董佳敏，盧 濤，李 珂，李夢佳，王旭丹，葛東宇，吳 瑩，2

（1.北京中醫(yī)藥大學，北京 102488；2.廣西醫(yī)科大學附屬柳州市人民醫(yī)院，廣西 柳州 545008）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是炎癥性腸?。╥nflammatoryboweldisease，IBD）最常見的一種類型，主要癥狀為腹痛、腹瀉、便血、體重下降，易發(fā)展為難治的結(jié)直腸癌，其發(fā)病率近年來呈上升趨勢［1，2］。UC 的 發(fā) 病 原 因 及 機 制 普 遍 認 為 與 易 感 基因、環(huán)境因素、飲食習慣、精神疾患、腸道菌群種類以及數(shù)量改變、異常的免疫反應作用于腸道共生微生物以及腸黏膜有關(guān)［3，4］。干擾素（interferon，IFN）主要包括Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型，其中Ⅰ型和Ⅲ型干擾素可通過相同的JAK/STAT 信號通路，激活干擾素刺激基因（ISGs）的轉(zhuǎn)錄，誘導下游信號的表達，從而在疾病中發(fā)揮作用［5］。Ⅰ型和Ⅲ型IFN 在UC的發(fā)病過程中起到重要作用，Ⅰ型IFN 能通過調(diào)節(jié)抗炎和促炎過程維持腸道的免疫平衡，臨床可使用Ⅰ型IFN 治療UC；缺失Ⅲ型干擾素受體的小鼠體重顯著下降，并且加重了腸道的炎性損傷；也有觀點認為Ⅰ型和Ⅲ型IFN 的表達會加重炎癥反應［6-9］。因此探究Ⅰ型和Ⅲ型IFN 在UC 結(jié)腸中的表達情況可能有助于治療UC。

在中醫(yī)學中，UC 多歸屬于“痢疾”、“泄瀉”、“腸澼”、“腸風”和“滯下”等范疇。臨床常見證型以脾腎陽虛證多見［10，11］。四神丸具有溫腎健脾，澀腸止瀉的作用，可治療脾腎陽虛之五更瀉，臨床常用來治 療UC 等 腸 道 疾 ?。?2，13］。但 四 神 丸 治 療UC 的 作用機制是否與Ⅰ型、Ⅲ型IFN 及其受體有關(guān)鮮有報道。本研究采用DSS 制備急性UC 模型，觀察四神丸對UC 小鼠癥狀、體征的改善及小鼠結(jié)腸組織中Ⅰ型、Ⅲ型IFN 及其受體表達的變化，為Ⅰ型、Ⅲ型IFN 對UC 發(fā)揮作用的進一步研究以及在臨床更合理的使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物

SPF 級 雄 性C57BL/6Cnc 小 鼠40 只，6～7 周齡，18～22 g，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，動物合格證號SCXK（京）2016-0006，飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學良鄉(xiāng)校區(qū)動物房，溫度18～22 ℃，相對濕度50%～60%，動物實驗經(jīng)北京中醫(yī)藥大學實驗動物倫理委員會審查通過（BUCM-4-2020091401-3049）。

