馬玲玲，冀建斌

天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院消化科，天津300192

潰瘍性結(jié)腸炎（UC）是一種特發(fā)性的慢性結(jié)腸黏膜炎癥病變，臨床主要表現(xiàn)為腹痛、腹瀉和黏液膿血便，主要侵犯結(jié)直腸的黏膜與黏膜下層［1］。相關(guān)研究［2］表明，UC是由于多種因素的相互作用而最終導(dǎo)致腸道黏膜慢性炎癥的發(fā)生。其發(fā)病機(jī)制與腸黏膜屏障功能受損有一定的相關(guān)性，環(huán)境因素、遺傳易感性、免疫反應(yīng)異常、感染以及精神心理狀態(tài)也被認(rèn)為與UC的病理和生理具有很大的關(guān)系，越來越多的研究［3］表明，腸道黏膜屏障的解剖基礎(chǔ)源于黏膜機(jī)械屏障，由腸黏膜表面的黏液層、腸黏膜上皮細(xì)胞及細(xì)胞間緊密連接、上皮基底膜、黏膜下固有層等構(gòu)成，有抵御較強(qiáng)的刺激和細(xì)菌侵犯的能力。大量研究［4］表明，中醫(yī)藥能通過各種不同的作用機(jī)制對腸黏膜屏障起保護(hù)作用，相比西藥具有不良反應(yīng)少、療效好的特點(diǎn)，青赤散由赤石脂、爐甘石、苦參、黃柏、青黛、三七粉、白及和兒茶組成［5］，具有化瘀止血、清熱祛濕、斂瘡生肌的功效。臨床研究［6］顯示，青赤散灌腸在UC的治療中取得了非常好的效果，但其藥理機(jī)制尚不明確。2017年6月—2020年12月，本研究觀察了青赤散灌腸對UC小鼠腸黏膜通透性的改善作用，并探討其機(jī)制，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 小鼠、青赤散及試劑 雄性C57BL/6 J小鼠50只，鼠齡7～8周，體質(zhì)量21～25 g，購自斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司，合格證編號為SCXK（京）2020-0058。小鼠在無病原體環(huán)境中由專人飼養(yǎng)，室溫22～24℃，光照和黑暗循環(huán)12 h，隨意飲食和飲水。青赤散組成藥物：赤石脂60 g、爐甘石30 g、黃柏30 g、苦參30 g、青黛10 g、兒茶6 g、三七粉6 g、白及顆粒9 g，購自江陰天江藥業(yè)有限公司。Notch、分裂相關(guān)增強(qiáng)子-1（Hes1）、無調(diào)同源物1（ATOH1）一抗購自北京索來寶生物科技有限公司，結(jié)腸組織黏蛋白-2（MUC2）一抗購自杭州吉諾生物公司。

1.2 青赤散灌腸方劑制備 將赤石脂、黃柏、苦參、爐甘石、青黛置于燒瓶中，將藥物泡制60 min后，使用數(shù)顯控溫加熱套加熱，水沸騰后再煎煮60 min，去渣，將白及顆粒和三七粉調(diào)成湯劑，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮藥物后，分裝到1.5 mL EP管中，放于4℃冰箱中備用，每次使用前加熱至37℃。

1.3 動物分組和青赤散灌腸 50只雄性C57BL/6 J小鼠隨機(jī)分為對照組、模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組，每組10只。對照組每天自由飲用雙蒸水，其他組小鼠自由飲用3%的葡聚糖硫酸鈉（DSS）溶液7 d建立UC小鼠模型［7］，建模成功后無小鼠死亡。在建模成功后的第2天進(jìn)行藥物干預(yù)，按照60 kg/200 g人鼠轉(zhuǎn)換系數(shù)W=6.25，計算得出青赤散灌腸濃度為24.15 g/kg，每天1次，連續(xù)7 d。青赤散高劑量組每天給予青赤散24.15 g/kg灌腸治療，青赤散中劑量組每天給予青赤散12.08 g/kg灌腸治療，青赤散低劑量組每天給予青赤散6.04 g/kg灌腸治療，對照組和模型組按照5 mL/kg給予0.9%NaCL灌腸。

