林媚， 王天玉， 平新亮， 姚周麟

(浙江省柑橘研究所，浙江 臺州 318020)

柑橘屬蕓香科柑橘屬植物，因果實(shí)色香味美、酸甜可口、營養(yǎng)豐富而受消費(fèi)者喜愛。我國柑橘產(chǎn)量于2018年達(dá)到4 138.1×104t，占水果總產(chǎn)量的16.1%，為我國第一大水果[1]。柑橘產(chǎn)業(yè)是浙江省的農(nóng)業(yè)主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)之一，2019年栽培面積達(dá)8.86萬 hm2，產(chǎn)量達(dá)183.4萬 t，產(chǎn)值45.68億元，分別占全省水果栽培面積、產(chǎn)量和產(chǎn)值的28.0%、40.8%和26.9%[2]。因柑橘生長周期長，病蟲害多發(fā)，不可避免使用農(nóng)藥來提高產(chǎn)量及品質(zhì)，同時生產(chǎn)中使用的農(nóng)藥種類較多，而隨著人們健康意識的不斷增強(qiáng)，“吃得營養(yǎng)、吃得健康”成為現(xiàn)代人飲食的主流觀念[3]。由于近幾年一些高劇毒農(nóng)藥的禁限用，同時實(shí)際生產(chǎn)中病蟲害對一些農(nóng)藥抗性逐年增加，致使某些農(nóng)藥使用量存在增加趨勢，這些農(nóng)藥的大量使用最終是否會導(dǎo)致殘留超標(biāo)率提高或影響柑橘的質(zhì)量安全、出口貿(mào)易等，為保證該產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，需經(jīng)常性開展對柑橘果品的多殘留檢測及監(jiān)測。

農(nóng)藥殘留分析方法是果蔬產(chǎn)品質(zhì)量安全學(xué)科的主要內(nèi)容之一，目前農(nóng)藥多殘留分析方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)等[4-8]。目前已有對不同地區(qū)柑橘農(nóng)藥多殘留的調(diào)查與分析等相關(guān)研究[9-12]，但尚未見對浙江柑橘果品連續(xù)幾年跟蹤農(nóng)藥多殘留的相關(guān)報道。為此，本研究對浙江柑橘主產(chǎn)區(qū)的代表性品種在果品成熟期進(jìn)行連續(xù)3 a的樣本采集，采用GC-MS和LC-MS/MS檢測技術(shù)進(jìn)行136種農(nóng)藥多殘留分析，預(yù)期統(tǒng)計分析結(jié)果可為掌握浙江省柑橘生產(chǎn)用藥狀況、提高柑橘質(zhì)量安全、規(guī)避出口貿(mào)易壁壘和消費(fèi)引導(dǎo)等提供重要的理論和現(xiàn)實(shí)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2018—2020年每年9月初至12月底對浙江柑橘主產(chǎn)區(qū)臺州、寧波、衢州、溫州、金華等各生產(chǎn)基地(合作社、家庭農(nóng)場及種植大戶)選擇當(dāng)?shù)卮硇云贩N(溫州蜜柑、椪柑、紅美人等橘、柑類及柚類)在果品成熟期間進(jìn)行取樣，采樣方法參考GB/T 8855—2008[13]，共采集到鮮果樣品265個(表1)。

表1 2018—2020年柑橘樣品數(shù)及檢出農(nóng)藥數(shù)

1.2 主要儀器

GC-FPD：Agilent氣相色譜儀7890A；DB-17石英毛細(xì)管柱(30 m×0.53 mm，1.0 μm film)，美國Agilent公司；GC-MS：Agilent氣相色譜-質(zhì)譜儀7890A/5975C；DB-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm，0.25 μm film)，美國Agilent公司；UPLC-MS/MS Agilent 1290-6495；Agilent Ecipes Plus C18液相色譜柱(2.1 mm×50 mm，1.8 μm)，美國Agilent公司；多用途離心機(jī)：CL31/R型，美國Thermo Fisher公司；高通量組織研磨儀：Thmorgan CK2000，北京托摩根生物科技有限公司；氮吹儀：MD200-2，杭州奧盛儀器有限公司；超純水儀：Milli-Q A10型，美國Millipore公司。

