王琦，艾常虹，商慶輝

（1.呼倫貝爾市人民醫(yī)院，內(nèi)蒙古呼倫貝爾021000；2.呼倫貝爾市中蒙醫(yī)院，內(nèi)蒙古呼倫貝爾021000；3.內(nèi)蒙古民族大學(xué)呼倫貝爾醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼倫貝爾021000）

多重耐藥菌是指同時(shí)對(duì)≥3 種抗菌藥物耐藥的細(xì)菌，常被稱為超級(jí)細(xì)菌，其中引起廣泛關(guān)注的有耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、耐多藥肺炎鏈球菌、耐萬古霉素腸球菌、多重耐藥性結(jié)核桿菌、多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌以及最新發(fā)現(xiàn)的攜帶有新德里金屬-β-內(nèi)酰胺酶1(New Delhi metallo-beta-lactamase-1，NDM-1）基因的大腸桿菌和肺炎克雷伯菌等，它們導(dǎo)致的感染性疾病的發(fā)病率和死亡率逐年升高，給人類健康帶來了嚴(yán)重威脅［1］。據(jù)估計(jì)，當(dāng)前抗菌藥物耐藥性（antimicrobial resistance，AMR）每年在全球造成約70萬人死亡，到2050年死亡人數(shù)可能增加到每年1000 萬人；另外，到2050 年AMR 感染所消耗的全球醫(yī)療成本累計(jì)將達(dá)到100 萬億美元［2］。因此，AMR 將成為人類在21 世紀(jì)面臨的最大挑戰(zhàn)之一。

目前，抗菌藥物仍是治療細(xì)菌感染的主要方法。傳統(tǒng)抗菌藥物一般為小分子，通過與細(xì)菌DNA、RNA、蛋白質(zhì)或細(xì)胞壁的相互作用發(fā)揮殺菌或抑菌作用［3］。隨著AMR 的加劇，傳統(tǒng)抗菌藥物的療效明顯降低［4］，為此人們采取各種方法來應(yīng)對(duì)AMR，包括持續(xù)改進(jìn)抗菌藥物管理、使用百里酚和沒食子酸等細(xì)菌細(xì)胞膜通透劑提高抗菌效果、開發(fā)新的抗菌藥物或疫苗及采取抗毒力療法等［5～6］。其中，抗毒力療法是以毒力因子為作用靶點(diǎn)的治療方式。毒力因子是促進(jìn)宿主內(nèi)感染和細(xì)菌繁殖的細(xì)菌衍生分子［7］，借助這些毒力因子，細(xì)菌可以克服宿主防御系統(tǒng)和抗菌藥物的攻擊，使細(xì)菌適應(yīng)和定植于目標(biāo)靶點(diǎn)［8］。針對(duì)毒力因子進(jìn)行靶向治療雖無法消滅病原體，但可削弱或完全阻斷病原體入侵宿主的能力，并且不會(huì)對(duì)細(xì)菌施加選擇壓力，從而可降低細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險(xiǎn)。此外，由于大多數(shù)毒力因子被限制在少數(shù)相關(guān)菌種，所以耐藥的決定因素通過水平基因轉(zhuǎn)移的傳播風(fēng)險(xiǎn)是降低的。因此，抗毒力療法可能成為一種更安全的抗感染策略，并可有效克服抗菌藥物治療時(shí)存在的耐藥風(fēng)險(xiǎn)［5］。

細(xì)菌分選酶A（sortase A，SrtA）是一種細(xì)菌細(xì)胞膜酶，可將表面蛋白附著在細(xì)菌的細(xì)胞壁上，是革蘭陽性致病菌（如金黃色葡萄球菌）的關(guān)鍵毒力因子，其在細(xì)胞膜上的定位也是靶向治療的重要靶點(diǎn)。因此，SrtA 對(duì)于抗毒力療法的研究具有重要價(jià)值，在應(yīng)對(duì)AMR 方面也具有重要意義［9］。本文簡(jiǎn)要介紹AMR 的流行病學(xué)及其耐藥機(jī)制，著重闡述SrtA 的結(jié)構(gòu)、作用機(jī)制及抑制劑的研究進(jìn)展，以期為革蘭陽性超級(jí)細(xì)菌感染尋找新的治療方案。

