莎 娜，李國(guó)銀，張昕欣，張福金，連海飛，康博洋，狄彩霞，楊永青，史 培

（1.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010031；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室（呼和浩特），內(nèi)蒙古呼和浩特 010031）

近年來(lái)，隨著農(nóng)業(yè)科技快速發(fā)展，人們主要蔬菜消費(fèi)量劇增，在蔬菜大規(guī)模集約化種植過(guò)程中，普遍存在大量使用化學(xué)農(nóng)藥防治病蟲害現(xiàn)象，雖然化學(xué)農(nóng)藥可以殺死一些害蟲，促進(jìn)蔬菜的生長(zhǎng)，但不適當(dāng)或過(guò)量使用農(nóng)藥會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染并增加人體健康風(fēng)險(xiǎn)，而葉菜類蔬菜作為我國(guó)主要消費(fèi)蔬菜類型，在生產(chǎn)中用藥更普遍[1-4]。菠菜具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，富含類胡蘿卜素、葉黃素以及多種維生素，還含有豐富的鈣、鐵、磷、鉀和鈉等礦物質(zhì)元素。同時(shí)具有降脂、降糖、抗氧化、抗癌、增強(qiáng)體力、保養(yǎng)皮膚、改善視力、調(diào)理血壓、預(yù)防眼底黃斑病變和血友病等作用[5]。菠菜（Spinacia oleraceaL.）屬于莧科藜亞科菠菜屬植物，是以綠葉為主要器官的一、二年生草本植物。內(nèi)蒙古烏蘭察布市屬于典型的大陸性氣候、晝夜溫差大、氣候較為寒涼、年降水稀少，是全國(guó)三大冷涼蔬菜基地之一，菠菜在當(dāng)?shù)匾陨a(chǎn)基地集約化種植為主，是種植業(yè)主要經(jīng)濟(jì)來(lái)源之一。但是，菠菜生長(zhǎng)周期較長(zhǎng)，易發(fā)病蟲害，如果在集約化種植過(guò)程中農(nóng)藥使用不合理，會(huì)使病蟲害抗藥性增強(qiáng)，導(dǎo)致藥量增加、農(nóng)藥殘留超標(biāo)，造成惡性循環(huán)，對(duì)菠菜的質(zhì)量安全及消費(fèi)者的健康造成巨大隱患[6]。菠菜種植過(guò)程中常見病害有霜霉病、炭疽病、病毒病等，蟲害有蚜蟲、潛葉蠅、菜螟等，常用防治手段以化學(xué)農(nóng)藥為主[7]，大量施用農(nóng)藥化肥必然對(duì)菠菜的質(zhì)量安全帶來(lái)潛在風(fēng)險(xiǎn)，所以對(duì)菠菜進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)和膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估非常必要。朱曼潔[8]用氣相色譜三重四級(jí)桿質(zhì)譜掃描了菠菜中的甲胺磷、氧樂(lè)果、溴氰菊酯和甲氰菊酯等農(nóng)藥的殘留量。呂冰峰等[9]在2018年分析了我國(guó)蔬菜的食品安全形勢(shì)，指出菠菜的合格率僅為82.5%；宋玉峰等[10]研究了以菠菜為例的鮮食農(nóng)產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)，評(píng)估表明，與暴露于一種單一農(nóng)藥殘留相比，人體暴露于多種農(nóng)藥殘留可能會(huì)引起更高的聯(lián)合毒性效應(yīng)。因此，針對(duì)單一農(nóng)藥品種進(jìn)行評(píng)估的方式可能會(huì)造成風(fēng)險(xiǎn)程度的低估[11]。雖然已有菠菜農(nóng)藥殘留的研究，但鮮有菠菜農(nóng)藥多殘留組分膳食暴露的報(bào)道，本研究以內(nèi)蒙古烏蘭察布市某縣集約化種植的菠菜為試驗(yàn)樣品，結(jié)合我國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告[12]及居民膳食指南數(shù)據(jù)[13]，對(duì)其農(nóng)藥殘留情況以及膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作，以期為當(dāng)?shù)夭げ税踩a(chǎn)提供技術(shù)支撐，為政府監(jiān)管部門提供執(zhí)法依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣品采集