1.4 各組小鼠腸黏膜通透性觀察 采用異硫氰酸熒光素-葡聚糖（FITC-Dextran）示蹤法［9］。取灌腸治療7 d后的各組小鼠，禁食4 h后給予FITC-Dextran 4000（600 mg/kg）灌胃，灌胃4 h后，采集全血，離心處理，使用熒光分光光度計測定其熒光強(qiáng)度，激發(fā)光波長為490 nm，發(fā)射波長為520 nm，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線并計算小鼠血漿中FITC-D含量，以小鼠血漿中FITC-D含量表示小鼠腸黏膜通透性。

1.5 各組小鼠體質(zhì)量變化率測算和結(jié)腸長度測量 從造模后第1天開始，觀察并記錄各組小鼠的體質(zhì)量，計算體質(zhì)量變化率。體質(zhì)量變化率=（實驗開始后體質(zhì)量—實驗開始時體質(zhì)量）/實驗開始時體質(zhì)量×100%。實驗第7天脫頸處死小鼠，處死前12 h禁食禁水，小鼠處死后，立即取出結(jié)腸組織，測量結(jié)腸長度。

1.6 各組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)觀察和評分 采用HE染色法。小鼠處死后分離結(jié)腸組織，放入4%的多聚甲醛固定，乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟包埋、4μm切片后進(jìn)行蘇木素—伊紅（HE）染色，具體操作步驟參照HE染色參考文獻(xiàn)［8］，染色后再顯微鏡下觀察小鼠結(jié)腸組織的病理學(xué)變化，并參照文獻(xiàn)［9］對小鼠進(jìn)行組織病理評分：0分為無明顯損傷；1分為存在少量淋巴細(xì)胞浸潤，基底部1/3隱窩破壞；2分為淋巴細(xì)胞浸潤水平偏高，基底部2/3隱窩處破壞；3分為淋巴細(xì)胞浸潤程度較高，損傷黏膜以及黏膜下層，僅表面上皮完整；4分為淋巴細(xì)胞浸潤程度顯著，全部隱窩和上皮破壞。

1.7 各組小鼠結(jié)腸組織中炎癥因子TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA檢測 采用qRT-PCR法。取分離的結(jié)腸組織剪成小塊，采用TRIzol法提取總RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA，按照試劑說明書進(jìn)行qRT-PCR檢測。TNF-αmRNA上游引物為5′-GAGTTCATTCCCTCTGGGGC-3′，下游引物 為5′-TGAAGGCAGAGTGGCTTGAG-3′；MCP-1 mRNA上游引物 為5′-GCCCCATTCTCCTCCAGTTA-3′，下游引物 為5′-CCATGGGGGAGAACTTAGCA-3′；IL-1βmRNA上游引物為5′-TGGGAGAAACCCTGAAAGCAG-3′，下游 引 物 為5′-GAATTCACGGACCCCACAAG-3′；TCACGGA作為內(nèi)參，上游引物為5′-CCTGAAAGCAGGGTTGTGGG-3′，下 游 引 物 為5′-GAATTCACGGACCCCACAAG-3′。qRT-PCR反應(yīng)條件為95℃、20 min，90℃30 s、72℃30 s，72℃、5 min，循環(huán)次數(shù)為45次。以2-ΔΔCt表示小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA的相對表達(dá)量。

1.8 各組小鼠結(jié)腸組織中Notch信號通路相關(guān)蛋白Notch、Hes1、ATOH1、MUC2檢測 采用Western Blotting法。取分離的結(jié)腸組織，剪成小塊稱重，每10 mg組織中加入100 g裂解液和1μL蛋白酶抑制劑，勻漿至無塊狀，移入1.5 mL EP管中，16 000 r/min低溫離心20 min，采用BCA蛋白檢測試劑盒檢測蛋白濃度，在10%SDS-PAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，然后用5%脫脂乳封閉，4℃條件下分別加入Notch、Hes1、ATOH1、MUC2一抗，孵育過夜，TBST洗膜3次，每次5 min，加入二抗，室溫下孵育1 h，最后采用增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（ECL）試劑檢測小鼠結(jié)腸組織中Notch信號通路相關(guān)蛋白Notch、Hes1、ATOH1和MUC2。