1 抗菌藥物的耐藥性

1.1 流行病學(xué)

多重耐藥的腸球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、銅綠假單胞菌和腸桿菌等“超級(jí)細(xì)菌”導(dǎo)致的感染相關(guān)發(fā)病率和死亡率逐漸升高［10］。在美國(guó)，每年至少有280萬株耐藥菌感染發(fā)生，導(dǎo)致3.5萬人死亡［11］；在歐洲，每年約有2.5萬人死于耐藥細(xì)菌感染［12］。近年來，全球各地相繼報(bào)道了多種耐藥菌，如美國(guó)發(fā)現(xiàn)了耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistantKlebsiella pneumoniae）［13］，印度和巴基斯坦發(fā)現(xiàn)了blaNDM-1基因介導(dǎo)的耐碳青霉烯大腸埃希菌（carbapenem resistanceE.coli）和耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌［14］，中國(guó)發(fā)現(xiàn)了含有黏菌素耐藥基因mcr-1的大腸桿菌［15］。在澳大利亞，常見革蘭陰性菌（如大腸桿菌）的耐藥性不斷增加，養(yǎng)老院和醫(yī)院中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus，MRSA）以及耐萬古霉素屎腸球菌的流行率不斷升高［16］，可見全球范圍內(nèi)的抗菌藥物耐藥形勢(shì)都十分嚴(yán)峻。

1.2 耐藥機(jī)制

研究表明，AMR 的產(chǎn)生主要是源于抗菌藥物對(duì)微生物施加的選擇壓力［17］。AMR 大體分為2 類，一類是固有耐藥性，即引起AMR 的基因在細(xì)菌中代代相傳，使得細(xì)菌對(duì)抗菌藥物產(chǎn)生天然耐藥性［18］；另一類是獲得性耐藥性，即細(xì)菌由于基因突變或獲得外來耐藥性基因，或兩者兼而有之，從而獲得了抵抗抗菌藥物活性的能力［19］。

如圖1所示，目前研究較充分的AMR 機(jī)制主要有4 種，即酶促藥物降解、藥物靶點(diǎn)突變、藥物外排泵的激活和膜通透性的降低［4］。此外，其他因素也可導(dǎo)致AMR。據(jù)統(tǒng)計(jì)，80%細(xì)菌感染與細(xì)菌生物膜（簡(jiǎn)稱生物膜）形成相關(guān)，生物膜中的細(xì)菌形態(tài)和生理作用均與游離菌不同，對(duì)抗菌藥物的耐受性可提高10～1000 倍，且對(duì)宿主免疫防御的抗性很強(qiáng)，是造成細(xì)菌耐藥性的主要原因［20～21］。當(dāng)細(xì)菌暴露于較低濃度抗菌藥物時(shí)，一旦形成生物膜就會(huì)產(chǎn)生適應(yīng)性耐藥，進(jìn)而導(dǎo)致耐藥性的發(fā)展。研究表明，生物膜的形成可受毒力因子、溫度、糖濃度和pH 值等因素的影響，而AMR 與毒力因子之間可能也存在著很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性［22］。毒力因子是細(xì)菌產(chǎn)生的一種使細(xì)菌能附著在宿主細(xì)胞上的分子，常見的包括菌體表面的黏附結(jié)構(gòu)，如菌毛、莢膜及類莢膜，還包括一些具有侵襲能力的水解酶，細(xì)菌代謝產(chǎn)生的部分脂多糖和蛋白質(zhì)也屬于毒力因子的范疇。一方面，毒力因子可使病原菌在機(jī)體內(nèi)定殖、突破機(jī)體的防御屏障、內(nèi)化、繁殖和擴(kuò)散，這種能力被稱為侵襲力；另一方面，毒力因子也具有一定毒素的性質(zhì)，病原菌之所以能感染宿主并在宿主環(huán)境中繁殖，通常就是依靠一系列毒力因子相互協(xié)調(diào)作用實(shí)現(xiàn)的。人在感染有毒細(xì)菌并出現(xiàn)疾病癥狀后開始抗菌藥物治療，進(jìn)而導(dǎo)致AMR 的出現(xiàn)，可見毒力因子和AMR之間存在著直接關(guān)系［22］。

