馮都煌 劉會(huì)云 張 莉 吳新蕾 丁佐楠 張文元 譚 澍 翁小婷 汪加魏

（江西農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院，江西 南昌 330045）

油茶（Camellia oleifera）是山茶科山茶屬的常綠灌木或小喬木，別名茶子樹、茶油樹、白花茶等。油茶與油橄欖（Oleae uropaea）、油棕（Elaeis guineensis）、椰子（Cocos nucifera）并稱為世界四大木本油料植物，是我國(guó)南方特有的重要木本糧油樹種[1]，隨著油茶種植面積不斷增大，其經(jīng)濟(jì)和生態(tài)價(jià)值也不斷突顯[2]，而目前“落花落果”、“花而不實(shí)”已成為限制油茶產(chǎn)量提高的最主要原因之一[3]。而花粉活力、花粉管生長(zhǎng)均可能會(huì)影響油茶的坐果[4]。

蔗糖在花粉萌發(fā)中有提供能源和調(diào)節(jié)滲透壓的作用[5]，對(duì)花粉萌發(fā)率和花粉管長(zhǎng)度影響較大[6]。硼（B）能促進(jìn)花粉管萌發(fā)，缺硼會(huì)使酸性果膠質(zhì)在頂端大量富集，導(dǎo)致花粉管破裂而無法正常授粉[7-8]，花期噴施適宜濃度的硼酸可改善果實(shí)品質(zhì)和坐果率[9-11]。尿素中氮素可參與合成蛋白質(zhì)、核酸、磷脂及其他必需有機(jī)氮，盛花期噴施適宜濃度的硼酸和尿素可能提高果樹的坐果率[11-13]。鈣（Ca）在細(xì)胞骨架的組裝[14]、分泌小泡的運(yùn)輸和融合[15]、花粉管頂端的脈沖式生長(zhǎng)[16-17]、花粉管生長(zhǎng)調(diào)控[18-19]等方面發(fā)揮著重要作用。磷（P）和鉀（K）可提高酶及功能蛋白活性[18]，同時(shí)參與植物體內(nèi)糖類的運(yùn)輸，因此花期噴施磷酸二氫鉀（KH2PO4）可作為油茶重要的培育措施[20]。PEG-3350 可改變花粉內(nèi)膜結(jié)構(gòu)和通透性，進(jìn)而可促進(jìn)花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)[21-22]。維生素C 是一種還原劑，維生素C 有可能促進(jìn)油茶花粉萌發(fā)[23-25]。維生素B1是植物生長(zhǎng)發(fā)育中的重要調(diào)節(jié)成分之一，可能具有促進(jìn)離體花粉萌發(fā)的作用[26]。本文采用的離體花粉固體培養(yǎng)基法與柱頭上花粉萌發(fā)的條件較接近，為實(shí)驗(yàn)室促進(jìn)油茶花粉萌發(fā)的養(yǎng)分篩選提供了技術(shù)保障[27]。因此，本研究旨在探討蔗糖、硼酸、尿素、氯化鈣（CaCl2）、KH2PO4、PEG-3350、維生素C、維生素B1等對(duì)花粉萌發(fā)率和花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度的影響，篩選出對(duì)油茶花粉萌發(fā)具有重要促進(jìn)作用的營(yíng)養(yǎng)成分，為促進(jìn)油茶花粉萌發(fā)的營(yíng)養(yǎng)混合液配比提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

2019 年11 月中旬于江西省林木育種中心（115°39′16.97″E，18°57′11.64″N），選取生長(zhǎng)良好、進(jìn)入盛花期的‘贛無2’（國(guó)S-SC-CO-026-2008）、‘贛70’（國(guó)S-SC-CO-025-2010）、‘長(zhǎng)林166’（國(guó)R-SC-CO-008-2011）油茶為試驗(yàn)對(duì)象。分別剪取含苞待放的花枝，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行水培，待花完全自然開放后，用硫酸紙盒收集花藥并置于硅膠干燥器中干燥4～8 h，收集花粉置于離心管中干燥低溫（-20 ℃）保存[28-29]。

