林廈菁 茍鐘勇 范秋麗 葉金玲 王一冰 蔣守群

(廣東省農業(yè)科學院動物科學研究所，畜禽育種國家重點實驗室，農業(yè)農村部華南動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室，廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點實驗室，廣州510640)

隨著養(yǎng)殖業(yè)進入無促生長抗生素時代，植物精油添加劑越來越受到關注，常見的植物精油的主要成分是百里香酚、香芹酚、對傘花烴和γ-松油烯，其中植物精油中香芹酚和百里香酚的含量通常超過85%，它們也是最主要的功能性物質[1]，具有抗氧化[2]、抗炎癥[3]、抑菌[4]、調控血脂[5]等作用。飼糧中添加植物精油可提高肉雞生長性能[6]和蛋雞產蛋性能[7]，促進機體腸道健康[8]。研究發(fā)現，百里香酚和香芹酚具有抑制內臟脂肪堆積、降脂、改善胰島素和瘦素敏感性等作用[9-10]。肉種雞因脂肪沉積能力過強導致過肥，易發(fā)生脂肪肝綜合征和機體氧化應激，導致產蛋和繁殖性能嚴重下降等問題。前人研究表明，植物精油可以作為飼料添加劑在畜禽飼糧中應用，但目前植物精油對肉種雞生殖器官發(fā)育和脂肪代謝的影響尚未見研究報道。因此，本試驗通過研究植物精油對產蛋期黃羽肉種雞生產性能、蛋品質、孵化性能、生殖器官發(fā)育以及血漿和肝臟生化指標的影響，為植物精油在肉種雞生產中應用提供理論依據與技術支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

試驗采用單因素隨機分組設計，選用288只45周齡嶺南黃羽肉雞父母代種母雞作為試驗雞，根據產蛋率和體重相近的原則分為4個組，每組6個重復，每個重復12只雞。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組分別在基礎飼糧中添加10、20、30 mg/kg植物精油。試驗期10周。

1.2 基礎飼糧

基礎飼糧為玉米-豆粕型飼糧(粉料)，其營養(yǎng)成分參考《雞飼養(yǎng)標準》(NY/T 33—2004)[11]和《黃羽肉雞營養(yǎng)需要量》(NY/T 3645—2020)[12]，并參照《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表(2018年第29版)》[13]設計飼料配方，基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。植物精油產品為固體顆粒，主要成分為百里香酚和香芹酚，其含量均為25%，其他為載體。

表1 基礎飼糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)

續(xù)表1項目 Items含量 Content總磷 TP 0.70非植酸磷 NPP 0.40賴氨酸 Lys 0.68蛋氨酸 Met 0.44蘇氨酸 Thr 0.58可消化賴氨酸 DLys0.62可消化蛋氨酸 DMet0.41可消化蘇氨酸 DThr0.54

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在廣東省農業(yè)科學院動物科學研究所家禽營養(yǎng)研究室種雞試驗舍內進行，采用3層階梯式籠養(yǎng)，每籠2只雞。試驗雞每天08：00定量飼喂1次，每天的飼喂量為120 g/只，采用乳頭式飲水器來供應試驗雞自由飲水。保持自然通風，飼養(yǎng)員定期對欄舍進行衛(wèi)生清潔，常規(guī)防疫與免疫。

1.4 測定指標

1.4.1 產蛋性能

試驗期間每天以重復為單位記錄試驗雞的產蛋數、蛋重和雞只死亡數(整個試驗期無死亡)。產蛋性能指標計算公式如下：

總產蛋率(%)=[總產蛋數/(試驗雞存欄數×
試驗天數)]×100；
平均蛋重(g)=總蛋重/總產蛋數；
平均日產蛋重(g)=平均每只雞每日
產蛋數×平均蛋重；
料蛋比=采食量/平均日產蛋重；
合格蛋率(%)=(合格蛋數/產蛋數)×100。