2 細(xì)菌分選酶A

近年來，使用抗毒力療法治療細(xì)菌感染受到越來越多的關(guān)注。與傳統(tǒng)抗菌藥物限制細(xì)菌生長(zhǎng)或直接殺死細(xì)菌相比，抗毒力療法降低了細(xì)菌的毒性，增加了病原體對(duì)宿主免疫系統(tǒng)的敏感性，因此，細(xì)菌毒力因子可能是研發(fā)新型抗菌藥物的全新方向［23］。在眾多已知的毒力因子中，存在于大多數(shù)革蘭陽性菌中的Srt 受到了特別的關(guān)注。Srt 可分為8類，分別是A，B，C，D1，D2，E，F(xiàn)和“Marine”，每類均有自己的底物識(shí)別基序和功能。SrtA 是一類膜結(jié)合的巰基轉(zhuǎn)肽酶，其功能是將包括毒性因子在內(nèi)的表面蛋白連接到細(xì)菌細(xì)胞壁上，而這些表面蛋白作為多種毒力因子之一，在革蘭陽性菌對(duì)宿主的入侵中起著重要作用［24］。SrtA 在革蘭陽性菌的發(fā)病機(jī)制中是不可或缺的，但對(duì)其生長(zhǎng)或生存能力卻并不是必需的。因此，SrtA 是研發(fā)新型抗感染藥物的非常有價(jià)值的靶點(diǎn)，這些新型抗感染藥物可抑制生物膜形成等關(guān)鍵的細(xì)菌毒力機(jī)制，且不會(huì)引起耐藥性［25］。此外，SrtA 做為一種細(xì)菌細(xì)胞膜酶，與細(xì)胞內(nèi)靶點(diǎn)相比具有更好的靶向性［26］。

2.1 細(xì)菌分選酶A的結(jié)構(gòu)

SrtA 是一種管家蛋白，可將帶有LPXTG 基序的蛋白共價(jià)結(jié)合到細(xì)菌細(xì)胞壁上［27］。金黃色葡萄球菌SrtA N 端第1～59 氨基酸殘基中包含一個(gè)將其定位到細(xì)胞膜上的信號(hào)肽和一個(gè)螺旋膜錨。第60～206氨基酸殘基代表核心催化域，該催化域具有8股β 桶狀褶皺結(jié)構(gòu)，即Srt 褶皺，其中由β7 和β8 鏈形成SrtA的活性中心，而His120，Cys184和Arg197是活性中心不可缺少的3 個(gè)氨基酸，尤其是位于SrtA 特征基序LXTC上的Cys184具有催化活性［28］。此外，β3 和β4 環(huán)形成鈣結(jié)合位點(diǎn)，鈣離子可與β6/β7 環(huán)中的殘基相互協(xié)作，這種鈣離子的結(jié)合效應(yīng)減緩了SrtA的運(yùn)動(dòng)，使得底物與酶結(jié)合，導(dǎo)致酶活性增加8倍［29］。