1.2 花粉固體培養(yǎng)法

在凹槽載玻片的凹槽內(nèi)均勻而平坦的滴入培養(yǎng)基，待其凝固后，用毛筆蘸取少量花粉均勻的播撒在培養(yǎng)基上，培養(yǎng)皿中墊2 層濕濾紙，將載玻片放入（有花粉粒的一面朝上）。在20～25 ℃、40%濕度及黑暗的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)[30]。用光學(xué)顯微鏡觀察每個(gè)凹槽內(nèi)花粉的萌發(fā)情況，每個(gè)凹槽隨機(jī)選取3 個(gè)視野（取其平均值視為1 次重復(fù)），進(jìn)行3 次重復(fù)。其中每個(gè)視野花粉數(shù)目不少于30 粒，以花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度大于或等于花粉粒直徑視為萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)量花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度（PGL），按公式（1）計(jì)算花粉萌發(fā)率（PGR）。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)

100 g/L 的蔗糖和0.1 g/L 的硼酸作為促進(jìn)普通油茶花粉萌發(fā)的依據(jù)[29]，本試驗(yàn)采用完全正交試驗(yàn)（表1），2、4、8 h 時(shí)分別統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)數(shù)和花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度，篩選出最佳蔗糖-硼酸組合作為單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

表1 油茶花粉基礎(chǔ)培養(yǎng)基的試驗(yàn)處理Table 1 The treatments of base medium for the pollen germination of C. oleiferag/L

1.3.2 最佳培養(yǎng)基篩選試驗(yàn)

1）單因素試驗(yàn)以篩選出的最適蔗糖-硼酸組合（5%瓊脂）為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，分別對(duì)6 種重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行單因素添加試驗(yàn)，培養(yǎng)8 h 后測(cè)定花粉萌發(fā)率和萌發(fā)長(zhǎng)度，篩選出具有促進(jìn)作用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其濃度（表2）。2）正交試驗(yàn)在最適蔗糖-硼酸（5%瓊脂）基礎(chǔ)培養(yǎng)基上，添加單因素試驗(yàn)篩選出的具有顯著促進(jìn)作用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，采用正交試驗(yàn)，培養(yǎng)8 h 后測(cè)定花粉萌發(fā)率和萌發(fā)長(zhǎng)度，篩選出最佳養(yǎng)分組合。

表2 培養(yǎng)基成分的濃度處理Table 2 The concentration treatments of nutrients in the mediummg/L

1.4 數(shù)據(jù)處理

統(tǒng)計(jì)顯微鏡視野中的花粉總數(shù)、花粉萌發(fā)數(shù)、花粉管長(zhǎng)度，運(yùn)用Microsoft Excel 2010 整理原始數(shù)據(jù)及初步分析，利用SPSS 21.0 對(duì)各試驗(yàn)進(jìn)行一般線性方差分析和LSD 法多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基中蔗糖-硼酸對(duì)花粉萌發(fā)的影響

由表3 可知，培養(yǎng)2、4、8 h 后，均為T4的萌發(fā)率最高，分別達(dá)30.58%、31.09%、31.49%，比T8培養(yǎng)2 h（13.23%）后、T7培養(yǎng)4 h（18.22%）和8 h（15.41%）后的最低花粉萌發(fā)率顯著提高了131.14%、70.64% 和104.35%（P＜0.05）。最高萌發(fā)率均顯著高于T7～T9的萌發(fā)率（P＜0.05）。培養(yǎng)2 h 后，T6的花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度最長(zhǎng)，達(dá)626.75 μm，比T8的最短花粉萌發(fā)長(zhǎng)度顯著長(zhǎng)298.43 μm（P＜0.05）；培養(yǎng)4 h 和8 h 后，均為T2的花粉萌發(fā)長(zhǎng)度最長(zhǎng)，分別達(dá)946.70 μm 和922.12 μm，4 h 后最長(zhǎng)花粉萌發(fā)長(zhǎng)度是T8的最短花粉萌發(fā)長(zhǎng)度的2.55 倍，8 h 時(shí)，最長(zhǎng)花粉管長(zhǎng)度是T7的最短花粉萌發(fā)長(zhǎng)度的1.98 倍（P＜0.05）。最長(zhǎng)花粉萌發(fā)長(zhǎng)度均顯著高于T7～T9的花粉萌發(fā)長(zhǎng)度（P＜0.05）。