于2021年在內(nèi)蒙古烏蘭察布市某縣規(guī)模集約化種植產(chǎn)區(qū)采集樣本80 個(gè)，包括生產(chǎn)基地60 個(gè)、蔬菜市場(chǎng)20 個(gè)。所有菠菜樣品采集按照GB/T 8855—2008《新鮮水果和蔬菜取樣方法》[14]執(zhí)行，樣品盡快勻漿，于-18 ℃冷凍保存，備用。

1.2 儀器和試劑

微孔濾膜（0.22 μm）；乙腈、甲醇、正己烷、丙酮、二氯甲烷（色譜級(jí)，德國(guó)默克）；甲酸（ACROS ORGANICS，賽默飛）；氯化鈉（分析純）；2 mL DIKMA 凈化管（C1850 mg、PSA 50 mg、MgSO4150 mg，迪瑪科技）。各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所；實(shí)驗(yàn)用水為Milli-Q 超純水儀制造。

LC-MS/MS 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（Waters-TQ-S Micro），GC-MS/MS 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（Thermo-TSQ-quantum GC），AE270 電子天平（Mettler Toledo公司），勻漿機(jī)（Hestix Scientific），VORTEX-GENIE渦旋振蕩器（上海蘭儀），GL-20G-C 高速冷凍離心機(jī)（上海精密儀器），Milli-Q（超純水制水儀，美國(guó)），TTL-DC 氮吹儀（天津奧特賽恩斯儀器），MXZH2800樣品粉碎機(jī)（松下）。

1.3 檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)

稱取適量菠菜樣品，對(duì)63 種農(nóng)藥進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，添加水平為0.15 mg/kg，采用NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測(cè)定》、NY/T 789—2014《農(nóng)藥殘留分析樣本的采樣方法》、GB 23200.86—2016《植物源食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》、GB 20769—2008《水果和蔬菜中450 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果按照GB 2763—2021《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》[15]進(jìn)行判斷，該方法中未規(guī)定限量的農(nóng)藥不予判定。最終回收率為75.6%～107.8%，表明選用的方法結(jié)果可靠，可以用于檢測(cè)菠菜樣品。

檢測(cè)項(xiàng)目按農(nóng)藥類別劃分，包括殺蟲劑43 種，分別為甲胺磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、六六六、滴滴涕、甲基硫環(huán)磷、久效磷、氟蟲腈（包括氟甲腈、氟蟲腈硫醚、氟蟲腈砜）、甲拌磷（包括甲拌磷砜和甲拌磷亞砜）、殺螟硫磷、伏殺硫磷、三氯殺螨醇、氰戊菊酯、氟氯氰菊酯、乙酰甲胺磷、丙溴磷、馬拉硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、辛硫磷、二嗪磷、滅多威、滅幼脲、除蟲脲、氧樂(lè)果、水胺硫磷、甲基異柳磷、克百威（包括3-羥基克百威）、涕滅威（包括涕滅威砜和涕滅威亞砜）、毒死蜱、吡蟲啉、啶蟲脒、滅蠅胺、阿維菌素、辛硫磷、異丙威、甲基阿維菌素苯甲酸鹽、茚蟲威、噻蟲嗪、聯(lián)苯菊酯、溴氰菊酯、乙烯菌核利、氯氰菊酯；殺菌劑17 種，分別為五氯硝基苯、三唑酮、百菌清、霜霉威、嘧菌酯、烯酰嗎啉、腐霉利、戊唑醇、咯菌腈、腐霉利、氟嗎啉、苯醚甲環(huán)唑、丙環(huán)唑、異菌脲、噻菌酮、甲霜靈、多菌靈；除草劑2 種，分別為異丙甲草胺、二甲戊靈；殺螨劑1 種，為噠螨靈。

1.4 膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)即慢性或長(zhǎng)期接觸毒性與農(nóng)藥殘留每日允許攝入量的函數(shù)，計(jì)算公式[16]如下