1.3 主要試劑

乙腈、甲醇為色譜純，德國CNW Technologies GmbH公司；丙酮為色譜純，成都市科龍化工試劑廠；無水硫酸鎂、氯化鈉為分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)：40～63 mm，6 nm，德國CNW Technologies GmbH公司。

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品有敵敵畏、敵百蟲、殺蟲脒、甲拌磷、α-六六六、樂果、唑螨酯、β-六六六、γ-六六六、地蟲硫磷、嘧霉胺、δ-六六六、百菌清、氯唑磷、抗蚜威、甲基對硫磷、甲基毒死蜱、殺螟硫磷、馬拉硫磷、倍硫磷、三氯殺螨醇、毒死蜱、對硫磷、三唑酮、水胺硫磷、喹硫磷、稻豐散、噻螨酮、殺撲磷、苯硫威、殺螨酯、抑霉唑、p,p′-DDE、咯菌腈、噻嗪酮、殺螨特、p,p′-DDD、o,p′-DDT、三唑磷、p,p′-DDT、克螨特、亞胺硫磷、溴螨酯、聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、噠螨靈、氯氰菊酯、氰戊菊酯、苯醚甲環(huán)唑、溴氰菊酯、丙溴磷、甲基異柳磷、特丁硫磷、甲基硫環(huán)磷、治螟磷、嘧啶磷、速滅磷、乙基溴硫磷、異柳磷、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、矮壯素、丁酰肼、涕滅威亞砜、涕滅威砜、多菌靈、滅多威、雙甲脒、噻蟲嗪、噻菌靈、吡蟲啉、噻蟲胺、久效磷、啶蟲脒、3-羥基克百威、6-芐氨基嘌呤、赤霉素、霜脲氰、吲哚-3-乙酸、硫環(huán)磷、涕滅威、速滅威、磷胺、甲基硫菌靈、噻苯隆、萘乙酸、對氯苯氧乙酸、克百威、西維因(甲萘威)、葉蟬散(異丙威)、2,4-D、氯吡脲、甲霜靈、仲丁威、嘧菌酯、敵稗、烯酰嗎啉、多效唑、腈菌唑、聯(lián)苯肼酯、乙基谷硫磷、腐霉利、螺蟲乙酯、除蟲脲、烯效唑、異菌脲、苯線磷(亞礬)、氟蟲腈、啶氧菌酯、殺蟲畏、咪鮮胺、醚菌酯、氟啶脲、戊唑醇、蠅毒磷、二嗪磷、毒蟲畏、辛硫磷、甲基立枯磷、吡菌磷、甲氨基阿維菌素、茚蟲威、氟鈴脲、肟菌酯、唑蟲酰胺、乙硫磷、乙螨唑、滅幼脲、螺螨酯、氟胺氰菊酯、阿維菌素、丁硫克百威、依維菌素等136種，均為1 000 mg·L-1，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所。

1.4 樣品前處理

稱取10.00 g樣品，加入10.00 mL乙腈，振蕩提取30 min；加入4.00 g無水硫酸鎂+1.00 g氯化鈉，劇烈振蕩10 s，渦旋1 min；離心5 min(10 000 r·min-1)，取上清液3.00 mL至裝有50 mg PSA和250 mg無水硫酸鎂的離心管中，渦旋1 min，離心5 min(4 000 r·min-1);取1.00 mL上清液，氮吹(50 ℃)，1.00 mL丙酮定容上GC-MS[7]，剩余取適量有機(jī)相過濾膜上LC-MS/MS[8]，測定結(jié)果按照GB 2763—2019進(jìn)行判定[14]。

