藍(lán)航蓮，施 悅，張麗娜,*，周 鵬

（1.內(nèi)蒙古乳業(yè)技術(shù)研究院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110；2.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無錫 214122）

母乳作為嬰兒的“黃金食品”，不僅為嬰兒的生長(zhǎng)發(fā)育提供完整的營養(yǎng)物質(zhì)，且含有多種生物活性成分，例如活性蛋白、活性脂類、低聚糖及生長(zhǎng)因子等，在嬰兒腸道微生物菌群的定植及免疫系統(tǒng)的建立及完善中發(fā)揮著重要的作用。

低聚糖是乳中的一類生物活性成分，具有多種功能活性。首先，低聚糖可作為益生元刺激益生菌生長(zhǎng)。其在胃中難以被消化，通過腸道下部?jī)?nèi)源性微生物群發(fā)酵產(chǎn)生短鏈脂肪酸。短鏈脂肪酸可為腸黏膜細(xì)胞提供能量；此外，還能夠增加腸道滲透壓，加速腸道蠕動(dòng)，軟化腸道內(nèi)容物，促進(jìn)排便；同時(shí)還可降低腸道內(nèi)pH值以提供酸性環(huán)境，抑制有害菌的定植和生長(zhǎng)，維持腸道內(nèi)菌群正常化。其次，低聚糖具有顯著的抗病毒活性，其結(jié)構(gòu)與腸黏膜細(xì)胞上的糖脂/糖蛋白相似，可以干擾病原體與腸黏膜的結(jié)合，以保護(hù)嬰兒免受腸道有害菌及其他病原體的侵害。再次，低聚糖在抗炎、免疫調(diào)節(jié)、促進(jìn)大腦發(fā)育等方面也具有一定的作用。

低聚糖不僅存在于人乳中，山羊、牛、豬、駱駝等哺乳動(dòng)物的初乳和成熟乳中也存在多種低聚糖。低聚糖一般由3～10個(gè)單糖通過糖苷鍵連接而成，組成低聚糖的單糖有-葡萄糖（glucose，Glc）、-半乳糖（galactose，Gal）、-乙酰氨基葡萄糖（-acetylglucosamine，GlcNAc）、-巖藻糖（fucose，F(xiàn)uc）、-乙酰神經(jīng)氨酸（-acetylneuraminic acid，Neu5Ac）和-羥乙酰神經(jīng)氨酸（-glycolylneuraminic acid，Neu5Gc）。乳低聚糖的還原端通常由一個(gè)核心結(jié)構(gòu)組成，在人乳低聚糖中核心結(jié)構(gòu)一般為Gal-(1→4)-Glc，在動(dòng)物乳中發(fā)現(xiàn)了Gal-(1→4)-GlcNAc這一不同的核心結(jié)構(gòu)。特定的糖基轉(zhuǎn)移酶將上述單糖殘基從核苷酸糖轉(zhuǎn)移到低聚糖核心結(jié)構(gòu)的非還原端形成低聚糖，由于人乳中單磷酸胞苷-Neu5Ac羥化酶的缺失，攜帶Neu5Gc的低聚糖只在動(dòng)物乳中被發(fā)現(xiàn)。

目前，已有相關(guān)研究表明動(dòng)物乳中的低聚糖具有與人乳低聚糖相似的生物活性功能。將動(dòng)物乳中的低聚糖大規(guī)模提取，作為一種新型食品組分添加至嬰幼兒配方乳粉或功能性食品中，具有一定的應(yīng)用前景。哺乳動(dòng)物乳作為極具吸引力的生物活性低聚糖來源，確定其中低聚糖的種類及含量具有重要意義，可為合理選擇優(yōu)質(zhì)乳源提供依據(jù)。目前國內(nèi)外就哺乳動(dòng)物乳中低聚糖的種類及含量已經(jīng)展開了大量的研究，本文對(duì)文獻(xiàn)中報(bào)道過的4種哺乳動(dòng)物（山羊、牛、豬、駱駝）的初乳和成熟乳中的低聚糖種類及含量進(jìn)行對(duì)比和分析，旨在為后續(xù)動(dòng)物乳源低聚糖的開發(fā)與利用提供參考與指導(dǎo)。

1 哺乳動(dòng)物乳中低聚糖的結(jié)構(gòu)