1.4.2 蛋品質

試驗結束時，分別從每個重復隨機選取蛋樣2枚，進行蛋品質檢測。蛋形指數采用游標卡尺測量蛋樣的長徑和短徑后計算比值；蛋殼強度使用蛋殼強度測定儀(FGV-10XY，以色列)測定；蛋殼厚度采用千分尺(MODEL-1061)測量去殼膜后的蛋殼鈍端、中端和尖端3個點厚度，取平均值；倒出雞蛋內容物，用吸水紙拭去蛋殼上黏附的蛋清，稱量蛋殼重；使用多功能蛋品質測定儀(ORKA，北京天翔飛域儀器設備有限公司)測定蛋白高度、蛋黃顏色和哈氏單位；使用蛋黃重采樣分離器分離出完整蛋黃，使用精密電子分析天平(AL104)測定蛋黃重。

1.4.3 孵化性能

在試驗最后2周，對試驗雞進行人工授精，每個重復收取種蛋30枚(剔除畸形蛋)，每組180枚。種蛋根據種雞分組每個進行編號放入孵化箱孵化。記錄每個重復的未受精蛋數、出苗數和雛雞出殼重量。受精率和受精蛋孵化率計算公式如下：

受精率(%)=[(入孵蛋數-未受精蛋數)/
入孵蛋數]×100；
受精蛋孵化率(%)=(出苗數/入孵
受精蛋數)×100。

1.4.4 血漿和肝臟生化指標

試驗結束時，每個重復隨機選擇2只試驗雞(每組12只試驗雞)，將采集的抗凝血分離成血漿；采集肝臟，將肝臟制備成肝臟組織勻漿液。血漿和肝臟組織勻漿液均采用Beckman全自動生化分析儀(CX5型，Beckman儀器公司，美國)和相應分析試劑盒測定甘油三酯(triglyceride，TG)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)含量。試劑盒均采購自于南京建成生物工程研究所，具體方法參照試劑盒說明書進行。

1.4.5 腹脂率、生殖器官和卵泡發(fā)育

對1.4.4中選取的試驗雞進行解剖，取出腹脂、卵巢和輸卵管，進行稱重。用軟尺測量輸卵管的長度。從卵巢上分離出直徑>10 mm的大卵泡，并記錄卵泡數量。器官系數計算公式如下：

器官系數(%)=(器官重/活重)×100。

1.5 數據統(tǒng)計分析

所有的試驗數據用SPSS 17.0軟件進行單因素方差分析(one-way ANOVA)，再采用Duncan氏法進行多重比較分析。試驗數據均以平均值±標準差(mean±SD)表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結 果

2.1 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞產蛋性能的影響

由表2可見，飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞的平均日產蛋重、料蛋比、平均蛋重、產蛋率、合格蛋率均無顯著影響(P>0.05)。

表2 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞產蛋性能的影響

2.2 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞蛋品質的影響

由表3可知，飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞雞蛋的蛋形指數、蛋殼強度、蛋黃顏色、蛋黃重、蛋殼重無顯著影響(P>0.05)，對蛋白高度、哈氏單位和蛋殼厚度有顯著影響(P<0.05)。其中，對照組的蛋白高度顯著低于其他各組(P<0.05)，對照組的哈氏單位顯著低于10和20 mg/kg植物精油組(P<0.05)，對照組的蛋殼厚度顯著低于20 mg/kg植物精油組(P<0.05)。

表3 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞蛋品質的影響

2.3 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種孵化性能的影響

由表4可知，飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞的受精率、雛雞初生重、入孵蛋孵化率無顯著影響(P>0.05)，對受精蛋孵化率有顯著影響(P<0.05)。其中，對照組的受精蛋孵化率顯著低于10 mg/kg植物精油組(P<0.05)。