式中，STMR為菠菜中農(nóng)藥殘留的平均值（mg/kg）；ADI為農(nóng)藥每日允許攝入量（mg/kg）；P 為標(biāo)準(zhǔn)人群菠菜日消費(fèi)量（269.4 g）；BW 為標(biāo)準(zhǔn)人群平均體重（以60 kg 計(jì)）。

當(dāng)%ADI≤100%時(shí)，表示菠菜中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)可接受，%ADI越小則風(fēng)險(xiǎn)越??；當(dāng)%ADI＞100%時(shí)，表示菠菜中農(nóng)藥殘留有不可接受的風(fēng)險(xiǎn)。

急性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：是計(jì)算1 d 食物消費(fèi)中攝入的食物和水中某種物質(zhì)殘留量，計(jì)算公式[17]如下

式中，HR為菠菜中農(nóng)藥殘留的最大值（mg/kg）；ARfD為農(nóng)藥急性攝入?yún)⒖紕┝浚╩g/kg）；P 為居民菠菜消費(fèi)大份餐（為500.0 g）；BW 為標(biāo)準(zhǔn)人群平均體重（以60 kg 計(jì)）。

當(dāng)%ARfD≤100%時(shí)，表示菠菜中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)可接受，%ARfD越小則風(fēng)險(xiǎn)越小；當(dāng)%ARfD＞100%時(shí)，表示菠菜中農(nóng)藥殘留有不可接受的風(fēng)險(xiǎn)。

農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序：借鑒英國(guó)獸藥殘留委員會(huì)獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣[18]，選用農(nóng)藥毒性、農(nóng)藥毒效（即ADI值）、菠菜膳食比例、農(nóng)藥使用頻率、高暴露人群、殘留水平6 項(xiàng)指標(biāo)，樣品中各農(nóng)藥的殘留風(fēng)險(xiǎn)得分（S）采用公式（3）和（4）計(jì)算，該值越高殘留風(fēng)險(xiǎn)越大。

式中，F(xiàn)OD為菠菜種植期間農(nóng)藥使用頻率；T為菠菜成熟過(guò)程中使用該農(nóng)藥次數(shù)；H為菠菜生長(zhǎng)天數(shù)；S為風(fēng)險(xiǎn)得分；A為農(nóng)藥毒性得分；B為農(nóng)藥毒效得分（隨著ADI的降低，賦值得分增加）；C為菠菜膳食比例得分；D為農(nóng)藥使用頻率得分；E為高暴露人群得分；F為殘留水平得分。

2 結(jié)果與分析

2.1 菠菜中農(nóng)藥殘留情況

由表1 可知，烏蘭察布市某縣80 個(gè)菠菜樣品中共檢測(cè)出農(nóng)藥殘留3 大類16 種農(nóng)藥，占驗(yàn)證參數(shù)的25.40%，農(nóng)藥檢出率均為30.00%以下，最高的是殺蟲劑吡蟲啉，檢出率為30.00%，其次為殺菌劑甲霜靈（18.75%）和殺蟲劑滅蠅胺（16.30%）。檢出農(nóng)藥含量為0.002 0～1.280 0 mg/kg，參照GB 2763—2021[15]規(guī)定的菠菜中最大殘留限量進(jìn)行超標(biāo)判定，菠菜樣品中共有2 批次氟蟲腈超標(biāo)，超標(biāo)率為2.5%。

表1 菠菜樣品中農(nóng)藥的檢出情況

由圖1 可知，檢出農(nóng)藥按類別劃分為殺蟲劑、殺菌劑、殺螨劑，分別為10、5、1 種，分別占檢出農(nóng)藥總數(shù)的62.50%、31.25%、6.25%，檢出農(nóng)藥以殺蟲劑為主，其中殺蟲劑10 種分別為氟蟲腈、氯氰菊酯、吡蟲啉、啶蟲脒、滅蠅胺、茚蟲威、噻蟲嗪、聯(lián)苯菊酯、毒死蜱、溴氰菊酯；殺菌劑5 種分別為多菌靈、丙環(huán)唑、甲霜靈、腐霉利、嘧菌酯；殺螨劑1種為噠螨靈。