低聚糖的結(jié)構(gòu)具有復(fù)雜性和多樣性，其結(jié)構(gòu)包括單糖的組成、糖殘基的連接順序、連接位置。單糖組成相同的低聚糖可能存在不同的結(jié)構(gòu)，例如6’-唾液基-乳糖（6’-sialyllactose，6’-SL）和3’-唾液基-乳糖（3’-sialyllactose，3’-SL）的單糖組成均為Neu5Ac-Gal-Glc，但由于二者的唾液酸殘基的連接位置的差異，6’-SL對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)為Neu5Ac-(2→6)-Gal-(1→4)-Glc，3’-SL對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)則為Neu5Ac-(2→3)-Gal-(1→4)-Glc。由于在不同的研究中采用的儀器及檢測(cè)方法不同，鑒定到的低聚糖結(jié)構(gòu)完整程度也不同。本文就單糖組成的水平，對(duì)文獻(xiàn)中已經(jīng)報(bào)道過的山羊、牛、豬和駱駝這4種哺乳動(dòng)物乳中的低聚糖種類進(jìn)行了整理。在本文中，類似6’-SL與3’-SL的同分異構(gòu)體統(tǒng)一被描述為單糖組成的Hex2Neu5Ac1（或Neu5Ac-Gal-Glc）酸性低聚糖。如表1所示，在這4種哺乳動(dòng)物的初乳/成熟乳中檢測(cè)到84種不同單糖組成的低聚糖。其中山羊乳含有43種不同單糖組成的低聚糖，牛乳中有64種不同單糖組成的低聚糖，豬乳中有46種不同單糖組成的低聚糖，駱駝乳中有26種不同單糖組成的低聚糖。

表1 山羊、牛、豬、駱駝乳中報(bào)道的低聚糖種類[18,22-40]Table 1 Types of oligosaccharides reported in goat, cow, pig, and camel milk[18,22-40]

續(xù)表1

哺乳動(dòng)物乳中檢測(cè)到的低聚糖類型可以分為中性低聚糖和唾液酸化的低聚糖兩大類。中性低聚糖包括非巖藻糖基化的中性糖和巖藻糖基化的中性糖，唾液酸化低聚糖包括帶有Neu5Ac或帶有Neu5Gc的低聚糖，或是既帶有Neu5Ac又帶有Neu5Gc的低聚糖，還有特殊的既帶有巖藻糖基又帶有Neu5Ac的低聚糖。

Martinez-Ferez等對(duì)山羊成熟乳中的低聚糖進(jìn)行分析，共發(fā)現(xiàn)了7種單糖組成不同的非巖藻糖基化中性低聚糖和12種酸性低聚糖。Meyran等在Alpine山羊乳中鑒定到了31種單糖組成不同的低聚糖，其中16種為中性低聚糖（含5種巖藻糖基化中性糖），15種為酸性低聚糖。Martin-Ortiz等在Murciano-Granadina山羊初乳中鑒定出23種單糖組成不同的低聚糖，其中9種為中性非藻糖基化低聚糖，3種為巖藻糖基化中性低聚糖，11種為唾液化低聚糖；2017年，Martin-Ortiz等對(duì)Murciano-Granadina山羊成熟乳中的低聚糖展開了分析。結(jié)果表明，成熟乳中的低聚糖種類少于初乳中的低聚糖種類，在成熟乳中只鑒定到18種單糖組成不同的低聚糖，其中6種為中性非巖藻糖基化低聚糖，1種為巖藻糖基化中性低聚糖，11種為唾液酸化低聚糖。對(duì)山羊乳初乳和成熟乳中檢測(cè)到的低聚糖單糖組成進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)單糖組成為H1F1N1、H2F1、H2A2、H3A3、H3N3、H4N1和H5的低聚糖只在初乳中存在，而并未在成熟乳中發(fā)現(xiàn)；單糖組成為H3N3A1、H4N2A1這兩種低聚糖只在成熟乳中被發(fā)現(xiàn)。Albrecht等結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，通過連接酶和特異性外切糖苷酶進(jìn)行測(cè)序，對(duì)山羊乳中的低聚糖結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征。在山羊成熟乳中共檢測(cè)到了25種單糖組成不同的低聚糖，其中10種為中性糖（含2種巖藻糖基化中性糖）、13種為酸性糖。Lu Jing等對(duì)中國關(guān)中和薩能山羊乳中的低聚糖種類進(jìn)行了測(cè)定及比較，在這兩種山羊乳中共檢測(cè)到33種單糖組成不同的低聚糖，其中13種為非巖藻糖基化中性低聚糖，2種為巖藻糖基化聚糖，18種為酸性低聚糖。

