陶群星，陳婷，江秋菊

龍巖市第二醫(yī)院病理科 (福建龍巖 364000)

肺癌是臨床常見的惡性腫瘤，且其發(fā)病率呈逐年增高的趨勢[1]。研究顯示，針對肺癌患者，早診斷、早治療是抑制不良預后的關(guān)鍵[2]。肺結(jié)節(jié)指肺內(nèi)直徑≤30 mm的不規(guī)則病灶或類圓形病灶，且經(jīng)影像學檢查可見密度增高陰影。肺亞厘米結(jié)節(jié)即指直徑≤8 mm的結(jié)節(jié)。目前，隨著影像學技術(shù)的不斷更新與發(fā)展，肺亞厘米結(jié)節(jié)的檢出率逐年升高。但由于肺亞厘米結(jié)節(jié)的病灶體積較小，且癥狀不典型，導致其難以通過經(jīng)胸穿刺活檢、纖維支氣管鏡診斷等常規(guī)方法確診[3]。術(shù)中快速冰凍病理檢查是一種高效的病理檢查方法，或可在肺亞厘米結(jié)節(jié)的診斷中取得優(yōu)勢。基于此，本研究評估術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷肺亞厘米結(jié)節(jié)的準確率及影響因素，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年6月至2020年7月我院收治的88例肺亞厘米結(jié)節(jié)患者作為研究對象，其中男31例，女57例；平均年齡(46.5±12.1)歲；結(jié)節(jié)直徑0.1～0.8 cm，平均(0.46±0.13)cm。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

納入標準：均經(jīng)胸部CT檢查確診；臨床資料完整；自愿參與本研究；對研究方案依從性良好。排除標準：伴有認知功能障礙；有外科手術(shù)治療史；處于妊娠期或哺乳期；合并其他部位腫瘤、凝血功能障礙。

1.2 方法

所有患者均接受術(shù)中快速冰凍病理檢查及術(shù)后病理檢查。(1)術(shù)中快速冰凍病理檢查：術(shù)中，于患者結(jié)節(jié)暴露后，由病理醫(yī)師對其取材，根據(jù)結(jié)節(jié)大小選擇1～3片結(jié)節(jié)組織；然后利用恒溫冰凍切片機(徠卡顯微系統(tǒng)貿(mào)易有限公司，CM1950系列)處理標本；在制作冰凍切片前，先于設備冷凍頭表面涂抹一層包埋劑，然后將所得結(jié)節(jié)組織置于冰凍切片機上，在確認結(jié)節(jié)組織充分貼緊冷凍頭后，對組織進行冷凍，在冷凍至邊緣包埋劑凝固后停止冷凍操作，最后用切片機將結(jié)節(jié)組織切成厚度為5～7 μm的薄片，制備成冰凍切片；在冰凍切片制作完成后，先將薄層結(jié)節(jié)組織充分浸潤于酒精醋酸福爾馬林混合固定液中進行持續(xù)固定，然后在肺結(jié)節(jié)組織固定充分后，采用HE染色法對結(jié)節(jié)組織進行染色，隨后分別以1%乙醇、1%氨水及梯度乙醇進行分化、藍化及脫水處理，最后運用中性樹膠材料固定結(jié)節(jié)組織標本(封片處理)；醫(yī)師根據(jù)術(shù)中快速冰凍病理檢查方法對結(jié)節(jié)的定性結(jié)果，確定術(shù)中切除范圍。(2)術(shù)后病理檢查：對術(shù)中快速冰凍病理檢查后剩余的全部肺結(jié)節(jié)組織進行取材，并立即投入10%中性緩沖福爾馬林固定液(湖北泰康醫(yī)療設備有限公司，鄂孝食藥監(jiān)械生產(chǎn)備20160010號，規(guī)格 2 500 ml/瓶)中充分固定，然后放入全自動脫水機(德國徠卡病理系統(tǒng)，Leica ASP300S自動組織脫水機)中脫水、透明；將透明度好的組織塊置入已在溫箱(58～60 ℃)內(nèi)熔化的石蠟內(nèi)浸蠟，然后包埋；將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片(一般厚度為5～8 μm)，然后將薄片放入加熱(40 ℃)的水中燙平，再貼到載玻片上，于45 ℃恒溫箱[上海精宏，DHG-9053A電熱恒溫(鼓風)干燥箱]中烘干；用二甲苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度乙醇置換二甲苯，最后入蒸餾水水化，之后對切片進行HE染色；并將染色的切片經(jīng)梯度乙醇脫水、二甲苯透明，再在載玻片上加中性樹膠封片；最后醫(yī)師根據(jù)術(shù)后病理檢查方法對結(jié)節(jié)進行閱片、診斷。