2 結(jié)果與分析

2.1 柑橘樣品數(shù)量及檢出農(nóng)藥種類

3 a的樣品采集信息及檢出農(nóng)藥數(shù)為表1，柑橘樣品中檢出農(nóng)藥殘留的38種農(nóng)藥為表2，包括殺蟲劑18種、殺菌劑11種、殺螨劑6種、生長調(diào)節(jié)劑3種。由表1可見，3 a柑橘總樣品265個，其中橘、柑類樣本212個，占80.0%，柚類樣本占20.0%；3 a樣品中殘留檢出共38種農(nóng)藥，其中橘、柑類樣品檢出36種農(nóng)藥殘留(百菌清、多效唑未檢出)，柚類樣品檢出22種，農(nóng)藥檢出種類以柚類相對較少。

表2 柑橘樣品中檢出殘留的38種農(nóng)藥

比較3 a之間樣品中農(nóng)藥種類檢出情況，柑橘總樣本與橘、柑類樣品基本一致，均為2019年農(nóng)藥檢出種類最多；從農(nóng)藥檢出數(shù)量比較，柚類每年少于橘、柑類，但柚類樣品農(nóng)藥檢出數(shù)量呈逐年增加趨勢。

2.2 農(nóng)藥殘留的超標(biāo)率比較

將3 a柑橘樣品農(nóng)藥殘留超標(biāo)情況按《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》(GB 2763—2019)進(jìn)行統(tǒng)計(表3)，其中2018年檢出1個橘、柑類樣品的丙溴磷超標(biāo)，超標(biāo)率為1.75%；2019年檢出6個樣品4種農(nóng)藥超標(biāo)，具體為1個柚類樣品殺撲磷超標(biāo)，5個橘、柑類樣品超標(biāo)，具體為水胺硫磷超標(biāo)樣1個、苯醚甲環(huán)唑超標(biāo)樣3個，苯醚甲環(huán)唑+聯(lián)苯肼脂均超標(biāo)樣1個，2019年超標(biāo)率為5.88%；而2020年僅檢出1個橘、柑類樣品丙溴磷超標(biāo)，超標(biāo)率為0.94%，則3 a總樣本超標(biāo)率3.02%；比較3 a的超標(biāo)情況，2019年總超標(biāo)率最高，超標(biāo)農(nóng)藥種類最多。

表3 3 a柑橘樣品農(nóng)藥殘留超標(biāo)情況

2.3 農(nóng)藥殘留檢出率比較

將2018—2020年柑橘樣品中的農(nóng)藥殘留檢出率進(jìn)行比較(表4)，同時再將每年農(nóng)藥殘留檢出率超過10%的進(jìn)行排序(圖1)，發(fā)現(xiàn)農(nóng)藥檢出種類及檢出率存在一些明顯的變化。2018年樣品共檢出19種農(nóng)藥殘留(8種殺蟲劑、8種殺菌劑、3種殺螨劑)，檢出率>10%的農(nóng)藥排序依次為毒死蜱(61.40%)>乙螨唑(35.09%)>咪鮮胺(31.58%)>甲基硫菌靈(26.32%)>戊唑醇(17.54%)>多菌靈(15.79%)、聯(lián)苯肼酯(15.79%)>丙溴磷(10.53%)等8種，檢出率最高為殺蟲劑毒死蜱，同時當(dāng)年有個別樣品存在違禁農(nóng)藥馬拉硫磷、水胺硫磷殘留檢出，檢出率分別為7.02%和3.51%。

2019年樣品中農(nóng)藥檢出種類最多，共34種(18種殺蟲劑、8種殺菌劑、6種殺螨劑及2種生長調(diào)節(jié)劑)，檢出率最高為殺螨劑乙螨唑，其中檢出率>10%的15種農(nóng)藥排序依次為乙螨唑(64.71%)>戊唑醇(42.16%)>聯(lián)苯肼酯(32.35%)>咪鮮胺(31.37%)>毒死蜱(28.43%)、噻嗪酮(28.43%)>嘧菌酯(22.55%)>甲基硫菌靈(20.59%)>啶蟲脒(19.61%)>螺螨酯(17.65%)>吡蟲啉(14.71%)>苯醚甲環(huán)唑(12.75%)、克螨特(12.75%)>氯氰菊酯(11.76%)、多菌靈(11.76%)。盡管2019年為3 a中樣品農(nóng)藥檢出種類最多的年份，但是，與2018年比較，有機(jī)磷農(nóng)藥馬拉硫磷、水胺硫磷、丙溴磷、殺撲磷檢出率均為0.98%，存在不同程度的下降，另外，毒死蜱農(nóng)藥殘留檢出率下降32.97%。

