陳力，馬亞麗，李本亮

精神分裂癥是一種病因不明、危害性較大的慢性精神病，多在青壯年期緩慢、亞急性起病，臨床上患者常有感知覺、思維、行為、情感等多方面的障礙，且對其工作、日常生活、社交等有不利影響［1-2］。隨著病情的不斷進展，部分患者會出現(xiàn)認知功能損害、腸道功能障礙等多種并發(fā)癥，嚴重影響患者的生活質(zhì)量及身體健康［3-4］。腸道屏障是機體復雜且重要的防御系統(tǒng)，主要通過抵御抗原進入、吸收營養(yǎng)物質(zhì)等方式維持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，精神分裂癥、糖尿病、膿毒癥等非消化系統(tǒng)疾病均可造成腸道屏障功能失調(diào)，進而損害機體健康［4-5］。近年來硫化氫（H2S）在神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)中的病理生理作用引起廣泛關注，如Sommer等［6］研究發(fā)現(xiàn)外源性H2S作為精神分裂癥的抗氧化及抗炎介質(zhì)，可用于抗精神病治療；Cui等［7］研究發(fā)現(xiàn)外源性H2S可顯著改善腸缺血再灌注大鼠腸黏膜損傷、腸黏膜細胞凋亡及氧化應激損傷，但其作用機制仍不清晰。核因子E2相關因子2（Nrf2）/抗氧化反應元件（ARE）/血紅素氧化酶1（HO-1）通路是機體抵抗外界氧化應激的關鍵通路之一，在保護神經(jīng)功能［8］、維持腸道屏障功能［9］等方面發(fā)揮重要作用。本研究以Nrf2/ARE/HO-1為切入點，探究外源性H2S對精神分裂癥大鼠認知功能、腸道屏障功能的影響及其可能機制，旨在為臨床治療精神分裂癥提供新思路。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SPF級雄性SD大鼠40只，6~8周齡，體質(zhì)量200~240 g，購自廣東省醫(yī)學實驗動物中心，生產(chǎn)許可證號：SCXK（粵）2018-0002。大鼠于溫度22~24℃，相對濕度40%~60%，12 h/12 h晝夜交替的條件下飼養(yǎng)，自由進食飲水。本研究經(jīng)鄭州大學第五附屬醫(yī)院動物倫理委員會批準同意，實驗過程中按照動物使用的“3R”原則給予人道主義關懷。

1.2 主要試劑及儀器 N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受體拮抗劑MK-801、GYY4137（H2S供體）、全反視黃酸（ATRA，Nrf2抑制劑）購自上海陶素生化科技有限公司；原位末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(shù)（TUNEL）細胞凋亡檢測試劑盒、蛋白提取試劑盒、BCA試劑盒購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；HE染色試劑盒、H2S含量檢測試劑盒購自北京索萊寶科技有限公司；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、腫瘤壞死因子（TNF）-α、白細胞介素（IL）-6酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司；D-乳酸ELISA試劑盒（JL209792）購自上海江萊生物科技有限公司；兔抗鼠Nrf2、HO-1、Caspase-3、Bax、Bcl-2、GAPDH一抗，IgG二抗購自Abcam。組織脫水機（型號：ASP6025）、手動輪轉(zhuǎn)式切片機（型號：BIOCUT）購自德國Leica公司；光學顯微鏡（型號：BioScope Resolve）購自美國BRUKER；酶標儀（型號：SpectraMax i3x）購自奧地利Molecular Devices；蛋白電泳儀（型號：JY300）購自北京君意華鑫；半干轉(zhuǎn)膜儀（型號：TE70X）購自美國Hoefer；凝膠成像儀（型號：Quantum CX5）購自法國Vilber。

1.3 方法

1.3.1 動物模型制備及分組 精神分裂癥大鼠模型的制備參考文獻［10］，將SD大鼠按照隨機數(shù)字表法分為對照組（8只）和造模組（32只），造模組大鼠通過腹腔注射0.2 mg/kg的MK-801構(gòu)建精神分裂癥大鼠模型，每天注射1次，連續(xù)注射2周；對照組大鼠腹腔注射生理鹽水。第15天通過Morris水迷宮實驗驗證模型構(gòu)建情況，（造模組大鼠潛伏期-對照組大鼠潛伏期）/對照組大鼠潛伏期×100%＞20%表明精神分裂癥大鼠模型構(gòu)建成功［11］。造模過程中出現(xiàn)不符合條件或者死亡時（造模組出現(xiàn)2只）及時選取備用大鼠進行精神分裂癥模型的復制。

