楊凌宇，桑應(yīng)華，徐俊駒，徐天養(yǎng)，沈燕金，馮圭如，蒙 剛，字夢凡，呂 芬*

（1．云南省煙草公司 文山州公司，云南 文山 663000；2.云南農(nóng)業(yè)大學 煙草學院，云南 昆明 650201）

煙草根結(jié)線蟲病是嚴重影響煙葉產(chǎn)量和質(zhì)量的重要病害之一，云南省每年有大量的健康煙株被根結(jié)線蟲侵染，致使煙草產(chǎn)量大幅度下降30%～40%［1］。目前針對線蟲的防治措施主要有農(nóng)藥防治［2-4］、生物防治［5-8］、農(nóng)業(yè)生態(tài)防治［9-11］以及抗病品種選育［12-13］等，生物防治與農(nóng)業(yè)生態(tài)防治以其無污染、無公害、長效等優(yōu)點，成為煙草病蟲害綜合防治體系的重要組成部分。現(xiàn)有研究表明，多種作物具有抗結(jié)線蟲或殺結(jié)線蟲作用［14-16］，其中菊科類的萬壽菊對根結(jié)線蟲具有較好的抑殺效果［17］。目前對萬壽菊的研究主要集中于萬壽菊秸稈有機肥對線蟲的滅殺效果［18-19］以及與煙草間作、輪作對線蟲群落的影響［20-21］方面，而關(guān)于萬壽菊莖提取物對煙草線蟲防治效果的研究相對較少。

煙葉品質(zhì)是品牌發(fā)展的基礎(chǔ)與保障，煙葉化學成分又是煙葉風格和質(zhì)量形成的物質(zhì)基礎(chǔ)，是煙葉內(nèi)在品質(zhì)評價的重要指標。同時，土壤條件作為可調(diào)控因素，其理化特性對煙葉化學成分有重要影響。近年來，因長年連續(xù)種植烤煙，土壤養(yǎng)分下降，且大量施用化肥與農(nóng)藥使得土壤的理化性質(zhì)受到破壞，難以滿足烤煙生長所需營養(yǎng)的平衡。因此采取綠色環(huán)保且能改良土壤理化性質(zhì)的措施，對改善煙葉品質(zhì)、提高土壤功效有著重要意義。植物源農(nóng)藥相對于化學農(nóng)藥更容易降解，并且不會對植物造成危害，是防治病蟲害、改善土壤結(jié)構(gòu)、保護生態(tài)環(huán)境的一條有效途徑。相關(guān)研究表明，植物源農(nóng)藥對根結(jié)線蟲病的防治［22］、土壤理化性質(zhì)改良［23］、作物產(chǎn)量提升［24］、農(nóng)藥降解［25］等方面均有著較好效果。因此，本試驗通過探究不同時間噴施萬壽菊莖提取物對植煙土壤的理化性質(zhì)、烤煙產(chǎn)質(zhì)量、根結(jié)線蟲病防治及煙葉主要化學成分的影響，旨在為煙草根結(jié)線蟲病的綠色防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試品種為云煙116，采用漂浮育苗技術(shù)育苗，于2021年2月選取健壯整齊的煙苗移栽。用蒸餾水將萬壽菊莖乙醇提取物配制成25 g/L的溶液，低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗地點

本試驗于2021年4月至9月在云南省文山州廣南縣珠琳鎮(zhèn)煤炭坡進行，試驗地位于104°34′45″E，23°57′52″N附近，海拔1411.69 m。

1.3 試驗設(shè)計

采用隨機區(qū)組設(shè)計，試驗共設(shè)4個處理，其中CK：移栽后的0 d施用1 L清水；T1：移栽后的0 d施用1 L萬壽菊莖提取物；T2：移栽后的15 d施用1 L萬壽菊莖提取物；T3：移栽后的30 d施用1 L萬壽菊莖提取物。每個處理3次重復，每個重復60株烤煙，整個試驗共720株烤煙。該試驗的田間管理措施及煙葉的加工調(diào)制措施嚴格按照當?shù)貎?yōu)質(zhì)煙葉的生產(chǎn)要求進行。

1.4 測定方法

1.4.1 生育期與農(nóng)藝性狀的測定 于移栽后開始記錄生育期。參照《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查測量方法》(YC/T 142—2010)，在團棵期，在各小區(qū)隨機選取生長正常的5棵煙株調(diào)查主要農(nóng)藝性狀：自然株高、莖圍、節(jié)距（自然株高/自然著生葉片數(shù)）、自然葉數(shù)、有效葉數(shù)、腰葉、腰葉長、腰葉寬等，并計算單葉面積，單葉面積=0.6345×葉長×葉寬。對測量過的煙株掛牌，便于后續(xù)旺長期和成熟期的農(nóng)藝性狀測量。

