黃 雨，張寅生

（正大天晴藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，江蘇省抗病毒靶向藥物研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南京 211100）

生物電子等排是指將化合物結(jié)構(gòu)中的某些原子或基團(tuán)，用其外層電子總數(shù)相等（同價(jià)）或在體積、形狀、構(gòu)象、電子分布、脂水分配系數(shù)、pKa，化學(xué)反應(yīng)性和氫鍵形成能力等重要參數(shù)上存在相似性的原子或基團(tuán)進(jìn)行替換，從而產(chǎn)生新化合物的一種方法［1］。它是藥物結(jié)構(gòu)優(yōu)化中一種非常有效的策略。隨著藥物化學(xué)和有機(jī)化學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多經(jīng)典和非經(jīng)典生物電子等排體被運(yùn)用到新藥的設(shè)計(jì)中，并取得了顯著的成果。然而，面對(duì)日益狹小的專利保護(hù)空間，藥物化學(xué)家們不得不尋求一些結(jié)構(gòu)新穎的、具有潛在生物活性的生物電子等排體來(lái)改善化合物的性質(zhì)［2］。正是在這樣的背景之下，具有三維立體結(jié)構(gòu)的雙環(huán)［1. 1. 1］戊烷（BCP）因其弱親脂性、增強(qiáng)電負(fù)性等理化性質(zhì)，備受藥物化學(xué)家的青睞。為此，本文綜述了BCP 在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用，以便于給藥物研發(fā)人員提供參考。

1 雙環(huán)[1. 1. 1]戊烷（BCP）在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用

近年來(lái)，BCP作為生物電子等排體在藥物設(shè)計(jì)中已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用。其應(yīng)用主要分為3類［3］：（1）作為1，4-二取代苯環(huán)的生物電子等排體；（2）作為1，2-二取代炔基的生物電子等排體；（3）作為叔丁基等空間位阻較大的基團(tuán)的生物電子等排體。其主要作用是改善化合物的溶解度、代謝穩(wěn)定性及生物活性，同時(shí)，可突破專利，當(dāng)然也可作為新穎的結(jié)構(gòu)片段運(yùn)用到新藥設(shè)計(jì)中（圖1）。

Figure 1 Application and classification of bicyclo [1. 1. 1] pentane (BCP) as a bioisostere in drug design

1. 1 BCP 作為1,4-二取代苯環(huán)的生物電子等排體在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用

苯環(huán)是有機(jī)化學(xué)中最基本的結(jié)構(gòu)元素之一，并且廣泛的存在于各種生物活性分子及天然產(chǎn)物當(dāng)中。然而，隨著分子結(jié)構(gòu)中苯環(huán)數(shù)目的增加，其水溶性變差，毒性也隨之增加［4］。所以，近年來(lái)藥物化學(xué)家們傾向于以飽和的生物電子等排體來(lái)代替苯環(huán)，以期獲得生物活性更好或者理化性質(zhì)更佳的藥物活性分子［5］。其中，BCP 因其與1，4-二取代的苯環(huán)具有很多相似的空間結(jié)構(gòu)特征（圖2），在近年來(lái)備受關(guān)注。

1996 年，Pellicciari 等［6］首次用BCP 代替苯環(huán)應(yīng)用于代謝型谷氨酸受體拮抗劑的結(jié)構(gòu)改造當(dāng)中（圖3）?；衔? 是已知的代謝型谷氨酸受體1選擇性拮抗劑，為了探究苯環(huán)在該分子中的構(gòu)效關(guān)系，研究者以BCP 替代苯環(huán)成功合成了化合物2?；钚詳?shù)據(jù)表明BCP 結(jié)構(gòu)的替換，增強(qiáng)了化合物的活性并且保持了其選擇性（mGluR1a，IC50= 25 μmol/L；mGluR2，IC50＞300 μmol/L；mGluR4a，IC50＞300 μmol/L）。

