巴思，莫祥蘭

【關鍵詞】miRNA ;鼻咽癌 ;細胞增殖;侵襲;轉移

中圖分類號：R766.3文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.11.014

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是鼻咽部上皮來源的惡性腫瘤，與EB病毒（EBV）感染密切相關，發(fā)病人群具有顯著的地理分布特征，好發(fā)于中國南部和東南亞地區(qū);95%以上病例為未分化非角化型鱗狀細胞癌，對放療敏感。雖然早期經規(guī)范治療大部分患者可治愈，但NPC發(fā)病部位隱蔽，早期即經淋巴道或血道轉移。約70%患者就診時已為中晚期，治療效果差。因此，有必要深入研究NPC發(fā)生發(fā)展分子機制，尋找特異度和敏感度高的早期診斷NPC分子標志物，及早發(fā)現NPC患者，及早進行規(guī)范治療，進一步提高NPC患者治愈率和生存質量。研究已證實NPC的發(fā)生與EBV感染、遺傳因素、環(huán)境因素等密切相關。近年研究發(fā)現，miRNA表達失衡參與了NPC的發(fā)生和進展，但miRNA致NPC分子機制仍在探討中。

1miRNA與人類惡性腫瘤

miRNA是一類長度為19～25個核苷酸的單鏈非編碼小分子RNA，在轉錄后水平調控基因表達。miRNA具有高度保守性，在哺乳動物基因組中廣泛存在。隨著對miRNA研究的深入，發(fā)現其參與包括細胞增殖、分化、胚胎發(fā)育和組織形成等各種生理病理過程[1]。miRNA表達異常與人類多種疾?。ò[瘤）的發(fā)生密切相關。miRNA在人類惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演著類似于癌基因或抑癌基因的角色。新近研究發(fā)現食道癌細胞miR-483-5P表達上調，其通過靶向下調鉀離子通道亞家族Q成員1（KCNQ1）表達促進食道癌細胞的增殖、遷移和侵襲[2];提示miR-483-5P在食道癌發(fā)生發(fā)展過程中扮演癌基因角色。另一研究發(fā)現胃癌組織及細胞系miR-125b表達明顯下調，miR-125b模擬物可抑制胃癌細胞增殖、侵襲和轉移，在胃癌發(fā)生發(fā)展中扮演抑癌基因角色，其抑癌機制是通過靶向下調信號轉導和轉錄激活子3（STAT3）表達而實現的[3]。MAMINEZHAD等[4]研究發(fā)現6種血漿miRNA（miR-19a、miR-20a、miR-150、let-7a、miR-143和miR-145）可作為診斷大腸癌的分子標志物。大腸癌患者外周血miR-19a、miR-20a、miR-150和 let-7a表達顯著上調并與進展期密切相關，而 miR-143和miR-145則顯著下調。推測在大腸癌發(fā)生發(fā)展過程中miR-19a、miR-20a、miR-150和 let-7a扮演癌基因角色，而miR-143和miR-145則扮演抑癌基因角色。它們促癌或抑癌分子機制如何尚待研究。

2miRNA在NPC發(fā)生發(fā)展中的作用

NPC是鼻咽黏膜上皮細胞來源的惡性腫瘤。NPC的發(fā)生發(fā)展是多因素參與的復雜過程。研究已證實多種癌基因和抑癌基因表達異常導致多條信號通路包括Wnt/β-catenin、Rho/ROCK、PI3K/AKT、NF-κB、mTOR、MAPK等持續(xù)活化促進了NPC發(fā)生和進展。新近研究發(fā)現miRNA表達異常與NPC發(fā)生發(fā)展密切相關[5～9]。他們在NPC發(fā)生發(fā)展過程起促癌或抑癌作用。