1.4.2 根結(jié)線蟲病害情況調(diào)查病害調(diào)查分級 按照國家標準《煙草病蟲害分級及調(diào)查方法》（GB/T 23222—2008）實施，發(fā)病率及病情指數(shù)計算公式為：

1.4.3 化學成分分析 煙葉成熟后，采取掛牌單采單烤方式，烤后參照《烤煙標準規(guī)范國標》（GB 2635—1992）標準進行分級，各處理選取上中下各1.5 kg進行化學成分分析?？偺桥c還原糖含量的測定參考《煙草及煙草制品水溶性糖的測定連續(xù)流動法》（YC/T159—2002）、煙堿含量的測定參考《煙草及煙草制品總植物堿的測定連續(xù)流動法》（YC/T 160—2002）、鉀含量的測定參考《煙草及煙草制品鉀的測定連續(xù)流動法》（YC/T 217—2007）、氯含量的測定參考《煙草及煙草制品氯的測定連續(xù)流動法》（YC/T 162—2002）、氮含量的測定參考《煙草及煙草制品總氮的測定連續(xù)流動法》（YC/T 161—2011）、蛋白質(zhì)含量的測定參考《煙草和煙草制品總蛋白質(zhì)含量的測定》（YC/T 166—2003）。

1.4.4 煙葉產(chǎn)量、產(chǎn)值的測定 以小區(qū)為單位，對調(diào)制后的煙葉進行產(chǎn)量、產(chǎn)值、中上等煙比例、均價等經(jīng)濟指標進行統(tǒng)計和計算。

1.4.5 植煙土壤化學性質(zhì)的檢測 在煙葉完成采收后，分小區(qū)取土樣，并對土壤的pH值、有機質(zhì)含量、全氮含量、全磷含量、全鉀含量、水解性氮含量、有效磷含量、速效鉀含量進行檢測分析。

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用Excel、SPSS軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同時期施用萬壽菊提取物對煙株生育期的影響

由表1可以看出，4個處理煙株的各生育期無明顯差異，即在煙株生長的不同時期施用萬壽菊提取物對煙株生育期的影響不大。

表1 不同處理煙株的生育周期 d

2.2 不同時期施用萬壽菊提取物對煙株農(nóng)藝性狀的影響

由表2可知，施用萬壽菊莖提取物對煙株的農(nóng)藝性狀影響較小，與CK無顯著差異。且施藥處理在煙株移栽后、打頂前及打頂后這3個時期煙株的農(nóng)藝性狀變化不明顯。

表2 不同處理對煙株農(nóng)藝性狀的影響

2.3 不同時期施用萬壽菊提取物對煙株根結(jié)線蟲病的影響

由表3可知，CK煙株的發(fā)病率和病情指數(shù)顯著高于T1、T2和T3處理，即施用萬壽菊莖提取物能夠有效防治根結(jié)線蟲病。在施藥處理中，移栽后15 d施用萬壽菊莖提取物的T2處理的發(fā)病率和病情指數(shù)均顯著低于移栽后0 d（T1）和30 d（T3）的，T1和T3處理的發(fā)病率和病情指數(shù)數(shù)值接近，兩者不具有顯著差異。綜合分析可知，施用萬壽菊莖提取物能夠起到防治根結(jié)線蟲病的作用，且在移栽后15 d施用萬壽菊粗提物對根結(jié)線蟲病的預防效果最好。

表3 不同處理的根結(jié)線蟲病發(fā)病情況

2.4 不同時期施用萬壽菊提取物對煙葉主要化學成分的影響

由圖1可知，參照優(yōu)質(zhì)煙葉化學成分及比例指標，在X2F煙葉中，CK的總糖含量偏高，T1、T2和T3處理的總糖含量均在最適范圍內(nèi)；T1、T2處理的還原糖含量處于最適范圍，CK和T3處理的還原糖含量高于最適范圍。4個處理的氮和煙堿含量均在最適范圍左右，鉀含量均高于最適范圍，氯含量均處于最適范圍，總糖/蛋白質(zhì)均高于最適范圍，總糖/煙堿、鉀/氯均在最適范圍。在C3F煙葉中，4個處理的總糖、還原糖和蛋白質(zhì)的含量均高于最適宜范圍；氮、煙堿、鉀和氯的含量均在最適范圍；總糖/蛋白質(zhì)、總糖/煙堿、鉀/氯均在最適范圍。在B2F煙葉中，4個處理的總糖和還原糖含量偏低，氮、煙堿含量均高于最適范圍，鉀、氯、蛋白質(zhì)含量均在最適范圍；總糖/蛋白質(zhì)、總糖/煙堿均低于最適范圍；鉀/氯在最適范圍。