Figure 2 Comparison between BCP skeleton and 1, 4-disubstituted benzene ring

Figure 3 Comparison between compound 1 and 2

2006 年，Pellicciari 課題組又成功地將BCP 結(jié)構(gòu)應(yīng)用于選擇性代謝型谷氨酸受體激動(dòng)劑的結(jié)構(gòu)優(yōu)化中［7］（圖4）。從活性數(shù)據(jù)可以看出，苯環(huán)的替換提高了化合物對(duì)于mGluR4 受體的選擇性（mGluR4，EC50= 4. 2 μmol/L；mGluR6，EC50= 66 μmol/L；mGluR7，EC50＞1 000 μmol/L）。上述BCP代替苯環(huán)應(yīng)用實(shí)例（1 & 2，3 & 4）說(shuō)明苯環(huán)并不是活性必需基團(tuán)，只是起到連接兩個(gè)藥效團(tuán)的作用，而B(niǎo)CP 作為連接鏈，使得二側(cè)的取代基之間的距離縮短，可能使得兩邊的活性基團(tuán)處于更佳的與受體mGluR1a 或者mGluR4 的結(jié)合位置，從而使化合物的活性和選擇性得到提高。

2012 年，Stepan 等［8］創(chuàng)造性地以BCP 結(jié)構(gòu)替換已知γ-分泌酶抑制劑5（BMS-708163）中的氟苯，從而得到化合物6（圖5）。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，化合物6具有更強(qiáng)的生物活性、更低的親脂性以及更好的水溶性和代謝穩(wěn)定性。最為重要的一點(diǎn)是，該化合物具有一定的結(jié)構(gòu)新穎性，并開(kāi)創(chuàng)了突破制藥公司關(guān)于含苯生物活性分子專利的先例。此后，含有BCP 結(jié)構(gòu)的衍生物越來(lái)越多地被包含在相關(guān)專利中。

Figure 4 Comparison between compound 3 and 4

Figure 5 Comparison between compound 5 and 6

伊馬替尼是治療白血病的一個(gè)“明星”藥物。2016 年，Nicolaou 等［9］試圖以BCP 結(jié)構(gòu)替換伊馬替尼（7）結(jié)構(gòu)中的對(duì)位雙取代苯環(huán)，以期獲得結(jié)構(gòu)新穎的藥物實(shí)體分子（圖6）。與伊馬替尼相比，化合物8具有較低的親脂性、較高的水溶性和代謝穩(wěn)定性。然而，化合物8對(duì)于ABL1 酶的抑制活性卻顯著低于伊馬替尼（ABL1 激酶，IC50＞1 μmol/L）。推測(cè)其活性降低的原因可能是：（1）連接鏈的長(zhǎng)度縮短，哌嗪環(huán)上的氮原子與受體結(jié)合位點(diǎn)的距離變長(zhǎng)；（2）伊馬替尼中的對(duì)位雙取代苯環(huán)不僅起到一個(gè)連接鏈的作用，而且會(huì)與蛋白產(chǎn)生一定的π-π相互作用并對(duì)活性產(chǎn)生影響，而B(niǎo)CP 不具備π-π相互作用。

Figure 6 Comparison between compound 7 and 8

2016 年，研究人員應(yīng)用BCP 結(jié)構(gòu)對(duì)Wtn 抑制劑9進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造［10］（圖7）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，化合物10 基本喪失了活性（IC50＞50 nmol/L）。這表明化合物9 中的苯環(huán)結(jié)構(gòu)參與到了蛋白與受體的相互作用當(dāng)中，可能是活性必須基團(tuán)。

Darapladib（11）是一種有效的治療動(dòng)脈粥樣硬化的脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）抑制劑，目前正處于臨床試驗(yàn)階段。2017 年，Measom 等［11］采用BCP 骨架替換苯環(huán)的策略，對(duì)Darapladib 進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化（圖8）。研究數(shù)據(jù)表明，化合物12 相比于Darapladib，仍舊保持了良好的生物活性，并且水溶性得到了顯著的提升，但是其親脂性卻出乎意外的增加了。生物活性保持說(shuō)明BCP 可以代替苯環(huán)起到連接鏈的作用，而親脂性的增加說(shuō)明整體化學(xué)環(huán)境決定了分子的理化性質(zhì)。