1.3 觀察指標

以術(shù)后病理檢查結(jié)果為金標準，判斷術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷肺亞厘米結(jié)節(jié)的準確率及影響因素。結(jié)節(jié)的定性判斷：良性結(jié)節(jié)，細胞學、病理學均未發(fā)現(xiàn)惡性細胞或組織，至少有一項查到良性細胞或組織；惡性結(jié)節(jié)，細胞學、病理學至少有一項查到惡性細胞或組織；陰性，細胞學、病理學均未發(fā)現(xiàn)有診斷意義的細胞或組織，即未成功獲取標本。

1.4 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果

2.1 術(shù)中快速冰凍病理檢查的診斷準確率

88例肺亞厘米結(jié)節(jié)患者，經(jīng)術(shù)后病理檢查顯示，68例惡性結(jié)節(jié)，20例良性結(jié)節(jié)；經(jīng)術(shù)中快速冰凍病理檢查顯示，66例惡性結(jié)節(jié)，19例良性結(jié)節(jié)，3例誤診或漏診，診斷準確率為96.59%(85/88)。

2.2 影響術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷準確率的單因素分析

單因素分析結(jié)果顯示，準確診斷組與誤診或漏診組的冷凍溫度、冷凍時間及取材規(guī)范性比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

2.3 影響術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷準確率的多因素分析

多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，冷凍溫度、冷凍時間、取材規(guī)范性均為影響術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷準確率的因素(P<0.05)，見表2。

表2 影響術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷準確率的多因素分析

3 討論

隨著肺亞厘米結(jié)節(jié)患病人數(shù)的增加，此類肺部病變在臨床診斷工作中逐漸受到關(guān)注。依據(jù)既往經(jīng)驗，肺亞厘米結(jié)節(jié)中惡性結(jié)節(jié)的占比較高[4]。然而，受病灶體積、癥狀等因素的影響，臨床對肺亞厘米結(jié)節(jié)的診斷存在一定的困難[5]。為了避免因誤診或漏診而影響惡性肺亞厘米結(jié)節(jié)患者的預后，臨床需及時采取有效的方法進行診斷。

術(shù)中快速冰凍病理檢查基于恒溫冰凍切片機的支持，主要通過術(shù)中快速病理檢查對結(jié)節(jié)進行定性，為患者手術(shù)方案的制定、組織切除范圍的確定提供依據(jù)。該檢查方法的應用優(yōu)勢較多，具體如下。(1)診斷效率較高：術(shù)后病理診斷需經(jīng)過組織處理、制備切片、檢查結(jié)果判斷等環(huán)節(jié)[6]，整個檢查流程的耗時較長，難以為惡性肺亞厘米結(jié)節(jié)患者的臨床治療提供有效支持；而術(shù)中快速冰凍病理檢查方法采用恒溫冰凍切片機，其具有冰凍、切片準備一體化的特征，可有效提高病理診斷效率。(2)診斷準確率較高：本研究結(jié)果顯示，術(shù)中快速冰凍病理檢查的診斷準確率為96.59%，分析原因可能為，該方法可在短時間內(nèi)完成標本檢測，降低外部因素的影響，因此準確率較高。(3)保障手術(shù)效果：術(shù)中快速冰凍病理檢查、術(shù)后病理檢查均屬于有創(chuàng)性診斷方法，若采用術(shù)后病理檢查方法，術(shù)中醫(yī)師只能依據(jù)經(jīng)驗判定肺亞厘米結(jié)節(jié)患者的手術(shù)切除范圍(術(shù)中暴露病灶位置、顏色等)，這對醫(yī)師的手術(shù)經(jīng)驗、手術(shù)操作熟練程度等均提出了較高的要求[7]，若醫(yī)師經(jīng)驗不足，可能會影響肺亞厘米結(jié)節(jié)患者的手術(shù)效果；而采用術(shù)中快速冰凍病理檢查方法，醫(yī)師可在術(shù)中獲取肺結(jié)節(jié)的診斷結(jié)果，并據(jù)此合理確定結(jié)節(jié)病灶的切除范圍，如為良性，僅切除肺亞厘米結(jié)節(jié)組織即可，如為惡性，則需同時切除肺亞厘米結(jié)節(jié)及周圍一定范圍的組織，且術(shù)中快速冰凍病理檢查可幫助肺結(jié)節(jié)尤其是肺癌患者實現(xiàn)早期治療，減少不良預后。(4)提高患者滿意度：在臨床診療工作中，肺亞厘米結(jié)節(jié)患者的滿意度主要受診斷效率、手術(shù)時間等因素的影響[8]；與術(shù)后病理檢查方法比較，術(shù)中快速冰凍病理檢查方法可在較短時間內(nèi)獲取肺結(jié)節(jié)的診斷結(jié)果，不僅可避免等待檢查結(jié)果時間過長的問題，還可提高手術(shù)效率，控制手術(shù)時間，因此，患者的滿意度較高。

