解鵬宇，冷 靜，金 亮，毛一塵，卜秋寧

（1.河北省秦皇島市海港醫(yī)院，河北 秦皇島 066000；2.河北省秦皇島市第一醫(yī)院，河北 秦皇島 066000）

解脲支原體（UU）、淋球菌（NG）、泌尿生殖道沙眼衣原體（CT）等均為性傳播疾病的關(guān)鍵病原體［1］，該病發(fā)病率近年來逐漸上升。感染上述3 種病原體后，將導(dǎo)致男性患尿道炎、前列腺炎、附睪炎等，女性患尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎及不孕不育、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩、先兆流產(chǎn)等［2］。本研究中回顧性分析了秦皇島市性傳播疾病患者中上述3種病原體的檢出情況，以及部分病原體的藥物敏感性，為該地區(qū)性傳播疾病的防治提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取秦皇島市第一醫(yī)院和海港醫(yī)院婦科、泌尿外科、皮膚科及性醫(yī)學(xué)門診2016年至2019年就診的泌尿生殖系統(tǒng)感染及有高危性接觸史患者12 376 例。其中，男8 840 例，年齡18～72 歲，平均31 歲；女3 536 例，年齡16～59歲，平均27歲。

1.2 材料

儀器：DA-7600 型基因擴增儀（達(dá)安基因有限公司）；88870005 型金屬?。ㄙ惸w世爾科技＜中國＞有限責(zé)任公司）；MS3型旋渦混勻器（德國IKA有限責(zé)任公司）；LX20-TG16 型高速離心機（北京中西華大科技有限公司）；移液器（德國艾本德有限責(zé)任公司）。

試劑：沙眼衣原體熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）試劑盒（批號為202104194）、淋球菌PCR 試劑盒（批號為202104124）、解脲支原體PCR 試劑盒（批號為202104008），均購自華美生物技術(shù)有限公司；解脲支原體藥敏試劑盒（法國生物梅里埃公司，批號為1008380990）。

1.3 方法

PCR 擴增：將女性宮頸及陰道分泌物拭子或男性尿道拭子置無菌試管中，加入1.5 mL 0.9%氯化鈉注射液，充分振蕩，將混懸液置無菌EP管中，以12 000 r/min的速率離心5 min，棄上清液，充分振蕩，將混懸液置無菌EP管中，沉淀加50 μL DNA提取液，100 ℃、10 min混勻后熱浴，以12 000 r/min 的速率離心5 min，在相對應(yīng)DNA 熒光定量擴增管中分別取5 μL 模板DNA 置入。底物dNTP、熒光探針、Taq 聚合酶、模板、引物、離子buffer反應(yīng)體系50 μL，93 ℃預(yù)變性2 min，隨后93 ℃20 s、55 ℃20 s、72 ℃30 s，35 個循環(huán)，結(jié)果以NG 和CT 試劑盒說明書判斷。

支原體培養(yǎng)和藥物敏感性試驗（簡稱藥敏試驗）：嚴(yán)格按支原體試劑盒說明書操作，盒內(nèi)含有9種抗菌藥物（多西環(huán)素、交沙霉素、紅霉素、氧氟沙星、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、原始霉素、阿奇霉素、克拉霉素）患者的標(biāo)本做UU培養(yǎng)顯陽性后行藥敏試驗（分為敏感、中介、耐藥）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學(xué)軟件分析。計數(shù)資料以率（%）表示，行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

病原體檢出情況見表1。UU 藥敏試驗結(jié)果見表2。UU 對交沙霉素敏感性極高（未見耐藥株），對多西環(huán)素、原始霉素和克拉霉素的敏感率也較好（＞90%），對紅霉素、四環(huán)素、阿奇霉素的敏感性尚可，而對環(huán)丙沙星和氧氟沙星的敏感性較差（＜20%）。對氧氟沙星、環(huán)丙沙星、四環(huán)素和阿奇霉素的耐藥率呈逐年升高趨勢。

表1 2016年至2019年不同性別患者3種病原體檢出情況Tab.1 The detection rates of three pathogens in patients with different genders from 2016 to 2019

表2 2016年至2019年解脲支原體藥敏試驗結(jié)果［株（%）］Tab.2 Results of the drug sensitivity test of Ureaplasma urealyticum from 2016 to 2019［strain（%）］