Figure 7 Comparison between compound 9 and 10

Figure 8 Comparison between compound 11 and 12

白藜蘆醇（13）是一種具有抗氧化、抗糖尿病和抗腫瘤活性的天然產(chǎn)物。然而其生物利用度太差，特別是在口服吸收之后，血藥濃度很低。為了改善白藜蘆醇的藥代動(dòng)力學(xué)特征，Goh等［12］嘗試以BCP 骨架替換白藜蘆醇中的苯環(huán)結(jié)構(gòu)（圖9）。研究數(shù)據(jù)顯示，與白藜蘆醇相比，化合物14在保留了相當(dāng)?shù)目鼓[瘤活性的同時(shí)，其水溶性增強(qiáng)了40倍，并且具有較低的親脂性和良好的代謝穩(wěn)定性。此外，在經(jīng)過(guò)口服吸收之后，化合物14所能夠達(dá)到的血藥濃度也顯著高于白藜蘆醇。對(duì)于一些相對(duì)分子質(zhì)量較小的化合物，芳香環(huán)對(duì)化合物的理化性質(zhì)影響較大，BCP替換白藜蘆醇中的苯環(huán)能夠達(dá)到增強(qiáng)分子水溶性的目的。

Figure 9 Comparison between compound 13 and 14

吲哚胺2，3-雙加氧酶1（IDO1）是色氨酸代謝的關(guān)鍵酶，其在多種腫瘤細(xì)胞中過(guò)度表達(dá)，是腫瘤免疫治療的一個(gè)重要靶點(diǎn)。近年來(lái)，IDO1 抑制劑的研究得到了廣泛關(guān)注。其中默克公司的科學(xué)家通過(guò)高通量篩選的方法得到了一個(gè)活性優(yōu)異的苗頭化合物15。然而由于苯甲酰胺易于水解，導(dǎo)致化合物15代謝穩(wěn)定性較差。為此，Pu 等［13］采用了多種改造策略進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，最終發(fā)現(xiàn)以BCP 骨架替換中心苯環(huán)可以有效地避免酰胺鍵的水解，從而提高其代謝穩(wěn)定性（圖10）。與此同時(shí)，化合物16也保留了良好的生物活性和選擇性。這項(xiàng)研究結(jié)果說(shuō)明BCP 可以代替苯環(huán)起到連接鏈的作用，同時(shí)，BCP 代替可以獲得空間位阻較大的脂肪酰胺，使不易被水解代謝。

Figure 10 Comparison between compound 15 and 16

當(dāng)用飽和的烷基作為生物電子等排體取代生物活性化合物中的苯環(huán)時(shí)，需要考慮下列幾個(gè)因素。首先，這種替代物有可能增加化合物的代謝穩(wěn)定性和水溶性。例如，含有苯酚和苯胺的衍生物在體內(nèi)因易被細(xì)胞色素P450快速氧化成1，4-苯醌，因而被認(rèn)為代謝穩(wěn)定性差［14］。而用脂肪族連接體則可以避免這種方式降解，因此更穩(wěn)定。另一方面，由于苯衍生物在晶格中的π堆積，其水溶性較差［15］。用BCP 或立方烷取代苯環(huán)，通過(guò)破壞π堆積可增加化合物的溶解度，而雙環(huán)［2. 2. 2］辛烷骨架取代苯環(huán)對(duì)化合物水溶性的影響并不明顯。