2.2 細(xì)菌分選酶A的作用機(jī)制

SrtA 通過微生物表面成分識(shí)別黏附基質(zhì)分子（microbial surface components recognizing adhesive matrix molecules，MSCRAMM）中的LPXTG基序發(fā)起黏附過程。在完成識(shí)別過程之后，SrtA 接連催化硫酯化反應(yīng)和轉(zhuǎn)肽化反應(yīng)。SrtA 的催化性半胱氨酸殘基Cys184 首先在蘇氨酸殘基和甘氨酸殘基之間裂解LPXTG 基序，并產(chǎn)生?；蝓ッ钢虚g體。在此過程中，首先需要組氨酸殘基His120的咪唑環(huán)形成硫酸鹽從而激活Cys184；同時(shí)，精氨酸殘基Arg197 通過提供穩(wěn)定的四面體氧陰離子過渡態(tài)和激活反應(yīng)所需的能量，可助Cys184 進(jìn)行裂解反應(yīng)［30-31］。隨后，該硫酯被細(xì)菌肽聚糖中五甘氨酸（penta-Gly，Gly5）序列的N端氨解。這種轉(zhuǎn)肽化反應(yīng)導(dǎo)致MSCRAMM 的C 端蘇氨酸和肽聚糖Gly5序列之間形成酰胺連接，該連接將蛋白質(zhì)共價(jià)連接到細(xì)菌細(xì)胞壁上［30-31］（圖2）。SrtA 通過識(shí)別、硫酯化和轉(zhuǎn)肽化將MSCRAMM 錨定在細(xì)菌肽聚糖上，因此抑制上述步驟中的任何一個(gè)，均可導(dǎo)致細(xì)菌不能附著在特定的組織和（或）器官上，使細(xì)菌無法攻擊宿主細(xì)胞，同時(shí)無法逃避宿主的免疫反應(yīng)［32］。

3 細(xì)菌分選酶A抑制劑

目前，研究人員已篩選出多種類型的SrtA 抑制劑（SrtA inhibitor，SrtAi），包括合成小分子、多肽和其他天然產(chǎn)物等，這些SrtAi對(duì)金黃色葡萄球菌以及MRSA 都具有一定的抑制作用，而且不會(huì)產(chǎn)生傳統(tǒng)抗菌藥物常見的相關(guān)不良反應(yīng)［33］。

3.1 合成小分子

目前，研究人員通過分子對(duì)接與分子動(dòng)力學(xué)模擬篩選出了小分子藥物數(shù)據(jù)庫，用以識(shí)別能結(jié)合SrtA 活性位點(diǎn)的化合物，并對(duì)部分化合物的抑制作用進(jìn)行了生物評(píng)價(jià)。如研究人員對(duì)綠原酸（chlorogenic acid，CHA）及其類似物進(jìn)行了熒光共振能量轉(zhuǎn)移分析，以確定CHA對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）及對(duì)SrtA 活性的半數(shù)最大抑制濃度（half-maximal inhibitory concentration，IC50）。結(jié)果顯示，CHA對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC＞1024 μg·mL-1，對(duì)SrtA 活性的IC50為34 μg·mL-1，表明CHA與SrtA活性位點(diǎn)的結(jié)合阻止了SrtA 與MSCRAMM 中LPXTG 基序的結(jié)合，從而使SrtA 失去了生物活性［34］，但對(duì)金黃色葡萄球菌無明顯抑菌作用。

研究人員利用基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)方法，對(duì)具有SrtA 生物活性抑制作用的合成小分子進(jìn)行了優(yōu)化，并通過高通量篩選技術(shù)證實(shí)吡嗪酮類分子是有效的SrtA 抑制劑。Chan 等［35］合成了一系列高可溶性吡嗪酮基小分子，并推測(cè)它們可能與Cys184形成二硫鍵，因而可共價(jià)修飾SrtA 的活性半胱氨酸硫醇基團(tuán)。此外，這些小分子也部分模仿天然SrtA底物，可引起酶活性部位的構(gòu)象變化。其中，化合物2-（3-氟苯）-4-（3-羥丙氧）-5-巰吡啶嗪-3（2H）-酮展現(xiàn)出理想的SrtA 抑制作用，IC50為（21±14）nmol·L-1，具有更低的細(xì)胞毒性，且可有效破壞金黃色葡萄球菌表面蛋白。

