陳宏達(dá)，韓 燦，何 偉，張乃德＊

（1.鳳陽(yáng)縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 233100；2.鳳陽(yáng)縣畜牧獸醫(yī)局 233100）

近幾年，我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)持續(xù)發(fā)展，規(guī)?；潭炔粩嗵岣撸r(nóng)村散養(yǎng)戶仍占有一定的比例。由于散養(yǎng)戶養(yǎng)殖設(shè)施設(shè)備等硬件條件落后，并缺乏科學(xué)的養(yǎng)殖技術(shù)，再加上雞病的發(fā)生越來(lái)越復(fù)雜，主要以病毒病、細(xì)菌病和寄生蟲病為主，同時(shí)混合感染逐漸增多，控制難度加大[1]，直接影響?zhàn)B雞場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。病毒性病原仍以新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒、傳染性法氏囊炎病毒、呼腸孤病毒等為主。細(xì)菌性病原以大腸桿菌、雞毒支原體、滑液囊支原體等為主。寄生蟲以蛔蟲、球蟲、絳蟲等為主。散養(yǎng)雞群疾病的流行也呈現(xiàn)季節(jié)性特征，一般夏季溫度較高，有利于細(xì)菌、寄生蟲等病原體的滋生、繁殖，雞群易于患病。

本調(diào)查針對(duì)2019年～2020年鳳陽(yáng)縣送檢的臨床患病雞，縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心技術(shù)人員采用臨床診斷、病理解剖、結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行生物學(xué)分析。旨在了解鳳陽(yáng)縣雞場(chǎng)疫病流行動(dòng)態(tài)，為鳳陽(yáng)縣散養(yǎng)雞疫病防控提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

臨床樣品，來(lái)源于2019年～2020年鳳陽(yáng)縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)194場(chǎng)（戶）送檢的臨床患病雞。

1.2 方法

1.2.1 大腸桿菌的分離鑒定

1.2.1.1 大腸桿菌的分離及純化培養(yǎng)

無(wú)菌將患病雞小腸內(nèi)容物接種于MAC平板，37℃培養(yǎng)18～24h。從培養(yǎng)基上挑取粉紅色、光滑、中等大小可疑單個(gè)菌落于TSA瓊脂平板上37℃培養(yǎng)18～24h。

1.2.1.2 大腸桿菌的鑒定

鏡檢：挑取純培養(yǎng)菌落革蘭氏染色后鏡檢，大腸桿菌鏡下形態(tài)為紅色、兩端鈍圓、單個(gè)或成雙存在。

TSI鑒定反應(yīng)：無(wú)菌操作挑取純培養(yǎng)菌落進(jìn)行穿刺，斜面劃線，于37℃培養(yǎng)18～24h。當(dāng)培養(yǎng)基變顏色發(fā)黃并產(chǎn)氣，判為“＋”。

生化鑒定反應(yīng)：無(wú)菌操作挑取純培養(yǎng)菌落分別接種于枸櫞酸鹽、蛋白胨水、MR、VP生化鑒定管中，具體操作和結(jié)果判定按照公司提供的E. coli生化微量管操作說(shuō)明進(jìn)行。當(dāng)吲哚（I）試驗(yàn)、甲基紅（MR）試驗(yàn)均為“＋”，伏-普氏（V-P）試驗(yàn)、枸櫞酸鹽利用（C）試驗(yàn)、均為“－”，則判定大腸桿菌為“＋”。

1.2.2 球蟲卵囊分離鑒定

飽和食鹽水的配置：在100mL開水中加入食鹽38g，混勻。稱取2g的糞便于10mL的燒杯中，加飽和食鹽水至滿，將載玻片蓋于瓶口上方，靜置 1h，取下載玻片，蓋上蓋玻片，顯微鏡觀察，重復(fù)3次確定糞便中的球蟲卵囊情況。

1.2.3 采用SPASSstatistics25.0,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 臨床病例診斷情況

194份臨床患病雞病例，診斷出有球蟲、支原體、蛔蟲、大腸桿菌、傳染性支氣管炎病毒、雞呼腸孤病毒、組織滴蟲、絳蟲、禽白血病病毒、安卡拉病毒、新城疫病毒、巴氏桿菌、禽痛風(fēng)、住白細(xì)胞原蟲、馬立克病毒、傳染性法氏囊炎病毒、吸蟲、痘病毒、沙門氏菌共計(jì)19種病原，依次有71、47、39、25、24、21、14、12、12、8、7、6、3、1、1、1、1、1、1份。（見表5）

表5 被檢雞樣品中不同季節(jié)的診斷結(jié)果

其中，單一病原感染的有17種病原，共109份（56.19%）；混合感染的有85份（43.81%）；二重混合感染有70份（82.35%），總計(jì)26種模式；三重混合感染有13份（15.29%)，總計(jì)11種模式，四重混合感染有2份，總計(jì)2種模式?；旌细腥灸Ｊ街饕浴爸гw+球蟲”為主，占所有混合感染的14.12%。（見表1、2、3、4）

表1 被檢樣品中單一病原感染的診斷結(jié)果

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表2 被檢樣品中二重病原混合感染的診斷結(jié)果

表3 被檢樣品中三重病原混合感染的診斷結(jié)果

序號(hào) 感染模式 檢出份數(shù)/份 檢出率/%9 支原體+呼腸孤病毒+蛔蟲 1 1.18（1/85）10 支原體+呼腸孤病毒+蛔蟲 1 1.18（1/85）11 球蟲+傳染性性支氣管炎病毒+新城疫病毒 1 1.18（1/85）合計(jì)/份 13 15.29（13/85）

