■ 文｜廣東聯(lián)鯤集團(tuán)有限公司 張松

廣州市聯(lián)鯤生物科技有限公司 王耀華 陳林 楊勇

埃特亞（廣州）飼料添加劑有限公司 Sergi Carne

木聚糖酶、β -葡聚糖酶、植酸酶、淀粉酶和蛋白酶等酶制劑，作為外源性酶制劑添加到飼料中可有效提高水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)飼料的利用率，促進(jìn)生長(zhǎng)，增強(qiáng)免疫力，而且其殘留不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，影響食品安全。因其突出的優(yōu)點(diǎn)，在異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）、建鯉（Cyprinus carpio var.Jian）和黃顙魚(yú)（Pelteobagrus fulvidraco）等部分水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用已有研究。但是，受水產(chǎn)動(dòng)物種類(lèi)、生長(zhǎng)階段、酶制劑組合比例及添加量等因素的影響，外源性酶制劑對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的作用效果大相徑庭，需要進(jìn)一步的研究完善。

草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）是中國(guó)主要的淡水魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖品種，2019年全國(guó)產(chǎn)量達(dá)到了553.3萬(wàn)噸。草魚(yú)商業(yè)飼料配方中多以植物性原料為主要蛋白源，如豆粕、菜粕、棉粕和玉米副產(chǎn)物等。但是，上述植物蛋白中含有大量的α-半乳糖苷、木聚糖及葡聚糖等抗?fàn)I養(yǎng)因子，會(huì)嚴(yán)重影響草魚(yú)對(duì)飼料養(yǎng)分的消化吸收效果，進(jìn)而對(duì)其生長(zhǎng)性能產(chǎn)生負(fù)面影響。因此，在飼料中添加外源性酶制劑成為解決上述問(wèn)題的有效途徑之一。復(fù)合酶制劑在草魚(yú)中的應(yīng)用已有少量的研究，但以半乳糖苷酶和木聚糖酶為主的復(fù)合酶制劑在草魚(yú)中的應(yīng)用研究卻未見(jiàn)報(bào)道。

本研究探討了以α-1,6-半乳糖苷酶和內(nèi)切-1,4-β-木聚糖酶為主要成分的復(fù)合酶制劑對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能、飼料利用和形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響，旨在為該復(fù)合酶制劑在草魚(yú)配合飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。試驗(yàn)選取480尾草魚(yú)（初始均重為274.33±0.16 g），隨機(jī)分為4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚(yú)，分別投喂添加0（0 PC組）、0.03%（0.03% CEP組）、0.05%（0.05% CEP組）和0.05%（0.05%NC組，在0.05% CEP組配方基礎(chǔ)上降低4%豆粕，增加3%菜籽粕和1.5%玉米酒糟）復(fù)合酶制劑的4種等氮等脂（28.9%粗蛋白和4.7%粗脂肪）試驗(yàn)飼料，養(yǎng)殖周期為56天。結(jié)果顯示：與0 PC組相比，飼料中添加0.05%復(fù)合酶制劑可使草魚(yú)增重率提高11.20%～13.01%，特定生長(zhǎng)率提高9.09%～11.09%。0.05% NC組攝食率顯著高于0 PC組（P＜0.05）。此外，飼料添加0.05%復(fù)合酶制劑后，可使配方中豆粕添加量降低4%，并且不會(huì)對(duì)草魚(yú)的生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)面影響。各試驗(yàn)組草魚(yú)的末均重、增重率、特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)、肥滿度、肝體比、臟體比和腸體指數(shù)并無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。綜上所述，飼料中添加0.05%復(fù)合酶制劑對(duì)草魚(yú)的生長(zhǎng)和攝食有益。

材料與方法

1.試驗(yàn)飼料

復(fù)合酶制劑（主要成分是α-1,6-半乳糖苷酶和內(nèi)切-1,4-β-木聚糖酶，購(gòu)自廣東省廣州市埃特亞飼料添加劑有限公司。試驗(yàn)飼料配方及組分分析如表1所示。各組試驗(yàn)飼料為水產(chǎn)飼料工廠加工制成的沉水顆粒飼料。飼料原料經(jīng)粉碎后（粉碎粒度為90%）過(guò)60目篩，然后將所有粉碎后的原料充分混勻。將混合后的飼料進(jìn)行調(diào)質(zhì)，調(diào)質(zhì)溫度為90～100℃，調(diào)質(zhì)時(shí)間約為2分鐘，最后放入制粒機(jī)壓制成直徑3.0mm的顆粒飼料，冷卻干燥后于-20℃保存?zhèn)溆?。試?yàn)飼料氨基酸組成如表2所示。

