張麗卿，王建寶，白小娟，劉艷紅，李鵬花

(1.山西醫(yī)科大學(xué)汾陽(yáng)學(xué)院，山西 汾陽(yáng) 032200；2.山西省汾陽(yáng)醫(yī)院，山西 汾陽(yáng) 032200)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種慢性炎癥性全身性自身免疫性疾病，占全球人數(shù)的0.5%[1]，且逐年升高。我國(guó)每年有近5萬(wàn)例新增RA患者，門診及住院費(fèi)用驚人，嚴(yán)重影響人類健康和生存質(zhì)量。RA有活動(dòng)期與穩(wěn)定期交替發(fā)作的特點(diǎn)，活動(dòng)期給予有效干預(yù)可以延緩病情進(jìn)展，減少關(guān)節(jié)畸形發(fā)生，部分病例可達(dá)到長(zhǎng)期緩解。因此，準(zhǔn)確判斷病情對(duì)治療方法的選擇及預(yù)后尤為重要。目前RA的發(fā)病機(jī)制仍不明確，越來(lái)越多的證據(jù)表明RA的發(fā)病受(包括基因在內(nèi)等)多因素的影響[2-4]。Dickkopf-1(DKK-1)是Dickkopf家族的成員，是由兩個(gè)富含半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域和一個(gè)信號(hào)肽序列組成的分泌蛋白。DKK-1是Wnt/β-catenin信號(hào)通路(典型Wnt通路)的內(nèi)源性可溶性抑制因子。典型的Wnt通路通過(guò)模擬成骨細(xì)胞的增殖、成熟、分化及相關(guān)蛋白的產(chǎn)生，抑制破骨細(xì)胞的骨吸收來(lái)調(diào)節(jié)骨重塑[5-6]。DKK-1表達(dá)異常引起的骨代謝紊亂參與了骨侵蝕的發(fā)病機(jī)制[7-9]。關(guān)于血清DKK-1在RA中的表達(dá)說(shuō)法不一[10-12]。為此本研究就血清DKK-1水平與RA疾病活動(dòng)的關(guān)系進(jìn)行研究。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年10月—2019年12月在山西省汾陽(yáng)醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門診及住院治療的RA患者44 例，其中男14 例，女30 例，年齡(55.68±1.37) 歲。所有患者符合1987年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)(ACR)RA分類標(biāo)準(zhǔn)或者2010年ACR和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)提出的RA新的分類標(biāo)準(zhǔn)。排除患有其他結(jié)締組織病、血液系統(tǒng)疾病、腫瘤、嚴(yán)重感染者。

1.2 研究方法

詳細(xì)記錄RA患者病史及治療前和治療3個(gè)月后關(guān)節(jié)壓痛數(shù)(TJC)、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)(SJC)，檢測(cè)治療前后紅細(xì)胞沉降率(ESR)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、類風(fēng)濕因子(RF)水平，計(jì)算同一時(shí)點(diǎn)的RA患者疾病活動(dòng)評(píng)分(DAS28)。DKK-1試劑盒和標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自上海星科生物科技有限公司，嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)。ESR用魏氏法檢測(cè)，CRP和RF用ELISA法檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 治療前RA患者血清中DKK-1與相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系

RA患者年齡(55.68±1.37) 歲，TJC(7.14±0.85) 個(gè)，SJC為(6.90±0.87) 個(gè)，ESR為(40.01±7.87) mm/h，CRP為(34.71±6.87) mg/L，RF為(71.89±6.70) U/mL，DAS28為(4.49±0.16)。血清中DKK-1與TJC，SJC，DAS28呈正相關(guān)，與ESR，CRP，RF及年齡無(wú)相關(guān)性(見表1)。

表1 DKK-1與相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系

2.2 治療前后RA患者相關(guān)指標(biāo)的比較

治療后RA患者TJC，SJC，ESR，CRP，RF，DAS28及DKK-1較治療前下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表2 治療前后相關(guān)指標(biāo)的比較

3 討 論

RA是由多種因素引起的一種自身免疫性疾病，可引起關(guān)節(jié)畸形，導(dǎo)致生活能力下降。目前國(guó)際上有關(guān)RA的治療推崇達(dá)標(biāo)治療，以讓每位患者達(dá)到完全緩解或低疾病活動(dòng)度為目標(biāo)，最大限度地提高患者生活質(zhì)量。因此，及時(shí)明確疾病活動(dòng)性有利于更好地治療。