表3 基礎(chǔ)培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 3 The PGR and PGL of C. oleifera in the basal medium

油茶‘贛無2’、‘贛70’、‘長(zhǎng)林166’3 個(gè)品種的花粉通過2、4、8 h 培養(yǎng)后，其花粉萌發(fā)率及花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度分析結(jié)果見表3，T4對(duì)油茶花粉萌發(fā)率的促進(jìn)效果最佳，T7～T9對(duì)油茶花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度的促進(jìn)效果較差。本研究篩選出最適油茶花粉萌發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為100 g/L 蔗糖+0.075 g/L 硼酸+5 g/L 瓊脂。

2.2 培養(yǎng)基養(yǎng)分的篩選

2.2.1 尿素對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表4 可知，尿素對(duì)3 種油茶的花粉管萌發(fā)和花粉管的伸長(zhǎng)均有一定的促進(jìn)作用但不明顯。其中，僅50 mg/L 尿素對(duì)‘贛無2’花粉、‘贛70’花粉，100 mg/L 尿素對(duì)‘長(zhǎng)林166’花粉的萌發(fā)具有促進(jìn)作用，萌發(fā)率分別較CK 提高了30.78% 、7.31%、4.93%；100～200 mg/L 尿素對(duì)其萌發(fā)存在抑制作用。50 mg/L 尿素對(duì)‘贛無2’，100 mg/L尿素對(duì)‘長(zhǎng)林166’花粉管伸長(zhǎng)促進(jìn)作用較優(yōu)，分別比CK 長(zhǎng)233.13、187.31 μm。

表4 添加尿素的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 4 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with CO(NH2)2

2.2.2 CaCl2對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表5 可知，一定濃度的CaCl2對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)均具有一定促進(jìn)作用，隨著CaCl2的濃度增加，基本都呈現(xiàn)先增后減趨勢(shì)，較高濃度CaCl2表現(xiàn)為一定的抑制作用。200 mg/L 和400 mg/L 的CaCl2對(duì)‘贛無2’花粉萌發(fā)具一定的促進(jìn)作用，萌發(fā)率分別較CK 提高了18.43%和24.21%；100～400 mg/L 的CaCl2對(duì)‘贛70’和‘長(zhǎng)林166’花粉萌發(fā)均有一定促進(jìn)作用且以100 mg/L 促進(jìn)效果最佳，分別較CK 提高了49.04%和34.32%。100 ～200 mg/L 的CaCl2對(duì)‘贛無2’，100、300 mg/L 的CaCl2對(duì)‘贛70’，100 mg/L 的CaCl2對(duì)‘長(zhǎng)林166’花粉的管伸長(zhǎng)具一定的促進(jìn)效果，均以100 mg/L 促進(jìn)效果最優(yōu)，分別比CK長(zhǎng)120.79、89.58、13.22 μm。

表5 添加CaCl2 的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 5 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with CaCl2

2.2.3 KH2PO4對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表6 可知，花粉萌發(fā)與花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度隨著KH2PO4的濃度增加，基本呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)。40 mg/L 的KH2PO4處理下，‘贛無2’花粉的萌發(fā)率（50.73%）顯著高于CK（P＜0.05），是CK 的2.2 倍；‘贛70’花粉的萌發(fā)率在80 mg/L的KH2PO4濃度下達(dá)到36.87%，較CK 提高了57.63%，具有顯著促進(jìn)作用。80 mg/L 的KH2PO4處理下，‘贛無2’花粉萌發(fā)長(zhǎng)度（1 062.64 μm）顯著比CK 長(zhǎng)324.62 μm（P＜0.05）；40 mg/L 的KH2PO4對(duì)‘贛70’花粉（720.53 μm）和‘長(zhǎng)林166’（938.07 μm）花粉萌發(fā)長(zhǎng)度的促進(jìn)效果顯著（P＜0.05），分別比CK 長(zhǎng)145.87 μm、475.7 μm。

表6 添加KH2PO4 的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 6 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with KH2PO4