表1 試驗(yàn)飼料配方及組分分析（%干物質(zhì)）Table 1 Formulation and proximate composition of experimental diets(%dry matter)

表2 試驗(yàn)飼料氨基酸組成（%濕重）Table 2 Amino acids composition of the experimental diet (%wet weight)

2.飼養(yǎng)與管理

試驗(yàn)用草魚(yú)購(gòu)自中山市三角鎮(zhèn)東邊水產(chǎn)養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社，試驗(yàn)養(yǎng)殖系統(tǒng)為室外池塘網(wǎng)箱（長(zhǎng)1.5 m×寬1.5 m×深2 m，水深約3 m）養(yǎng)殖系統(tǒng)。本試驗(yàn)在廣東省珠海市聯(lián)鯤集團(tuán)研究院中試基地進(jìn)行。草魚(yú)在網(wǎng)箱暫養(yǎng)2周，攝食0 PC組試驗(yàn)飼料，每天投喂2次。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，隨機(jī)選取草魚(yú)（274.33±0.16g）480尾放入0 PC組、0.03% CEP組、0.05% CEP組和0.05% NC組等4個(gè)試驗(yàn)組中，每個(gè)組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30尾魚(yú)。按照草魚(yú)體重的3%～5%投喂試驗(yàn)飼料，每天投喂2次（9∶00和15∶00），根據(jù)草魚(yú)的攝食情況調(diào)整投喂量，養(yǎng)殖周期為56天。養(yǎng)殖過(guò)程中無(wú)換水，養(yǎng)殖期間的溶氧含量大于5mg/L、氨氮含量低于0.1mg/L、亞硝酸鹽含量低于0.5mg/L、水溫15～25.5℃、pH為7.8～8.4，試驗(yàn)采取自然光照。

3.樣品采集與分析

養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，草魚(yú)停止攝食24小時(shí)。分別將每個(gè)網(wǎng)箱內(nèi)全部草魚(yú)撈起瀝干后稱(chēng)重。此外，每組網(wǎng)箱隨機(jī)選取3尾魚(yú)測(cè)定其體長(zhǎng)、體重、肝臟重、內(nèi)臟重以及腸重用于計(jì)算肥滿度、肝體比、臟體比和腸體指數(shù)。

4.指標(biāo)測(cè)定

初始均重 （Initial mean body weight, IBW, g/尾魚(yú)）

末均重 （Final mean body weight,FBW, g/尾魚(yú)）

增重率（Weight gain rate, WGR,%）＝100×（FBW－IBW）/IBW;

特定生長(zhǎng)率（Specific growth rate,SGR, %/d）＝100×［LN（FBW）－LN（IBW）］/試驗(yàn)天數(shù)

攝食率 (Feeding rate, FR, % BW/d)＝100×飼料投喂量（干物質(zhì)量）/［試驗(yàn)天數(shù)×（初始魚(yú)體重＋終末魚(yú)體重）/2］

飼料系數(shù) （Feed conversion rate,FCR）＝飼料投喂量/（終末魚(yú)總重－初始魚(yú)總重）

肥滿度（Condition factor, CF, g/cm3）＝100×體重（g）/體長(zhǎng)（cm）3

肝體比（Hepatosomatic index,HSI, %）＝100×肝臟重/體重

臟體比（Viscerasomatic index,VSI, %）＝100×內(nèi)臟重/體重

腸體指數(shù)（Intestosomatic index,ISI, %）＝100×腸道重/體重

結(jié)果與分析

1.生長(zhǎng)性能和飼料利用

由表3可知，0.05%NC組攝食率顯著高于0PC組和0.03% CEP組（P＜0.05）。與0 PC組（對(duì)照組）相比，0.05% CEP組、0.05% NC組增重率（WGR）分別提高了11.20%、13.01%，特定生長(zhǎng)率（SGR）分別提高了9.09%、11.09%。但各試驗(yàn)組草魚(yú)的末均重（FBW）、WGR、SGR和飼料系數(shù)（FCR）無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表3 飼料添加復(fù)合酶制劑對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響Table 3 Effect of complex enzyme on growth performance and feed utilization of grass carp

2.形態(tài)學(xué)指標(biāo)

由表4可知，各試驗(yàn)組肥滿度（CF）、臟體比（VSI）和腸體指數(shù)（ISI）無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。0.05%NC組肝體比雖高于其它實(shí)驗(yàn)組，但各組之間并無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。