1.2 主要試劑與儀器

四神丸（批號20080016）購自北京同仁堂（集團）有限公司；柳氮磺胺吡啶腸溶片（批號09190911）購自上海信誼天平藥業(yè)有限公司；低分子葡聚糖硫酸鈉（批號CAM6550）購自日本和光純藥工業(yè)株式會社（Wako）；鄰聯(lián)甲苯胺法糞便隱血定性檢測試劑盒（批號L18S11G125170）購于上海源葉生物科技有限公司；蘇木素-伊紅（HE）染色試劑盒、高效RIPA 組織細胞裂解液、BCA 蛋白濃度測定試劑盒、SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒購自北京索萊寶科技有限公司；miRNeasy Mini Kit 試劑盒購自德國Qiagen 公司；Reveraid First Strand cDNA Syn‐thesis Kit 試劑盒購自美國賽默飛世爾科技公司（ThermoFisher）；Power STBR?Green PCR Master‐Mix 購自美國應用生物系統(tǒng)公司（Appliedbiosys‐tems）；PCR 引物由生工生物工程（上海）股份有限公 司 合 成；Mouse IL-28B（IFN lambda3）Uncoate‐dELISA 試劑盒、Recombinant Mouse IL-28 Ralpha/IFN-lambda R1 Fc Chimera，CF 購自美國英杰生命技術(shù)有限公司（Invitrogen）；VeriKineTMMouse IFN Alpha ELISA Kit、VeriKineTMMouse IFN Beta ELI‐SA Kit 試劑盒購自美國維百奧生物科技（PBL As‐say Science）有限公司；Mouse IL-28A Simple Step ELISA?Kit 試 劑 盒 購 自 美 國Abcam 公 司；Mouse IFN-α/β R2 Antibody 試 劑 購 自 美 國R&D 公 司；HRP-conjugated Affinipure Rabbit Anti-Goat IgG（H+L）試劑、普通ECL 發(fā)光化學檢測試劑盒購自美 國Proteintech 公 司；Rabbit Anti-Mouse IFN-α/β R1 Antibody 試劑購自中國北京義翹神州生物技術(shù)有限公司（Sino Biological Inc.）。

石蠟包埋機HistoCore Aracadia H、研究級高分辨顯微分析系統(tǒng)、攤片機HI1210、烤片臺HI1220、自動組織脫水機HistoCore Pearl、冷卻態(tài)HistoCore Arcadia C、全自動輪轉(zhuǎn)式切片機、多功能染色機ST5020、RM2255 購自德國徠卡（Leica）顯微系統(tǒng)有限公司；低溫離心機Centrifuge5417R 購自德國艾本德（Eppendorf）；多功能熒光分子成像系統(tǒng)、電泳儀、電轉(zhuǎn)儀購自美國伯樂公司（Bio-Rad）；多功能酶標儀SpectraMax?i3x 購自美國美谷分子儀器有限公司（MD）；熒光定量PCR 儀QuantStudio?Real-Time PCR 購自美國賽默飛世爾科技公司（Thermo Fish‐er）。

1.3 實驗方法

1.3.1 四神丸對急性UC 小鼠疾病活動指數(shù)（DAI）的影響 雄性C57BL/6Cnc 小鼠隨機分為對照組（Control）、葡聚糖硫酸鈉模型組（DSS）、四神丸組（SSW）與柳氮磺胺吡啶組（SASP）。除對照組外，其余小鼠4% DSS 灌胃給藥進行造模，0.2 mL/d，連續(xù)5 d，造模第2 天后灌胃給藥，SSW 組小鼠給予1.5 g/kg 四神丸0.2 mL，SASP 組小鼠給予0.25 g/kg SASP 0.2 mL，Control 組 和DSS 組 給 予 等 體 積生理鹽水，2 次/d，連續(xù)7 d。造模后每天記錄小鼠體重并計算體重分數(shù)；觀察糞便黏稠度；鄰聯(lián)甲苯胺法檢測糞便隱血情況。根據(jù)體重分數(shù)、糞便黏稠度和糞便隱血分數(shù)計算小鼠的疾病活動指數(shù)評分（DAI）。

1.3.2 四神丸對急性UC 小鼠結(jié)腸組織病理變化的影響 小鼠末次給藥后禁食不禁水1 d，脫頸處死小鼠，剪取結(jié)腸，清洗后取約3 cm 結(jié)腸用10%中性福爾馬林溶液固定24 h，自來水充分沖浸。脫水、石蠟包埋、切片、HE 染色法進行染色，在顯微鏡下觀察并計算組織學評分。

1.3.3 qPCR 檢 測 小 鼠 結(jié) 腸 組 織 中IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 mRNAs 水 平 取100 mg 結(jié) 腸 組織，加入液氮進行研磨，用勻漿機進行組織勻漿，按照miRNeasy Mini Kit 試劑盒的說明書提取RNA，測定RNA 濃度，并進行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。建立20 μL qPCR 反 應 體 系：Power SYBR GreenPCR Master Mix 10 μL，上游引物（10 mol/L）0.4 μL，下游引物（10 mol/L）0.4 μL，無核酸酶的高純水7.2 μL，cDNA（原 液5 倍 稀 釋）2 μL。95 ℃10 min；95 ℃5 s，60 ℃30 s，40 個循 環(huán)；95 ℃15 s，60 ℃1 min，95 ℃15 s。