Tao等在Jersey和Holstein牛乳中鑒定到了7種單糖組成不同的非巖藻糖基化中性聚糖、18種酸性聚糖。2010年，Barile等在Holstein牛的初乳和成熟乳中的低聚糖中發(fā)現(xiàn)了17種不同單糖組成的低聚糖，其中包括5種非巖藻糖基化中性低聚糖、2種巖藻糖基化中性糖和10種酸性低聚糖。2011年，Marino等使用親水作用液相色譜和外糖苷酶消化相結(jié)合的方法，對(duì)Holstein-Fresian奶牛初乳中的21種不同單糖組成的游離聚糖（2種非巖藻糖基化中性糖、6種巖藻糖基化中性糖和13種唾液化低聚糖）進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。2012年，Sundekilde等對(duì)Jersey和Holstein牛乳中的低聚糖種類進(jìn)行對(duì)比，在兩種牛乳中共檢測(cè)到了33種單糖組成不同的低聚糖，其中包括16種非巖藻糖基化中性糖、5種巖藻糖基化中性糖和12種酸性糖。2013年，Aldredge等對(duì)Jersey和Holstein牛初乳中的低聚糖進(jìn)行了全面的結(jié)構(gòu)分析，在牛初乳中確定了22種單糖組成不同的低聚糖，其中15種為中性糖（含4種巖藻糖基化中性糖）、7種為酸性糖。2014年，Albrecht等在Holstein-Friesian牛初乳中檢測(cè)到了9種單糖組成不同的中性低聚糖（包含3種巖藻糖基化中性聚糖）、15種酸性低聚糖。2020年，Chen Wenyan等使用泛甲基化修飾結(jié)合基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)市售牛乳中的游離低聚糖進(jìn)行分析，在牛乳中發(fā)現(xiàn)8種巖藻糖基化低聚糖。

Tao等在豬乳中共檢測(cè)到了11種單糖組成不同的低聚糖，包括6種中性低聚糖（其中包含2種低豐度的巖藻糖基化中性低聚糖）和5種酸性低聚糖。Albrecht等對(duì)Landrace豬的初乳進(jìn)行檢測(cè)，共發(fā)現(xiàn)了9種單糖組成不同的中性低聚糖（包括2種巖藻糖基化中性聚糖）、6種酸性低聚糖。2016年，Difilippo等對(duì)長(zhǎng)白豬的初乳和成熟乳中的低聚糖進(jìn)行分析，共鑒定到13種單糖組成不同的低聚糖，其中包括6種非巖藻糖基化中性低聚糖、2種巖藻糖基化中性低聚糖和5種酸性低聚糖。Cheng Likun等利用親水作用液相色譜串聯(lián)四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)Landrace-Large White、Duroc和Yorshire 3個(gè)品種豬乳中的低聚糖進(jìn)行檢測(cè)及分析。在這3種豬乳中檢測(cè)到的低聚糖共有27種不同的單糖組成，其中包括6種非巖藻糖基化中性低聚糖、5種巖藻糖基化中性低聚糖和16種酸性低聚糖。2017年，張佳妮利用基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)對(duì)長(zhǎng)白豬、大白豬、梅山豬3個(gè)品種豬乳中的低聚糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析，共檢測(cè)到14種單糖組成不同的低聚糖，其中包括5種非巖藻糖基化中性糖、2種巖藻糖基化中性糖和7種酸性糖。

Fukuda等采用H-核磁共振波譜對(duì)雙峰駝的初乳和成熟乳中的低聚糖進(jìn)行了鑒定和表征。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在初乳中鑒定到了9種單糖組成不同的低聚糖，其中包括3種中性低聚糖（含1種巖藻糖基化中性聚糖）和6種酸性低聚糖，在成熟乳中只鑒定到3種低聚糖，分別為Gal-(1→3)-Gal-(1→4)-Glc、Gal-(1→4)-GlcNAc-(1→6)-(Gal1-3)Gal-(1→4)-Glc和Neu5Ac-(2→)-Gal-(1→4)-Glc)，而Gal-(1→4)-GlcNAc-(1→6)-(Gal1→3)-Gal-(1→4)-Glc只在成熟乳中發(fā)現(xiàn)而未在初乳中檢測(cè)到。2013年，Alhaj等也采用H-核磁共振波譜的方法對(duì)市售單峰駝乳中的低聚糖進(jìn)行了鑒定，共鑒定到了6種單糖組成不同的低聚糖，其中包括2種中性低聚糖和4種酸性低聚糖。2014年，Albrecht等使用超高效液相色譜串聯(lián)二級(jí)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)單峰駝乳中低聚糖進(jìn)行表征。在單峰駝成熟乳中共檢測(cè)到了25種單糖組成不同的低聚糖，其中包括 5種巖藻糖基化中性糖、9種非巖藻糖基化中性低聚糖和11種酸性低聚糖。