1.9 各組小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)測算 采用PAS染色法。取分離的結(jié)腸組織約為0.5 cm左右，放入4%的多聚甲醛中固定，乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟包埋、4μm切片，將切片浸入1%過碘酸8 min，采用PAS液染色10 min，偏重亞硫酸鈉洗液5 min后沖洗，蘇木素染核、分化、返藍(lán)，透明、封片后，在400倍顯微鏡下，每張切片選擇10個視野，計數(shù)每個視野中的杯狀細(xì)胞數(shù)，取平均值。

1.10 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計軟件。計量資料以±s表示，多組間比較用單因素方差分析，兩兩比較用LSD-t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠腸黏膜通透性比較 對照組、模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠血漿中FITC-D含量分別為（0.47±0.13）、（2.51±0.76）、（1.93±0.34）、（1.26±0.19）、（0.72±0.16）μg/mL，其中模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠血漿中FITC-D含量與對照組相比顯著升高（P均<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠血漿中FITC-D含量與模型組相比顯著降低（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠血漿中FITC-D含量與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著降低（P均<0.05）。

2.2 各組小鼠體質(zhì)量變化率和結(jié)腸長度比較 造模后各組小鼠體質(zhì)量變化率比較見表1。由表1可知，各組小鼠在第1～3天的體質(zhì)量變化率無顯著差異（P均>0.05），模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組在第4～7天的體質(zhì)量變化率與對照組相比顯著降低（P均<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組在第4～7天的體質(zhì)量變化率與模型組相比明顯升高（P均<0.05），青赤散高劑量組在第4～7天的體質(zhì)量變化率與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著升高（P均<0.05）。對照組、模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸長度分別為（8.09±0.65）、（5.93±0.46）、（6.44±0.57）、（7.63±0.61）、（7.97±0.63）cm，其中模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸長度與對照組相比顯著變短（P<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸長度與模型組相比顯著變長（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸長度與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著變長（P均<0.05）。

表1 造模后各組小鼠體質(zhì)量變化率比較（%，±s）

表1 造模后各組小鼠體質(zhì)量變化率比較（%，±s）

注：與對照組相比，*P<0.05；與模型組相比，#P<0.05。

組別對照組模型組青赤散低劑量組青赤散中劑量組青赤散高劑量組體質(zhì)量變化率第1天0.95±0.02 0.97±0.01 0.95±0.03 0.94±0.02 0.92±0.04第2天1.06±0.31 1.02±0.25 1.03±0.26 1.04±0.25 1.03±0.27第3天1.03±0.29 0.96±0.18 1.01±0.16 1.02±0.27 1.03±0.29第4天1.05±0.31 0.93±0.27*1.03±0.21*#1.03±0.19*#1.02±0.22*#第5天1.07±0.34 0.89±0.16*0.95±0.17*#0.98±0.14*#1.01±0.19*#第6天1.08±0.33 0.85±0.05*0.93±0.08*#0.95±0.09*#0.99±0.14*#第7天1.09±0.13 0.78±0.04*0.86±0.06*#0.92±0.08*#0.97±0.11*#

2.3 各組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)變化情況和評分比較 各組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)變化情況見圖2。由圖2可見，對照組小鼠結(jié)腸組織中隱窩、腺體和黏膜結(jié)構(gòu)規(guī)則、排列整齊，無炎癥細(xì)胞浸潤；與對照組相比，模型組小鼠結(jié)腸組織黏膜充血水腫，潰瘍形成、隱窩破壞、杯狀細(xì)胞減少，出現(xiàn)明顯的急性炎癥反應(yīng)，炎癥累及黏膜和黏膜下層；與模型組對比，青赤散低劑量組和青赤散中劑量組小鼠結(jié)腸組織中隱窩、腺體和黏膜結(jié)構(gòu)明顯好轉(zhuǎn)，炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少；與青赤散中劑量相比，青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中隱窩、腺體和黏膜結(jié)構(gòu)出現(xiàn)規(guī)則狀態(tài)，并且排列整齊，炎癥細(xì)胞浸潤顯著減少。對照組、模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)評分分別為（2.03±0.49）、（13.67±3.28）、（11.42±2.81）、（7.16±1.57）、（4.69±1.03）分，其中模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)評分與對照組相比顯著升高（P<0.05），而青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)評分與模型組相比顯著降低（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)評分與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著降低（P均<0.05）。