本研究多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，影響術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷準確率的因素主要包含以下幾方面。(1)取材規(guī)范性：肺亞厘米結(jié)節(jié)患者的病灶組織較小，在采集肺結(jié)節(jié)標本時，若取材不規(guī)范(疏忽微小標本的超聲處理、結(jié)節(jié)采集不完整等)，易影響切片質(zhì)量，進而增加誤診或漏診風險。(2)冷凍溫度：在應用術(shù)中快速冰凍病理檢查方法診斷肺亞厘米結(jié)節(jié)的過程中，肺結(jié)節(jié)組織的冰凍溫度也會影響診斷準確率，如冷凍溫度過低，會損害肺結(jié)節(jié)組織結(jié)構(gòu)及細胞完整性，進而影響最終診斷準確率；如冷凍溫度偏高，可能會因組織冰凍不充分，進而干擾肺亞厘米結(jié)節(jié)診斷的可靠性。(3)冷凍時間：冷凍時間過短或過長均可能干擾診斷準確率，這是因為當冷凍時間不達標時，可能導致細胞出現(xiàn)體積脹大、細胞拉長、胞內(nèi)空泡、細胞核變形等假象，增加診斷困難。

為提升術(shù)中快速冰凍病理檢查的診斷準確率，我們可采取以下措施。(1)加強取材管理：鑒于肺結(jié)節(jié)組織取材規(guī)范性與術(shù)中快速冰凍病理檢查結(jié)果的密切關(guān)聯(lián)，可將取材管理作為重點，通過對病理醫(yī)師開展培訓的方式，確保其能夠規(guī)范、熟練地掌握肺結(jié)節(jié)取材方法及微小標本超聲處理方法等技能，以便提升冰凍切片質(zhì)量，進而提升術(shù)中快速冰凍病理檢查準確率，為此類肺部疾病患者的后續(xù)治療提供支持。(2)合理設置組織冷凍溫度及冷凍時間：不同類型標本對冷凍溫度的要求不同，通常情況下，脂肪組織標本的最佳冷凍溫度為<-50 ℃，而卵巢、子宮等組織的最佳冷凍溫度為-18～-20 ℃，為保障冰凍肺結(jié)節(jié)切片的質(zhì)量，在針對肺結(jié)節(jié)組織進行冰凍處理時，應注意將冷凍溫度設置為-15～-20 ℃；而在冷凍時間方面，我們需根據(jù)組織邊緣的凝固狀況，確定最佳冷凍時間。

本研究仍存在不足之處，如在對影響術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷結(jié)果進行單因素分析時，由于誤診或漏診樣本數(shù)較少，無法通過分組對照試驗更加精準地確認影響檢測結(jié)果的單因素，因此，在后續(xù)的研究中應擴大樣本規(guī)模，通過差異性對比的方式找出影響診斷準確率的單因素，進而使多因素分析得到更高等級的證據(jù)支持。

綜上所述，術(shù)中快速冰凍病理檢查診斷肺亞厘米結(jié)節(jié)的準確率較高，為充分發(fā)揮該方法的價值，需加強檢查期間取材的規(guī)范，以及對冷凍溫度和冷凍時間的控制。