如圖1A所示，在單糖組成的水平上，在山羊乳中發(fā)現(xiàn)了22種中性低聚糖和21種酸性低聚糖，在牛乳中發(fā)現(xiàn)了32種中性低聚糖和32種酸性低聚糖，在豬乳中發(fā)現(xiàn)了21種中性低聚糖和25種酸性低聚糖，在駱駝乳中發(fā)現(xiàn)了14種中性低聚糖和12種酸性低聚糖。

圖1 不同哺乳動(dòng)物乳中低聚糖的種類[18,22-40]Fig. 1 Types of oligosaccharides in milks from different mammals[18,22-40]

革蘭氏陰性菌多通過細(xì)菌內(nèi)毒素與腸道Toll樣受體4（Toll-like receptor 4，TLR4）結(jié)合以激活黏膜炎癥。巖藻糖基化低聚糖被發(fā)現(xiàn)可以調(diào)節(jié)人腸細(xì)胞中白細(xì)胞分化抗原（cluster of differentiation，CD）14的表達(dá)，抑制TLR4信號(hào)，從而減輕由細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)的新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎等炎癥。從動(dòng)物乳中提取純化的巖藻糖基化低聚糖，可以作為一種新型的口服預(yù)防藥物或治療藥物，以減輕各種黏膜炎癥。如圖1B所示，巖藻糖基化低聚糖在牛乳和豬乳中發(fā)現(xiàn)的種類較多，牛乳中發(fā)現(xiàn)了15種，單糖組成分別為H1F1N1、H2F1、H2F1N1、H3F1、H3F1N1、H3F2N1、H3F1N2、H3F1N4、H3F1N6、H4F1N1、H4F1N2、H4F1N4、H4F1N5、H4F2N2、H5F1N4；在豬乳中發(fā)現(xiàn)了10種，單糖組成分別為H1F1N1、H2F1、H2F1N1、H2F2、H3F1N1、H3F2N1、H4F1N1、H4F1N2、H4F2N1、H4F2N2；在山羊乳和駱駝乳中分別發(fā)現(xiàn)了7種和5種巖藻糖基化低聚糖，單糖組成分別為H1F1N1、H2F1、H3F1N1、H3F2N1、H3F1N3、H4F1N2、H4F2N2（山羊乳）；H2F1、H2F1N1、H3F1、H3F1N1、H4F1N2（駱駝乳）。其中單糖組成為H4F1N4、H3F1N6、H5F1N4、H3F1N4、H4F1N5、H3F1N2的巖藻糖基化低聚糖目前只在牛乳中發(fā)現(xiàn)，單糖組成為H3F1N3的巖藻糖基化低聚糖只在山羊乳中發(fā)現(xiàn)，在豬乳發(fā)現(xiàn)其特有的H2F2和H4F2N1這兩種單糖組成的巖藻糖基化低聚糖。

炎癥過程中，白細(xì)胞通過黏附和穿越血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放活性氧自由基和酶，造成血管損傷及嚴(yán)重的組織損傷。唾液酸化的低聚糖被發(fā)現(xiàn)能夠降低白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附從而減輕炎癥反應(yīng)，其可能作為一種抗炎成分有利于降低母乳喂養(yǎng)嬰兒炎癥性疾病的發(fā)病率。如圖1A所示，在單糖組成的水平上，在牛乳和豬乳中發(fā)現(xiàn)了種類較多的酸性低聚糖。有相關(guān)研究表明，感染小牛和仔豬的輪狀病毒對(duì)唾液酸酶敏感，其與細(xì)胞的附著和結(jié)合被認(rèn)為依賴于唾液酸，牛乳和豬乳中被發(fā)現(xiàn)具有種類較多并且濃度較高的唾液酸化低聚糖，可通過水解釋放末端的唾液酸，與上皮細(xì)胞表面競(jìng)爭(zhēng)輪狀病毒的結(jié)合位點(diǎn)，并與病毒結(jié)合阻斷其傳染，為小牛和仔豬提供保護(hù)。