2017年，Auberson等［16］報(bào)道了3種可替代苯環(huán)的生物電子等排體：BCP、立方烷（cubane）和雙環(huán)［2. 2. 2］辛烷（BCO），并對(duì)它們的理化性質(zhì)進(jìn)行了綜合比較，重點(diǎn)分析了化合物中的C-C 距離、基于人工膜上色譜疏水指數(shù)所反映的非特異性結(jié)合力以及它們?cè)谒械娜芙舛龋▓D11）。從幾何角度看，立方烷和雙環(huán)［2. 2. 2］辛烷中的連接原子之間的距離與對(duì)位取代苯中的連接原子之間的距離非常相似，而B(niǎo)CP 中的連接原子之間的距離比對(duì)位取代苯中的連接原子小約35%，并顯著降低非特異性結(jié)合，不過(guò)BCP 取代芳香環(huán)可使溶解度提高至少約50 倍。雙環(huán)［2. 2. 2］辛烷的結(jié)構(gòu)替換導(dǎo)致分子更加親脂，并且在非特異性結(jié)合或溶解度方面沒(méi)有表現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)，而立方烷的替換即顯示了這兩個(gè)參數(shù)上的改進(jìn)。研究者認(rèn)為，BCP 和立方烷是兩種較好的對(duì)位取代苯環(huán)的生物電子等排體。

Figure 11 Comparison between benzene ring, BCP, cubane and BCO

雖然用飽和的烷基取代生物活性分子中的苯環(huán)對(duì)活性和選擇性的影響很難預(yù)測(cè)（圖12），但有兩種簡(jiǎn)化的情形是可能預(yù)測(cè)的：（1）被取代的苯環(huán)純粹作為構(gòu)象剛性連接片段，將兩個(gè)取代基保持在彼此很好的確定距離上（圖12-A，12-C），使兩個(gè)取代基與受體結(jié)合。在這種情況下，起作用的關(guān)鍵因素是連接片斷的長(zhǎng)度。例如，用立方烷或雙環(huán)［2. 2. 2］辛烷取代苯環(huán)，有可能保持類似的活性水平。因?yàn)橄啾戎逻@3 個(gè)連接物中的C-C 距離與苯環(huán)最相似（2. 82 ?vs2. 60 ?vs2. 72 ?）。另一方面，如果生物活性化合物中取代基之間的較短距離更適合于受體結(jié)合囊，則可以觀察到甚至增加的活性。（2）在第二種情況下，苯環(huán)起到兩種作用：作為剛性間隔基來(lái)保持取代基間的距離和特定的芳基-蛋白質(zhì)相互作用（圖12-B）。后者可包括：（i）苯環(huán)與精氨酸和賴氨酸殘基質(zhì)子化氨基的陽(yáng)離子-π相互作用；（ii）苯環(huán)與蛋白質(zhì)中苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸和組氨酸殘基的π-π相互作用；（iii）其他弱偶極-π相互作用［17］。在這種情況下，事實(shí)上，用任何飽和連接物替換生物活性化合物中的苯環(huán)將大大降低其活性，如在化合物8和10的飽和類似物中觀察到的那樣。

Figure 12 Effect of substituting benzene with saturated alkyl on activity and selectivity in bioactive molecule

1. 2 BCP 作為1,2-二取代炔基的生物電子等排體在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用

BCP作為炔基的生物電子等排體也有應(yīng)用，因?yàn)槿不缺江h(huán)的長(zhǎng)度更接近BCP。 2017 年，Makarov 等［18］首次嘗試用BCP 結(jié)構(gòu)替換炔基的策略，對(duì)已上市藥物Tazarotene（17）進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造（圖13）。藥代動(dòng)力學(xué)研究及理化性質(zhì)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，化合物18 在pKa 和非特異性吸附等性質(zhì)上與Tazarotene非常接近。

Figure 13 Comparison between compound 17 and 18

1. 3 BCP作為叔丁基的生物電子等排體在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用

叔丁基是藥物分子中一種常見(jiàn)的空間位阻較大的取代基，然而當(dāng)向感興趣的分子骨架中引入叔丁基時(shí)卻往往會(huì)使化合物的脂溶性提高以及代謝穩(wěn)定性降低［19］。為了解決這一問(wèn)題，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了多種叔丁基的生物電子等排體，其中由于BCP的結(jié)構(gòu)新穎性和親脂性降低而備受關(guān)注。

