田 瑾，羅瀟瀟，馬 嫄,*，劉曉翠，黃林華

（1.西華大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，四川 成都 610039；2.西南大學(xué)柑桔研究所，重慶 400712）

柑橘屬于蕓香科下屬植物，包括橘子、柑、柚、甜橙、金橘、檸檬、酸橙等[1?4]。柑橘類水果富含維生素C、黃酮類物質(zhì) (檸檬素、柚皮素、橘紅素等)、植物多酚等[5]，研究發(fā)現(xiàn)柑橘類能改善血壓、血脂和保護(hù)心血管，還具有化食消痰，防止惡心等功效[6?7]。柑橘汁因其特有的風(fēng)味和豐富的營養(yǎng)成分，銷量在眾多的果蔬汁中占據(jù)榜首[8]。柑橘汁生產(chǎn)中主要采用的巴氏殺菌方法會減少柑橘汁中維生素C 的含量并會影響其原有的風(fēng)味，因此在大多數(shù)巴氏殺菌的柑橘汁中往往會加入一些添加劑來保持口感、營養(yǎng)價(jià)值或增添柑橘汁的風(fēng)味。非熱殺菌是采用非加熱的方法來殺死食品中的微生物，同時最大限度地維持食品原有的風(fēng)味、營養(yǎng)成分以及其物性的殺菌方法。非熱殺菌主要包括物理殺菌和化學(xué)殺菌，其中物理殺菌主要包括超高壓殺菌、超聲波殺菌、高壓脈沖電場殺菌等[9]。非熱殺菌一般在常溫下完成，處理過程中不產(chǎn)生熱效應(yīng)。因此它克服了一般熱殺菌技術(shù)傳熱較慢和對殺菌對象產(chǎn)生熱損傷等缺點(diǎn)，特別適合熱敏性的食品物料（如柑橘汁）的殺菌處理。

1 熱殺菌

1.1 巴氏殺菌

巴氏殺菌是利用低于100 ℃的熱力殺滅微生物的殺菌方法。經(jīng)巴氏殺菌后的柑橘汁，其營養(yǎng)成分和揮發(fā)性成分都有所損失，王可興等[10]研究表明對橙汁進(jìn)行巴氏殺菌的過程中有7 種鍵合態(tài)香氣物質(zhì)被完全水解，有3 種鍵合態(tài)香氣物質(zhì)的含量在滅菌后顯著降低。程玉嬌[11]檢測發(fā)現(xiàn)巴氏殺菌后寬皮柑橘汁具有風(fēng)味活性的1-對孟稀-8-硫醇濃度降低，但DMS、MeSH、CS2等有異味的的揮發(fā)性硫化物濃度增加。Achir 等[12]對柑橘汁進(jìn)行巴氏殺菌，發(fā)現(xiàn)羥基葉黃素和環(huán)氧葉黃素的損失率分別可達(dá)40%和70%。Ros-Chumillas 等[13]發(fā)現(xiàn)橙汁利用巴氏殺菌和采用不同包裝材料及無菌灌裝可達(dá)到延長儲藏期的目的。雖然巴氏殺菌條件優(yōu)化后能使?fàn)I養(yǎng)成分和揮發(fā)性成分得以保留，并且通過將不同的因素（例如氧氣清除劑，灌裝過程中在頂部空間中添加液氮滴，螺旋蓋中用鋁箔密封以及冷藏溫度）與單層PET 瓶結(jié)合使用能延長貨架期，但是在貯藏期間柑橘汁的營養(yǎng)成分和揮發(fā)性成分的保持效果不佳。Sádecká 等[14]研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)過巴氏殺菌處理后的橙汁，在其貯藏過程中香氣成分（d-檸檬烯、戊烯、二苯烯醇（如亞麻醇））的含量下降，而某些伏拉式單烯顯著增加，此外，還對貯藏果汁中的抗壞血酸濃度、抗氧化活性、總多酚濃度和顏色變化進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)貯藏期間這些指標(biāo)逐漸下降。由此可以知道巴氏殺菌對柑橘汁的殺菌效果能達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)，但在貯藏期中維持柑橘汁的營養(yǎng)成分和延長貨架期方面并不理想。這也是巴氏殺菌未來研究的一個方向。

