周鵬飛,楊永興,汪海,王惠明
(隴南市經(jīng)濟(jì)林研究院核桃研究所,甘肅 武都 746000)
近年來,隨著人們生活水平的提高,心血管疾病已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人類健康[1]。目前國內(nèi)外治療方案首選為生活方式的干預(yù),即通過控制飲食與運(yùn)動(dòng)進(jìn)行改善,隨后再進(jìn)行藥物治療,但是在藥物治療過程中可能會(huì)產(chǎn)生藥物相互作用,甚至毒副作用,影響其最終治療效果[2-3]。因此,飲食對(duì)心血管疾病的預(yù)防及治療極其重要。如楊敏等[4]人發(fā)現(xiàn)長鏈多不飽和脂肪酸可調(diào)節(jié)人體脂質(zhì)代謝、防止血栓形成,預(yù)防心腦血管疾病。
核桃油是核桃仁第一主要成分[5],不飽和脂肪酸在90以上,由亞油酸,油酸,亞麻酸和棕櫚酸等成分組成,且亞油酸與α-亞麻酸比值接近于4∶1;此外核桃油還富含維生素E、磷脂、角鯊烯、黃酮類等化合物,使其在抗炎、抗癌、健腦等方面功效顯著[6-7],但是品種不同,其脂肪酸組成及含量存在一定程度差異[8]。因此研究對(duì)‘清香’核桃油脂肪酸組成進(jìn)行分析,并對(duì)其心血管結(jié)構(gòu)改善作用進(jìn)行性研究,研究結(jié)果為核桃油保健作用及產(chǎn)品開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
‘清香’核桃油來源于隴南市武都區(qū)城關(guān)鎮(zhèn)吉石壩黃家壩核桃園冷榨所得;昆明小鼠購買于河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心?;A(chǔ)飼料為23.07 %蛋白質(zhì)+11.85 %脂肪+65.08 %碳水化合物;高脂飼料為基礎(chǔ)飼料+15 %豬油+20 %蔗糖+1.2 %膽固醇+0.2%膽酸鈉。
高脂飼料,購自北京華阜康生物科技股份有限公司;總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)及高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)檢測試劑盒購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;AL/AS1310與TRACE1300 ISQ自動(dòng)進(jìn)樣-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Thermo scientific)。
1.3.1 脂肪酸組成分析。參考GB 5009.168-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪酸的測定》[9]。
1.3.2 高血脂改善作用研究。分組及飼養(yǎng) 選取60只昆明小鼠(雌雄各30只)適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,然后從中選取體重約30 g的雌雄小鼠30只(雌雄各15只),分為陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,且每組10只(雌雄各5只):陽性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組使用高脂飼料喂養(yǎng),陰性對(duì)照組使用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)(三組除了喂養(yǎng)飼料不同外,其余飼養(yǎng)條件相同),喂養(yǎng)時(shí)間為30 d。隨后,陽性對(duì)照組、陰性對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組均使用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng),且實(shí)驗(yàn)組每只小鼠每天灌胃0.3 mL核桃油,灌胃20 d,進(jìn)行取樣。
采樣 小鼠采用后頸椎脫臼法處死,然后收集血液樣品以及肝位血管組織。
血清處理及血脂指標(biāo)檢測 各組血樣在室溫條件下放置于40 min,然后3000 r/min離心15 min,收集上層血清,按照試劑盒說明書TC、TG、LDL-C、HDL-C的方法進(jìn)行檢測。
HE染色 使用4%多聚甲醛固定液對(duì)肝部血管組織組織進(jìn)行固定,然后固經(jīng)HE染色分析其病理。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以(X±S)形式表示,利用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,組間差異使用LSD法比較,其中P<0.05差異顯著。
如表1所示,‘清香’核桃油脂肪酸主要成分由亞油酸、油酸、棕櫚酸、亞麻酸組成,且亞油酸含量最高,油酸次之,說明清香’核桃油貨架期較長[10],且對(duì)血液中的膽固醇具有較好降解功效[11]。
表1 ‘清香’核桃油脂肪酸組成及相對(duì)含量
2.2.1 血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C分析。如表2所示,與陰性對(duì)照組相比較,陽性對(duì)照組TC、TG、HDL-C、LDL-C含量增加顯著(P<0.05),說明本實(shí)驗(yàn)所建立的高血脂模型符合要求;與陽性對(duì)照組相比較,實(shí)驗(yàn)組TC、TG、HDL-C、LDL-C含量降低顯著著(P<0.05),且與陰性對(duì)照組相比較,實(shí)驗(yàn)組TC、TG、HDL-C、LDL-C含量不顯著著(P>0.05),說明‘清香’核桃油能夠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量,此研究結(jié)果與李小迪等人研究結(jié)果一致。
表2 不同組血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C含量
2.2.2 血管結(jié)構(gòu)改善作用。由圖1、表3可知,‘清香’核桃油對(duì)血管壁厚度及血管腔面積具有改善作用.這是由于亞油酸能夠減少高脂飲食大鼠體重和體脂含量[12],降低血脂及脂肪組織中脂蛋白、脂肪酶等活性,增強(qiáng)肝脂酶活性,進(jìn)一步改善小鼠血管粥樣硬化的血清中脂肪酸的含量和組成[13],使血管壁厚度降低、血管腔面積增加,從而達(dá)到對(duì)血管結(jié)構(gòu)改善作用。
A為陽性對(duì)照組;B為陰性對(duì)照組;C為陰性對(duì)照組。
表3 血管結(jié)構(gòu)變化
‘清香’核桃油脂肪酸主要成分依次為亞油酸、油酸、棕櫚酸、亞麻酸組成,且對(duì)高血脂癥血管具有改善作用。