2.2.4 PEG-3350 對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表7 可知，一定濃度的PEG-3350 對(duì)‘贛無2’、‘贛70’、‘長(zhǎng)林166’花粉萌發(fā)和花粉管的伸長(zhǎng)均具有促進(jìn)作用，對(duì)‘贛無2’花粉萌發(fā)的促進(jìn)作用隨著濃度升高而上升；對(duì)‘贛70’、‘長(zhǎng)林166’花粉萌發(fā)在200 mg/L 的PEG-3350時(shí)有所下降。對(duì)花粉管生長(zhǎng)則基本呈現(xiàn)先增后減趨勢(shì)。100～200 mg/L 的PEG-3350 處理對(duì)‘長(zhǎng)林166’花粉萌發(fā)促進(jìn)作用顯著（P＜0.05）?！M無2’和‘長(zhǎng)林166’花粉分別在200 mg/L和150 mg/L 的PEG-3350 濃度條件下萌發(fā)率達(dá)最高分別為38.58%、71.53%，顯著高于CK（P＜0.05），是CK 的1.7 倍和3.7 倍。150 mg/L 的PEG-3350 處理下，‘贛無2’（1 571.17 μm）、‘贛70’（846.44 μm）、‘長(zhǎng)林166’（1 575.93 μm）花粉萌發(fā)長(zhǎng)度均達(dá)最長(zhǎng)，比CK 長(zhǎng)822.06、271.78、1 113.56 μm，均具有顯著促進(jìn)作用（P＜0.05）。

表7 添加PEG-3350 的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 7 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with PEG-3350

2.2.5 維生素C 對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表8 可知，花粉萌發(fā)隨著維生素C 的濃度增加，基本呈現(xiàn)先增后減趨勢(shì)，而花粉管長(zhǎng)度則無明顯增減趨勢(shì)。維生素C 對(duì)‘贛無2’、花粉萌發(fā)具有顯著抑制作用（P＜0.05）；對(duì)‘贛70’花粉僅在20 mg/L 條件下萌發(fā)率（24.09%）較CK 提高了2.99%，其余均表現(xiàn)出一定的抑制作用；對(duì)‘長(zhǎng)林166’花粉萌發(fā)具一定的抑制作用。維生素C 對(duì)‘贛70’花粉管伸長(zhǎng)有一定抑制作用，在10 mg/L 的維生素C 條件下抑制作用顯著（P＜0.05）；20～30 mg/L 的維生素C 對(duì)‘長(zhǎng)林166’花粉管伸長(zhǎng)促進(jìn)效果顯著（P＜0.05），20 mg/L 時(shí)花粉萌發(fā)長(zhǎng)度達(dá)最長(zhǎng)，比CK 長(zhǎng)124.76 μm。

表8 添加維生素C 的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 8 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with Vitamin C

2.2.6 維生素B1對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表9 可知，花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)隨維生素B1的濃度增加，基本呈現(xiàn)先增后減趨勢(shì)。維生素B1對(duì)‘贛無2’、‘贛70’、‘長(zhǎng)林166’花粉管伸長(zhǎng)均具有一定的抑制作用，對(duì)‘贛無2’的花粉管伸長(zhǎng)抑制作用顯著（P＜0.05）。維生素B1對(duì)‘贛無2’花粉管伸長(zhǎng)具有顯著促進(jìn)作用（P＜0.05），在20 mg/L 的維生素B1處理下萌發(fā)長(zhǎng)度較CK 長(zhǎng)737.5 μm，是CK 的1.98 倍；‘長(zhǎng)林166’在15 mg/L 的維生素B1處理下花粉管長(zhǎng)度長(zhǎng)于CK520.26 μm，是CK 的2.13 倍，促進(jìn)作用顯著（P＜0.05）。

表9 添加維生素B1 的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 9 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with Vitamin B1