表1 引物序列Tab 1 Sequence primers

1.3.4 ELISA 檢測小鼠結(jié)腸組織中IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 水平 取100 mg 結(jié) 腸組織加1 mL生理鹽水研磨，將研磨液轉(zhuǎn)移至1.5 mL EP 管，置于冰上20 min，每隔5 min 震蕩一下，12 000 r/min 離心5 min，吸取上清液，BCA 法測定蛋白濃度，將樣品稀釋50 倍，用ELISA 試劑盒測定IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 的表達水平。

1.3.5 Western blot 檢測小鼠結(jié)腸組織中干擾素受體IFNAR1、IFNAR2、IFNLR1 表達 取一小段結(jié)腸組織剪碎，加入高效RIPA 組織、細胞裂解液，充分裂解組織，再將組織裂解液吸取到1.5 mL EP 管中，12 000 r/min 離心5 min。吸取上清液，BCA 法測定蛋白濃度并進行變性。蛋白樣品使用SDSPAGE 凝膠電泳，電轉(zhuǎn)后封閉1 h，加入一抗（IFN-α/βR2、IFNLR1、IFN-α/βR1），4 ℃孵育過夜，用PBST洗三次，5～10 min/次，加入二抗，孵育1 h，用PBST洗三次，5～10 min/次。加入ECL 發(fā)光液，使用多功能熒光分子成像系統(tǒng)進行曝光。

1.4 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)使用Graphpad Prism 8.0.2 處理，采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）進行各組間差異比較，當方差不齊時，各組間比較采用Tamhance′s T2 檢驗；當方差齊時，各組間比較采用LSD 檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 四神丸能夠降低UC 小鼠DAI 水平

與DSS 組相比，四神丸和SASP 治療后小鼠體重分數(shù)顯著降低（P<0.001）；腹瀉分數(shù)顯著降低（P<0.01～0.001）；便血分數(shù)明顯降低（P<0.01）。與對照組相比，DSS 組小鼠的DAI 明顯上升（P<0.001），四神丸組與SASP 組小鼠的DAI 也顯著上升（P<0.001）。但與DSS 組相比，四神丸和SASP治療組小鼠的DAI 都明顯下降（P<0.001）。見表2、圖1。

圖1 各組小鼠DAI 的變化Fig 1 DAI changes of mice in each group

表2 各組小鼠疾病活動指數(shù)的變化（±s，n=10）Tab 2 Disease activity index changes of mice in each group（±s，n=10）

表2 各組小鼠疾病活動指數(shù)的變化（±s，n=10）Tab 2 Disease activity index changes of mice in each group（±s，n=10）

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；與DSS 組相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001。

DAI 0.76±0.52 5.48±1.43***2.82±0.85###***2.89±0.46###***36.82 0.000組別對照組DSS 組四神丸組SASP 組FP Weight score 0.71±0.58 3.06±0.59***1.46±0.52###1.82±0.50###25.60 0.000 Diarrhea 0.00 1.72±0.59***0.74±0.30###0.77±0.41##26.29 0.000 Hematochezia 0.00 2.36±1.00***0.96±0.46##0.93±0.24##23.93 0.000

2.2 四神丸能夠恢復結(jié)腸組織病理變化

結(jié)腸組織HE 染色表明四神丸能減少炎性細胞浸潤，恢復結(jié)腸黏膜、隱窩結(jié)構(gòu)，縮小淋巴結(jié)，有效減輕組織病變。與對照組小鼠相比，DSS 組、四神丸組和SASP 組小鼠結(jié)腸組織的組織學評分明顯升高（P<0.01～0.001）。四神丸或SASP 治療后，小鼠結(jié)腸組織的組織學評分顯著降低（P<0.001）。見表3、圖2。