與牛乳、豬乳和駱駝乳不同的是，山羊乳中發(fā)現(xiàn)的攜帶Neu5Gc的酸性低聚糖的種類數(shù)與攜Neu5Ac的酸性低聚糖的種類數(shù)相近。此外，在山羊乳和牛乳中發(fā)現(xiàn)了同時(shí)攜帶Neu5Ac和Neu5Gc的低聚糖，H2A1G1這一單糖組成的低聚糖同時(shí)也在山羊乳和牛乳中被發(fā)現(xiàn)，山羊乳中還發(fā)現(xiàn)了其特有H3A1G1這一單糖組成的酸性低聚糖。還有一類低聚糖，同時(shí)攜帶巖藻糖基和Neu5Ac基團(tuán)，它們?cè)谂Ｈ楹拓i乳中均有被發(fā)現(xiàn)，在牛乳中發(fā)現(xiàn)了6種，單糖組成分別為H1F1N1A1、H2F1A1、H2F1N1A1、H2F1N1A2、H2F1N2A1、H3F1N2A1；在豬乳中也發(fā)現(xiàn)了6種，單糖組成分別為H1F1N1A1、H2F1N2A1、H3F1N1A1、H4F1N1A1、H4F1N2A1、H4F1N1A1。其中H1F1N1A1和H2F1N2A1這兩種單糖組成的低聚糖為牛乳和豬乳中共有。在豬乳和牛乳中都檢測(cè)到了多種巖藻糖基低聚糖以及同時(shí)攜帶巖藻糖基和Neu5Ac基團(tuán)的聚糖，這說明豬乳和牛乳低聚糖在結(jié)構(gòu)上可能具有一定的相似性。目前，對(duì)攜帶Neu5Gc的酸性低聚糖、同時(shí)攜帶Neu5Ac和Neu5Gc的酸性低聚糖以及一些同時(shí)攜帶巖藻糖基和唾液酸基團(tuán)的低聚糖的生理功能的研究較少，有待進(jìn)一步的研究與討論。

將在山羊、牛、豬和駱駝這4種哺乳動(dòng)物乳中發(fā)現(xiàn)的不同單糖組成的低聚糖種類進(jìn)行對(duì)比，如圖2所示，哺乳動(dòng)物乳中的低聚糖存在一定的相似性，以牛乳和豬乳最為相似，二者共有37種單糖組成相同的低聚糖，這個(gè)數(shù)據(jù)與上文的分析結(jié)果一致。其次是牛乳和山羊乳，共有33種單糖組成相同的低聚糖。第三是牛乳和駱駝乳，共發(fā)現(xiàn)了26種單糖組成相同的低聚糖。在不同的哺乳動(dòng)物乳中也發(fā)現(xiàn)了一些其特有的低聚糖。在山羊乳中發(fā)現(xiàn)11種其特有的低聚糖，單糖組成分別為H3F1N3、H9、H8、H5、H3A1G1、H4A1、H4N2G1、H2G2、H2N4、H7、H2N1G1；在牛乳中發(fā)現(xiàn)18種其特有的低聚糖，單糖組成分別為H3N5、H2F1A1、H3N6、H3N1A2、H6N2A1、H2F1N1A2、H4N4、H2F1N1A1、H4F1N5、H6、H3F1N6、H2N1A2、H3F1N2A1、H3F1N4、H3F1N2、H4F1N4、H5F1N4、H4N5；在豬乳中也發(fā)現(xiàn)了8種其特有的低聚糖，分別為H1N2A1、H2F2、H5N1、H4F2N1、H4F1N2A1、H6N2、H3F1N1A1、H4F1N1A1；而在駱駝乳中未發(fā)現(xiàn)其特有的低聚糖。

圖2 山羊、牛、豬、駱駝乳中報(bào)道的低聚糖種類的Venn圖[18,22-40]Fig. 2 Venn diagram of oligosaccharide species reported in goat, cow,pig, and camel milk[18,22-40]

通過對(duì)4種哺乳動(dòng)物乳中檢測(cè)到的低聚糖種類進(jìn)行分析可知，牛乳和豬乳中存在種類較多的巖藻糖基化低聚糖和唾液酸化低聚糖，可作為提取動(dòng)物乳源巖藻糖基化低聚糖和唾液酸化低聚糖的較適乳源。而山羊乳中含有種類較多的攜帶Neu5Gc的酸性低聚糖，可對(duì)此進(jìn)行山羊乳源中特有低聚糖的功能活性研究。