圖1 菠菜樣品中檢出的不同農(nóng)藥類別比較

由圖2 可知，根據(jù)樣品中檢出農(nóng)藥種類數(shù)劃分為1～6 種，13 個(gè)樣品檢出1 種農(nóng)藥殘留占比為16.25%，15 個(gè)樣品檢出2～4 種農(nóng)藥殘留占比為18.75%，27 個(gè)樣品檢出5～6 種農(nóng)藥殘留占比為33.75%，其余樣品未檢出農(nóng)藥殘留。檢出5～6 種農(nóng)藥殘留在所檢樣品中占比最大，該現(xiàn)象是否會(huì)產(chǎn)生一定的毒害作用，有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。

圖2 菠菜樣品中農(nóng)藥殘留種類數(shù)

由圖3 可知，檢出農(nóng)藥按毒性劃分，低毒性15 種，占檢出農(nóng)藥93.75%；中等毒性1 種，占檢出農(nóng)藥6.25%。樣品中沒(méi)有高毒性農(nóng)藥檢出，以低毒性農(nóng)藥為主。

圖3 菠菜樣品中檢出的不同農(nóng)藥毒性比較

2.2 慢性、急性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)分析

2.2.1 慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)分析

由表2 可知，樣品中檢出的16 種農(nóng)藥%ADI值均低于100%。在標(biāo)準(zhǔn)人群中，氟蟲腈的%ADI值最高，為2.24%；其次為噠螨靈，為2.02%；嘧菌酯、滅蠅胺%ADI值分別為1.39%、1.06%，其他農(nóng)藥的%ADI均低于1.00%，說(shuō)明菠菜中農(nóng)藥殘留的慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)在標(biāo)準(zhǔn)人群中為可接受范圍，但氟蟲腈的%ADI值高于其他農(nóng)藥，慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)較高。不同年齡段的%ADI值表現(xiàn)為：隨著年齡的增長(zhǎng)，菠菜中的農(nóng)藥慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)降低；幼兒的不同農(nóng)藥慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)均為最高，說(shuō)明菠菜中農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)對(duì)幼兒造成的危害最大。因此，氟蟲腈在菠菜中的殘留給2～6 歲幼兒帶來(lái)的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高，應(yīng)給予重視，同時(shí)要加強(qiáng)氟蟲腈的禁用管理。

表2 菠菜樣品中檢出農(nóng)藥慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果

2.2.2 急性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)分析

世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)庫(kù)[19]中未規(guī)定嘧菌酯、甲霜靈和噠螨靈的%ARfD，不進(jìn)行計(jì)算?！吨袊?guó)居民膳食指南》[13]推薦我國(guó)居民每天需攝入300～500 g 蔬菜；《中國(guó)居民營(yíng)養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告（2015）》[12]中指出，2012年我國(guó)居民平均每日食用新鮮蔬菜攝入量按標(biāo)準(zhǔn)體重60 kg 計(jì)算，消費(fèi)量為269.4 g。由表3 可知，標(biāo)準(zhǔn)人群中，16 種殘留農(nóng)藥的%ARfD值占比為0.013%～41.670%，均低于100%，說(shuō)明即使在最大攝入量下，殘留農(nóng)藥對(duì)一般人群的急性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)都在可接受范圍內(nèi)，其中氟蟲腈%ARfD值最高（41.670%）。

表3 菠菜樣品中檢出農(nóng)藥急性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果

2.3 農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序分析

毒性、毒效、菠菜膳食比例、農(nóng)藥使用頻率、高暴露人群、農(nóng)藥殘留水平均采用原賦值標(biāo)準(zhǔn)，各指標(biāo)賦值標(biāo)準(zhǔn)見表4。

表4 風(fēng)險(xiǎn)排序得分賦值標(biāo)準(zhǔn)

菠菜占居民總膳食百分比按0.28%計(jì)算（數(shù)據(jù)來(lái)源于《中國(guó)居民膳食指南》），賦值為0 分，本次檢出農(nóng)藥最大使用次數(shù)T為3 次，生長(zhǎng)天數(shù)H為35 d，使用頻率（FOD）按公式（3）計(jì)算為8.6，即D的得分賦值為1 分，當(dāng)前尚無(wú)資料判定存在高暴露人群數(shù)據(jù)，E的得分為3 分，結(jié)果見表5。