圖2 各組小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)變化情況（HE，×200）

2.4 各組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1β mRNA相對表達(dá)量比較 各組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA相對表達(dá)量比較見表2。由表2可知，模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA相對表達(dá)量與對照組相比顯著升高（P均<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA相對表達(dá)量與模型組相比顯著降低（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA相對表達(dá)量與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著降低（P均<0.05）。

表2 各組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA相對表達(dá)量比較（±s）

表2 各組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1、IL-1βmRNA相對表達(dá)量比較（±s）

注：與對照組相比，*P<0.05；與模型組相比，#P<0.05。

組別對照組模型組青赤散低劑量組青赤散中劑量組青赤散高劑量組TNF-αmRNA 1.36±0.27 4.98±0.83*3.06±0.59*#2.43±0.47*#1.74±0.33*#MCP-1 mRNA 1.42±0.31 3.87±0.79*2.65±0.48*#2.27±0.36*#1.54±0.27*#IL-1βmRNA 1.39±0.24 5.33±0.92*3.74±0.65*#3.13±0.48*#1.83±0.31*#

2.5 各組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1、ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量比較 各組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1、ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量比較見表3。由表3可知，模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1蛋白相對表達(dá)量與對照組相比顯著升高（P均<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1蛋白相對表達(dá)量與模型組相比顯著降低（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1蛋白相對表達(dá)量與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著降低（P均<0.05）。模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量與對照組相比顯著降低（P均<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量與模型組相比顯著升高（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著升高（P均<0.05）。

表3 各組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1、ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量比較（±s）

表3 各組小鼠結(jié)腸組織中Notch、Hes1、ATOH1、MUC2蛋白相對表達(dá)量比較（±s）

注：與對照組相比，*P<0.05；與模型組相比，#P<0.05.

組別對照組模型組青赤散低劑量組青赤散中劑量組青赤散高劑量組Notch蛋白0.24±0.03 1.27±0.32*1.03±0.19*#0.78±0.07*#0.46±0.05*#Hes1蛋白0.31±0.04 1.18±0.29*1.07±0.21*#0.83±0.09*#0.58±0.05*#ATOH1蛋白1.16±0.23 0.37±0.06*0.45±0.06*#0.78±0.08*#1.03±0.14*#MUC2蛋白1.05±0.18 0.19±0.01*0.23±0.03*#0.31±0.07*#0.73±0.09*#

2.6 各組小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)比較 對照組、模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)分別為（26.87±0.79）、（8.37±2.15）、（13.64±1.02）、（17.49±0.63）、（22.56±0.71）個，其中模型組、青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)與對照組相比顯著減少（P<0.05），青赤散低劑量組、青赤散中劑量組、青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)與模型組相比顯著增多（P均<0.05），青赤散高劑量組小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)與青赤散低劑量組、青赤散中劑量組相比顯著增多（P均<0.05）。

3 討論

UC在許多發(fā)達(dá)國家和地區(qū)較為常見，但在發(fā)展中地區(qū)該病的發(fā)病率也在逐漸上升。UC的發(fā)病可能與微生物、基因的易感性、環(huán)境和免疫等因素相關(guān)［11］，其具體機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。但隨著UC發(fā)病機(jī)制研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)腸黏膜屏障功能在UC中起著重要作用，并且認(rèn)為保護(hù)腸黏膜屏障功能是有效治療UC潛在方法［12］。雖然臨床UC治療藥物取得了一定的效果，但治療出現(xiàn)的反應(yīng)性、耐受性和不良反應(yīng)等仍是不容忽視的，所以需要尋找替代或輔助治療途徑。青赤散是由赤石脂、爐甘石、黃柏、青黛、苦參、三七粉、黃柏、白岌、兒茶組成，是借鑒中醫(yī)外科“癰瘍”理論研制的局部灌腸方，全方共奏具有化瘀止血、清熱化濕、斂瘡生肌的功效，因方中含有青黛和赤石脂，故被稱作青赤散。赤石脂具有吸附消化道內(nèi)有毒物質(zhì)、改善黏膜損傷的作用，青黛和兒茶具有化腐斂瘡生肌、清熱解毒的功效?？鄥⒑忘S柏具有殺菌、抗炎、抗?jié)兒涂共《镜淖饔?，對相關(guān)的炎癥因子TNF-α、MCP-1和IL-1β具有較好的抑制作用。青黛也具有抗炎抗菌的效果，和白岌、三七合用，能夠快速止血，保護(hù)腸黏膜，還能夠解除腸道的高凝狀態(tài)。爐甘石能夠改善創(chuàng)面血液微循環(huán)，縮小創(chuàng)面面積和促進(jìn)新生毛細(xì)血管生成。

