張夢鴿

（山西省運(yùn)城市畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心 044000）

布魯氏桿菌病又被稱為布氏桿菌病，是一種由布氏桿菌引起的慢性人畜共患傳染病，世界動物衛(wèi)生組織將其稱作B 類動物疫病，很大程度上阻礙奶牛業(yè)的發(fā)展[1]。而且需要注意的是，奶牛布魯氏桿菌病同樣可以傳染人類，進(jìn)而對人類健康造成威脅，同樣需要引起廣泛重視。

1 奶牛布魯氏桿菌病的基本分析

1.1 布魯氏桿菌病病因分析

布魯氏桿菌?。˙rucellosis）是由布魯氏桿菌（Brucella）引起的具有傳染性人畜共患病。普通家畜均為其易感動物。在我國流行的菌株中主要以牛種、羊種布魯氏菌為主，其中牛種布魯氏菌病對奶牛業(yè)危害最為嚴(yán)重。該病具有極高致病性，通常呈現(xiàn)地方流行性。布魯氏桿菌病的傳染源主要在于患病奶牛及其他帶菌動物，敏感性強(qiáng)，但對溫度十分敏感，沸水即可殺死布魯氏桿菌。同時(shí)，布魯氏桿菌病轉(zhuǎn)移性極強(qiáng)。布魯氏桿菌病主要通過消化道進(jìn)行傳播，當(dāng)奶牛接觸患病奶?；虮黄湮廴镜娘暳?、乳汁、分泌物甚至地面土壤后均可能會造成一定的程度感染。而人類如果缺乏必要的消毒防護(hù)措施，貿(mào)然接觸患病奶?；蛳嚓P(guān)動物源性食品，布魯氏桿菌會透過人類皮膚黏膜侵入呼吸道及結(jié)膜等，促使人類感染布魯氏桿菌病[2]。對于奶牛而言，布魯氏桿菌病的主要特征在于母牛流產(chǎn)，產(chǎn)出死胎或脆弱犢牛。

1.2 布魯氏桿菌病臨床表現(xiàn)

布魯氏菌病主要侵害奶牛自身生殖系統(tǒng)，引發(fā)一系列繁殖障礙等疾病。懷孕母畜經(jīng)常以發(fā)生流產(chǎn)現(xiàn)象為主，引起關(guān)節(jié)炎、子宮炎、腹膜炎等炎癥，甚至可能會造成奶牛不孕等情況。對于感染布魯氏桿菌病奶牛所出現(xiàn)流產(chǎn)問題，可能會出現(xiàn)在其中任何環(huán)節(jié)，孕育奶牛流產(chǎn)前期便會出現(xiàn)無法正常休息、食欲不振等情況；新生犢牛一般可以見到肺炎病灶；公牛也可被感染，公牛感染后會出現(xiàn)睪丸炎等情況，一般不易被發(fā)現(xiàn)。人類如果感染上布魯氏桿菌病一般表現(xiàn)為渾身無力、低燒、生殖系統(tǒng)障礙等疾病，嚴(yán)重者可終身喪失勞動力甚至死亡，需要引起重視，及時(shí)預(yù)防。

2 奶牛布魯氏桿菌病的診斷方法

2.1 細(xì)菌學(xué)診斷

通過分離布魯氏桿菌培養(yǎng)、涂片染色進(jìn)行診斷的試驗(yàn)方法。其中標(biāo)本采集是重中之重。選取適宜的抗生素在合適的部位按照相關(guān)試驗(yàn)要求完成采集工作，采樣結(jié)束接種于培養(yǎng)基培養(yǎng)。對比所形成的菌落與布魯氏桿菌的生物特性進(jìn)行鑒別；涂片染色通常是將血液等組織制作成涂片，采取沙黃、亞甲藍(lán)鑒別法進(jìn)行染色，顯微鏡下觀察染色情況，如果被染成紅色，那么證明檢驗(yàn)的細(xì)菌為布魯氏桿菌，如果呈現(xiàn)藍(lán)色，則證明所檢驗(yàn)細(xì)菌為其他細(xì)菌。細(xì)菌學(xué)診斷準(zhǔn)確性高，但存在潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)，因此，要求相關(guān)人員有一定的專業(yè)基礎(chǔ)。

2.2 虎紅平板凝聚試驗(yàn)

虎紅平板凝聚試驗(yàn)（RBPT）又被稱為班氏孟加拉紅平板凝集試驗(yàn)，是一種較為簡單便捷的檢測方式，常常應(yīng)用于陽性牛的初步篩選[3]。檢測布魯氏桿菌病所使用的抗原是經(jīng)過虎紅染料染色后懸浮于乳酸緩沖液中制備而成，所以呈現(xiàn)粉紅色。通過血清對照進(jìn)行判斷，如果受檢血清在4min 內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象則判為陽性；如果無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色則判為陰性?；⒓t平板凝聚試驗(yàn)雖然會出現(xiàn)假陰性等缺點(diǎn)，但有靈敏性高、操作簡單、成本低的優(yōu)勢，是布魯氏桿菌病常用的監(jiān)測手段之一。

2.3 試管凝集反應(yīng)

試管凝集反應(yīng)主要適用于實(shí)驗(yàn)室操作，是一種較為快速的診斷方法。試管凝集反應(yīng)經(jīng)常用于定量試驗(yàn)。通過將抗原與受稀釋的奶牛待測血清混合放置，觀察凝集現(xiàn)象，以此來確定血清中是否存在該抗體和該抗體的含量。該方法易受外界因素的影響，容易出現(xiàn)假陽性和假陰性的結(jié)果。