3.2 多肽

抗菌肽（antimicrobial peptides，AMP）為傳統(tǒng)抗菌藥物治療耐藥菌感染帶來了一種替代或補(bǔ)充方案。它們是一種陽離子多肽，可與帶負(fù)電荷的分子（如革蘭陽性菌的重要表面抗原脂磷壁酸）發(fā)生靜電作用，從而進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)膜與脂質(zhì)雙分子層相互作用形成跨膜孔，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞膜的生物作用呈劑量依賴性減弱［36］。AMP 由15～50 個(gè)氨基酸組成，可折疊成不同二級(jí)結(jié)構(gòu)，包括α-螺旋、β-折疊、環(huán)和擴(kuò)展螺旋，它們可通過非特異性作用機(jī)制抑制細(xì)菌，從而導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞破壞。由于AMP的作用模式通常不是通過特定的生化途徑實(shí)現(xiàn)，因此未觀察到細(xì)菌對(duì)這類抗菌藥物產(chǎn)生耐藥性［37］。

人類β-防御素是存在于動(dòng)植物體內(nèi)的一種具有廣譜抗微生物作用的陽離子多肽［38］，它們可與入侵的革蘭陰性和陽性微生物的細(xì)胞膜相互作用，一些細(xì)菌雖已對(duì)它們產(chǎn)生了耐藥性，但這些肽經(jīng)過修改和重新設(shè)計(jì)可克服這一問題。如D-IK8（MIC：16 μmol·L-1）和WR12（MIC：4 μmol·L-1）等新型合成短肽對(duì)MRSA 表現(xiàn)出顯著抑制活性。WR12（RWWRWWRRWWRR）是一種完全由色氨酸（Trp）和精氨酸（Arg）組成的12 位氨基酸肽，D-IK8（D-IRIKIRIK-NH2）是一種八殘基β-片狀肽，兩者均可通過破壞細(xì)菌細(xì)胞膜抑制細(xì)菌，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物泄漏，從而導(dǎo)致細(xì)菌死亡［39］。研究表明，D-IK8 和WR12 可破壞在體外定植的穩(wěn)定生長(zhǎng)階段的MRSA。體內(nèi)研究結(jié)果顯示，將D-IK8和WR12 應(yīng)用于MRSA 皮膚感染的小鼠模型時(shí)，兩者均可顯著降低開放傷口內(nèi)MRSA USA300 的計(jì)數(shù)，表明D-IK8和WR12在減少M(fèi)RSA 皮膚損傷的細(xì)菌負(fù)荷方面非常有效。此外，與傳統(tǒng)抗菌藥物相比，D-IK8和WR12 在阻斷表皮葡萄球菌和金黃色葡萄球菌生物膜方面更加有效［39］。

AMP 克服AMR 的能力使其展現(xiàn)出替代傳統(tǒng)抗菌藥物的潛力。然而，AMP 做為多肽類藥物也存在明顯局限性，其有限的生物利用度和較弱的蛋白水解穩(wěn)定性限制了其在臨床的廣泛應(yīng)用［40］。為解決這些問題，研究人員以天然AMP為基礎(chǔ)進(jìn)行了優(yōu)化修飾，以便開發(fā)出模擬AMP 特性的合成類似物，修飾的重點(diǎn)是AMP的膜活性及其物理化學(xué)性質(zhì)，如兩親性活性和正電荷。樹狀多肽是一類新的抗菌藥物，是由附著在中心核上的一個(gè)功能肽單元的多個(gè)副本組成的支化分子，它們表現(xiàn)出抗菌作用［40］。如樹狀分子RW 4D 通過一種獨(dú)特的膜溶解作用選擇性地消除革蘭陰性細(xì)菌而非革蘭陽性細(xì)菌［41］；類似地，樹狀分子SB056（MIC：3.125 mmol·L-1）對(duì)革蘭陰性微生物非常有效。研究表明，這些化合物的抗菌活性與多黏菌素B 和黏菌素相當(dāng)?？傊?，樹狀多肽與單體肽相比具有更高的活性，這可能是因?yàn)闃錉疃嚯木哂卸鄡r(jià)性，所以對(duì)蛋白酶和肽酶的蛋白水解活性敏感度降低［40］。

