王自然，郭 俊，李進(jìn)學(xué)，楊建東，毛加梅，楊 帆，趙 俊，岳建強(qiáng)

(云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶亞熱帶經(jīng)濟(jì)作物研究所，云南德宏，678600)

灰霉病是重要經(jīng)濟(jì)作物的主要病害之一，主要由葡萄孢屬灰葡萄孢真菌Botrytiscinerea引起[1]?；移咸焰呤堑湫偷乃荔w營(yíng)養(yǎng)型真菌[2-3]，能殺死植物細(xì)胞后獲取養(yǎng)分，引起植物組織腐爛[4-5]。美國(guó)、新西蘭和日本均證實(shí)灰葡萄孢菌B.cinerea能在柑桔花期感染花瓣引起腐爛，腐爛花瓣黏附在幼果上，致使幼果表皮形成凹陷斑點(diǎn)或斑塊[6-7]。國(guó)內(nèi)朱麗等[8-9]也研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，柑桔花瓣灰霉腐爛與果實(shí)表面疤痕有關(guān)。全球每年因灰霉病造成的經(jīng)濟(jì)損失達(dá)100億～1 000億美元，被列為十大植物真菌病害之一[10]。檸檬Citruslimon屬蕓香科柑桔屬枸櫞檸檬類果樹(shù)，是柑桔中的第三大水果。云南省是我國(guó)第二大檸檬產(chǎn)區(qū)，其檸檬種植主要分布在德宏、保山、普洱、曲靖等干濕熱氣候區(qū)域[11]，一年四季均可開(kāi)花掛果?；颐共∈怯绊憴幟使尜|(zhì)量的主要病害之一。國(guó)內(nèi)檸檬灰霉病防控研究主要為防控藥劑篩選[12-14]，但防控關(guān)鍵時(shí)間節(jié)點(diǎn)一直未能提出。為了實(shí)現(xiàn)檸檬灰霉病的高效防控，筆者開(kāi)展了防控藥劑篩選和防控時(shí)期的研究。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)毒力測(cè)定按照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測(cè)定試驗(yàn)準(zhǔn)則 殺菌劑 第2部分：抑制病原真菌菌絲生長(zhǎng)試驗(yàn) 平皿法》(NY/T 1156.2—2006)開(kāi)展試驗(yàn)。

供試檸檬灰霉病菌分離自云南檸檬綜合試驗(yàn)站基地內(nèi)，純化培養(yǎng)后，經(jīng)柯赫氏法則驗(yàn)證其致病性，再將菌種接種于PDA培養(yǎng)基中，在24 ℃、相對(duì)濕度90%條件下培養(yǎng)5 d，菌絲長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿后用0.4 cm打孔器取菌餅備用。

供試藥劑：① 32%戊唑醇·嘧菌酯懸浮劑(12%嘧菌酯+2%戊唑醇，新勢(shì)威，北京富力特農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司)；② 50%腐霉利可濕性粉劑(國(guó)光，四川潤(rùn)爾科技有限公司)；③ 50%異菌脲可濕性粉劑(撲海因，蘇州富美實(shí)植物保護(hù)劑有限公司)；④ 0.3%丁子香酚可溶液劑(灰滅，江蘇省南通神雨綠色藥業(yè)有限公司)；⑤ 50%啶酰菌胺水分散粒劑(凱澤，德國(guó)巴斯夫公司)；⑥ 40%嘧霉胺懸浮劑(施佳樂(lè)，德國(guó)拜耳公司)。各藥劑配制的濃度梯度均為0.04、0.2、1、5、100 mg/L，以清水為對(duì)照，共31個(gè)處理。

每處理以3皿為一個(gè)重復(fù)，3次重復(fù)，共9皿。將含藥培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基分別接種菌餅后，放置在24 ℃、相對(duì)濕度90%條件下培養(yǎng)。接種后第3天(72 h)用“十字交叉法”測(cè)量菌落直徑，并計(jì)算灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率。

1.2 田間不同時(shí)期防控試驗(yàn)試驗(yàn)于2019年進(jìn)行。檸檬灰霉病主要在春花開(kāi)花期發(fā)生，因此，以檸檬春花現(xiàn)蕾期至果實(shí)膨大期不使用任何殺菌劑為對(duì)照(CK)，設(shè)計(jì)5個(gè)防控時(shí)期進(jìn)行藥劑全株噴霧處理。除對(duì)照外，其他各處理均使用化學(xué)藥劑2次：第1次使用50%啶酰菌胺WG 1 500倍液全株噴霧，第2次使用50%異菌脲1 000倍液全株噴霧。防控時(shí)期處理1為在春花現(xiàn)蕾期(2019年2月3日)施用第1次藥，間隔20 d(2019年2月23日)施用第2次藥；處理2為在春花初花期(開(kāi)花量小于1/3，2019年3月4日)施用第1次藥，間隔20 d(2019年3月24日)施用第2次藥；處理3為在春花盛花期(開(kāi)花量1/2～2/3，2019年3月28日)施用第1次藥，間隔20 d(2019年4月17日)施用第2次藥；處理4為在春花謝花期(謝花2/3以上，2019年4月25日)施用第1次藥，間隔20 d(2019年5月15)施用第2次藥；處理5為在春花果第二次生理落果結(jié)束期(2019年5月20)施用第1次藥，間隔20 d(2019年6月9)施用第2次藥。隨機(jī)選定一個(gè)區(qū)域內(nèi)3行共21株作為一個(gè)處理進(jìn)行全株均勻噴霧。