2.3 KH2PO4 與PEG-3350 對(duì)油茶花粉萌發(fā)的影響

由表10 可知，不同濃度的KH2PO4與PEG-3350 處理組合對(duì)油茶花粉萌發(fā)及花粉管伸長(zhǎng)均有一定的促進(jìn)作用。通過分析花粉萌發(fā)率，‘贛無2’、‘贛70’的花粉萌發(fā)率在各處理間的差異不顯著，T13達(dá)最高，比最低萌發(fā)率提高了40.83%，T10、T11、T12、T17的萌發(fā)率均稍低于最高萌發(fā)率；‘贛70’花粉在處理2 的萌發(fā)率最高，較最低萌發(fā)率提高了23.68%，T15的花粉萌發(fā)率略低于最高萌發(fā)率；‘長(zhǎng)林166’花粉在T11的萌發(fā)率高達(dá)46.16%，與其他處理間差異較顯著，比最低萌發(fā)率顯著（P＜0.05）提高了33.64%。通過分析花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度，3 種油茶的花粉萌發(fā)長(zhǎng)度在各處理間存在顯著差異（P＜0.05）?！M無2’在T18的花粉管萌發(fā)最長(zhǎng)為1 988.47 μm，顯著長(zhǎng)于T10、T12、T13，且比最短花粉管顯著長(zhǎng)522.69 μm（P＜0.05）；‘贛70’花粉在T17的花粉管長(zhǎng)度最長(zhǎng)為1 743.85 μm，顯著長(zhǎng)于T10～T15的花粉管長(zhǎng)度，花粉管長(zhǎng)度在T15最短為1 211.91 μm（P＜0.05）；‘長(zhǎng)林166’花粉在T11、T12、T14的花粉管長(zhǎng)度長(zhǎng)于處理T13、T15、T16、T17、T18且差異顯著，T12的最長(zhǎng)花粉管長(zhǎng)度比T16的最短花粉管長(zhǎng)度提高了90.56%。綜合分析萌發(fā)率與萌發(fā)長(zhǎng)度，在基礎(chǔ)培養(yǎng)基條件下，60 mg/L 的KH2PO4+150 mg/L 的PEG-3350 對(duì)油茶花粉萌發(fā)的促進(jìn)效果最佳。

表10 添加KH2PO4 與PEG-3350 的培養(yǎng)基中油茶花粉萌發(fā)率及花粉管長(zhǎng)度Table 10 The PGR and PGL of C. oleifera in the medium with KH2PO4 and PEG-3350

3 結(jié)論與討論

花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)是植物有性生殖的重要生理過程，除了受自身遺傳學(xué)特性、濕度、溫度、光照等環(huán)境因素外，還受N、P、K、Ca 等營(yíng)養(yǎng)元素的影響，本試驗(yàn)研究了蔗糖、硼酸、尿素、CaCl2、KH2PO4、PEG-3350、維生素C、維生素B1對(duì)花粉萌發(fā)及花粉管萌發(fā)長(zhǎng)度的影響。

本研究發(fā)現(xiàn)100 g/L 蔗糖+0.075 g/L 硼酸的基礎(chǔ)培養(yǎng)基最適于油茶花粉萌發(fā)。高濃度蔗糖對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管的伸長(zhǎng)存在一定抑制作用，可能是高濃度蔗糖對(duì)花粉滲透壓產(chǎn)生了負(fù)面效應(yīng)，從而間接影響花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)[7]。