2 哺乳動(dòng)物乳中低聚糖的含量

由于目前在駝乳方面的研究還較少，只有Zhang Heping等的研究表明Bactrian駱駝初乳中乳糖含量約占總固形物的4.44%，成熟乳中乳糖含量約占總固形物的4.24%，但對(duì)低聚糖的含量還未進(jìn)行深入的研究。因此，本文就目前文獻(xiàn)中報(bào)道的山羊乳、牛乳和豬乳中的低聚糖質(zhì)量濃度，以及6’-SL、3’-SL和GL這3種目前研究較多且質(zhì)量濃度表現(xiàn)為較高的低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行總結(jié)和對(duì)比，結(jié)果分別如表2～4所示。

表2 山羊乳中報(bào)道的低聚糖質(zhì)量濃度Table 2 Contents of oligosaccharides reported in goat milk

表3 牛乳中報(bào)道的低聚糖質(zhì)量濃度Table 3 Contents of oligosaccharides reported in cow milk

表4 豬乳中報(bào)道的低聚糖質(zhì)量濃度Table 4 Contents of oligosaccharides reported in porcine milk

如表2所示，Martinez-Ferez等對(duì)山羊成熟乳中低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行檢測(cè)，總質(zhì)量濃度約為250～300 mg/L。其中酸性低聚糖以6’-SL質(zhì)量濃度最高（50～70 mg/L），中性低聚糖以3’-半乳糖基-乳糖（3’-galactosyl-lactose，3’-GL）質(zhì)量濃度最高（30～50 mg/L）。Claps等對(duì)兩種意大利山羊（Garganica羊和Maltese羊）的初乳及成熟乳中3種酸性低聚糖（3’-SL、6’-SL和雙唾液基-乳糖（disialyllactose，DSL））的質(zhì)量濃度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明，在初乳中，Garganica羊的3’-SL和6’-SL質(zhì)量濃度均高于Maltese羊，DSL的平均質(zhì)量濃度略低于Maltese羊。其中Garganica羊初乳中3’-SL質(zhì)量濃度為253.96～328.54 mg/L，6’-SL質(zhì)量濃度為174.27～200.96 mg/L，DSL質(zhì)量濃度為126.44～137.94 mg/L；Maltese羊初乳中3’-SL質(zhì)量濃度為201.27～249.33 mg/L，6’-SL質(zhì)量濃度為136.90～144.07 mg/L，DSL為104.91～228.14 mg/L，這一結(jié)果與Martinez-Ferez等的研究結(jié)果不同。Meyrand等對(duì)Alpine山羊成熟乳中的低聚糖進(jìn)行定量，低聚糖總質(zhì)量濃度約為1 110～1 350 mg/L，比文獻(xiàn)[26]中所報(bào)道的山羊乳中的低聚糖質(zhì)量濃度高。Thum等對(duì)New Zealand Saanen山羊初乳和成熟乳中的低聚糖進(jìn)行定量，結(jié)果表明初乳中低聚糖總質(zhì)量濃度為236～404 mg/L，成熟乳中低聚糖總質(zhì)量濃度為201～319 mg/L。

Martin-Ortiz等對(duì)Murciano Granadina山羊初乳中的低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行檢測(cè)，總質(zhì)量濃度為251.22～572.24 mg/L，其中酸性低聚糖的質(zhì)量濃度為83～251 mg/L，中性低聚糖的質(zhì)量濃度為140～350 mg/L。在酸性低聚糖中，以6’-SL質(zhì)量濃度最高（28.85～123.76 mg/L），3’-SL次之（3.05～11.99 mg/L）；在中性低聚糖中，以GL的異構(gòu)體質(zhì)量濃度最高，總質(zhì)量濃度為124.92～265.77 mg/L。在巖藻糖基化低聚糖中，2’-巖藻基-乳糖（2’-fucosyl-lactose，2’-FL）與Fuc-GalNAc-Glc均顯示較高質(zhì)量濃度，分別為2.21～31.59 mg/L和3.08～6.15 mg/L。之后，他們對(duì)不同泌乳期（泌乳期為2、10、30、40 d和泌乳期為1、7、30、120 d）的Murciano Granadina山羊乳中的低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行研究。結(jié)果表明，泌乳期從2 d延長(zhǎng)到40 d所收集到的羊乳樣品，低聚糖總質(zhì)量濃度由199.1 mg/L減少到59.2 mg/L；泌乳期從1 d延長(zhǎng)到120 d所收集到的羊乳樣品，低聚糖總質(zhì)量濃度由488 mg/L減少到112.4 mg/L。在不同泌乳期間，6’-SL的質(zhì)量濃度均高于3’-SL，泌乳期第一天的羊乳樣品中6’-SL質(zhì)量濃度最高，為51.4～250.0 mg/L。Marziali等對(duì)泌乳期為1～4 d的Murciano Granadina山羊乳中的低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)低聚糖的總質(zhì)量濃度的平均值由第1天的2 398.3 mg/L減少到第4天的702.7 mg/L，泌乳期第1天，在絕對(duì)定量的6種低聚糖中，中性Gal-Gal-Glc質(zhì)量濃度的平均值為390.3 mg/L；酸性3’-SL的質(zhì)量濃度（平均值為1 421.2 mg/L）高于6’-SL（平均值為221.3 mg/L），這與Martin-Ortiz等的結(jié)果相反。并且，同樣是對(duì)Murciano Granadina這個(gè)品種山羊的乳低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行研究，Marziali等測(cè)定的低聚糖質(zhì)量濃度高于Martin-Ortiz等的結(jié)果，即同一品種山羊乳中的低聚糖的質(zhì)量濃度存在差異，可能是受畜牧地區(qū)、產(chǎn)崽及泌乳的季節(jié)氣候和產(chǎn)崽胎次等因素影響，后續(xù)的研究可以針對(duì)不同地區(qū)及不同季節(jié)的Murciano Granadina山羊乳中的低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行對(duì)比分析。