1.2 微波殺菌

微波是頻率在300 MHz 到300 GHz 的電磁波。微波殺菌是利用微波對微生物的熱效應(yīng)與非熱效應(yīng)的相互作用改變微生物細(xì)胞膜的通透性使其生長發(fā)育受到阻礙而導(dǎo)致死亡[15]。由于微波殺菌是物理殺菌，沒有添加化學(xué)防腐劑，且采用的溫度較低耗時較短，所以經(jīng)微波殺菌后柑橘汁具有較好的品質(zhì)[16]。韓燕等[17]通過對橙汁進(jìn)行不同殺菌處理可知對橙汁的色澤影響最大的是煮沸殺菌，其次是高溫高壓殺菌，微波殺菌的影響是最小的。沈海亮等[18]對錦橙汁進(jìn)行微波殺菌和巴氏殺菌來看其揮發(fā)性香氣成分的保留程度，結(jié)果表明巴氏殺菌后的橙汁中的揮發(fā)性香氣成分比微波殺菌后的橙汁少，所以微波殺菌更有利于萜烯類和酯類的香氣物質(zhì)的留存。在Singh 等[19]的研究中利用微波輔助紫外線對橙汁進(jìn)行殺菌，研究表明當(dāng)微波功率為500 W，流速為166 mL/min 和處理時間為9.51 s時能得到橙汁細(xì)菌總數(shù)、總酚、維生素C 等的最佳參數(shù)值；同時 Brugos 等[20]采用常規(guī)熱處理（熱?。┖途劢刮⒉訜幔ê铣晌⒉ǚ磻?yīng)器）對橙汁中果膠甲基酯酶（PME）的動態(tài)失活，研究發(fā)現(xiàn)微波輔助熱處理后橙汁中果膠甲基酯酶滅活率達(dá)到99%。雖然微波殺菌可以很好地保持柑橘汁的營養(yǎng)成分和色澤，但是柑橘汁微波殺菌后在貯藏期中柑橘汁成分的變化缺乏深入的研究，所以這將是柑橘汁微波殺菌未來的研究熱點(diǎn)。

1.3 超高溫瞬時殺菌

超高溫瞬時殺菌是在125～150 ℃下保持4～20 s 的處理方式[21]。高溫瞬時殺菌與巴氏殺菌相比較，因其溫度較高可以殺死孢子，使柑橘汁殺菌效果更接近于商業(yè)無菌，且貨架期更長；雖然超高溫瞬時殺菌對柑橘汁的精油含量損失較大，但對其色澤、香氣物質(zhì)和風(fēng)味都不會有太大的變化。

王金鋒等[22]利用計(jì)算流體力學(xué)模擬出超高溫瞬時滅菌處理橙汁的理想時間，根據(jù)卡諾循環(huán)計(jì)算出滅菌的最佳條件為135 ℃、13 s，因其能耗是最低 的。Galina 等[23]的研究表明經(jīng)130 ℃、2 s處理的橙汁比傳統(tǒng)巴氏滅菌處理的橙汁具有更高的生物活性物質(zhì)（維生素C、總酚、橙皮苷和類胡蘿卜素）。Wang 等[24]通過利用計(jì)算流體力學(xué)（computational fluid dynamics，簡稱CFD）證明了選擇超高溫短時殺菌更有利于殺菌后降低冷卻過程中消耗的能量[25?26]。綜上所述，超高溫瞬時滅菌具有延長貨架期和有利于滅菌后的冷卻過程等優(yōu)點(diǎn)，而且相較于其他熱殺菌方法，它更有利于保存活性物質(zhì)。

2 非熱殺菌方法的研究進(jìn)展

2.1 超高壓殺菌

超高壓殺菌是指用100～1000 MPa 的壓強(qiáng)去處理食品，超高壓能通過瞬間卸壓或梯度減壓等連續(xù)式操作使?jié)B透到致病菌體內(nèi)的水或其他物質(zhì)膨脹，來殺滅微生物，通過作用于食品中酶的非共價(jià)鍵，如離子鍵、二硫鍵等，破壞其結(jié)構(gòu)來鈍化酶活[27]。而超高壓對共價(jià)鍵的影響很小，這能在殺滅微生物的同時很好地保護(hù)食品的品質(zhì)[28?29]。