根據(jù)英國(guó)獸藥殘留委員會(huì)獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣，計(jì)算農(nóng)藥的殘留風(fēng)險(xiǎn)得分，劃分為3 類，第1 類為高風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，殘留風(fēng)險(xiǎn)＞45 分；第2 類為中風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，殘留風(fēng)險(xiǎn)為45～30 分；第三類為低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥，殘留分值＜30 分。參照表5 得分賦值標(biāo)準(zhǔn)，按照公式（3）和（4）計(jì)算，得分均低于30 分[20]，檢出農(nóng)藥殘留經(jīng)過(guò)排序計(jì)算均屬于低風(fēng)險(xiǎn)。在16 種檢出農(nóng)藥中，農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍內(nèi)，氟蟲氰的農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序得分最高，說(shuō)明該農(nóng)藥在所檢菠菜中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較高，應(yīng)該予以重視。

表5 菠菜樣品中檢出農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序得分

3 結(jié)論與討論

綜上所述，在內(nèi)蒙古烏蘭察布市集約化種植基地采集80 份菠菜，樣品檢出16 種農(nóng)藥包括：多菌靈2 次（2.50%）、嘧菌酯7 次（8.75%）、丙環(huán)唑5 次（6.25%）、吡蟲啉24 次（30.00%）、啶蟲脒9 次（11.25%）、甲霜靈15 次（18.75%）、滅蠅胺13 次（16.25%）、茚蟲威7 次（8.75%）、噻蟲嗪4 次（5.00%）、氟蟲腈10 次（12.50%）、氯氰菊酯11 次（13.75%）、噠螨靈11 次（13.75%）、聯(lián)苯菊酯5 次（6.25%）、腐霉利4 次（5.00%）、毒死蜱3 次（3.75%）、溴氰菊酯3 次（3.75%），檢出農(nóng)藥以殺蟲劑、低毒農(nóng)藥為主，檢出農(nóng)藥含量在0.002 0～1.280 0 mg/kg，農(nóng)藥超標(biāo)率2.5%，超標(biāo)農(nóng)藥為氟蟲腈，原因可能是葉菜表面積大，與農(nóng)藥直接接觸容易吸收較多農(nóng)藥[21]，表明農(nóng)民因利益驅(qū)動(dòng)，為使菠菜快速上市加大了多種農(nóng)藥的使用頻率與劑量，菠菜中存在一定程度的多種農(nóng)藥殘留，且有超標(biāo)農(nóng)藥存在，建議相關(guān)部門加大監(jiān)管力度，組織農(nóng)業(yè)技術(shù)專家入戶，指導(dǎo)農(nóng)民科學(xué)規(guī)范使用農(nóng)藥。

利用農(nóng)藥毒理學(xué)數(shù)據(jù)（ADI值、ARfD值）、農(nóng)藥殘留數(shù)據(jù)和菠菜消費(fèi)數(shù)據(jù)對(duì)檢出的16 種農(nóng)藥進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，結(jié)果表明，除了嘧菌酯、甲霜靈、噠螨靈沒(méi)有ARfD信息，其余檢出的農(nóng)藥殘留慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)（%ADI）和急性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)（%ARfD）均低于100%，表明食用者無(wú)健康風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于不同年齡段單一農(nóng)藥的急、慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)均在可接受范圍內(nèi)，氟蟲腈的%ADI值高于其他農(nóng)藥，但是不具有慢性膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)。借鑒英國(guó)獸藥殘留委員會(huì)獸藥殘留風(fēng)險(xiǎn)排序矩陣，對(duì)檢出的16 種農(nóng)藥進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)排序，依據(jù)最終得分判定檢出農(nóng)藥屬于低風(fēng)險(xiǎn)農(nóng)藥殘留，但是超標(biāo)農(nóng)藥氟蟲腈屬于潛在的風(fēng)險(xiǎn)因子，建議在菠菜安全生產(chǎn)監(jiān)管中，加強(qiáng)氟蟲腈禁用農(nóng)藥監(jiān)管，確保該地區(qū)菠菜種植產(chǎn)業(yè)綠色高質(zhì)量發(fā)展。