如表3所示，Martinez-Ferez等檢測(cè)到牛的成熟乳中低聚糖質(zhì)量濃度為30～60 mg/L。Nakamura等對(duì)Holstein牛初乳及過渡乳中3種酸性低聚糖（3’-SL、6’-SL和6’-唾液基--乙酰乳糖胺（6’-sialyl--acetyllactosamine，6’-SLN））的質(zhì)量濃度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，牛乳中3’-SL質(zhì)量濃度高于6’-SL和6’-SLN。在牛初乳中，3’-SL質(zhì)量濃度為690～744 mg/L，在過渡乳中迅速下降至135～262 mg/L。6’-SL和6’-SLN的質(zhì)量濃度在牛初乳中也最高，分別為58～70 mg/L和93～103 mg/L，而在過渡乳中其質(zhì)量濃度分別降為18～40 mg/L和64～74 mg/L。Fong等采用外標(biāo)法對(duì)Friesian牛初乳和成熟乳中的酸性低聚糖進(jìn)行絕對(duì)定量。結(jié)果表明3’-SL的質(zhì)量濃度高于其他酸性低聚糖。在產(chǎn)后收集的初乳中3’-SL的質(zhì)量濃度為1 163～1 327 mg/L，質(zhì)量濃度隨著哺乳期的延長(zhǎng)而減少，在成熟乳中檢測(cè)到3’-SL的質(zhì)量濃度為47～59 mg/L。在產(chǎn)后收集的初乳中，6’-SLN、DSL和6’-SL的質(zhì)量濃度也較高，分別為112～126、118～134 mg/L和79～91 mg/L；在成熟乳中質(zhì)量濃度均有所下降，分別為0.11～0.15、1.4～1.6 mg/L和5.9～9.2 mg/L。

如表4所示，Difilippo等對(duì)Dutch-Landrace豬初乳和成熟乳中的低聚糖質(zhì)量濃度進(jìn)行檢測(cè)。初乳中低聚糖總質(zhì)量濃度為7 380～29 350 mg/L，其中酸性低聚糖質(zhì)量濃度最高，約占總聚糖總量的77%；酸性低聚糖中又以3’-SL的質(zhì)量濃度最高，約為5 030～20 980 mg/L。成熟乳中低聚糖總質(zhì)量濃度較初乳下降，為6 820～6 980 mg/L，其中中性低聚糖的相對(duì)含量由初乳的23%提高到了58%，中性低聚糖中以Hex3的質(zhì)量濃度較高，約為2 610～3 220 mg/L。Cheng Likun等收集了泌乳期為1、5、10、21 d的豬乳，并對(duì)乳中的低聚糖進(jìn)行相對(duì)定量分析，結(jié)果表明，不同的低聚糖在泌乳過程中表現(xiàn)出不同的規(guī)律，大部分的低聚糖在初乳中質(zhì)量濃度較高，并隨著泌乳期時(shí)間的延長(zhǎng)質(zhì)量濃度降低，但也有少數(shù)低聚糖的質(zhì)量濃度增加。