圖2 各組小鼠結(jié)腸組織HE 染色（×200）Fig 2 HE staining of mice in each group（×200）

表3 各組小鼠組織學評分的變化（±s，n=10）Tab 3 Histological score changes of mice in each group（±s，n=10）

表3 各組小鼠組織學評分的變化（±s，n=10）Tab 3 Histological score changes of mice in each group（±s，n=10）

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；與DSS 組相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001。

HE stain 0.00 12.50±0.93***1.00±0.89###**1.29±0.76###***563.60 0.00組別對照組DSS 組四神丸組SASP 組FP

2.3 四神丸對急性UC 小鼠結(jié)腸組織中IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 mRNAs 表達的影響

與對照組相比，DSS 組小鼠結(jié)腸組織中IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 mRNA 水平明顯降低（P<0.01～0.05）；四神丸組IFN-β、IFN-λ2 mRNA 水平升高（P<0.05），IFN-α、IFN-λ3 mRNA 水平升高但無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。經(jīng)治療后與DSS 組相比，四神丸組IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 mRNA水平明顯上升（P<0.01～0.001）。見表4。

表4 各組小鼠IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 mRNAs 的變化（±s，n=3）Tab 4 Changes of IFN-α，IFN-β，IFN-λ2 and IFN-λ3 mRNAs of mice in each group（±s，n=3）

表4 各組小鼠IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 mRNAs 的變化（±s，n=3）Tab 4 Changes of IFN-α，IFN-β，IFN-λ2 and IFN-λ3 mRNAs of mice in each group（±s，n=3）

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；與DSS 組相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001。

IFN-λ3 1.16±0.23 0.28±0.16*1.91±0.69##10.88 0.010組別對照組DSS 組四神丸組F P IFN-α 1.08±0.19 0.13±0.07**2.19±0.80###22.86 0.002 IFN-β 1.03±0.16 0.16±0.20*2.01±0.66###*15.12 0.005 IFN-λ2 0.91±0.13 0.17±0.16*1.73±0.44###*24.03 0.001

2.4 四神丸對急性UC 小鼠結(jié)腸組織中IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 水平的影響

ELISA 法檢測小鼠結(jié)腸組織勻漿上清中IFNα、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 的表達發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，DSS 組IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 水平明顯降低（P<0.01～0.001）；四神丸組IFN-β 水平升高（P<0.01），IFN-α、IFN-λ2、IFN-λ3 水平升高無統(tǒng)計學意義；SASP 組IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 水平均有明顯升高（P<0.01～0.001）。經(jīng)治療后與DSS 組相比，四神丸組IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFNλ3 水 平 均 明 顯 升 高（P<0.01～0.001），SASP 組IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 水平均明顯升高（P<0.01～0.001）。見表5。

表5 各組小鼠IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 的變化（±s，n=3）Tab 5 IFN-α，IFN-β，IFN-λ2 and IFN-λ3 change of mice in each group（±s，n=3）

表5 各組小鼠IFN-α、IFN-β、IFN-λ2、IFN-λ3 的變化（±s，n=3）Tab 5 IFN-α，IFN-β，IFN-λ2 and IFN-λ3 change of mice in each group（±s，n=3）

注：與Control 小鼠相比*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；與DSS 小鼠相比#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001。

IFN-λ3 233.70±20.08 56.86±14.37***242.80±32.76###390.80±31.86###***110.70 0.00組別對照組DSS 組四神丸組SASP 組F P IFN-α 67.96±2.94 58.74±1.25**74.49±5.32##78.39±1.17###***29.60 0.00 IFN-β 78.85±2.67 41.00±19.11**135.90±23.76###**212.60±61.87##**18.72 0.00 IFN-λ2 76.38±3.00 15.02±5.79***64.59±19.62##102.00±5.27###***46.86 0.00

2.5 四神丸對急性UC 小鼠結(jié)腸組織中IFNAR1、IFNAR2、IFNLR1 表達的影響

與對照組相比，DSS 組IFNAR1、IFNAR2、IF‐NLR1 水平明顯降低（P<0.05～0.01）；四神丸組IF‐NAR2 水平升高（P<0.001），IFNAR1、IFNLR1 水平升高但差異無統(tǒng)計學意義；SASP 組IFNAR2、IF‐NLR1 水平升高（P<0.05～0.001），IFNAR1 水平升高無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。經(jīng)治療后與DSS 組相比，四神丸組和SASP 組IFNAR1、IFNAR2、IFN‐LR1 水 平 均 明 顯 升 高（P<0.05～0.001）。 見 表6、圖3。