將造模成功的大鼠按照隨機數(shù)字表法分為模型組、H2S干預組、Nrf2抑制劑組、H2S+Nrf2抑制劑組，每組8只。H2S干預組腹腔注射10 mg/kg的GYY4137（H2S供體）［12］，Nrf2抑制劑組腹腔注射10 mg/kg的ATRA（Nrf2抑制劑）［13］，H2S+Nrf2抑制劑組腹腔注射10 mg/kg的GYY4137和10 mg/kg的ATRA，模型組和對照腹腔注射生理鹽水，連續(xù)處理7 d。

1.3.2 各組大鼠認知功能測定 末次給藥結(jié)束后24 h進行Morris水迷宮實驗測定各組大鼠的認知功能。將水迷宮均分為1、2、3、4四個象限，在第1象限中央低于水平面1 cm處放置半徑為5 cm的圓形透明平臺。第1、2、3、4天進行定位巡航實驗：每天上午8：00將大鼠從第2、3、4象限的同一位置放入水中，記錄大鼠從入水至爬到圓形平臺的時間，即逃避潛伏期；若大鼠在90 s內(nèi)未找到圓形平臺，則引導大鼠至圓形平臺上并停留10 s，此時潛伏期為90 s。第5天進行空間探索實驗：將圓形平臺撤去，記錄120 s內(nèi)大鼠游過圓形平臺的次數(shù)，即穿臺次數(shù)。

1.3.3 各組大鼠相關標本采集 完成Morris水迷宮測試后取大鼠尾靜脈血0.4 mL，置于肝素化離心管中，3 000 r/min離心15 min后取上層血漿。將大鼠麻醉后處死，取回盲部腸管組織5 cm，其中2.5 cm用于組織病理學觀察及TUNEL測定，另2.5 cm用于腸道屏障功能相關指標及Nrf2/ARE/HO-1通路相關蛋白的測定，取大鼠海馬組織CA1區(qū)用于HE染色觀察神經(jīng)元細胞形態(tài)。

1.3.4 各組大鼠腸組織、海馬組織病理損傷及腸黏膜細胞凋亡檢測 取各組大鼠腸管組織適量于4%多聚甲醛中固定72 h，用流水洗去多聚甲醛后于組織脫水機中脫水，將脫水后的腸組織用融化的石蠟進行包埋，待其凝固后切成厚度約為4μm的切片。在漂片機中展開后附著在載玻片上，按照HE染色試劑盒中的要求進行HE染色，中性樹膠封固后在顯微鏡下觀察、拍照并分析。海馬組織HE染色方法同腸組織HE染色。采用TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒對各組大鼠腸組織中腸黏膜細胞凋亡情況進行測定，測定方法參考試劑盒說明書，TUNEL染色陽性的凋亡細胞呈棕色，凋亡率=（凋亡細胞數(shù)/細胞總數(shù)）×100%。

1.3.5 各組大鼠血漿H2S、D-乳酸，腸組織腸道屏障功能相關指標及應激指標的檢測 取各組大鼠血漿，用H2S含量檢測試劑盒測定大鼠血漿中H2S含量，D-乳酸ELISA試劑盒測定大鼠血漿中D-乳酸含量。取各組大鼠腸組織，在光鏡下記錄大鼠腸組織的小腸絨毛高度及隱窩深度。取適量腸組織，用生理鹽水制成組織勻漿，取上清液，用相應ELISA試劑盒測定各組大鼠腸組織中SOD、MDA、TNF-α、IL-6水平。

