過(guò)蒸汽壓片預(yù)處理后，有助于犢牛瘤胃的發(fā)酵和發(fā)育，以上研究結(jié)果表明，熟化、發(fā)酵、蒸汽壓片等預(yù)處理方式，均可以提高犢牛生長(zhǎng)性能，與本研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

中國(guó)荷斯坦?fàn)倥ｉ_(kāi)口料中添加不同比例的速溶酶解發(fā)酵乳化飼料后，犢牛末重、開(kāi)口料干物質(zhì)采食量和日均增重均有不同程度的提高， 日糧養(yǎng)分消化率得到不同程度的提高， 腹瀉率不同程度的降低，并且可促進(jìn)瘤胃的發(fā)育和功能的健全。