表4 被檢樣品中四重病原混合感染的診斷結(jié)果

2.2 不同季節(jié)的病例診斷結(jié)果

按照氣候的不同，將3～5月、6～8月、9～11月、12～次年2年，分為春、夏、秋、冬季，每個(gè)季節(jié)診斷病例數(shù)分別為51、80、45、18份。在四個(gè)季節(jié)診斷有球蟲、蛔蟲；呼腸孤病毒感染的，相互之間差異不顯著（p＞0.05）；支原體感染的，春季與夏季之間差異極顯著（p＜0.01）、與秋季之間差異顯著（p＜0.05）、與冬季之間差異顯不顯著（p＞0.05），夏、秋、冬季之間差異不顯著（p＞0.05）；疑似大腸桿菌感染的，春、夏、秋季之間差異不顯著（p＞0.05），與冬季差異極顯著（p＜0.01）

3 討論

2019年常順志等調(diào)查云南省雞大腸桿菌病、沙門氏菌病、霉菌感染、支原體感染、禽霍亂的檢出率依次為14.80%、9.80%、6.28%、0.21%；新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊炎、雞痘、馬立克氏病的檢出率，依次為4.05%、1.81%、0.96%、0.75%、0.21%[2]。李超等報(bào)道我國(guó)各地雞群球蟲感染率均在50%以上[3]。馬景霞等檢測(cè)山東濱州新城疫感染率在20%左右[4]。本次調(diào)查散養(yǎng)雞中診斷出病原較多的是球蟲、支原體、蛔蟲、大腸桿菌、傳染性支氣管炎病毒、呼腸孤病毒、組織滴蟲、絳蟲、白血病病毒，盡管本次調(diào)查與有關(guān)報(bào)道結(jié)果存在差異，但與其他地區(qū)雞群疫病感染相似。鳳陽(yáng)縣散養(yǎng)雞群中普遍存在球蟲、支原體、蛔蟲、大腸桿菌、傳染性支氣管炎病毒的感染。

隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，雞病的流行特點(diǎn)日益復(fù)雜，混合感染病例逐漸增多。郭文龍調(diào)查山東濰坊、青島、泰安地區(qū)雞群中廣泛存在網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥、馬立克氏病、雞傳染性貧血病、白血病較為嚴(yán)重的混合感染[5]。唐茂恒調(diào)查山東煙臺(tái)地區(qū)養(yǎng)雞場(chǎng)中廣泛存在白血病、傳染性貧血病、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥、呼腸孤病毒病混合感染的病原[6]。本次調(diào)查混合感染率占43.81%，其中二重混合感染占82.35%，而且混合感染類型多樣，種類繁多，還檢測(cè)出有三、四重混合感染。這說(shuō)明如今養(yǎng)殖的大環(huán)境在進(jìn)一步惡化，發(fā)病情況也越來(lái)越復(fù)雜。呼腸孤病毒病等免疫性抑制病的影響也加大雞群疫病防控的難度。

通過對(duì)不同季節(jié)臨床診斷病例結(jié)果綜合分析發(fā)現(xiàn)，球蟲、蛔蟲一年四季均可感染雞群，在溫度較高的春季、夏季感染較多，這是由于球蟲卵囊、蛔蟲卵在溫暖潮濕的季節(jié)更容易發(fā)育[7]。雞傳染性支氣管炎、呼腸孤病毒感染的發(fā)生無(wú)明顯的季節(jié)性差異，過熱、嚴(yán)寒等應(yīng)激性因素均能促進(jìn)雞傳染性支氣管炎的發(fā)生；而呼腸孤病毒對(duì)環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，傳播途徑廣泛，消除病原難度大[8]。本次分析發(fā)現(xiàn)春季支原體感染率最高，大腸桿菌在冬季的感染率較高。支原體一年四季均可感染雞群，以寒冷季節(jié)流行嚴(yán)重[8]。大腸桿菌在自然屆普遍存在，一年四季均可流行，在多雨潮濕的季節(jié)多發(fā)，而在寒冷的冬季，由于通風(fēng)不良，衛(wèi)生條件差，吸入污染病原的灰塵易發(fā)生氣囊炎[9]。

4 結(jié)論

鳳陽(yáng)縣散養(yǎng)雞群中普遍存在球蟲、支原體、蛔蟲、大腸桿菌、傳染性支氣管炎病毒的感染；以混合感染為主，類型多樣，傳染性支氣管炎病毒、呼腸孤病毒、球蟲、蛔蟲一年四季均可感染雞群，冬春季節(jié)支原體、大腸桿菌更易感染雞群。

針對(duì)鳳陽(yáng)縣散養(yǎng)雞群疫病流行情況，提出三點(diǎn)建議。一是按照免疫程序接種雞群傳染性支氣管炎、馬立克、新城疫等疫苗，改善飼養(yǎng)設(shè)施，完善生物安全體系建設(shè)，加強(qiáng)飼料營(yíng)養(yǎng)水平，保障雞群有良好的抵抗力。二是減少大腸桿菌、沙門氏菌等條件性致病菌誘發(fā)因素，降低繼發(fā)感染，及時(shí)治療患病雞，嚴(yán)格按照規(guī)定使用抗生素，不亂用、濫用抗生素。三是搞好環(huán)境衛(wèi)生，定期消毒消殺以及驅(qū)蟲，尤其是在溫度較高在季節(jié)，增加驅(qū)蟲次數(shù)。