1.3.6 Western blot檢測各組大鼠腸組織Nrf2/ARE/HO-1通路蛋白、凋亡相關蛋白的表達 取適量腸組織，剪碎后置于研缽中，加入適量RIPA裂解液研磨以提取總蛋白。提取充分后置于EP管中，靜置20 min后1 000 r/min、4℃離心10 min，吸取上清液為目的蛋白，用BCA法測定并計算其中蛋白質(zhì)濃度。取適量待測蛋白樣品，按照體積比為5∶1加入上樣緩沖液，100℃加熱5 min使蛋白變性，取20μL變性的蛋白溶液進行聚丙烯酰胺凝膠電泳以分離蛋白，電泳過程在冰上進行。將分離的蛋白質(zhì)采用濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，將PVDF膜置于5%脫脂牛奶中封閉處理30 min，經(jīng)TBST緩沖液沖洗3次后加入兔抗鼠Nrf2（1∶500）、HO-1（1∶1 000）、Caspase-3（1∶1 000）、Bax（1∶1 000）、Bcl-2（1∶1 000）、GAPDH（1∶1 000）一抗，4℃冰箱過夜?；厥找豢梗琓BST緩沖液沖洗3次，加入羊抗兔IgG二抗（1∶5 000），室溫下?lián)u床中搖晃1 h，棄二抗，TBST緩沖液沖洗3次，顯影、曝光后于凝膠成像儀中觀察并分析。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 22.0軟件進行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析和重復測量方差分析，組間多重比較行LSD-t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠認知功能比較 時間與分組因素對潛伏期的影響存在交互效應（P＜0.05）；隨著訓練時間的增加，各組大鼠逃避潛伏期逐漸縮短；與對照組相比，模型組大鼠逃避潛伏期延長，穿臺次數(shù)減少（均P＜0.05）；與模型組相比，H2S干預組大鼠逃避潛伏期縮短，穿臺次數(shù)增多（均P＜0.05），Nrf2抑制劑組與模型組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組大鼠逃避潛伏期延長（P＜0.05），穿臺次數(shù)減少（P＜0.05），見表1。

2.2 各組大鼠海馬組織HE染色結(jié)果 海馬HE染色結(jié)果顯示，對照組海馬神經(jīng)元形態(tài)規(guī)則、著色均勻、排列整齊；模型組神經(jīng)元排列紊亂，大量神經(jīng)元核深染、固縮，部分細胞被小膠質(zhì)細胞代替；與模型組相比，H2S干預組神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)得到恢復；與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組大鼠海馬神經(jīng)元損傷加重，見圖1。

Tab.1 Comparison of cognitive function of rats between the five groups表1 各組大鼠認知功能比較 （n=8，±s）

Tab.1 Comparison of cognitive function of rats between the five groups表1 各組大鼠認知功能比較 （n=8，±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；a與對照組比較，b與模型組比較，c與H2S干預組比較，d與Nrf2抑制劑組比較，P＜0.05；表2~5同。

組別對照組模型組H2S干預組Nrf2抑制劑組H2S+Nrf2抑制劑組第2天59.28±6.05 81.75±7.05a 66.39±7.11ab 82.28±8.31ac 74.06±7.04abcd第3天43.19±3.99 75.57±7.77a 56.62±5.23ab 76.15±6.85ac 67.49±6.63abcd第4天29.10±2.06 60.84±6.71a 35.30±2.18ab 66.93±6.46ac 49.08±3.91abcd F（組間/時間/交互）逃避潛伏期（s）第1天64.60±7.44 88.58±7.28a 72.70±7.05ab 89.26±8.34ac 80.70±7.30abcd 170.676＊＊/120.340＊＊/2.103＊穿臺次數(shù)（次）6.68±1.39 2.20±0.42a 3.59±0.43ab 2.06±0.35ac 2.61±0.17acd 59.924＊＊

2.3 各組大鼠腸黏膜細胞凋亡情況 與對照組相比，模型組腸黏膜細胞凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表達顯著升高，Bcl-2蛋白表達顯著降低（P＜0.05）；與模型組相比，H2S干預組腸黏膜細胞凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表達顯著降低，Bcl-2蛋白表達顯著升高（P＜0.05），Nrf2抑制劑組與模型組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組大鼠腸黏膜細胞凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表達顯著升高（P＜0.05），Bcl-2蛋白表達顯著降低（P＜0.05），見表2，圖2、3。

