董克鋒

(青島沃林藍(lán)莓果業(yè)有限公司/青島市藍(lán)莓工程技術(shù)研究中心，山東青島 266400)

藍(lán)莓鮮果營(yíng)養(yǎng)豐富，但采后易發(fā)生霉?fàn)€，嚴(yán)重影響藍(lán)莓鮮果的貨架期和商品價(jià)值[1]。特別是大棚藍(lán)豐藍(lán)莓采后鮮果在20～25 ℃的常溫下放置72 h后果蒂部就出現(xiàn)明顯的霉?fàn)€長(zhǎng)毛現(xiàn)象，影響市場(chǎng)壽命。近年來國(guó)內(nèi)對(duì)藍(lán)莓霉?fàn)€的采后病害研究報(bào)道較多，周笑犁[2]報(bào)道藍(lán)莓采后病害的主要致病菌為擬盤多毛孢、新梭殼孢、青霉、地霉及枝頂孢等。戴啟東[3]報(bào)道藍(lán)莓采后病害的主要致病菌為灰葡萄孢、鏈格孢、青霉及粉紅單端孢菌。尉瑩瑩[4]報(bào)道藍(lán)莓采后病害的病原菌有鏈格孢、灰葡萄孢、根霉、黑曲霉等12種真菌。王丹[5]報(bào)道病原真菌為尖孢鐮刀菌、鏈格孢菌和灰葡萄孢菌。吳文能[6]報(bào)道藍(lán)莓采后腐爛主要致病菌為灰葡萄孢菌、青霉、擬盤多毛孢。周倩[7]報(bào)道藍(lán)莓果實(shí)表面病原真菌為青霉、產(chǎn)黃青霉和鏈格孢霉；葛達(dá)娥[8]報(bào)道藍(lán)莓霉?fàn)€病原菌為稻黑孢霉、青霉屬、枝孢屬和鏈格孢屬真菌。為了解大棚藍(lán)莓采后霉?fàn)€發(fā)生情況，對(duì)藍(lán)莓鮮果采后霉?fàn)€初始病害發(fā)生和田間噴藥預(yù)防采后霉?fàn)€效果進(jìn)行試驗(yàn)研究，明確引起藍(lán)莓鮮果采后霉?fàn)€的初始病原菌和進(jìn)行有效地預(yù)防。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

藍(lán)莓試驗(yàn)園位于青島大棚藍(lán)莓種植基地，品種為藍(lán)豐，樹齡12年，盛果期，栽植株行距1 m×2.4 m，水肥一體化滴灌肥水，花期放蜂授粉，采收期6月1～30日(圖1)。選擇棚內(nèi)樹體大小一致的植株進(jìn)行試驗(yàn)。

供試藥劑：①40%百可得可濕性粉劑，日本曹達(dá)株式會(huì)社生產(chǎn)。②1.5%噻霉酮水乳劑，陜西西大華特科技實(shí)業(yè)有限公司。③10%抑霉唑硫酸鹽水劑，陜西泰豐農(nóng)化有限公司。④2.1%丁子·香芹酚水劑，大連云林碳化藥業(yè)有限公司。⑤0.5%幾丁聚糖水劑，成都特普生物科技股份有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

樹體噴藥設(shè)6個(gè)處理：處理①40%百可得可濕性粉劑1 500倍液。②1.5%噻霉酮水乳劑700液。③10%抑霉唑硫酸鹽水劑1 000液。④2.1%丁子·香芹酚水劑600液。⑤0.5%幾丁聚糖水劑400液。⑥清水對(duì)照。

圖1 藍(lán)莓品種藍(lán)豐結(jié)果狀

選長(zhǎng)勢(shì)一致的植株進(jìn)行試驗(yàn)，15株為1個(gè)處理小區(qū)，隨機(jī)區(qū)組安排，重復(fù)3次。每處理計(jì)45株，共270株。在藍(lán)莓坐果撤蜂后(4月25日)開始每隔10 d噴施藥劑1次，連噴3次。均勻噴施藥液至葉面藥液將下滴為準(zhǔn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 藍(lán)莓果實(shí)采樣方法 6月1日第1次采摘，至6月21日，每隔4 d采摘鮮果1次，共6次。各處理隨機(jī)采摘成熟度一致、無損的鮮果(果徑大于15 mm)，放于規(guī)格為125 g 的PET盒中，每處理小區(qū)每次取樣1盒約120 g，每次取樣18盒。取樣后貯放于20～25 ℃的室內(nèi)樣品陳列柜上，每次取樣的樣品記錄72 h時(shí)的果實(shí)自然霉?fàn)€量。對(duì)6月5日第2次采摘的鮮果樣品進(jìn)行存放24 h、48 h、72 h、96 h及120 h的果實(shí)霉?fàn)€量統(tǒng)計(jì)，計(jì)算各種藥劑對(duì)霉?fàn)€病的防治效果。

1.3.2 藍(lán)莓霉?fàn)€病菌的分離與鑒定 室溫存放72 h時(shí)，按常規(guī)組織分離法[9]在藍(lán)莓果實(shí)霉?fàn)€部位邊緣切取3 mm×3 mm大小的病組織，在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)和單菌絲純化。用顯微鏡(型號(hào)LEIKA DM750)觀察病原真菌菌絲及孢子的形態(tài)。參照真菌鑒定手冊(cè)[10]進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定。

1.3.3 健康果實(shí)接種病原菌 選取健康無損傷無病害的藍(lán)莓鮮果，先用70%酒精浸泡30 s，再用無菌水洗凈晾干。在每個(gè)果實(shí)的果蒂處接種病原菌菌絲體，以接種無菌水為對(duì)照。接種24 h后，每天觀察病原菌的生長(zhǎng)情況。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