在培養(yǎng)基養(yǎng)分的單因素試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，50～100 mg/L 的尿素對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，50 mg/L 的尿素對(duì)‘贛無2’花粉萌發(fā)率較CK 提高了30.78%，該濃度稍低于袁德義研究的100～150 mg/L 適宜尿素濃度[31]。100～200 mg/L 的CaCl2對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用，此濃度的CaCl2處理‘贛無2’花粉的萌發(fā)率是CK 的1.24 倍，花粉管伸長(zhǎng)量比CK 長(zhǎng)120.79 μm，該結(jié)論與100 mg/L 鈣能促進(jìn)海棠（Malus spectabilis）[32]（萌發(fā)率最高達(dá)76.43%）、思茅松（Pinus kesiyavar.langbianensis）[33]（萌發(fā)率最高達(dá)42.16%）花粉萌發(fā)的結(jié)論基本相同；而也有研究表明CaCl2對(duì)油茶花粉萌發(fā)具有一定抑制作用[31]，其作用機(jī)制尚不十分清楚。40～120 mg/L的KH2PO4對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)具有顯著促進(jìn)作用，其中40 mg/L 的KH2PO4處理‘贛無2’花粉的萌發(fā)率最高達(dá)50.73%（是CK 的2.24 倍）；該結(jié)果與50～100 mg/L 的KH2PO4對(duì)油茶花粉萌發(fā)的促進(jìn)作用的結(jié)果基本一致[31]。50～200 mg/L的PEG-3350 對(duì)花粉萌發(fā)和花粉管伸長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，其中150 mg/L 的PEG-3350處理的‘長(zhǎng)林166’花粉萌發(fā)率最高達(dá)71.53%，是CK的3.71 倍；該結(jié)果與150 mg/L的PEG-3350 可顯著促進(jìn)蘋果花粉萌發(fā)率的結(jié)果相似[34]。維生素C 對(duì)油茶花粉萌發(fā)促進(jìn)作用不顯著或具一定抑制作用，維生素B1對(duì)油茶花粉萌發(fā)具有一定抑制作用，而對(duì)花粉管伸長(zhǎng)具有一定促進(jìn)作用，‘贛無2’花粉在20 mg/L 的維生素B1條件下萌發(fā)長(zhǎng)度達(dá)到最大值1 486.61 μm，是CK的1.98 倍；這與20 mg/L 的維生素B1可顯著促進(jìn)文冠果花粉萌發(fā)的研究結(jié)果基本一致[35]，然而目前維生素C 和維生素B1對(duì)油茶花粉萌發(fā)的作用機(jī)制還尚不清楚[25]，有待進(jìn)一步研究。不同油茶品種在同一養(yǎng)分濃度的培養(yǎng)基處理下，花粉萌發(fā)率和花粉管伸長(zhǎng)存在差異。這可能是由于不同油茶品種的花粉自身所含營(yíng)養(yǎng)差異、花粉活力高低，以及花粉對(duì)不同營(yíng)養(yǎng)元素濃度的敏感性或耐受性不同所引起。有研究表明，離體培養(yǎng)基中蔗糖、H3BO3和Ca(NO3)2的濃度配比因柳樹（Salix babylonica）個(gè)體不同而略有差異[36]，不同柚（Citrus grandis）品種促進(jìn)花粉萌發(fā)的最佳蔗糖和硼酸濃度配比不同[37]，3 個(gè)李（Prunus salicina）品種花粉在相同蔗糖-硼酸培養(yǎng)基中的花粉萌發(fā)率不同[38]；煙草（Nicotiana tabacum）K326 花粉在不同發(fā)育時(shí)期的可溶性糖、可溶性淀粉和ATP 酶等內(nèi)含物含量均可能對(duì)花粉活力有一定影響[39]。此外，花粉在不同溫度條件下對(duì)相同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敏感程度不同[40]。因此不同植株或不同品種（種源）的花粉活力、最適花粉萌發(fā)條件均可能存在差異[35,37,41]。而不同油茶品種花粉對(duì)不同營(yíng)養(yǎng)元素濃度的敏感性的相關(guān)研究較少，其作用或影響機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，促進(jìn)油茶花粉萌發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為100 g/L 蔗糖+0.075 g/L 硼酸+5%瓊脂。對(duì)油茶花粉萌發(fā)而言，KH2PO4（40～120 mg/L）、PEG-3350（50～200 mg/L）具有顯著促進(jìn)作用；尿素（50～100 mg/L）和CaCl2（100～200 mg/L）具有一定的促進(jìn)作用；維生素C、維生素B1均存在一定的抑制作用。促進(jìn)油茶花粉萌發(fā)的最佳營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)配比為基礎(chǔ)培養(yǎng)基（100 g/L 蔗糖+0.075 g/L硼酸+5 g/L 瓊脂）+60 mg/L 的KH2PO4+150 mg/L的PEG-3350。本研究將為促進(jìn)油茶花粉萌發(fā)的營(yíng)養(yǎng)混合液配比及人工噴霧授粉技術(shù)提供一定參考，將有利于油茶開花坐果調(diào)控及其增產(chǎn)培育。