核酸檢測其實(shí)是檢測受測者體內(nèi)是否有新冠病毒的核酸(RNA)。每種病毒的核酸內(nèi)部都含有核糖核苷酸,不同的病毒所含的核糖核苷酸數(shù)量和排列順序不同,使得每種病毒都具有特異性。
新冠病毒的核酸也是獨(dú)特的,核酸檢測就是對新冠病毒的核酸進(jìn)行特異性檢測。在進(jìn)行核酸檢測之前,需要采集受測者的痰液、咽拭子、肺泡灌洗液、血液等樣本,對這些樣本進(jìn)行檢測,就可以發(fā)現(xiàn)受測者的呼吸道感染了什么病菌。新冠病毒核酸檢測常用的是咽拭子樣本檢測,將樣本裂解提純,從中提取出可能存在的新冠病毒核酸,檢測的準(zhǔn)備工作就做好了。
新冠病毒核酸檢測主要用熒光定量RT-PCR技術(shù),這種技術(shù)是熒光定量PCR技術(shù)與RT-PCR技術(shù)的結(jié)合。在檢測過程中,先采用RT-PCR技術(shù)將新冠病毒的核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為對應(yīng)的脫氧核糖核酸(DNA);再采用熒光定量PCR技術(shù),將得到的DNA進(jìn)行大量復(fù)制,同時,使用特異性探針對復(fù)制得到的DNA進(jìn)行檢測,打上標(biāo)記。如果存在新冠病毒核酸,儀器就可以檢測到熒光信號,而且,隨著DNA的不斷復(fù)制,熒光信號不斷增強(qiáng),這樣就間接檢測到了新冠病毒的存在。
假陰性,就是指被檢測者已經(jīng)感染了新冠病毒,但是卻沒有檢測出病毒核酸,即核酸檢測為陰性。如果一個受測者沒有出現(xiàn)相關(guān)癥狀,核酸檢測又為陰性,就很容易讓他放松警惕,可能帶來更大范圍的病毒傳播,這也是新冠病毒的狡猾之處。
出現(xiàn)假陰性的原因主要有以下三方面:
第一,原始檢測標(biāo)本中新冠病毒核酸含量過低,低于能被檢測到的下限。這與所采集樣本的類型和采集的時機(jī)等都有關(guān)系。
第二,如果新冠病毒核酸與探針結(jié)合的部位發(fā)生變異,可能影響檢測中探針的結(jié)合效率,導(dǎo)致熒光信號檢測不到。
第三,假陰性也和檢測技術(shù)的靈敏度有關(guān)。疫情發(fā)生初期,應(yīng)用于臨床的試劑盒不夠成熟、靈敏度不夠高,關(guān)于假陰性的報道頻出。后來,隨著技術(shù)水平的提高,檢測的準(zhǔn)確率迅速提高,假陰性率不斷降低。
核酸檢測結(jié)果呈陽性,就可以確認(rèn)受測者上呼吸道存在病毒核酸,但并不能直接確診為新冠肺炎患者。在核酸檢測為陽性的情況下,還要綜合流行病學(xué)史對受測者進(jìn)行進(jìn)一步的診斷,如果受測者還有發(fā)熱、咽痛、咳嗽、乏力等癥狀,以及與已確診的感染者有接觸史等,就可以診斷為確診病例。
如果受測者沒有任何相關(guān)癥狀,一般診斷為無癥狀感染者。無癥狀感染者也有傳染性,而且一些無癥狀感染者后來也開始出現(xiàn)癥狀,變成了確診患者。
對受測者來說,從標(biāo)本中分離出病毒是最權(quán)威的確診依據(jù),但是,分離病毒是比較危險的操作,需要在高防護(hù)級別的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,而且耗時比較長、成本較高。一般醫(yī)療機(jī)構(gòu)不具備這個條件,他們大多會采取檢測血液中是否有病毒抗體的方法,來判斷受測者是否感染了病毒,乙肝、艾滋病等都是通過這種方式進(jìn)行檢測的。
新冠病毒也可以通過這種免疫學(xué)檢測的方法檢測出來。面對新冠病毒的入侵,人體會進(jìn)行“反抗”,產(chǎn)生特異性抗體IgM和IgG(免疫球蛋白M和免疫球蛋白G)。如果在受測者血液中檢測出這兩種特異性抗體,就可以說明受測者感染了新冠病毒。
怎么檢測抗體呢?常用的是化學(xué)發(fā)光免疫分析法,也就是使用化學(xué)發(fā)光劑或特定的酶標(biāo)記抗體或抗原,發(fā)生免疫反應(yīng)形成復(fù)合物,洗滌后再加入發(fā)光劑,如果受測者血液中存在IgM和IgG這兩種特異性抗體,化學(xué)發(fā)光儀就能檢測到發(fā)光信號。這種化學(xué)發(fā)光免疫分析法,是目前最先進(jìn)的免疫檢測技術(shù)之一。它靈敏度高、特異性強(qiáng)、檢測范圍寬、出結(jié)果快,但檢測成本較高。
此外,由于人體感染病毒后需要一定時間才能產(chǎn)生抗體,只有等抗體產(chǎn)生后才能檢測到,這也導(dǎo)致抗體檢測的時效性不強(qiáng)。乙肝、艾滋病等感染后需要2~3周才能產(chǎn)生抗體。新冠病毒感染后需要3天以上才能檢測到IgM抗體,需要一周以上才能檢測到IgG抗體。