表4 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞孵化性能的影響

2.4 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞生殖器官發(fā)育和腹脂率的影響

由表5可知，飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞的輸卵管長度和卵泡數量無顯著影響(P>0.05)，對卵巢系數、輸卵管重量和輸卵管系數有顯著影響(P<0.05)。其中，對照組的卵巢系數顯著低于10和20 mg/kg植物精油組(P<0.05)，對照組的輸卵管重量和輸卵管系數顯著低于10 mg/kg植物精油組(P<0.05)。飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞的腹脂率沒有顯著影響(P>0.05)。其中，20 mg/kg植物精油組的腹脂率最低，比對照組低1.05個百分點。

2.5 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞血漿和肝臟生化指標的影響

由表6可知，飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞血漿甘油三酯、總膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇含量無顯著影響(P>0.05)，對血漿低密度脂蛋白膽固醇含量有顯著影響(P<0.05)。其中，對照組的血漿低密度脂蛋白膽固醇含量顯著高于20 mg/kg植物精油組(P<0.05)。飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞肝臟總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇含量無顯著影響(P>0.05)，對肝臟甘油三酯含量有顯著影響(P<0.05)。其中，對照組的肝臟甘油三酯含量顯著高于10 mg/kg植物精油組(P<0.05)。

表5 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞生殖器官發(fā)育和腹脂率的影響

表6 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞血漿和肝臟生化指標的影響

3 討 論

3.1 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞產蛋性能的影響

近年來，植物精油對蛋雞產蛋性能的影響的研究結果并不一致。本試驗中，飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞的產蛋性能(平均日產蛋重、料蛋比、平均蛋重、產蛋率、合格蛋率)無顯著影響。宮榕[14]和曹巖峰等[15]研究表明，飼糧中添加百里香酚植物精油對海蘭褐蛋雞的產蛋性能無顯著影響，與本試驗結果一致。但Cabuk等[16]和Bozkurt等[17]研究均發(fā)現，在高溫應激條件下，飼糧中添加植物精油(主要成分百里香酚和香芹酚)能夠提高蛋雞產蛋量，減少死亡率。百里香酚和香芹酚具有抗氧化、增強腸道屏障保護等多種作用，說明植物精油在機體發(fā)生應激或者亞健康的狀態(tài)下，更能發(fā)揮出提高產蛋性能等作用。

3.2 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞蛋品質和孵化性能的影響

種蛋的品質直接決定了孵化率和雛雞的質量，蛋殼顏色[18]、蛋重[19]、蛋形指數[20]、蛋白高度[21]、哈氏單位[22]和蛋殼厚度[23]這些蛋品質指標均對孵化率有重要影響。本試驗結果顯示，飼糧中添加植物精油能夠提高蛋白高度、哈氏單位，哈氏單位和蛋白高度越高表示雞蛋越新鮮，蛋品質越好，說明飼糧中添加植物精油可以改善黃羽肉種雞雞蛋的新鮮程度，這與弓浩杰等[24]在蛋雞飼糧中添加植物精油可以提高哈氏單位和蛋白高度的結果一致。本試驗研究發(fā)現，飼糧中添加植物精油能夠提高蛋殼厚度。蛋殼的形成主要是靠子宮腺體分泌形成碳酸鈣，但如果種雞脂肪沉積過多會影響腺體分泌，從而影響蛋殼的質量[25]。本試驗結果顯示，飼糧中添加植物精油有降低黃羽肉種雞腹脂率的趨勢，并降低了黃羽肉種雞血漿低密度脂蛋白膽固醇含量和肝臟中甘油三酯含量，所以可能是由于百里香酚和香芹酚減少了黃羽肉種雞的脂肪沉積，從而有助于提高蛋殼厚度。Ghasemi等[26]研究表明，飼糧中添加百里香植物精油能夠顯著提高雞蛋的蛋殼厚度和哈氏單位。另有研究發(fā)現，添加中添加植物精油(主要成分百里香酚、香芹酚和檸檬烯)能夠顯著提高蛋殼重量[27]，但對其他蛋品質指標無顯著影響。以上研究表明，由于植物精油的主要成分不同而對各蛋品質指標的改善程度各異。本試驗結果表明，植物精油對黃羽肉種雞的蛋品質有明顯的提高作用。