圖3 各組小鼠結(jié)腸組織中IFNAR1、IFNAR2、IFNLR1 的表達水平Fig 3 Expression levels of IFNAR1，IFNAR2 and IFN?LR1 in colon tissues of mice in each group

表6 各組小鼠IFNAR1、IFNAR2、IFNLR1 的變化（±s，n=3）Tab 6 IFNAR1，IFNAR2 andI FNLR1 changes of mice in each group（±s，n=3）

表6 各組小鼠IFNAR1、IFNAR2、IFNLR1 的變化（±s，n=3）Tab 6 IFNAR1，IFNAR2 andI FNLR1 changes of mice in each group（±s，n=3）

注：與對照組相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；與DSS 組相比，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001。

IFNLR1 1.04±0.06 0.57±0.14**1.41±0.36#0.90±0.05#*9.275 0.005組別對照組DSS 組四神丸組SASP 組F P IFNAR1 0.95±0.06 0.60±0.11**1.14±0.20#0.93±0.08#10.46 0.003 IFNAR2 0.52±0.05 0.37±0.03*0.84±0.03###***1.18±0.01###***338.50 0.000

3 討論

UC 是一種自發(fā)性的慢性疾病，而這種慢性疾病被描述為開始于直腸并以一種連續(xù)的損傷擴展到鄰近的結(jié)腸。隨著人們生活水平的不斷提升，生活環(huán)境、生活習慣和飲食結(jié)構(gòu)的改變，我國UC 的發(fā)病率正逐年增高。UC 病程較長，常規(guī)藥物（如氨基水楊酸類藥物、免疫抑制劑、類固醇類藥物）往往只能緩解癥狀，難以完全治愈，并且一些患者對于常規(guī)藥物治療有不良反應，很容易發(fā)展成為難治性的UC［14］。因此尋求更加有效的方法治療UC 成為重中之重。

腸道微生物、腸黏液層、腸道上皮、免疫細胞相互 作 用 保 持 胃 腸 道 的 穩(wěn) 態(tài)［15，16］。而 在UC 中，這 一動態(tài)平衡被完全打破。UC 患者的腸上皮層完整性降低；黏膜組織的通透性增加［17］；固有免疫系統(tǒng)紊亂，諸多炎性細胞因子過度表達加重炎性損害，如IL-1β、IL-8、TNF-α、IL-6、IL-23、IL-12、IL-17 等［18］；同時T 細胞的平衡也被打破，輔助性T 細胞（Th1、Th2）的過度增多，導致Th1 和Th2 細胞和調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）的數(shù)量不平衡［19］，活化的T 細胞產(chǎn)生并釋放炎性因子，進一步加重持續(xù)性的炎癥［20］。最近研究發(fā)現(xiàn)干擾素系統(tǒng)在UC 的進程中也發(fā)揮了重要的作用。干擾素是被發(fā)現(xiàn)的具有干擾病毒復制作用的細胞因子［21］，分為I 型、Ⅱ型和Ⅲ型IFN。Ⅰ型IFN 包 括IFNα、IFNβ，通 過 異 質(zhì) 二 聚 體 受 體（IFNαβR）發(fā)揮作用，激活JAK/STAT 信號通路，形成干擾素刺激基因因子（ISGF）3 從而發(fā)揮作用［22］。在平常狀態(tài)下，Ⅰ型IFN 在腸道或者其它組織中含量很低［23］。研究表明I 型IFN 信號對UC 的作用有兩面性。Ⅰ型IFN 信號缺失的小鼠結(jié)腸炎的癥狀加重，Ⅰ型IFN 的表達能夠維持腸道的免疫平衡［7］。也有研究發(fā)現(xiàn)Ⅰ型IFN 增多，反而加重了腸道炎癥［6，24］。Ⅱ型干擾素IFN-γ 主要起到促炎作用，破壞結(jié)腸黏膜的完整性，導致UC 的發(fā)生［25］。Ⅲ型IFN（包含IFNλ1，2，3，4）利用與Ⅰ型IFN 相同的JAK/STAT 信號通路發(fā)揮作用［8］，但其受體主要由IFNλR1 和IL-10R2 亞 基 組 成［26］。與Ⅰ型IFN 相 比，Ⅲ型IFN 可能在免疫信號的傳遞上和腸道上皮細胞作用更加密切。IFN-λ 可以減少過度的炎性反應，卻不會引起機體防御功能減弱。Durbin 等［27］報道在用DSS 誘導結(jié)腸炎后，缺失Ⅲ型干擾素受體的小鼠CXCL10 的表達比正常小鼠顯著上調(diào)，這引起了小鼠體重的顯著下降，并且加重了腸道的炎性損傷。

