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豬藍耳病的免疫挑戰(zhàn)

2021-12-03 03:17謝璐娜福建省龍巖市動物疫病預防控制中心福建龍巖364000
福建畜牧獸醫(yī) 2021年1期
關鍵詞:耳病活疫苗毒株

謝璐娜 福建省龍巖市動物疫病預防控制中心 福建龍巖 364000

豬繁殖與呼吸障礙綜合征(PRRS),是一種由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的高度接觸性傳染病,其主要表現(xiàn)為母豬的繁殖能力下降,出現(xiàn)流產、早產等癥狀,以及生長育肥豬出現(xiàn)耳部發(fā)紫、呼吸困難等臨床癥狀。該病發(fā)病率及病死率高,對我國養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經濟損失。

1994 年, 全球第一個商品化豬藍耳病疫苗問世。 目前世界上商品化PRRS 疫苗有滅活疫苗和弱毒活疫苗兩類。

滅活疫苗是無毒力的獲得病原微生物。 滅活疫苗比較安全, 免疫保護時間較長。 缺點是保護力不強,誘導有效免疫力的能力差,抗體產生速度慢。 而弱毒活疫苗為低毒力的活的病原微生物。 接種弱毒活疫苗后,病原微生物在體內復制、增殖進而刺激機體產生抗體, 弱毒活疫苗既可以刺激機體的細胞免疫,又可以刺激機體產生體液免疫,其刺激機體產生抗體速度快, 保護力強。 弱毒活疫苗可以幾乎完全保護同源病毒株的攻擊, 對同個基因型異源病毒株的攻擊也能提供部分保護。既往研究表明,弱毒活疫苗可以明顯減輕同基因型異源病毒株攻擊后產生的臨床癥狀(如高熱、肺部病理改變減輕,促進豬的體重增加),但不能抑制病毒感染[1]。 攻毒試驗表明,免疫弱毒活疫苗后可明顯降低病毒血癥的持續(xù)時間和病毒滴度,種豬精液排毒減少[2-3]。 與滅活疫苗相比,弱毒活疫苗安全性是其使用的最大問題。 研究者發(fā)現(xiàn)弱毒活疫苗免疫良好的農場仍可發(fā)生嚴重的PRRS 暴發(fā)[4]。 弱毒活疫苗存在返強的可能,能夠向外擴散病毒,也容易出現(xiàn)疫苗株變異和重組。 因此,目前弱毒活疫苗并不能完全有效控制和消滅藍耳病。 藍耳病免疫防控過程中困難重重, 現(xiàn)對該病面臨的免疫挑戰(zhàn)進行簡要概述,僅供參考。

1 豬藍耳病病毒的多樣性與變異性

豬藍耳病病毒主要有兩個基因型:基因1 型(也稱為歐洲型)和基因2 型(也稱為北美洲型)。這兩個基因型的全基因組有大約60%的相似性,兩者之間存在顯著的抗原差異性[5]。 豬藍耳病病毒具有廣泛的變異性和毒株的多樣性, 不同毒株之間在毒力和致病性上有明顯的差異。 目前關于遺傳相似性的研究主要集中在該病毒的開放讀碼框5(ORF5)上。 豬藍耳病病毒在外界環(huán)境條件的影響和免疫壓力下,ORF5 極易發(fā)生變異, 目前報道的2 型病毒就有超過13 000 種ORF5 序列。 更重要的是,目前兩個基因型的病毒株仍在不斷發(fā)生變異, 其多樣性仍在增加。 2006 年, 我國出現(xiàn)2 型高致病性毒株 (HPPRRSV),使我國多個省暴發(fā)嚴重的豬疫情,造成嚴重的經濟損失。高致病性毒株在致病性、遺傳多樣性方面均發(fā)生了很大的變化, 雖然之后開發(fā)了相應的商品化疫苗, 但一直未能改變我國PRRSV 廣泛流行和發(fā)病的現(xiàn)狀,且新的變異毒株還在不斷出現(xiàn)。

