李江鵬

(桂林市人民醫(yī)院，廣西 桂林，541000)

免疫組織化學(xué)指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，也是對相應(yīng)抗原進行定性、定位和定量測定的一種新技術(shù)[2]。免疫組織化學(xué)檢測陽性對照合理設(shè)置的情況下，不僅能夠有效提高敏感性、特異性和穩(wěn)定性的情況下，也能夠?qū)γ庖呓M織化學(xué)檢測的質(zhì)量進行有效控制[3]。臨床中免疫組織化學(xué)檢測常用的陽性對照包括組織內(nèi)陽性對照、單個組織陽性對照等?；诖耍疚木兔庖呓M織化學(xué)檢測陽性對照的應(yīng)用現(xiàn)狀與進展展開分析，內(nèi)容如下。

1 應(yīng)用現(xiàn)狀

在楊紅麗[4]等人的研究中，選取800例PD-L1免疫組織化學(xué)切片,分別統(tǒng)計分析陽性率＜1%,1%～49%,≥50%的患者。結(jié)果顯示：PD-L1陽性率＜1%、1%～49%、≥50%的患者分別占63.88%(511/800)、29.38%(235/800)、6.75%(54/800)。可以得出免疫學(xué)組織檢測腫瘤患者具有良好效果。陽性對照組種類包含了組織內(nèi)陽性對照、單個組織陽性對照、組織芯片陽性對照、多組織對照體系對照、多組織羊膜卷陽性對照、組織碎片懸液陽性對照以及細胞系液態(tài)陽性對照等。其中組織內(nèi)陽性對照主要是等到檢測的正常組織可以表達目的抗原，將該組織作為陽性對照，也就是組織內(nèi)進行對照。在進行檢測的過程中，此種陽性對照組方法要優(yōu)于外對照，因為組織內(nèi)陽性對照的蛋白表達相對比較穩(wěn)定，而且該組織和等待檢測組織細胞分析前后的參數(shù)是抑制的，并不用再選取其他陽性組織進行對照切片，一定程度上可以節(jié)約時間與成本。不過該檢測方式也存在一定問題，比如不是所有的組織都能夠進行該方式對照。

單個組織陽性對照，此種對照方式是挑選抗體陽性的組織蠟塊，并選擇具有代表性的區(qū)域，和等待檢測組織一起進行檢測。此種檢測方式主要是和等到檢測組織放在同一載玻片上，操作相對而言比較簡單。不過此種檢測方式需要耗費比較大的人力物力制作切片，而且對半定量的指導(dǎo)性有著一定局限性，比如針對乳腺癌一些指標結(jié)果的判定。組織芯片陽性對照，在相關(guān)研究中顯示，該方式主要是需要挑選具有明確陽性的組織蠟塊和相應(yīng)切片，并選擇最有代表性的區(qū)域[5]。在進行此種方式檢測過程中，需要在切片上進行標記，并使用組織芯片將芯柱取出來之后放在提前設(shè)計好的蠟塊上，并將其放在平整的操作臺上，最后放置在溫箱中。此外是組織碎片懸液陽性對照，在相關(guān)研究中顯示，進行檢測期間需要選擇腫瘤豐富陽性組織蠟塊，連續(xù)切片后放入50ml的干凈燒杯中，并用玻璃棒輕輕攪碎，后進行溶解于離心等一系列操作后制成懸液，將其滴在空白載玻片上，染色后觀察細胞分布情況[6]。

在陳培瓊[7]等人的研究中，多組織對照體系對照檢測手機外檢的闌尾、結(jié)腸腺癌以及甲狀腺等組織，經(jīng)過4%中性甲醛液的固定，以及常規(guī)脫水、浸蠟、包埋等方式，選擇明確病例診斷結(jié)果剩余的標本進行試驗。此種檢測方式具有組織靈活自由的特點，將平時取材后剩余的組織進行檢測就可以，并不需要耗費大量人力物力，不過在制作過程中需要進行取材、固定和脫水等程序。細胞系液態(tài)陽性對照是臨床中應(yīng)用效果較好的方法，能夠批量培養(yǎng)不同種類抗原細胞，以及生產(chǎn)不同抗體陽性對照。在李韜等人的研究中，采用已知的HER-2免疫組織化學(xué)染色呈強陽性的乳腺癌，胃癌組織制作液態(tài)陽性對照，在3個月內(nèi)的不同時間將制作的液態(tài)陽性對照進行HER-2免疫組織化學(xué)染色并實際用于乳腺癌。結(jié)果顯示：HER-2免疫組織化學(xué)染色的液態(tài)陽性對照在保存3個月內(nèi)不同時間的檢測結(jié)果有良好的一致性，用于腫瘤組織HER-2免疫組織化學(xué)染色結(jié)果判讀效果較好[8]。由以上結(jié)果可以得出，此種檢測方式有著良好效果。

2 應(yīng)用進展

根據(jù)免疫組織化學(xué)檢測判讀原則的而不同可以分為定性和半定量兩種，其中定性主要用在病例診斷中，此種方式只需要作出陰性和陽性的判斷。而半定量主要用于腫瘤組織中激素受體蛋白和藥敏試驗等檢測中，該方式在臨床治療中有著重要作用[9]。免疫組織化學(xué)檢測具有準確和快速的特點，使得其在臨床診斷中得到廣泛應(yīng)用，能夠進一步診斷腫瘤良性惡性、一些感染性疾病、臨床用藥指導(dǎo)以及對預(yù)后的評估等，均有良好應(yīng)用效果。隨著臨床醫(yī)學(xué)水平不斷進步與發(fā)展的基礎(chǔ)上，免疫組織化學(xué)檢測在臨床靶向治療的靶標篩選中也起到一定作用，能夠更好地輔助醫(yī)師進行藥物選擇，提高治療的科學(xué)性和安全程度。在進行免疫組織化學(xué)檢測的過程中，對照的選擇、切片處理、脫蠟效果以及載玻片的選擇都直接影響著最終檢測結(jié)果。所以在進行檢測的過程中，應(yīng)當進一步提高實驗室內(nèi)部合理布局，并對檢測技術(shù)人員與醫(yī)師進行定期培訓(xùn)，提高檢測規(guī)范性。

3 總結(jié)

免疫組織化學(xué)檢測屬于一種過程性的指標，在進行檢測的過程中需要保證每一步的操作都具有規(guī)范性，并設(shè)置合理的對照，這樣才能夠提高實驗檢測的科學(xué)性，為患者的后續(xù)治療提供依據(jù)[10]。在進行免疫組織化學(xué)檢測的過程中，對照設(shè)置是控制該檢測質(zhì)量的主要內(nèi)容，也是判斷的最終依據(jù)，能夠明確抗原是否充分表達或者是否存在缺失狀況。所以，在展開免疫組織化學(xué)檢測期間，應(yīng)當加強陽性對照的選擇，提高檢測準確性，為后續(xù)治療提供科學(xué)依據(jù)，促進患者疾病恢復(fù)。