在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)青赤散在組織學(xué)改變上取得了令人滿意的結(jié)果。通過HE染色結(jié)果顯示，與模型組對比，低劑量青赤散和中劑量青赤散小鼠結(jié)腸組織中隱窩、腺體和黏膜結(jié)構(gòu)明顯好轉(zhuǎn)，炎癥細(xì)胞浸潤明顯減少；與中劑量青赤散相比，高劑量青赤散小鼠結(jié)腸組織中隱窩、腺體和黏膜結(jié)構(gòu)出現(xiàn)規(guī)則狀態(tài)，并且排列整齊，炎癥細(xì)胞浸潤顯著減少；且與模型組相比，低劑量青赤散、中劑量青赤散和高劑量青赤散的病理學(xué)評分顯著降低，高劑量青赤散的病理學(xué)評分降低最為明顯。相關(guān)研究［13］表明，青赤散灌腸可能通過降低UC大鼠血清LPS、TNF-α含量，減少結(jié)腸上皮細(xì)胞凋亡，而起到治療UC的作用。本研究中，RT-PCR實驗檢測結(jié)果顯示，低劑量青赤散組、中劑量青赤散組和高劑量青赤散組小鼠結(jié)腸組織中TNF-α、MCP-1和IL-1βmRNA的相對表達(dá)量明顯低于模型組，高劑量青赤散中TNF-α、MCP-1和1L-1βmRNA的表達(dá)與模型組相比最低，從而說明青赤散不僅改變了小鼠的組織形態(tài)學(xué)，同時降低了相關(guān)的炎癥因子，而且高劑量的青赤散在組織學(xué)改變和降低炎癥因子方面效果最為明顯。

完整的腸黏膜屏障由上皮屏障、化學(xué)屏障、免疫屏障和微生物屏障組成，是機(jī)體防御的關(guān)鍵。在炎癥性腸病中，UC黏膜屏障的破壞可能會加劇腸道共生微生物和毒素的入侵。腸損傷上皮屏障破壞被認(rèn)為是UC病理生理學(xué)的標(biāo)志。黏液層是腸道的另一個重要的黏膜屏障組成部分，黏液是由杯狀細(xì)胞產(chǎn)生的，通常含有黏液蛋白，而腸內(nèi)主要黏液成分為MUC2黏液蛋白。研究［14］顯示，腸道MUC2蛋白缺乏會導(dǎo)致結(jié)腸炎的發(fā)生。因此，恢復(fù)黏液層的厚度以及杯狀細(xì)胞的數(shù)量可能是治療UC的有效方法。相關(guān)研究［15］表明，Notch信號通路介導(dǎo)細(xì)胞命運(yùn)的決定和模式，Notch和Hes1特異性表達(dá)于腸隱窩。相關(guān)研究［16］表明，Notch下游效應(yīng)物Hes1和ATOH1在調(diào)節(jié)腸上皮細(xì)胞發(fā)育和體內(nèi)平衡中是必需的。我們的研究結(jié)果表明，給予高劑量青赤散的小鼠結(jié)腸組織中Notch和Hes1蛋白相對表達(dá)量明顯降低，ATOH1和MUC2蛋白明顯升高，使用高劑量青赤散的杯狀細(xì)胞最多，F(xiàn)ITC-D含量也最低。

綜上所述，青赤散能夠降低FITC-D含量，改善小鼠結(jié)腸組織病理學(xué)變化和Notch信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)，降低TNF-α、MCP-1、IL-1β的相關(guān)炎癥水平，增加小鼠結(jié)腸組織中杯狀細(xì)胞數(shù)量，其中高劑量的青赤散效果最為明顯，提示高劑量的青赤散對DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎具有多種保護(hù)作用，主要通過Notch信號通路來減輕腸道炎癥，恢復(fù)結(jié)腸屏障功能。