2.4 各組大鼠腸組織形態(tài)學觀察 對照組回盲部腸組織形態(tài)學正常，光澤度較好，絨毛排列整齊，形態(tài)呈指狀，未見炎性細胞浸潤；模型組腸組織損傷嚴重，可見絨毛生長稀疏，略有水腫，出現(xiàn)炎性細胞浸潤等情況；與模型組相比，H2S干預組大鼠腸組織損傷得到一定緩解，Nrf2抑制劑組無明顯差異；與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組大鼠腸組織損傷情況較重，見圖4。

Fig.1 HE staining observation of hippocampal tissue of rats in each group(×400)圖1 各組大鼠海馬組織HE染色結(jié)果（×400）

2.5 各組大鼠血漿H2S、D-乳酸，腸組織腸道屏障功能相關指標及應激指標變化 與對照組相比，模型組血漿D-乳酸及腸組織中MDA、TNF-α、IL-6水平顯著升高（P＜0.05），小腸絨毛高度、小腸隱窩深度、血漿H2S水平、腸組織中SOD水平顯著降低（P＜0.05）；與模型組相比，H2S干預組血漿D-乳酸及腸組織中MDA、TNF-α、IL-6水平顯著降低（P＜0.05），小腸絨毛高度、小腸隱窩深度、血漿H2S水平、腸組織中SOD水平顯著升高（P＜0.05），Nrf2抑制劑組與模型組相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組血漿D-乳酸及腸組織中MDA、TNF-α、IL-6水平顯著升高（P＜0.05），小腸絨毛高度、小腸隱窩深度、血漿H2S水平、腸組織中SOD水平顯著降低（P＜0.05），見表3、4。

2.6 各組大鼠腸組織Nrf2/ARE/HO-1通路相關蛋白表達情況 與對照組相比，模型組腸組織中Nrf2、HO-1蛋白表達水平顯著增加（P＜0.05）；與模型組相比，H2S干預組腸組織中Nrf2、HO-1蛋白表達水平顯著增加（P＜0.05），Nrf2抑制劑組與模型組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組大鼠腸組織中Nrf2、HO-1蛋白表達水平顯著降低（P＜0.05），見表5、圖5。

Tab.2 Apoptosis of intestinal mucosa cells of rats in each group表2 各組大鼠腸黏膜細胞凋亡情況 （n=8，±s）

Tab.2 Apoptosis of intestinal mucosa cells of rats in each group表2 各組大鼠腸黏膜細胞凋亡情況 （n=8，±s）

組別對照組模型組H2S干預組Nrf2抑制劑組H2S+Nrf2抑制劑組F凋亡率（%）4.15±0.86 19.48±5.25a 6.60±1.80b 20.46±6.82ac 13.44±3.21acd 24.555＊＊凋亡相關蛋白表達Caspase-3/GAPDH 0.49±0.10 1.25±0.27a 0.60±0.14b 1.27±0.31ac 0.93±0.18acd 22.428＊＊Bax/GAPDH 0.41±0.08 1.22±0.26a 0.61±0.14b 1.26±0.30ac 0.92±0.17acd 26.133＊＊Bcl-2/GAPDH 1.01±0.10 0.58±0.05a 0.93±0.09b 0.54±0.03ac 0.67±0.03acd 80.054＊＊

Fig.2 TUNEL staining was used to detect the apoptosis of intestinal mucosal cells in each group(×200)圖2 TUNEL染色檢測各組大鼠腸黏膜細胞凋亡情況（×200）

Fig.3 Expression of apoptosis related proteins in intestinal mucosa of rats in each group圖3 各組大鼠腸黏膜細胞凋亡相關蛋白表達情況

3 討論

精神分裂癥是由一組癥狀群組成的臨床綜合征，為多因素慢性疾病，發(fā)病機制復雜且尚未明了，缺乏療效確切的治療藥物及方法［14-15］。隨著精神分裂癥的不斷進展，部分患者會出現(xiàn)認知功能退化［16］、腸道菌群失調(diào)［17］等多種不良表現(xiàn)，臨床常通過藥物和心理治療等方法控制病情，但難以改善認知功能退化問題。據(jù)報道，MK-801可引起認知功能障礙，是其誘導精神分裂癥形成的基礎［10］。本研究通過腹腔注射0.2 mg/kg的MK-801構(gòu)建精神分裂癥大鼠模型，結(jié)果顯示，模型組大鼠潛伏期延長，穿臺次數(shù)減少，提示認知功能受到損害，精神分裂癥大鼠模型構(gòu)建成功。