圖1 不同處理煙葉主要化學成分分析

2.5 不同時期施用萬壽菊提取物對煙株經(jīng)濟性狀的影響

由表4可知，施用過萬壽菊莖提取物的煙葉產(chǎn)質(zhì)量顯著高于CK。在施藥處理中，T2處理的產(chǎn)量、產(chǎn)值、均價、中上等煙比例均是3個處理中最高的，T2處理對煙葉經(jīng)濟性狀的影響最顯著。從總體上看，施用萬壽菊莖提取物能夠有效提升烤煙的產(chǎn)質(zhì)量，且在移栽后的15 d施用萬壽菊莖提取物對烤煙經(jīng)濟性狀的提升最為明顯。

表4 不同處理的煙株經(jīng)濟性狀比較

2.6 不同時期施用萬壽菊提取物對植煙土壤化學性質(zhì)的影響

由表5可知，施用萬壽菊提取物對土壤的化學性質(zhì)有改良作用。煙草種植最適宜土壤pH值為5.5～6.5，CK土壤的pH值高于烤煙生長發(fā)育所需的最適值，隨著萬壽菊莖提取物的施入，土壤pH值得到了改善，T1、T2、T3處理的土壤pH值均在最適宜pH范圍。且施用萬壽菊莖提取物的土壤有機質(zhì)、全氮、水解性氮、速效鉀含量均顯著高于CK；全磷、有效磷含量與CK的差異不顯著；全鉀含量在T3處理時較CK差異顯著。綜上，施用萬壽菊莖提取物能夠有效地改良土壤的化學性質(zhì)。

表5 不同處理土壤化學性質(zhì)對比

3 討論

根結(jié)線蟲的整個生長發(fā)育過程分為卵期、幼蟲期和成蟲3個時期。在適宜溫度條件以及植物根系分泌物的刺激下，蟲卵孵化后的第2天進入囊胚期，孵化后的第5天進入到原腸期，在進入原腸期之后，經(jīng)過4～5 d的發(fā)育，蟲卵孵化后的第10天出現(xiàn)具有口針的1齡幼蟲。在本試驗中，通過對根結(jié)線蟲發(fā)病率的分析，初步證明了移栽后的15 d施用萬壽菊莖提取物對根結(jié)線蟲的殺滅效果最好。原因可能是由于萬壽菊莖提取物對1齡幼蟲至2齡幼蟲這一時期的根結(jié)線蟲能起到最好的抑制作用，甚至起到殺死一部分害蟲的作用，并且該時期也是防治根結(jié)線蟲病的關(guān)鍵時期。

相關(guān)研究表明［24-25］，外源有機物料可以通過改變土壤物理、化學特性進而影響農(nóng)作物生長和產(chǎn)量，其在提高作物產(chǎn)量和土壤水穩(wěn)性大團聚體含量方面有著明顯優(yōu)勢。本試驗中施用萬壽菊莖的提取物有效降低了土壤的pH值，使得植煙土壤的pH值達到了烤煙種植的最佳范圍。施用萬壽菊提取物對土壤的改良效果十分顯著，施用過萬壽菊莖提取物的植煙土壤中氮、磷、鉀等元素的含量顯著高于大田中常規(guī)植煙土壤的含量。施用萬壽菊莖提取物能夠增強土壤中微生物的活性，分解土壤中的有機物，提高速效鉀等元素的含量，相關(guān)結(jié)論應(yīng)該在后續(xù)試驗中進一步驗證。

4 結(jié)論

施用萬壽菊莖提取物對煙株的生育期、農(nóng)藝性狀和化學特性無顯著性影響，但能夠顯著防治根結(jié)線蟲病，間接提高烤煙的產(chǎn)質(zhì)量。且T2處理對于病蟲害防治效果最好，能夠有效防治根結(jié)線蟲病，對于煙葉的產(chǎn)質(zhì)量提升也最為明顯。由數(shù)據(jù)分析可得，施用萬壽菊莖提取物對于植煙土壤的理化性質(zhì)具有明顯的改良效果，能夠有效降低植煙土壤的pH值，使其達到種植烤煙的最適宜pH值；在3個處理中，T2的烤煙產(chǎn)質(zhì)量優(yōu)于T1和T3。綜合分析，無論是在根結(jié)線蟲防治上、還是經(jīng)濟性狀上、土壤化學性質(zhì)上均以T2處理的效果最好。因此，在移栽后的15 d施用萬壽菊粗提物，能夠顯著防治根結(jié)線蟲病，提高產(chǎn)量產(chǎn)值，改良土壤化學性質(zhì)。