2.1miRNA靶向調控抑癌基因表達促進NPC發(fā)生和發(fā)展研究證實部分miRNA促進NPC發(fā)生和發(fā)展。 NPC組織miRNA-630表達水平明顯上調并與預后不良密切相關;體外實驗發(fā)現，NPC細胞外源性過表達miRNA-630促進細胞增殖;其可能通過靶向下調抑癌基因P53誘導核蛋白2（TP53INP2）表達促進腫瘤發(fā)展[6]。NPC組織miR-103表達上調，而腫瘤侵襲轉移抑制基因基質金屬蛋白酶-3組織抑制物（TIMP-3）表達水平明顯降低;NPC細胞外源性過表達miR-103促進細胞增殖、遷移和侵襲，Wnt/β-catenin通路相關基因β-catenin 和cyclin D1表達上調[7]，提示 miR-103通過靶向抑制TIMP-3表達，激活Wnt/β-catenin通路促進NPC發(fā)生和發(fā)展。另一研究發(fā)現，miRNA-215在NPC組織中表達上調并與預后差密切相關;NPC細胞外源性過表達miR-215促進了細胞增殖、遷移和侵襲;miR-215通過靶向抑制抑癌基因RB1表達促進了NPC的發(fā)展;此外，miR-215通過促進NPC上皮-間質轉化（EMT）、激活Wnt/β-catenin通路促進NPC侵襲和轉移[8]。NPC組織miR106a-5p表達上調，其表達水平與疾病晚期、復發(fā)和不良臨床預后密切相關;功能研究發(fā)現 miR106a-5p通過靶向抑制抗增殖因子3（BTG3），抑制自噬而增強了NPC惡性表型;由miR106a-5p/BTG3軸介導的自噬減弱是通過激活MAPK通路而實現[9]。miR-141的功能具有組織特異性。NPC組織miR-141-3p表達上調并與不良預后相關，外源性過表達miR-141-3p促進了NPC細胞的增殖、遷移和侵襲，其通過靶向抑制腫瘤抑制基因DLC1表達、激活mTOR通路從而促進NPC的進程[10]。NPC組織高表達miRNA-19a-3p，而凋亡促進基因程序性細胞死亡5（PDCD5）表達下調，兩者表達水平呈負相關;生存分析顯示，高表達miRNA-19a-3p或低表達PDCD5者預后較差，他們是影響NPC預后的獨立危險因素[11]，提示miRNA-19a-3p在NPC中扮演癌基因角色。研究還發(fā)現NPC患者血漿miR-214-3p表達與臨床分期和復發(fā)或轉移密切相關，在NPC患者治療后的隨訪過程中，血漿miR-214-3p表達逐漸降低，復發(fā)或轉移的患者總是在同一時間點伴有更高水平的血漿miR-214-3p[12]，提示miR-214-3p可能在NPC發(fā)生發(fā)展中扮演癌基因角色。SUN等[13]研究發(fā)現，NPC患者外周血miR-93表達水平顯著增高并與臨床分期、淋巴結轉移以及5年總生存期顯著相關，是預測NPC預后的獨立因素;體外實驗表明，敲低miR-93可抑制NPC細胞增殖;進一步功能學實驗證明，其通過靶向抑制PDCD4表達促進NPC增殖。除人類miRNA外，部分EBV編碼的miRNA（EBV-miRNA）亦可促進NPC發(fā)生和發(fā)展。NPC組織高表達EBV-miRNA-BART8-3p并與遠處轉移密切相關[14];其通過激活NF-κB促進EMT從而促進NPC侵襲和轉移[15]。EBV-miR-BART2-5p在NPC中高表達，高表達與遠處轉移和預后差密切相關;體外實驗發(fā)現EBV-miR-BART2-5p通過靶向調控Rho家族GTP酶 3（RND3）表達，導致ROCK信號通路功能異常，最終引起NPC侵襲和轉移[16]。因此，部分miRNA包括EBV-miRNA能促進NPC發(fā)生發(fā)展，他們通過靶向下調抑癌基因表達，促進細胞增殖、侵襲和轉移的相關信號通路持續(xù)活化，導致NPC發(fā)生和進展。

2.2miRNA靶向調控癌基因表達抑制NPC發(fā)生和發(fā)展除促進NPC發(fā)生和發(fā)展外，部分miRNA在NPC發(fā)生中起抑癌作用。GAO等[17]研究發(fā)現所有NPC細胞系miR-233表達均下調，以高轉移性細胞系表達下調尤為明顯;體外實驗證實了miR-233能抑制NPC細胞增殖、EMT、遷移和侵襲，其抑癌作用是通過靶向下調結構特異性識別蛋白SSRP1表達，抑制EMT而實現的。另一研究發(fā)現miR-424-5P在NPC組織和細胞系中均低表達并且與淋巴結轉移和臨床分期呈負相關，轉染miR-424-5p模擬物可抑制NPC細胞增殖、遷移和侵襲;其通過下調 AKT3表達抑制AKT信號通路從而抑制NPC發(fā)生和發(fā)展[18]。miRNA-296-5p可通過逆轉轉化生長因子-β誘導的EMT抑制NPC細胞轉移和侵襲[19];miRNA-379-5p/YBX1軸調節(jié)NPC細胞EMT抑制NPC細胞的侵襲和遷移[20]。新近研究發(fā)現miR-206作為抑癌基因參與了多種人類惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展[21～25]。在NPC細胞中，miR-206顯著下調細胞周期促進基因周期素依賴激酶9（CDK9）的表達，導致細胞活性降低，細胞生長受抑制，遷移和侵襲能力減弱并誘導細胞凋亡[26]。研究還發(fā)現miRNA-331-3p在NPC組織和細胞系中表達明顯降低;NPC細胞外源性過表達miRNA-331-3p導致細胞增殖和侵襲轉移受抑制，細胞凋亡增加;其通過靶向下調真核細胞翻譯起始因子4B（eIF4B）的表達，抑制PI3K-AKT信號通路而抑制NPC進展[27]。NPC細胞低表達miR-375，高表達丙酮酸脫氫酶激酶1（PDK1），兩者表達水平呈負相關; miR-375通過靶向抑制PDK1從而抑制NPC細胞的增殖和侵襲[28]。鼻咽癌組織和細胞系低表達 miR-204，高表達趨化因子受體CXCR4，兩者表達呈負相關;miR-204通過靶向CXCR4調控NF-κB信號通路活性抑制鼻咽癌增殖、侵襲和轉移[29]。miR-34a在鼻咽癌組織中低表達，鼻咽癌細胞外源性過表達miR-34a抑制了細胞遷移和侵襲力，其通過抑制AKT信號通路抑制鼻咽癌侵襲和轉移[30]。因此，部分miRNA在NPC發(fā)生發(fā)展過程中起抑癌作用，其抑癌功能是通過靶向下調癌基因表達導致相關信號通路受抑制從而抑制腫瘤進程。NPC組織中抑癌miRNA表達下調促進NPC增殖、侵襲和轉移。

3展望

miRNA表達失衡參與了NPC發(fā)生和發(fā)展。miRNA通過靶向調控細胞內癌基因或抑癌基因表達從而激活或抑制相關信號通路，進而促進或抑制NPC進程。研究已證實與NPC密切相關的miRNA眾多，哪些 miRNA是NPC的啟動基因？他們在早期診斷NPC的價值如何？尚待進一步研究。

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（收稿日期：2021-06-23修回日期：2021-08-04）

（編輯：梁明佩）