張佳妮以長(zhǎng)白豬、大白豬、梅山豬為研究對(duì)象，使用麥芽五糖對(duì)豬乳中的低聚糖進(jìn)行外標(biāo)定量，將各個(gè)泌乳期豬乳中低聚糖的總質(zhì)量濃度進(jìn)行比較。結(jié)果顯示，3個(gè)品種豬乳中初乳的低聚糖總質(zhì)量濃度存在差異，其中梅山豬初乳中的低聚糖質(zhì)量濃度最高，約為3 700 mg/L，大白豬次之（約2 700 mg/L），長(zhǎng)白豬豬乳中的低聚糖質(zhì)量濃度最低，約為1 300 mg/L。隨著哺乳期的延長(zhǎng)，這3個(gè)品種的豬乳中的低聚糖質(zhì)量濃度差異逐漸減小。且初乳中的低聚糖總質(zhì)量濃度高于成熟乳，大約是其3.5～12.5 倍。

通過對(duì)比表2的數(shù)據(jù)可知，豬乳中的低聚糖質(zhì)量濃度遠(yuǎn)高于山羊乳和牛乳，且在張佳妮的研究中發(fā)現(xiàn)，梅山豬乳中的低聚糖質(zhì)量濃度高于大白豬和長(zhǎng)白豬，梅花豬的初乳可能成為提取純化動(dòng)物乳源低聚糖的首選。Murciano Granadina山羊乳和Alpine山羊乳中也含有較高質(zhì)量濃度的低聚糖，在以山羊?yàn)橹饕曫B(yǎng)家畜的地區(qū)，可選擇山羊乳作為工業(yè)化提取低聚糖的乳源。同時(shí)，乳低聚糖的質(zhì)量濃度可能隨地區(qū)、氣候、季節(jié)及產(chǎn)崽胎次的變化而變化，可針對(duì)某一較適宜物種，進(jìn)行不同地區(qū)、不同產(chǎn)崽及泌乳季節(jié)和不同產(chǎn)崽胎次個(gè)體乳的低聚糖質(zhì)量濃度比較，以選取最佳乳源。而目前的研究結(jié)果表明，單從低聚糖的質(zhì)量濃度方面考慮，牛乳中的低聚糖質(zhì)量濃度較山羊乳和豬乳低，可能不是提取低聚糖的較佳乳源。

3 結(jié) 語

乳低聚糖在醫(yī)療保健和食品工業(yè)中的應(yīng)用前景十分廣闊。例如巖藻糖基化低聚糖可以抑制細(xì)菌和受體的結(jié)合，有潛力作為一種不同于目前抗生素作用機(jī)制的新型預(yù)防或治療抗菌藥物。相關(guān)研究表明，使用在嬰幼兒配方奶粉中添加2’-FL的復(fù)合乳粉喂養(yǎng)的嬰兒的血液和體外炎癥細(xì)胞因子水平與母乳喂養(yǎng)組顯示的水平接近，且均低于添加半乳糖的嬰幼兒配方奶粉的復(fù)合乳粉喂養(yǎng)組。2’-FL的添加有望使配方奶粉更接近母乳，從而進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)配方奶粉的母乳化。唾液酸低聚糖被發(fā)現(xiàn)具有抗炎的作用，有助于降低母乳喂養(yǎng)嬰兒的炎癥性疾病的發(fā)病率。動(dòng)物乳源唾液酸化低聚糖也被證明了具有抵抗炎癥疾病的生理功能，有相關(guān)研究表明，與對(duì)照組（不口服山羊乳低聚糖）相比，口服500 mg/（kg·d）山羊乳低聚糖的大鼠結(jié)腸病變較少，腸道菌群組成更為正常，說明山羊乳低聚糖具有抗炎作用，有助于恢復(fù)結(jié)腸黏膜。此外，動(dòng)物乳可能是膳食補(bǔ)充唾液酸的極好的來源。從動(dòng)物乳中分離出來的唾液酸化低聚糖可作為腦活化因子應(yīng)用于嬰兒配方奶粉和其他功能食品中。

動(dòng)物乳初乳中低聚糖的種類較成熟乳豐富，低聚糖的含量也較成熟乳高，可作為提取純化低聚糖的首選來源。近年來研究者對(duì)動(dòng)物乳中的低聚糖開展了大量研究，但大多數(shù)研究?jī)H以表征低聚糖的結(jié)構(gòu)和含量為目標(biāo)，而對(duì)其生理功能研究較少。雖然已有研究表明從動(dòng)物乳源提取的低聚糖和人乳低聚糖具有相似的功能特性，但是否具有相同的生物利用度仍然是一個(gè)有待證實(shí)的問題。其次，動(dòng)物乳中低聚糖的含量較低，需要高通量、高純度分離純化低聚糖的方法來滿足工業(yè)化生產(chǎn)的要求。