有研究發(fā)現，廣西麻雞飼喂含有枯草芽孢桿菌和植物精油的飼糧能夠顯著提高孵化率和產蛋率[28]，羅氏肉種雞飼喂含有混合植物精油的飼糧能夠顯著提高受精率、孵化率和出雛重[29]。本試驗結果顯示，飼糧中添加植物精油可以提高受精蛋孵化率，與上述結果基本一致。植物精油對不同品種的肉種雞的孵化性能均有提高作用。蛋白高度和哈氏單位可直接反映雞蛋的新鮮程度和蛋白品質[30]，研究發(fā)現種蛋越新鮮則孵化率越高[21-22]。本試驗中，試驗組的蛋白高度與對照組相比顯著提高，這個可能是植物精油提高受精蛋孵化率的原因之一。種蛋的保存時間、破損率以及孵化率均與蛋殼厚度高度相關[31]，蛋殼太薄的種蛋在孵化期間水分散失太大，會導致孵化率降低[32]。蛋殼厚度較薄時，蛋在孵化期間易受損，細菌易侵入從而導致死胚增加[33]，所以在一定范圍內提高蛋殼厚度有助于種蛋的保存和完整性，從而達到提高孵化率的作用。本試驗中，試驗組的蛋殼厚度與對照組相比顯著提高，這可能是植物精油提高孵化率的另一個原因。

3.3 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞生殖器官發(fā)育的影響

卵巢與繁殖相關的一系列活動有著密切的關系[34]，種禽的輸卵管不僅是運送卵子和受精的場所，還承擔著蛋卵白、殼膜等結構的形成[35]。目前，關于植物精油對生殖器官發(fā)育的研究較少。胡喜珍等[36]研究表明，在老年大鼠的飼糧中添加植物提取物具有良好的維持卵巢功能和保護卵泡儲備作用。本試驗結果發(fā)現，飼糧中添加植物精油能夠提高黃羽肉種雞卵巢和輸卵管系數。這說明植物精油能夠促進黃羽肉種雞生殖器官的發(fā)育，這一結果與本試驗提高蛋品質的結果相呼應。

3.4 飼糧中添加植物精油對黃羽肉種雞血漿和肝臟生化指標的影響

許多研究指出，脂肪代謝和沉積對家禽的繁殖性能有重要的影響[37-38]。曹頂國[39]對高產蛋雞和低產蛋雞的卵巢進行全基因組轉錄本的檢測，發(fā)現了14個關于脂肪酸合成、運輸和降解密切相關的基因有顯著表達差異。當雞只脂肪沉積過多后，會導致種禽生殖系統(tǒng)發(fā)育紊亂，進而對產蛋數和受精率等關鍵繁殖性能指標產生不利影響[40]。百里香酚和香芹酚能夠促進脂肪細胞代謝，降低固醇調控元件結合蛋白-1c含量，減少腎臟的脂質積累，對高脂飼糧誘導的糖尿病腎病有顯著的保護作用[41-42]。本試驗研究發(fā)現，飼糧中添加植物精油能夠降低黃羽肉種雞血漿低密度脂蛋白膽固醇含量和肝臟甘油三酯含量，說明植物精油對黃羽肉種雞脂肪代謝有一定促進作用，但具體的調控機制還需要進一步深入研究。

4 結 論

① 飼糧中添加植物精油不影響黃羽肉種雞的產蛋性能，但能夠改善蛋品質，提高受精蛋孵化率和生殖器官(輸卵管和卵巢)系數，降低血漿低密度脂蛋白膽固醇含量和肝臟甘油三酯含量。

② 本試驗條件下，產蛋期黃羽肉種雞飼糧植物精油適宜添加水平為10～20 mg/kg。