Bull 等[30]的研究表明經(jīng)超高壓處理（600 MPa、20 ℃、60 s）后臍橙汁的微生物菌量降低到無法檢測的水平。Polydera 等[31]研究發(fā)現(xiàn)，與熱殺菌（80 ℃，60 s）相比，超高壓處理（600 MPa、40 ℃、4 min）能較好地保留橙汁的抗氧化活性。蔣和體等[32]的研究發(fā)現(xiàn)橙汁經(jīng)超高壓處理后其主要成分的減少都小于熱力殺菌。王孝榮等[33]的研究表明鮮榨橙汁經(jīng)過超高壓處理（400 MPa、15 min）和熱處理（90℃、30 s）后其醛類、烴類含量均會出現(xiàn)不同程度的減少，但超高壓處理后的鮮榨橙汁的色澤受影響較小。趙玉生等[34]的研究發(fā)現(xiàn)溫州蜜桔和八塑果汁分別經(jīng)1 000～6 000 Pa、10 min 和8 000～10 000 Pa、10 min 的超高壓處理后營養(yǎng)成分損失較少。綜上所述，超高壓殺菌技術(shù)在對柑橘汁進(jìn)行殺菌和滅酶的同時也對其色香味等感官特征有一定保護(hù)作用[35]，無疑是一種有潛在價(jià)值的非熱殺菌技術(shù)。

2.2 超聲波殺菌

超聲波是一種頻率高于20 kHz 的聲波，它應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、軍事、工業(yè)中較多，在食品方面主要是用于物質(zhì)的提取，也可被用來對食品進(jìn)行殺菌[36]。超聲波殺菌利用超聲波的空化作用，使液體產(chǎn)生瞬間高溫高壓從而導(dǎo)致細(xì)菌死亡、病毒失活以及抑制酶的活性[37?38]。其中空化作用是指在超聲波的作用下液體中的微氣泡發(fā)生振動，當(dāng)聲壓達(dá)到一定值后由氣泡產(chǎn)生沖擊形成的一系列振動、膨脹等的動力學(xué)過程，即在食品超聲滅菌過程中產(chǎn)生了強(qiáng)烈的機(jī)械振動，這種振動具有破壞微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)和使微生物內(nèi)溶物流出或沉淀等的能力[39]。

超聲波殺菌技術(shù)不僅可以殺菌還能降解農(nóng)藥殘留，最重要的是與傳統(tǒng)熱殺菌技術(shù)相比超聲波能最大程度地保留果汁中的營養(yǎng)成分和揮發(fā)香氣成分[40]。粟星等[41]研究發(fā)現(xiàn)，超聲波比熱處理更好地保持橙汁的營養(yǎng)品質(zhì)。李申[42]研究發(fā)現(xiàn)，在低溫下（4 ℃）對橙汁進(jìn)行30 min 的超聲波處理，總的殺菌率僅42.5%，但當(dāng)處理溫度為50 ℃時，超聲波處理的橙汁的總殺菌率達(dá)到了99.89%，說明超聲波與適宜的溫度協(xié)同對柑橘汁進(jìn)行殺菌，其滅菌效果可達(dá)到國標(biāo)要求。Paniagua-Martínez 等[43]使用超聲波輔助超臨界CO2處理橙汁3 min，發(fā)現(xiàn)：大腸桿菌完全滅活，橙汁的酸堿度基本沒有變化；與巴氏殺菌相比，橙汁的酚類化合物和抗壞血酸的損失量都較少；其抗氧化能力提高了12%。Khandpur等[44]將超聲波和紫外線相結(jié)合應(yīng)用使橙汁營養(yǎng)保持在較高水平，但與僅用超聲波處理相比，營養(yǎng)素有一些損失。由此可知，超聲波殺菌能使柑橘汁保持較好的品質(zhì)，但在殺菌方面需要與其他技術(shù)相結(jié)合才能達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)[45]。

2.3 高壓脈沖電場殺菌

高壓脈沖電場殺菌（plused electric fields,PEF）通過電極產(chǎn)生的瞬時高壓脈沖電場作用于食品，使微生物的細(xì)胞膜破裂或穿孔起到對食品的滅菌作用，同時它也是最近幾年食品非熱力殺菌處理研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。