應(yīng)用Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 藍(lán)莓鮮果常溫貯存霉?fàn)€的發(fā)生與癥狀

大棚藍(lán)莓果實(shí)采后于20～25 ℃常溫室內(nèi)放置72 h時(shí)已出現(xiàn)明顯霉?fàn)€癥狀。在果蒂區(qū)表面先是產(chǎn)生稀疏白色菌絲，后成為白色或褐色菌落，棉絮狀，果蒂周邊出現(xiàn)塌陷(圖2)。果蒂大而濕潤(rùn)的、果蒂凸起的、過熟的、果蒂撕裂的果實(shí)霉?fàn)€快。但有部分鮮果放置到果實(shí)縮水仍未出現(xiàn)霉?fàn)€。

圖2 藍(lán)莓霉?fàn)€癥狀

2.2 引起藍(lán)莓鮮果霉?fàn)€的病原菌種類

對(duì)大棚藍(lán)莓采后常溫放置72 h后發(fā)生霉?fàn)€的鮮果鏡檢，發(fā)現(xiàn)引起藍(lán)莓霉?fàn)€的病原菌均為真菌，在PDA培養(yǎng)基上表現(xiàn)菌絲較長(zhǎng)，呈棉絮狀，初期灰白色，后變?yōu)榛液稚梁谏?。菌絲體不分枝或分枝較少，具膜；分生孢子呈棍棒形，卵形，倒梨形或近橢圓形，具膜，分隔處略縊縮。經(jīng)形態(tài)比對(duì)初步確定為鏈格孢屬真菌，是優(yōu)勢(shì)種，其分離頻率為95.67%。

將健康藍(lán)莓鮮果接種病原菌后，保濕培養(yǎng)48 h，果蒂部即有稀疏狀霉層長(zhǎng)出，清水對(duì)照的未發(fā)病，待典型病斑形成后，挑取少許霉層進(jìn)行顯微觀察，經(jīng)驗(yàn)證與采后霉?fàn)€所觀察情況一致，進(jìn)一步證明為鏈格孢屬真菌。

2.3 不同藥劑處理對(duì)藍(lán)莓鮮果霉?fàn)€病的防治效果

大棚藍(lán)莓各藥劑處理后，不同時(shí)期采收的果置于20～25 ℃常溫下PET盒內(nèi)，統(tǒng)計(jì)48 h、72 h的鮮果霉?fàn)€發(fā)生情況，計(jì)算不同藥劑處理對(duì)藍(lán)莓采后霉?fàn)€病均有一定的預(yù)防效果(表1)，在采后48 h時(shí)以百可得防效最高，為82.59%；其余藥劑防效依次為幾丁聚糖78.90%，噻菌酮65.26%、抑霉唑42.08%、丁子·香芹酚12.26%。采后72 h時(shí)防效仍以百可得65.54%最高。

表1 不同藥劑處理藍(lán)莓采后常溫存放不同時(shí)間對(duì)霉?fàn)€病的防治效果 %

2.4 不同藥劑處理存放時(shí)間對(duì)藍(lán)莓霉?fàn)€的影響

對(duì)6月5日采收的藍(lán)莓在20～25 ℃下放于PET盒內(nèi)貯放，對(duì)其放置24、48、72、96及120 h的霉?fàn)€情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(圖3)。不同藥劑處理在48 h時(shí)均有霉?fàn)€果出現(xiàn)。各藥劑處理的藍(lán)莓霉?fàn)€發(fā)生率均隨放置時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，且霉?fàn)€癥狀加重，常溫放置72 h后基本失去商品價(jià)值。

圖3 不同處理隨放置時(shí)間藍(lán)莓霉?fàn)€發(fā)生情況

3 小結(jié)與討論

通過病原菌分離純化以及接種發(fā)病后的病原菌形態(tài)鏡檢表明，引起藍(lán)莓采后霉?fàn)€的初始病原菌主要是鏈格孢屬真菌(占95.67%)。對(duì)大棚藍(lán)莓采前定期噴施不同的殺菌劑處理對(duì)預(yù)防藍(lán)莓鮮果采后霉?fàn)€均有一定效果，在48 h時(shí)以百可得防效最高，其次幾丁聚糖，72 h防效仍以百可得(65.54%)最高。不同藥劑處理的藍(lán)莓鮮果均隨放置時(shí)間的延長(zhǎng)霉?fàn)€程度加重，采后常溫放置72 h后基本失去商品價(jià)值。

對(duì)霉?fàn)€鮮果的性狀分析發(fā)現(xiàn)，果蒂大而濕潤(rùn)的、果蒂凸起的、過熟的、果蒂撕裂的果實(shí)霉?fàn)€快。

針對(duì)藥劑預(yù)防藍(lán)莓采后霉?fàn)€的效果不理想的問題，應(yīng)考慮在其他(如栽培管理、冷鏈等)措施上進(jìn)行研究來減輕藍(lán)莓鮮果霉?fàn)€，延長(zhǎng)貨架期，提高藍(lán)莓效益。對(duì)鏈格孢屬菌引起的藍(lán)莓采后霉?fàn)€，可暫時(shí)推薦使用百可得和幾丁聚糖等減緩霉?fàn)€發(fā)生，但對(duì)鏈格孢的侵染途徑、藍(lán)莓果實(shí)性狀的關(guān)系及有效的防治方法還需進(jìn)一步研究探討。