引起RA關(guān)節(jié)破壞的機(jī)制一直備受關(guān)注。目前已知Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與骨骼的生長(zhǎng)發(fā)育，而DKK-1作為Wnt/β-catenin信號(hào)通路的內(nèi)源性抑制劑，通過(guò)與低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白-5/6(LRP 5/6)結(jié)合，參與骨穩(wěn)態(tài)的調(diào)控。這種結(jié)合導(dǎo)致了LRP 5/6的失活，并抑制了脆性蛋白、Wnt成員與LRP 5/6的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，健康大鼠組織中DKK-1表達(dá)低于病理組織和壞死組織(炎癥組織)。與骨性關(guān)節(jié)炎(OA)相比，RA個(gè)體膝關(guān)節(jié)滑膜組織中DKK-1表達(dá)增加更為明顯，且RA中DKK-1可能抑制血管形成，降低成骨細(xì)胞功能，負(fù)調(diào)控軟骨形成，從而影響軟骨或骨骼發(fā)育。這些提示DKK-1可能參與了慢性炎癥性關(guān)節(jié)病的骨代謝異常和發(fā)病機(jī)制[3]。

DKK-1通過(guò)成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞調(diào)控骨代謝。研究[13]發(fā)現(xiàn)，RA患者骨密度評(píng)分越低血清DKK-1水平越高。國(guó)外研究[14]發(fā)現(xiàn)，一些炎癥因子可以通過(guò)激活和增加DKK-1進(jìn)一步加速骨丟失、促進(jìn)骨破壞。另有研究[15]發(fā)現(xiàn)，抑制骨信號(hào)通路的關(guān)鍵蛋白DKK-1比單純抑制炎癥能更好地控制病理性骨侵蝕，進(jìn)一步證實(shí)了DKK-1在骨代謝中的重要作用。有學(xué)者應(yīng)用腫瘤壞死因子(TNF-α)阻斷劑抑制DKK-1，發(fā)現(xiàn)RA患者的骨破壞逐漸逆轉(zhuǎn)為骨重塑[16]。推測(cè)DKK-1表達(dá)上調(diào)可能成為RA成骨細(xì)胞活性抑制的主要機(jī)制，對(duì)于RA患者中成骨細(xì)胞的Wnt信號(hào)途徑的其他變化還需更深入的研究。關(guān)于Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)破骨細(xì)胞影響的研究較少，認(rèn)為主要是通過(guò)作用于成骨細(xì)胞間接影響破骨細(xì)胞的功能。

DKK-1水平與RA患者的疾病活動(dòng)性、骨破壞等密切相關(guān)。研究[17]結(jié)果顯示，RA患者血清DKK-1水平與病程及ESR，CRP，DAS28呈正相關(guān)；RA患者血清DKK-1越高，預(yù)示著放射學(xué)進(jìn)展越明顯。國(guó)外學(xué)者對(duì)379 例RA患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，血清中DKK-1水平高者骨關(guān)節(jié)功能下降，同時(shí)未發(fā)現(xiàn)DKK-1與高水平的DAS28、臨床的疾病活動(dòng)指數(shù)(CDAI)、簡(jiǎn)化的疾病活動(dòng)指數(shù)(SDAI)的相關(guān)性，提示DKK-1可能是RA功能障礙的生物標(biāo)志物[17]；另有研究發(fā)現(xiàn)RA患者血清中DKK-1水平與影像學(xué)進(jìn)展呈正相關(guān)，與骨密度呈負(fù)相關(guān)，支持RA中DKK-1的高表達(dá)與骨破壞相關(guān)[13]。本研究發(fā)現(xiàn)治療后DKK-1水平較治療前下降，且反映疾病活動(dòng)性的指標(biāo)也下降，表明DKK-1可提示疾病活動(dòng)性。對(duì)DKK-1與相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系分析，證明DKK-1與疾病活動(dòng)性呈正相關(guān)，進(jìn)一步證明DKK-1可作為反映疾病活動(dòng)性的指標(biāo)，與國(guó)外研究[13]結(jié)論一致。同時(shí)我們對(duì)DKK-1與ESR，CRP，RF的相關(guān)性進(jìn)行了探討，得出DKK-1與ESR，CRP，RF無(wú)相關(guān)性，考慮與ESR，CRP，RF受多種因素影響或病例數(shù)較少有關(guān)。

綜上所述，治療后RA患者血清中DKK-1水平下降，且DKK-1與RA疾病活動(dòng)性呈正相關(guān)，因此可將DKK-1視為RA疾病活動(dòng)的生物標(biāo)志物，對(duì)其展開深入研究有利于控制RA患者疾病活動(dòng)性，延緩疾病進(jìn)展。