在中醫(yī)理論中，UC 大多是由外感時邪、飲食不潔、飲食不節(jié)、情志內(nèi)傷以及素體脾腎不足所致，引起機體的氣滯、血瘀、濕熱、痰濁等。UC 屬于本虛標實，寒熱錯雜，以脾腎陽虛為本，濕熱血瘀為標［10］。其中脾腎陽虛證以溫補脾腎、收澀固脫為治療原則，多用四神丸治療［28，29］。諸多研究表明四神丸能夠緩解UC 患者的癥狀體征，并具有一定控制炎癥的作用［30-32］。四神丸能夠有效降低脾腎陽虛型UC 大鼠結(jié)腸組織中蛋白激酶B（Akt）、磷脂酰肌醇-3 激 酶（PI3K）以 及 雷 帕 霉 素 靶 蛋 白（mTOR）mRNAs 水平，能夠增高IL-10 的表達水平，使p-PI3K、p-mTOR 以及p-Akt 蛋白的表達水平下降［29］。四神丸能夠有效降低IL-1β 的表達水平，升高IL-4的表達水平，升高IL-13 的表達水平，說明四神丸治療UC 大鼠的免疫機制可能與調(diào)節(jié)Th1/Th2 的免疫平衡有一定關(guān)聯(lián)，可以抑制過度的免疫反應［33］。本研究用四神丸治療DSS 誘導的小鼠急性UC 模型取得了良好的效果，印證了四神丸的治療作用。但目前四神丸治療UC 過程中干擾素系統(tǒng)所發(fā)揮的免疫學作用并不明確，筆者的研究發(fā)現(xiàn)模型組的結(jié)腸組織中Ⅰ型干擾素和Ⅲ型干擾素通路中IFN-α、IFN-β、IFN-λ2 和IFN-λ3 及 其 受 體IFNAR1、IF‐NAR2 和IFNLR1 的表達水平顯著降低，說明DSS誘導的急性小鼠UC 模型可能通過抑制Ⅰ型、Ⅲ型IFN 信號通路，使得免疫調(diào)節(jié)作用發(fā)生異常，從而導致結(jié)腸黏膜炎性損傷的加重。在經(jīng)過四神丸治療后，上述因子的表達水平均顯著升高，說明四神丸可能通過促進Ⅰ型、Ⅲ型IFN 及其受體的表達，對小鼠結(jié)腸黏膜的免疫反應進行調(diào)節(jié)，從而抑制過度的免疫反應造成的炎性損傷，使小鼠結(jié)腸黏膜結(jié)構(gòu)恢復正常。四神丸治療小鼠急性UC 時，Ⅰ型和Ⅲ型IFN 的表達變化，緩解了UC 小鼠的癥狀體征，減少了炎性損害，使UC 小鼠趨于康復。這一發(fā)現(xiàn)為進一步探討四神丸治療UC 時干擾素信號通路發(fā)揮的作用奠定了基礎(chǔ)。

作者貢獻度說明：

董佳敏、李珂、李夢佳進行實驗操作，數(shù)據(jù)收集整理及撰寫文章；盧濤、王旭丹、葛東宇、吳瑩對實驗設(shè)計，數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計及作圖，文章撰寫等進行指導。