表4 3 a柑橘樣品中不同農(nóng)藥的殘留檢出率比較

圖1 3 a農(nóng)藥檢出率>10%的排序

2020年樣品中農(nóng)藥檢出30種(13種殺蟲劑、9種殺菌劑、5種殺螨劑及3種生長調(diào)節(jié)劑)，檢出率最高為殺菌劑苯醚甲環(huán)唑(43.40%)，檢出率>10%的17種農(nóng)藥排序依次為苯醚甲環(huán)唑(43.40%)>乙螨唑>(40.57%)>戊唑醇(33.02%)>啶蟲脒(32.08%)、螺螨酯(32.08%)>聯(lián)苯肼酯(28.30%)>吡蟲啉(26.42%)>氯氰菊酯(24.53%)>多菌靈(23.58%)>螺蟲乙酯(21.70%)>甲基硫菌靈(20.75%)>咪鮮胺(17.92%)>噻嗪酮(16.04%)>嘧菌酯(15.09%)>噻蟲嗪(13.21%)>毒死蜱(10.38%)、噠螨靈(10.38%)。與2019年比較，檢出率>10%的農(nóng)藥增加了2種，殺菌劑苯醚甲環(huán)唑檢出率上升20.65%，殺螨劑乙螨唑下降20.83%，殺蟲劑毒死蜱下降18.05%，而其他殺蟲劑如啶蟲脒、吡蟲啉、氯氰菊酯、螺蟲乙酯、噻蟲嗪等檢出率均有不同程度的上升。

2.4 農(nóng)藥多殘留分析

分別按農(nóng)藥殘留檢出數(shù)由小到大統(tǒng)計每年的樣品數(shù)占當(dāng)年總樣品的比例(圖2)，發(fā)現(xiàn)這3 a中2018年農(nóng)藥殘留未檢出樣品的比例最高，為12.28%，而2019、2020年分別僅為0.98%和2.83%；3 a樣品的檢出率依次為87.72%、99.02%和97.17%，樣品農(nóng)藥殘留的總檢出率為95.85%；再比較3 a中僅1種農(nóng)藥檢出的樣品檢出率，最高為2018年的26.32%，而2019、2020年分別為0.98%和6.60%；統(tǒng)計2018年檢出農(nóng)藥數(shù)≤3及4～6的檢出率分別為66.67%和28.08%，當(dāng)年樣品中檢出農(nóng)藥數(shù)最多為7，檢出率為5.26%，即2018年約2/3的樣品檢出農(nóng)藥數(shù)在3種以內(nèi)。2019年和2020年檢出農(nóng)藥數(shù)≤3的樣品檢出率分別為26.46%和40.55%，農(nóng)藥數(shù)為4～6的分別占47.07%和30.18%，農(nóng)藥數(shù)為7～9的分別占19.60%和16.03%，農(nóng)藥數(shù)為≥10的分別占6.86%和13.21%，這2 a樣品中檢出農(nóng)藥數(shù)最多分別達(dá)17種和14種。