3 討論

泌尿生殖系統(tǒng)感染最常見的病原體為支原體類、衣原體類及淋球菌類，其中CT，NG，UU 主要經(jīng)成人性行為傳播。泌尿生殖道中若寄生CT，NG，UU，則將導(dǎo)致泌尿生殖系統(tǒng)化膿性感染或急性炎性病變［3］。UU 屬機會致病菌，通常不會造成感染，但若生存環(huán)境發(fā)生改變，則可導(dǎo)致相應(yīng)部位感染。而衣原體為原核細(xì)胞微生物，可導(dǎo)致男性的非淋菌性尿道炎及女性的宮頸炎、盆腔炎、輸卵管炎［4］。感染UU 或衣原體的孕婦，可能在分娩時將病原體傳播給新生兒，UU 可通過胎盤感染胎兒，導(dǎo)致死胎、早產(chǎn)［5］，而衣原體會引起新生兒眼結(jié)膜炎和（或）肺炎［6］。近年來，性傳播疾病尤其是支原體感染發(fā)生率逐年增長［7］。

本研究中發(fā)現(xiàn)，秦皇島市3種病原體檢出率由高至低依次為UU，CT，NG。CT 檢出率與姚貝等［8］的研究基本相符，UU 檢出率略低于該研究，可能與檢測方法不同有關(guān)；NG檢出率高于該研究，但稍低于袁柳鳳等［9］的研究，可能與就診人群的差異及檢驗方法不同有關(guān)；泌尿外科門診患者占比較高，皮膚科門診患者占比較低，且RNA 僅在活菌中存在，治療用藥后RNA 轉(zhuǎn)陰而病原體DNA 仍可檢出；女性總陽性率明顯高于男性，與國內(nèi)有關(guān)報道一致［10-11］，可能與女性生殖道內(nèi)酸性環(huán)境更適合支原體的生長特性有關(guān)，男性患者NG 陽性率明顯高于女性，可能與男性感染NG 后自覺癥狀明顯及時就醫(yī)有關(guān)；女性患者UU 陽性率明顯高于男性，可能是由于女性生殖道的脲原體是正常菌群的一部分，在無癥狀的女性體內(nèi)，其定植率高達(dá)80%［12］，且當(dāng)機體免疫力低下或黏膜受損時可大量繁殖而導(dǎo)致其陽性率升高。目前，已知UU分為2個生物群，其中生物群2與致病有關(guān)，生物群1為非特異性共生體，但兩者的關(guān)系有待進(jìn)一步探討［13］。女性CT 檢出率低于男性，與曲沛等［12］的研究結(jié)論相符；女性送檢標(biāo)本數(shù)明顯少于男性，而陽性檢出率遠(yuǎn)高于男性，說明當(dāng)前臨床對女性泌尿生殖感染的認(rèn)識和重視程度需進(jìn)一步加強，應(yīng)重視女性患者尤其是性活躍期患者的篩查，加強女性無癥狀感染防治知識的宣教。

支原體是無細(xì)胞壁原核細(xì)胞型微生物，對萬古霉素等糖肽類抗菌藥物及對干擾細(xì)胞壁合成的抗菌藥物均耐藥［14］，近年來，臨床對抗菌藥物濫用、療程不足等原因，以及患者反復(fù)感染、遷延難愈導(dǎo)致支原體的耐藥性不斷變化，給治療帶來了較大困難［15-16］。本研究中，感染者使用抗菌藥物對支原體的活性可分為3個級別，多西環(huán)素、交沙霉素、原始霉素及克拉霉素屬高敏性（敏感率＞90%），可作為UU 首選治療藥物；紅霉素、四環(huán)素、阿奇霉素屬中敏性（敏感率50%～80%），氧氟沙星和環(huán)丙沙星屬低敏性（敏感率＜20%），耐藥機制可能與UU gyrA 和parC 基因喹諾酮類耐藥決定區(qū)發(fā)生突變有關(guān)，干擾其原本抗菌機制［17］，故臨床不宜選用。支原體對四環(huán)類藥物的敏感性從2011年開始呈逐漸上升趨勢，而對大環(huán)內(nèi)酯類藥物及部分喹諾酮類藥物的敏感性從2014年開始明顯降低［14］，但本研究中四環(huán)素類藥物敏感性不僅未上升，反而明顯下降，而與該研究相符的是喹諾酮類藥物和阿奇霉素的耐藥性明顯增加，分析原因可能與臨床醫(yī)師的用藥習(xí)慣及UU 的地域差異有關(guān)。

綜上所述，泌尿生殖系統(tǒng)感染的病原體中，以支原體類感染率最高，其次為衣原體類、淋球菌類。對于支原體感染所致泌尿生殖系統(tǒng)疾病的治療，臨床醫(yī)師需依據(jù)病原體鑒定及藥敏試驗結(jié)果合理選擇藥物，同時避免不恰當(dāng)用藥導(dǎo)致的支原體耐藥性升高。