2.4 奶牛布病快速診斷試紙條

奶牛布病快速診斷試紙條又被稱為膠體金法快速診斷試紙，是當(dāng)前我國用于檢測布魯氏桿菌病的一種新型診斷方法。經(jīng)常用于奶牛場隨時(shí)初次檢驗(yàn)，奶牛場防疫工作人員可以通過奶牛布病快速診斷試紙條對牛群布魯氏桿菌病患病情況進(jìn)行初步檢驗(yàn)，簡單快速，而且試管凝聚方法的符合率很高，是現(xiàn)階段進(jìn)行布魯氏桿菌病檢測的常用方法。

2.5 ELISA 反應(yīng)法

ELISA 反應(yīng)法通常采用固相載體表面抗原與抗體的特異結(jié)合，在酶的作用下底物發(fā)生顏色變化。測定對象可以是抗體也可以是抗原。ELISA 反應(yīng)法包括間接法、雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、競爭法、阻斷法等。ELISA 反應(yīng)法的優(yōu)勢在于其準(zhǔn)確率高，出錯率低且判定簡單。

2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

實(shí)時(shí)熒光定量PCR 技術(shù)是在分子水平上對病原進(jìn)行鑒定，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，較細(xì)菌學(xué)、血清學(xué)相比有更高的安全性，可以同時(shí)對大批樣品進(jìn)行檢測。隨著非洲豬瘟的流行，分子病原學(xué)檢測技術(shù)已普及到縣（市、區(qū)）級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，在未來實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測會成為主流監(jiān)測手段。

3 奶牛布魯氏桿菌病的防控措施

3.1 確保衛(wèi)生，定期消毒檢查

需要明確的是，奶牛布魯氏桿菌病病因復(fù)雜，近年來，發(fā)病率也在逐漸上升，對畜牧業(yè)造成極大威脅，而人類一旦患病，嚴(yán)重時(shí)可危及生命，對畜牧業(yè)和公共衛(wèi)生安全造成不可估量的經(jīng)濟(jì)損失，所以必須引起重視。當(dāng)前對布魯氏桿菌病缺乏切實(shí)有效的藥物，主要以預(yù)防為主。衛(wèi)生是第一大關(guān)，保證養(yǎng)殖場環(huán)境安全衛(wèi)生才能保證奶牛健康成長，避免因環(huán)境問題加劇布魯氏桿菌病。

對于奶牛養(yǎng)殖場而言，應(yīng)設(shè)立獨(dú)立的消毒通道，確定無菌空間。工作人員進(jìn)出奶牛場需進(jìn)行消毒；對奶牛場養(yǎng)殖環(huán)境定期消毒；應(yīng)科學(xué)合理的喂食奶牛飼料提高奶牛自身免疫力；每天清理奶牛糞便，如果需要積累肥料，也應(yīng)做好糞便無害化處理，搞好衛(wèi)生消毒，提供安全的奶牛生活環(huán)境。

3.2 管理嚴(yán)格，避免交叉感染

在保證奶牛安全的生活環(huán)境基礎(chǔ)上，應(yīng)對奶牛進(jìn)行定期免疫，同時(shí)進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測監(jiān)督奶?？贵w水平，抗體不達(dá)標(biāo)時(shí)應(yīng)注意加強(qiáng)免疫等工作。定期進(jìn)行布魯氏桿菌病檢測工作，避免染病奶牛進(jìn)入奶牛養(yǎng)殖場。布魯氏桿菌病對奶牛自身傷害極大，而且具有極強(qiáng)污染性，所以應(yīng)定期進(jìn)行分子病原學(xué)檢測，確保沒有布魯氏桿菌病原。對已感染布魯氏桿菌病的奶牛，由于很容易進(jìn)行傳染，必須采取撲殺方式，并進(jìn)行消毒處理，確保凈化可靠，只有保證安全無菌的奶牛生活環(huán)境，嚴(yán)格管控奶牛養(yǎng)殖場，才能避免患病奶牛發(fā)生交叉感染情況，將布魯氏桿菌病進(jìn)一步擴(kuò)大。

奶牛養(yǎng)殖場工作人員應(yīng)確保自身健康，定期進(jìn)行體檢，布魯氏桿菌病不僅能傳染動物，也能傳染人類，所以在整個奶牛養(yǎng)殖過程必須做好自身防護(hù)工作，奶牛養(yǎng)殖場應(yīng)避免非工作人員進(jìn)入奶牛養(yǎng)殖場。

3.3 強(qiáng)化根除，科學(xué)飼養(yǎng)奶牛

奶牛養(yǎng)殖場工作人員確保衛(wèi)生消毒，以及奶牛養(yǎng)殖場環(huán)境確保定期檢查的基礎(chǔ)上，奶牛養(yǎng)殖場應(yīng)適當(dāng)采取科學(xué)飼養(yǎng)方式，提高奶牛自身免疫力，同時(shí)避免引進(jìn)外部奶牛，而是采取自繁自養(yǎng)，從源頭處防控布魯氏桿菌病。對奶牛進(jìn)行科學(xué)合理的疫苗接種，一般奶牛在牛犢出生后6 個月就可以采取一次疫苗接種，18 個月可以進(jìn)行二次接種疫苗，切實(shí)確保安全健康。

4 結(jié)論

綜上所述，預(yù)防奶牛布魯氏桿菌病對保障奶牛健康和人類安全十分重要。對現(xiàn)階段布魯氏桿菌病診斷方法應(yīng)針對不同情況用以試驗(yàn)檢測，奶牛養(yǎng)殖場工作人員也應(yīng)予以重視，做到科學(xué)養(yǎng)殖，嚴(yán)格消毒，確保環(huán)境安全衛(wèi)生，全方位防控布魯氏桿菌病，提升奶牛布魯氏桿菌病自身防控水平。