Fig.4 Observation of intestinal histomorphology of rats in each group(HE,×200)圖4 各組大鼠腸組織形態(tài)學觀察（HE，×200）

Tab.3 Comparison of the related indexes of intestinal barrier function and the plasma level of H 2S between the five groups of rats表3 各組大鼠腸道屏障功能相關指標、血漿H 2S水平比較 （n=8，±s）

Tab.3 Comparison of the related indexes of intestinal barrier function and the plasma level of H 2S between the five groups of rats表3 各組大鼠腸道屏障功能相關指標、血漿H 2S水平比較 （n=8，±s）

組別對照組模型組H2S干預組Nrf2抑制劑組H2S+Nrf2抑制劑組F血漿D-乳酸（mg/L）4.26±0.74 15.44±1.89a 7.30±1.51ab 16.25±1.80ac 11.06±1.72abcd 84.379＊＊小腸絨毛高度（μm）250.12±16.10 188.23±7.39a 218.06±11.02ab 172.37±7.48ac 193.43±9.21acd 63.965＊＊小腸隱窩深度（μm）92.60±8.26 49.01±4.44a 75.23±6.90ab 47.18±3.07ac 60.82±5.50abcd 83.156＊＊血漿H2S（μmol/L）43.08±4.15 20.18±2.07a 34.80±3.02ab 22.49±2.69ac 28.99±2.01abcd 83.032＊＊

Tab.4 Comparison of oxidative stress and inflammatory factors between the five groups of rats表4 各組大鼠氧化應激、炎性因子水平比較 （n=8，±s）

Tab.4 Comparison of oxidative stress and inflammatory factors between the five groups of rats表4 各組大鼠氧化應激、炎性因子水平比較 （n=8，±s）

組別對照組模型組H2S干預組Nrf2抑制劑組H2S+Nrf2抑制劑組F SOD（U/mg）85.03±4.75 61.25±2.78a 77.48±3.28ab 60.43±2.25ac 70.46±2.83abcd 82.387＊＊MDA（nmol/mg）2.46±0.51 8.53±1.11a 3.94±0.71ab 8.60±1.18ac 6.02±1.03abcd 67.188＊＊TNF-α（ng/L）16.28±3.29 132.46±17.56a 50.06±4.36ab 134.03±16.41ac 85.82±11.37abcd 143.769＊＊IL-6（ng/L）13.15±2.47 102.18±11.31a 48.26±4.83ab 105.73±11.24ac 75.44±6.89abcd 182.417＊＊

Tab.5 Comparison of Nrf2/ARE/HO-1 pathway related protein expression in intestinal tissues between the five groups of rats表5 各組大鼠腸組織中Nrf2/ARE/HO-1通路相關蛋白表達比較 （n=8，±s）

Tab.5 Comparison of Nrf2/ARE/HO-1 pathway related protein expression in intestinal tissues between the five groups of rats表5 各組大鼠腸組織中Nrf2/ARE/HO-1通路相關蛋白表達比較 （n=8，±s）

組別對照組模型組H2S干預組Nrf2抑制劑組H2S+Nrf2抑制劑組F Nrf2/GAPDH 0.08±0.01 0.28±0.04a 1.25±0.21ab 0.16±0.03c 0.73±0.14abcd 144.163＊＊HO-1/GAPDH 0.15±0.03 0.37±0.06a 1.38±0.18ab 0.29±0.06c 0.85±0.15abcd 162.235＊＊

Fig.5 Expression levels of Nrf2/ARE/HO-1 pathway relatedproteins in intestinal tissues of rats in each group圖5 各組大鼠腸組織中Nrf2/ARE/HO-1通路相關蛋白表達情況