在檸檬果實(shí)膨大期(果實(shí)縱徑大于1.0 cm，2019年8月24日)，以每個(gè)處理區(qū)域第二行的中間5株作為調(diào)查樣株。按照檸檬果面灰霉病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)，果面無(wú)灰霉病病斑；1級(jí)，灰霉病病斑面積占果面的5%以下；3級(jí)，灰霉病病斑面積占果面的6%～10%；5級(jí)，灰霉病病斑面積占果面的11%～25%；7級(jí)，灰霉病病斑面積占果面的26%～50%；9級(jí)，灰霉病病斑面積占果面的50%以上，調(diào)查灰霉病為害情況。每個(gè)樣株按東、西、南和北4個(gè)方位，每個(gè)方位分別按上、中和下3個(gè)部位隨機(jī)選定2個(gè)縱徑在1.0～1.5 cm的果實(shí)作為調(diào)查對(duì)象，每株調(diào)查24個(gè)果，每個(gè)處理共調(diào)查120個(gè)果實(shí)。調(diào)查記錄灰霉病為害果數(shù)，每個(gè)果為害級(jí)別，并計(jì)算病情指數(shù)和相對(duì)防治效果。計(jì)算公式為：病情指數(shù)=100×∑(各級(jí)病果數(shù)×各級(jí)代表值)/(調(diào)查總果數(shù)×最高級(jí)代表值)；相對(duì)防治效果(%)=(對(duì)照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/ 對(duì)照病情指數(shù)×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 6種殺菌劑的室內(nèi)毒力試驗(yàn)結(jié)果看出，供試殺菌劑濃度在 0.04和0.20 mg/L 時(shí)，40%嘧霉胺 SC對(duì)檸檬灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率均最大，分別為19.93%和37.09%；濃度在1、5和100 mg/L時(shí)，均以50%啶酰菌胺 WG 的抑制率最大，分別為57.96%、81.48%和97.53%(見(jiàn)表1)。

表1 不同濃度供試藥劑對(duì)檸檬灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率 %

毒力回歸分析結(jié)果看出，50%啶酰菌胺WG、40%嘧霉胺SC和0.3%丁子香酚SL對(duì)檸檬灰霉病菌均具有較強(qiáng)的毒力，其次為50%異菌脲WP和32%戊唑醇·嘧菌酯 SC，再次為50%腐霉利 WP(見(jiàn)表2)。

表2 供試藥劑對(duì)檸檬灰霉病菌的毒力回歸方程(48 h)

2.2 大田不同時(shí)期施藥的防控效果在檸檬春花的顯蕾期至謝花期進(jìn)行第1次施藥的處理，灰霉病的發(fā)病率和病情指數(shù)均明顯低于對(duì)照(CK)，防控效果在54.35%～87.25%之間，在初花期和盛花期開(kāi)始第1次施藥的處理防控效果(80%以上)顯著高于其他處理；在第二次生理落果后才進(jìn)行第1次施藥的處理，病情指數(shù)與對(duì)照無(wú)顯著差異，幾乎沒(méi)有防控效果(見(jiàn)表3)。可見(jiàn)，檸檬初花至盛花是防控灰霉病用藥關(guān)鍵期。

表3 檸檬春花不同時(shí)期施藥對(duì)灰霉病的防控效果

3 討論

檸檬灰霉病主要在檸檬春花開(kāi)花期發(fā)生。檸檬開(kāi)花期，花柱頭裸露在外，尤其此時(shí)遇到果園溫度降低、濕度增大，會(huì)大大加重灰霉病發(fā)生概率，因此，初花至盛花是防控灰霉病的關(guān)鍵時(shí)期。檸檬開(kāi)花期，果園連續(xù)2 d或以上遇低溫、連續(xù)陰雨天氣，或露水較大，應(yīng)加強(qiáng)灰霉病的防控。

檸檬果面灰霉病病斑是以死體營(yíng)養(yǎng)型的真菌菌絲侵染所致，因此應(yīng)以關(guān)鍵防控期化學(xué)防控為主，輔以農(nóng)業(yè)防控才能起到較好的防控效果。秋冬季，應(yīng)結(jié)合柑桔修剪和清園工作，徹底剪除樹(shù)上殘枝、殘葉，并清除桔園內(nèi)枯枝、落葉和落果，帶出園外燒毀，盡量減少病源。生產(chǎn)中，還應(yīng)通過(guò)合理修剪和整枝增強(qiáng)桔園通風(fēng)透光性，降低園內(nèi)濕度，減少病菌侵染機(jī)會(huì)。當(dāng)檸檬園處于開(kāi)花期，遇溫度驟降，濕度增大，尤其是出現(xiàn)連續(xù)陰雨天氣時(shí)，需及時(shí)噴藥防控，可選用的藥劑有啶酰菌胺WG、異菌脲WP、32%戊唑醇·嘧菌酯SC、嘧霉胺SC以及腐霉利WP等。