3.3 天然產(chǎn)物

由于傳統(tǒng)抗菌藥物的耐藥形勢(shì)愈發(fā)嚴(yán)峻，研究人員轉(zhuǎn)而對(duì)天然抗菌劑產(chǎn)生了濃厚的興趣。野生植物中感染性疾病的發(fā)生率極低，表明這些物種成功地形成了防御機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，植物能產(chǎn)生多種小分子（相對(duì)分子質(zhì)量＜500）抗菌劑［42］。此外，自20世紀(jì)初以來，天然化合物在治療微生物引起的感染方面發(fā)揮了重要作用，其抗菌特性被多方研究報(bào)道［43-44］。

Zhang 等［45］發(fā)現(xiàn)來源于唇形科植物Hyptis atrorubensPoit 的粗蕨素是一種強(qiáng)效SrtA 抑制劑，IC50為24.17 μmol·L-1。利用定點(diǎn)誘變技術(shù)得到金黃色葡萄球菌SrtA 的2 種突變形式，即Val166Ala和Val168Ala，并評(píng)價(jià)了粗蕨素對(duì)這2 種突變體的抑制活性。結(jié)果表明，經(jīng)粗蕨素抑制后兩者活性較天然SrtA 明顯降低，較天然SrtA 分別降低了67%和99%。可見粗蕨素是一種可通過靶向SrtA 抑制金黃色葡萄球菌感染的潛在的新型抗菌藥物。在Cho 等［46］的相關(guān)研究中，對(duì)20 種黃酮類化合物的SrtA 抑制性能進(jìn)行了測(cè)試，其中芒柄花素和7-羥-6-甲氧黃酮對(duì)金黃色葡萄球菌有較強(qiáng)的抑制作用，IC50分別為74.9 和96.1 μmol·L-1。Kim 等［47］的另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，葡萄糖甾醇的一種分離物，β-谷甾醇-3-氧-吡喃葡萄糖苷，具有SrtA 抑制作用，IC50為18.3 μg·mL-1。此外，其對(duì)金黃色葡萄球菌也具有一定抗菌活性（MIC：200 μg·mL-1），表明該化合物是一種潛在的SrtAi 候選物。該研究還發(fā)現(xiàn)，谷甾醇對(duì)SrtA 活性和金黃色葡萄球菌均無抑制作用，推斷β-谷甾醇-3-氧-吡喃葡萄糖苷的抑制作用取決于吡喃葡萄糖苷側(cè)鏈部分。

植物產(chǎn)生的小分子抗菌劑大多為弱效抗菌劑，然而不同植物產(chǎn)生的抗菌劑之間可能發(fā)生協(xié)同作用，合用時(shí)抗菌效力有所增強(qiáng)［42］。小檗堿和5-甲氧大風(fēng)子素的聯(lián)合作用就是一個(gè)典型例子。小檗堿是一種DNA嵌入劑，由于其易被病原菌多藥耐藥泵排出，因此作為抗菌藥物是無效的。而藍(lán)莓的次級(jí)代謝產(chǎn)物5-甲氧大風(fēng)子素是一種多藥耐藥泵的阻斷劑，二者聯(lián)合作用展現(xiàn)出較強(qiáng)的抗菌作用［42］。