1993 年，Barbachyn 等［20］首次應(yīng)用BCP 骨架來(lái)替換叔丁基（圖14）。BMY-40062（20）是已上市藥物環(huán)丙沙星（19）的結(jié)構(gòu)類似物，其殺菌活性得到了較大提升，但是沒(méi)有能夠克服環(huán)丙沙星所帶來(lái)的耐藥性。所以研究者在BMY-40062 的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，并創(chuàng)造性地以BCP 結(jié)構(gòu)來(lái)替換叔丁基得到了U-87947E（21）。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，U-87947E的抗菌活性要優(yōu)于環(huán)丙沙星，并且對(duì)于耐環(huán)丙沙星的金黃色葡萄球菌有很強(qiáng)的抑制作用。

Figure 14 Design of compound 21

2015 年，Westphal 等［19］分別用BCP 骨架替換已上市藥物Bosentan（22）和Vercirnon（24）結(jié)構(gòu)中的叔丁基，并系統(tǒng)性的研究了化合物改造前后在物理化學(xué)性質(zhì)、藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)和生物活性上產(chǎn)生的變化（圖15）。研究數(shù)據(jù)表明，在結(jié)構(gòu)上，BCP骨架的體積要小于叔丁基。當(dāng)以BCP 替換叔丁基之后，化合物親脂性降低，其他理化性質(zhì)也會(huì)得到一定的改善。

Figure 15 Comparison between compound 22 & 23, 24 & 25

1. 4 BCP 作為新穎的結(jié)構(gòu)片段在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用

輝瑞公司通過(guò)高通量篩選發(fā)現(xiàn)了一類新的熱休克蛋白90（Hsp90）拮抗劑，并對(duì)其進(jìn)行了構(gòu)效研究［21］。值得引起注意的是結(jié)構(gòu)中含有BCP 大體積酰胺取代基。含有BCP胺基片段的化合物26顯示出對(duì)細(xì)胞色素P450 的抑制作用，但也觀察到不必要的脫靶效應(yīng)，對(duì)動(dòng)物腫瘤模型試驗(yàn)表明該化合物具有顯著的抗腫瘤療效以及其他令人滿意的成藥特性。應(yīng)用相同的設(shè)計(jì)理念，BCP 片段已經(jīng)被引入到JAK 抑制劑27［22］、RIPK1 抑制劑28［23］、RET抑制劑29［24］、DLK 抑制劑30［25］、Ikaros 和Aiolos 的降解劑31［26］等創(chuàng)新藥物分子中（圖16）。上述活性分子已作為瑟法?。–ephalon）、輝瑞、百時(shí)美施貴寶、藥明康德等國(guó)內(nèi)外制藥公司在研的先導(dǎo)化合物。

Figure 16 Examples of novel bioactive compounds with a BCP moiety

2 結(jié)語(yǔ)與討論

到目前為止，BCP骨架作為1，4-二取代苯環(huán)的生物電子等排體的應(yīng)用最為廣泛。而其作為炔基和叔丁基的生物電子等排體的應(yīng)用卻屈指可數(shù)，所以在未來(lái)還有很多研究的空間?？傮w而言，將BCP 引入藥物分子當(dāng)中可以極大地提高化合物的被動(dòng)滲透性、水溶性和代謝穩(wěn)定性等。但是對(duì)于生物活性而言，還需要綜合考慮替換基團(tuán)的具體作用。

近年來(lái)，BCP 作為1，4-二取代苯環(huán)、1，2-二取代炔基和叔丁基的生物電子等排體在藥物設(shè)計(jì)中已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用。越來(lái)越多的化合物專利中，已經(jīng)將該結(jié)構(gòu)納入了保護(hù)的范圍。與此同時(shí)，BCP衍生物合成方法的開(kāi)發(fā)也如火如荼地進(jìn)行著，并已經(jīng)取得了非常顯著的進(jìn)展。可以預(yù)見(jiàn)，隨著時(shí)間的沉淀，會(huì)有含BCP 結(jié)構(gòu)的藥物成功上市并造福人類。