腸道屏障中的腸黏膜是與內(nèi)環(huán)境、外環(huán)境相互作用的主要媒介之一，可維持機體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，而腸道屏障的顯著改變會增加腸道的通透性，繼而大量炎性因子及外界病原體侵入人體，引起機體各種病變［18］。近年來研究發(fā)現(xiàn)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)與胃腸道之間存在一定的聯(lián)系，生理、心理壓力等引起的大腦功能障礙性疾病（如精神分裂癥、自閉癥）會影響腸道功能，胃腸道微環(huán)境的改變也會引起行為及神經(jīng)功能的變化，TNF-α、IL-6等促炎因子的增加可通過改變神經(jīng)元神經(jīng)酰胺的合成而導致患者認知功能損傷［19-20］。因此，探究具有保護腸道功能的治療方法對于改善精神分裂癥患者的認知功能具有重要意義。H2S是一種重要的氣體信號分子，廣泛存在于各個組織器官中，參與機體的各種生理病理過程，在神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)相關疾病中發(fā)揮抗氧化、抗炎、抗凋亡等作用［21-22］。盧根林等［22］研究發(fā)現(xiàn)H2S能顯著減少回腸上皮細胞凋亡，并改善腸缺血再灌注損傷大鼠腸上皮細胞功能。Berry等［23］研究發(fā)現(xiàn)精神分裂癥患者血漿中H2S含量低于健康人群，增加機體內(nèi)H2S含量可能具有抗精神疾病作用。本研究結(jié)果顯示，模型組大鼠海馬組織、腸組織損傷嚴重，腸絨毛生長稀疏，略有水腫，出現(xiàn)炎性細胞浸潤等情況，腸黏膜細胞凋亡率、血漿D-乳酸以及腸組織中MDA、TNF-α、IL-6水平顯著高于對照組，小腸絨毛高度、小腸隱窩深度、血漿H2S水平、腸組織中SOD水平顯著低于對照組，提示精神分裂癥可導致大鼠出現(xiàn)海馬受損、腸道炎癥反應及氧化應激反應，導致大鼠腸道屏障功能障礙。經(jīng)過外源性H2S干預的大鼠炎癥反應及氧化應激反應均得到抑制，大鼠海馬功能、認知功能、腸道屏障功能均得到改善，提示給機體補充H2S，可顯著改善精神分裂癥引起的認知功能、腸道屏障功能障礙。

Nrf2/ARE通路是近年來發(fā)現(xiàn)的內(nèi)源性抗氧化損傷通路，HO-1是Nrf2/ARE通路下游關鍵因子之一，激活的HO-1可將血紅蛋白分解代謝成膽紅素、膽綠素、鐵離子等，進而減輕細胞膜脂質(zhì)過氧化，發(fā)揮抗氧化作用［24-25］。Nrf2/ARE/HO-1通路在阿爾茨海默病中發(fā)揮神經(jīng)保護作用，激活Nrf2/ARE/HO-1通路可顯著改善東莨菪堿引起的小鼠記憶缺陷［26-27］。Liu等［28］研究發(fā)現(xiàn)激活Nrf2/ARE/HO-1通路可提高小鼠機體抗氧化能力，進而減輕小鼠腸缺血再灌注損傷。

本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，模型組腸組織中Nrf2、HO-1蛋白表達水平顯著增加，提示Nrf2/ARE/HO-1通路與MK-801誘導的精神分裂癥大鼠認知功能及腸道屏障功能障礙有關；與模型組相比，H2S干預組腸組織中Nrf2、HO-1蛋白表達水平顯著增加，推測H2S可能通過激活Nrf2/ARE/HO-1通路改善精神分裂癥大鼠的認知功能和腸道屏障功能，為了驗證該推測，本研究利用Nrf2/ARE/HO-1通路抑制劑ATRA進行干預，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與H2S干預組相比，H2S+Nrf2抑制劑組大鼠腸組織中Nrf2/ARE/HO-1通路相關蛋白表達顯著降低，大鼠認知功能及腸道屏障功能障礙嚴重，證明了H2S對認知功能和腸道屏障功能的保護作用是通過促進Nrf2/ARE/HO-1通路的激活實現(xiàn)的。

綜上所述，外源性H2S可能通過激活Nrf2/ARE/HO-1通路顯著改善精神分裂癥大鼠的認知功能和腸道屏障功能，但H2S作用機制復雜，也可能通過其他途徑發(fā)揮作用，仍需深入研究。