圖2 檢出農(nóng)藥數(shù)統(tǒng)計樣品的檢出率

3 小結(jié)與討論

3 a柑橘總樣品的農(nóng)藥多殘留分析結(jié)果為共檢出農(nóng)藥38種，殺蟲劑18種、殺菌劑11種、殺螨劑6種、生長調(diào)節(jié)劑3種；農(nóng)藥殘留總檢出率為95.85%，每年依次為87.72%、99.02%和97.17%，農(nóng)藥使用情況較為普遍；柚類樣品農(nóng)藥檢出率、超標(biāo)率均小于橘、柑類；每年樣品中農(nóng)藥殘留檢出狀況呈現(xiàn)一定的變化，最高檢出率由2018年的殺蟲劑毒死蜱(61.40%)到2019年殺螨劑乙螨唑(64.71%)再到2020年殺菌劑苯醚甲環(huán)唑(43.40%)，且苯醚甲環(huán)唑較2019年上升20.65%；從農(nóng)藥檢出的種類分析，2018—2020年依次檢出農(nóng)藥為19、34、30種，2019、2020年用藥種類較多；從超標(biāo)率分析，3 a總超標(biāo)率為3.02%，每年依次為1.75%、5.88%、0.94%，2018年和2020年僅丙溴磷農(nóng)藥存在超標(biāo)，2019年殺撲磷、水胺硫磷超、苯醚甲環(huán)唑、聯(lián)苯肼脂4種農(nóng)藥存在超標(biāo)，2019年超標(biāo)率最高，超標(biāo)農(nóng)藥種類最多。

3 a柑橘樣本禁限用農(nóng)藥檢出結(jié)果為逐年明顯趨好，說明控制較好。2018年禁用農(nóng)藥馬拉硫磷、水胺硫磷存在殘留檢出，檢出率分別為7.02%和3.51%，2019年這2種農(nóng)藥檢出率均為0.98%，較2018年存在不同程度的下降，同時毒死蜱農(nóng)藥殘留檢出率下降32.97%；2020年馬拉硫磷、水胺硫磷、殺撲磷農(nóng)藥均未檢出，毒死蜱農(nóng)藥殘留檢出率較2019年再下降18.05%。

按檢出農(nóng)藥數(shù)統(tǒng)計樣本的檢出率發(fā)現(xiàn)柑橘樣品使用農(nóng)藥種類有增加的趨勢。3 a中每年樣品中檢出農(nóng)藥數(shù)最多依次為7、17和14種，且3 a中未檢出農(nóng)藥殘留及只檢出1種農(nóng)藥的樣品占比均為2018年最高，3 a檢出農(nóng)藥數(shù)≤3的樣品占比依次對應(yīng)為66.67%、26.46%、40.55%。近2 a存在樣品使用農(nóng)藥種類增加的趨勢，隨著檢出農(nóng)藥數(shù)的增加，2020年較2019年樣本的檢出率增加。

綜上所述，浙江省這3 a柑橘果品農(nóng)藥殘留檢出狀況良好，果品質(zhì)量整體安全性較高。盡管2018、2019年極少數(shù)果園存在檢出水胺硫磷、馬拉硫磷、殺撲磷等禁限用農(nóng)藥，但在2020年這些農(nóng)藥已基本達(dá)到無檢出，說明隨著宣傳、監(jiān)管及執(zhí)法力度的增加，效果顯著；探究2019年樣品中農(nóng)藥殘留檢出狀況相對較差的原因，尤其是苯醚甲環(huán)唑存在超標(biāo)，經(jīng)核查這些樣品均來自大棚，主要原因為當(dāng)年夏末初秋的一次強(qiáng)臺風(fēng)，果農(nóng)為了災(zāi)后補(bǔ)救，對果園多次補(bǔ)噴殺菌劑、殺螨劑，而大棚內(nèi)降解緩慢，因此，果品成熟采收時應(yīng)嚴(yán)格遵守安全間隔期。另外，柑橘樣品的超標(biāo)率是按照國家標(biāo)準(zhǔn)《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》以柑橘全果檢測結(jié)果進(jìn)行判斷，而實(shí)際樣品分析中發(fā)現(xiàn)大多數(shù)農(nóng)藥的殘留則主要集中在果皮上。為此，今后在針對柑橘產(chǎn)品安全生產(chǎn)上除了關(guān)注超標(biāo)農(nóng)藥外，還需重視高檢出率農(nóng)藥并對其進(jìn)行跟蹤監(jiān)測，同時也要重視農(nóng)藥多殘留的聯(lián)合暴露問題，隨時了解生產(chǎn)過程中的用藥動向，加強(qiáng)綠色防控措施，最終實(shí)現(xiàn)減藥增效及果品安全。