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在體背根神經(jīng)節(jié)鈣成像方法解析內(nèi)臟痛及牽涉痛的新機制

2021-11-30 20:19:37GaoXY,HanS,HuangQ
中國疼痛醫(yī)學雜志 2021年10期
關(guān)鍵詞:敏化辣椒素內(nèi)臟

內(nèi)臟痛是指來自機體內(nèi)在器官病理改變或功能異常引起的疼痛,常與多種內(nèi)臟疾病相關(guān),如急慢性腸炎等。內(nèi)臟痛往往伴有軀體一定部位的牽涉痛。到目前為止,內(nèi)臟痛及其牽涉痛的機制仍不清楚。該研究采用在體背根神經(jīng)節(jié)鈣成像方法(in vivo DRG calcium imaging),大視野實時動態(tài)觀察和研究內(nèi)臟痛及牽涉痛的背根節(jié)(dorsal root ganglion, DRG)神經(jīng)元相關(guān)機制。主要方法:(1)采用2, 4, 6-三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS)灌腸建立結(jié)腸炎模型;(2)采用辣椒素灌腸誘導內(nèi)臟痛模型;(3)采用含有編碼鈣指示劑的轉(zhuǎn)基因小鼠(pirt-GCaMP6)進行在體DRG 鈣成像,同步記錄DRG 神經(jīng)元群的活動。結(jié)果:(1)在正常小鼠,直腸擴張和辣椒素刺激可激活L6DRG 神經(jīng)元,但不激活L4DRG。給予L6對應體表下背部皮膚(low back skin)機械刺激,可以甄別出L6DRG 體表-內(nèi)臟相關(guān)的神經(jīng)元;(2)在TNBS 結(jié)腸炎小鼠,伊文氏藍滲出位于下背部皮膚和足底皮膚,同時行為學結(jié)果也提示這兩個體表部位呈現(xiàn)痛覺敏感,是結(jié)腸炎相關(guān)的牽涉痛部位;(3)在TNBS 結(jié)腸炎小鼠,直腸擴張激活L6DRG 神經(jīng)元的比例較正常動物明顯增加,以中小細胞為主,說明結(jié)腸炎敏化支配該區(qū)域的L6DRG 神經(jīng)元;(4)在TNBS 結(jié)腸炎小鼠,下背部皮膚(L6DRG 支配)毛刷刺激產(chǎn)生的鈣熒光信號比在正常動物誘發(fā)的信號強。說明結(jié)腸炎產(chǎn)生L6DRG 神經(jīng)元敏化,可以引起相同DRG 節(jié)段對應皮膚部位的牽涉性痛敏;(5)在TNBS 結(jié)腸炎小鼠,足底皮膚(L4DRG 支配)給予機械壓力刺激,激活L4DRG 神經(jīng)元的數(shù)量顯著增加。說明結(jié)腸炎還可以敏化原本不接受結(jié)直腸傳入的L4DRG神經(jīng)元,引起不同DRG 節(jié)段支配皮膚的牽涉痛;(6)在辣椒素灌腸誘導的急性內(nèi)臟痛模型,同節(jié)段L6支配和不同節(jié)段L4支配體表施加機械刺激,均能比辣椒素前激活更多神經(jīng)元或更強的反應。結(jié)論:采用在體DRG 鈣成像的方法可以直觀反映DRG 在內(nèi)臟痛和牽涉痛中的作用。結(jié)腸炎引起相同節(jié)段L6DRG 神經(jīng)元外周皮膚的敏化,同時也引起原本不接受結(jié)直腸傳入的L4DRG 神經(jīng)元的皮膚區(qū)域敏化,提示外周敏化和中樞敏化均參與了牽涉痛的產(chǎn)生,為內(nèi)臟痛及牽涉痛提供新機制。

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