表4 飼料添加復(fù)合酶制劑對(duì)草魚(yú)形態(tài)學(xué)指標(biāo)的影響Table 4 Effect ofcomplex enzyme on morphological indexes of grass carp

討論

為了保持水產(chǎn)養(yǎng)殖的可持續(xù)性，豆粕、菜籽粕和棉籽粕等植物源蛋白常被添加到水產(chǎn)飼料中。這些植物性原料通常含有較高含量的α-半乳糖苷、木聚糖等非淀粉多糖，而且植物性原料在飼料中的占比越高，飼料中的非淀粉多糖含量越高。非淀粉多糖的抗?fàn)I養(yǎng)特性會(huì)降低營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。α-半乳糖苷在畜禽中被報(bào)道可通過(guò)增加小腸內(nèi)容物的滲透性和液體的保持力，加快腸道食麋的排空速度，從而影響動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收；而木聚糖則會(huì)提高腸道內(nèi)容物的黏度，降低內(nèi)源性消化酶的活性，進(jìn)而降低養(yǎng)分的消化吸收。前人研究發(fā)現(xiàn)，飼料中高水平的植物性原料會(huì)引起尼羅羅非魚(yú)、虹鱒等魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)性能的下降，這可能與植物性原料中抗?fàn)I養(yǎng)因子干擾水產(chǎn)動(dòng)物正常的消化吸收功能有關(guān)。

隨著水產(chǎn)飼料中植物性原料比例的提升，外源性酶制劑在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。木聚糖酶可將木聚糖降解成低聚糖和木糖，通過(guò)分解細(xì)胞壁、降低食糜黏度、提高內(nèi)源性消化酶活性等途徑在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮作用。α-半乳糖苷酶也可通過(guò)類(lèi)似途徑發(fā)揮作用。Hassaan et al.研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加0.05%木聚糖酶可提高尼羅羅非魚(yú)消化酶活性、飼料養(yǎng)分的消化率，改善腸道形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。復(fù)合酶制劑可針對(duì)飼料中不同抗?fàn)I養(yǎng)化合物作用，其對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的作用效果可能優(yōu)于在飼料中單一添加某種酶制劑。盧靜等研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加0.05%或0.15%的復(fù)合酶制劑（包括中性蛋白酶、酸性蛋白酶、纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶）能顯著提高歐洲鰻鱺的WGR和SGR。Jasek et al.研究發(fā)現(xiàn)復(fù)合酶制劑（α-半乳糖苷酶和木聚糖酶）能增加飼喂玉米-豆粕型飼料肉雞的回腸可消化能和改善回腸氨基酸的特定消化率，從而提高其生長(zhǎng)性能。但上述復(fù)合酶制劑在魚(yú)類(lèi)中的應(yīng)用研究卻未見(jiàn)報(bào)道。

本研究中，相比于對(duì)照組而言，添加0.05%復(fù)合酶制劑（0.05% CEP組）使草魚(yú)的WGR和SGR分別提高了11.20%和9.09%，說(shuō)明該復(fù)合酶制劑對(duì)促進(jìn)草魚(yú)的生長(zhǎng)有益。但是，兩組WGR和SGR并無(wú)顯著性差異，這可能與本試驗(yàn)飼料中植物性原料添加量過(guò)高（豆粕、菜籽粕和玉米酒糟添加量高達(dá)65%）有關(guān)，還需進(jìn)一步提高復(fù)合酶制劑的添加量以研究其對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，在0.05%復(fù)合酶制劑的影響下，降低4%的豆粕并沒(méi)有造成草魚(yú)WGR和SGR的降低，反而攝食率有了一定程度的提高。上述結(jié)果表明，在草魚(yú)飼料中添加0.05%復(fù)合酶制劑，適當(dāng)降低飼料營(yíng)養(yǎng)水平（用菜籽粕、玉米酒糟替代豆粕），不會(huì)對(duì)草魚(yú)生長(zhǎng)性能產(chǎn)生負(fù)面影響。

綜上所述，本試驗(yàn)條件下，飼料中添加0.05%復(fù)合酶制劑（主要成分是α-1,6-半乳糖苷酶和內(nèi)切-1,4-β-木聚糖酶）對(duì)草魚(yú)的生長(zhǎng)和攝食有益。另外，飼料添加0.05%復(fù)合酶制劑后，可降低配方中4%的豆粕添加量，并且不會(huì)對(duì)草魚(yú)的生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)面影響。此外，飼料中添加復(fù)合酶制劑對(duì)草魚(yú)形態(tài)學(xué)指標(biāo)沒(méi)有明顯的影響。