很多種情況下天然化合物和抗菌藥物之間同樣存在協(xié)同作用［48］。mecA基因是編碼產(chǎn)生青霉素結(jié)合蛋白2a（penicillin binding proteins 2a，PBP2a）的結(jié)構(gòu)基因，由轉(zhuǎn)座子攜帶并整合至葡萄球菌染色體的mec片段。mec片段是葡萄球菌染色體上獲得的外來片段，該片段只存在于耐甲氧西林葡萄球菌中［49-50］。Mun 等［48］通過分析PBP2a 的表達(dá)來評(píng)估桑色素與β 內(nèi)酰胺抗菌藥物對(duì)MRSA 的聯(lián)合作用。結(jié)果顯示，單用桑色素的MIC 值為125～500 μg·mL-1，而桑色素與苯唑西林聯(lián)用的MIC 為0.97～259 μg·mL-1，說明二者之間存在協(xié)同作用。桑色素與苯唑西林聯(lián)用治療MRSA 時(shí)，PBP2a 蛋白水平明顯下降，提示該聯(lián)用方案對(duì)MRSA 有出色的臨床療效。根據(jù)該研究推測(cè)，桑色素聯(lián)合β-內(nèi)酰胺抗菌藥物展現(xiàn)的殺傷特性可能是通過對(duì)抗PBP2a介導(dǎo)的耐藥性實(shí)現(xiàn)的。Ekambaram等［51］采用瓊脂孔擴(kuò)散法評(píng)價(jià)迷迭香酸（rosmarinic acid，RA）對(duì)金黃色葡萄球菌和MRSA的抗菌作用。結(jié)果表明，RA對(duì)金黃色葡萄球菌（MIC：0.8 mg·mL-1）和MRSA（MIC：10 mg·mL-1）均有抑制作用；此外，RA 還與阿莫西林、萬古霉素和氧氟沙星對(duì)金黃色葡萄球菌有協(xié)同抗菌作用，但對(duì)于MRSA 的臨床分離物，RA僅與萬古霉素聯(lián)用時(shí)展現(xiàn)出協(xié)同抗菌作用。RA 與這些抗菌藥物雖有協(xié)同作用，但MIC值仍然較高［51］，臨床應(yīng)用前需進(jìn)行優(yōu)化以克服該問題。

4 結(jié)語

鑒于超級(jí)細(xì)菌感染在全球引起的公共衛(wèi)生危機(jī)，人們需要進(jìn)一步明確細(xì)菌生存所需的關(guān)鍵因素和感染進(jìn)展所需的毒力決定因素，從而有針對(duì)性地研發(fā)出新型抗菌藥物以應(yīng)對(duì)細(xì)菌耐藥的嚴(yán)峻形勢(shì)?，F(xiàn)有研究表明，針對(duì)毒力因子的藥物設(shè)計(jì)是研發(fā)新型抗菌治療的新路線，SrtA 是一種將表面蛋白共價(jià)連接到細(xì)菌細(xì)胞壁的毒力因子，是治療革蘭陽性菌感染的候選靶點(diǎn)。研究人員迄今已篩選出多種具有抗金黃色葡萄球菌活性的SrtAi，如合成小分子、多肽和天然產(chǎn)物，這為攻克革蘭陽性超級(jí)細(xì)菌感染帶來了新希望。然而，SrtAi成功應(yīng)用于臨床還面臨一些急需解決的難題：①SrtAi 的療效仍然需要在膿毒癥或形成膿腫的體內(nèi)感染模型中進(jìn)一步仔細(xì)評(píng)估；②需要進(jìn)一步研究SrtAi與其他抗菌劑（如抗菌藥物和抗真菌藥物）或其他成分的合用，以提高其水溶性或生物利用度，從而降低最終配方中所需化合物的濃度；③SrtAi 應(yīng)具有良好的成本效益，從而有利于其最終在臨床廣泛應(yīng)用；④SrtAi 應(yīng)在不影響人體內(nèi)正常微生物菌群恢復(fù)下削弱細(xì)菌致病性，從而防止超級(jí)病菌的發(fā)展。綜上所述，SrtAi 對(duì)金黃色葡萄球菌甚至MRSA 感染展現(xiàn)出一定的臨床療效，盡管仍需優(yōu)化解決一些問題才能應(yīng)用于臨床，但其為克服AMR 的發(fā)展提供了新的研究方向。隨著研究的深入推進(jìn)，SrtAi在未來十分有可能應(yīng)用于治療革蘭陽性超級(jí)細(xì)菌感染。