2 免疫逃逸

感染PRRSV 的豬表現(xiàn)為急性感染期和持續(xù)感染狀態(tài),該病毒具有多種免疫抑制和免疫逃逸策略,因而該病也被認為是一種免疫抑制性疾病。 首先,PRRSV 可以通過抑制I 型干擾素的分泌及信號傳導,從而抑制先天性免疫。 在體液免疫方面,PRRSV可以選擇性抑制和延遲宿主中和抗體的產生。PRRSV 對應的中和抗體往往要在病毒感染一個月后才會出現(xiàn)[6]。 此外,PRRSV 還能抑制細胞免疫。 外周血中IFNγ 分泌細胞(IFN-γ-SC)的變化特征可用于監(jiān)測PRRS 特異性細胞免疫應答狀態(tài)。 以往研究發(fā)現(xiàn),PRRSV 感染或免疫8~10 周后才能檢測到IFN-γ-SC 細胞,與其他豬的病毒相比顯得更緩慢[7]。

3 對機體的免疫保護機制認識不完全

大多數(shù)豬在感染5~6 個月后可以清除體內的PRRSV[8],說明豬的免疫系統(tǒng)可以對病毒感染和其導致的疾病起保護作用。研究顯示,體液免疫和細胞免疫都參與了豬體的免疫保護。 豬接觸PRRSV 后,產生一系列的特異性抗體, 首次感染后有助于避免再次感染。但是產生的抗體中,起中和作用的抗體產生速度慢、滴度低,并且存在抗體依賴性增強作用,使PRRSV 呈現(xiàn)長期的持續(xù)性感染, 說明體液免疫的保護作用并不完全[9]。

經疫苗免疫接種后的豬, 在不產生中和抗體的情況下,仍能對攻毒產生保護作用,說明細胞介導的免疫反應可能對PRRSV 起到很重要的保護作用。有假設認為,對細胞免疫效果有重要影響的是T 細胞的質量而不是其數(shù)量[1]。 但是疫苗免疫后是哪種分型的T 細胞起作用, 以及其作用機制尚不清楚。此外, 每一個PRRSV 的結構蛋白在病毒的感染和免疫原性等作用不同[10-11],目前對不同結構蛋白的結構和功能的認識仍不完全。

4 缺乏有效的疫苗評價體系, 免疫效果評價指標難以確定

由于PRRSV 基因的多樣性和高突變性, 因此在疫苗開發(fā)時能產生免疫保護的病毒株的種類和數(shù)量的選擇十分重要。 早期研究曾使用疫苗毒株和動物感染毒株間ORF5 序列的相似性來預測疫苗的保護效果[12]。但是,多大的基因相似度可以起保護作用目前尚無定論。此外,疫苗對相同毒株或者相近毒株的免疫保護并不是完全的, 同源保護的效果仍需更多研究。

常用的抗體監(jiān)測不能對豬藍耳病疫苗的保護效果作出準確評估。一般在豬藍耳病疫苗免疫14 d 后可以檢測到豬藍耳病抗體, 但此時的抗體不是中和抗體,與保護率無相關性,且中和抗體的檢測費時費力。 目前豬藍耳病疫苗最有效的評價方法是通過免疫攻毒效力檢驗試驗評估的。 此外,PRRSV 的含量與免疫攻毒保護之間為正相關關系,因此,病毒含量測定可以作為疫苗攻毒效力檢驗方法的替代方法。然而無論是病毒含量測定,還是免疫攻毒保護試驗,在我國大規(guī)模存在的中小企業(yè)中都無法進行相應評估,疫苗的實際使用效果難以評價,大大阻礙了疫苗的研發(fā)。

總之,由于PRRSV 特殊的免疫學特征,給疫苗研制帶來了很大的困難。 我們迫切需要開發(fā)更加安全有效、免疫譜更廣的疫苗。隨著分子生物學的發(fā)展以及對PRRSV 基因結構的不斷了解, 使基因工程疫苗的研發(fā)成為可能。 近年來,嵌合病毒疫苗、DNA疫苗和亞單位疫苗的研究工作逐漸增加并深入,為研究PRRS 疫苗開辟了新天地。

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