由于高壓脈沖電場可以殺滅微生物，具有處理時間短、能耗低和傳遞速度均勻等優(yōu)點(diǎn)，所以它能更有效地鈍化橙汁中的各類酶活，從而延長其貯藏期[46]。嚴(yán)志明[47]將橙汁經(jīng)由高壓脈沖電場（流速10 mL/min，場強(qiáng)達(dá)到20 kV/cm，脈沖頻率128 Hz，脈沖寬度為17 μs）殺菌后，在0 ℃低溫儲藏條件下橙汁的儲藏期有加長。對于橙汁中的各類酶來說，Cronin 等[48]發(fā)現(xiàn)當(dāng)脈沖電場強(qiáng)度及處理時間都增加時，橙汁中的果膠甲基酯酶的殘留活性下降。而廖小軍等[49]發(fā)現(xiàn)當(dāng)脈沖場強(qiáng)為12 kV/cm，脈沖時間為1 200 個脈沖時，橙汁中的大腸桿菌減少了1.73 個對數(shù)，當(dāng)減小至10 kV/cm、400 個脈沖時，橙汁中的過氧化物酶活性降低60%。同時與熱殺菌對比，高壓脈沖電場殺菌技術(shù)對橙汁中的Vc 具有更高的保留率，如Agcam 等[50]對橙汁進(jìn)行高壓脈沖電場技術(shù)處理和熱處理，研究發(fā)現(xiàn)，在對橙汁進(jìn)行高壓脈沖電場殺菌后（電場強(qiáng)度為17 kV/cm，時間為1 034 μs，能量為17.37 J）橙汁中的抗壞血酸的半衰期最長（1112d），并且在貯藏期中未發(fā)生明顯的降解；方婷[51]發(fā)現(xiàn)經(jīng)熱殺菌后的橙汁Vc 的含量下降了7.7%，而高壓脈沖電場殺菌后的橙汁Vc 含量只下降了5%。曾新安等[52]的研究表明當(dāng)溫度小于60℃，脈沖場強(qiáng)為25 kV/cm 時滅菌效果達(dá)到國家標(biāo)準(zhǔn)，同時Vc 保留率為86.6%。

綜上所述，高壓脈沖電場技術(shù)在橙汁殺菌工藝中效果不錯，而且在一些高壓脈沖電場處理?xiàng)l件下殺菌的橙汁抗壞血酸的含量高于經(jīng)過熱殺菌處理后的橙汁；但在未來希望能將高壓脈沖電場殺菌和其他熱殺菌技術(shù)進(jìn)行聯(lián)用來達(dá)到更好的殺菌效果。

2.4 輻照殺菌（高頻輻射）

對含有熱敏性成分的食品來說輻照技術(shù)是最有效的殺菌技術(shù)之一[53?54]。輻照殺菌主要通過造成微生物DNA 損傷、干擾代謝和破壞細(xì)胞內(nèi)膜從而引起酶系統(tǒng)紊亂，導(dǎo)致微生物死亡[54?56]。另外水分子受輻射后離子化，形成了-H、-OH、-HO2、-H2O等基團(tuán)，這些基團(tuán)在不同途徑中參與化學(xué)反應(yīng)，在水基團(tuán)的作用下，生物活性物質(zhì)被鈍化以致細(xì)胞受損，當(dāng)損傷到一定程度則微生物的生理機(jī)能就會喪失。

范剛等[57]通過比較輻照和巴氏殺菌對錦橙汁品質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)輻照處理后的錦橙汁香氣物質(zhì)的保持率高于巴氏殺菌。鄒立強(qiáng)等[58]研究發(fā)現(xiàn)，不同輻照劑量（2、4、6、8、10 kGy）對臍橙汁處理后其菌落總數(shù)、霉菌和酵母及大腸桿菌的數(shù)量分別下降2.48、2.97、4.61 個對數(shù)級，輻照劑量越大殺菌效果越好。但輻照也會造成產(chǎn)品維生素的損失并對產(chǎn)品的風(fēng)味造成不利影響，當(dāng)利用0.7 kGy 的γ 射線對柑橘汁進(jìn)行處理時會產(chǎn)生異味[59?60]，同時果蔬食品中的Vc、Vb 和Ve 對輻照最敏感；但柑橘在大約1 kGy劑量下輻照Vc 沒有明顯損失[54]。Nakauma 等[61]研究發(fā)現(xiàn)，隨著電子束或γ 射線照射劑量的增加，酸乳桿菌孢子的存活率呈指數(shù)級下降，通過研究當(dāng)輻照和熱殺菌協(xié)同對殺菌時，所需的輻照劑量可降低，因此輻照協(xié)同熱處理具有較好的應(yīng)用前景。

2.5 化學(xué)殺菌

化學(xué)殺菌是利用化學(xué)殺菌劑（一般是抑菌劑、防腐劑和抗菌劑）去干擾或破壞微生物的生理、生化反應(yīng)和代謝活動，使微生物的生長繁殖受到抑制，甚至死亡，化學(xué)殺菌的效果通常與化學(xué)殺菌劑的用量與作用時長有關(guān)[62]。其實(shí)在實(shí)際的食品生產(chǎn)過程中，對食品使用化學(xué)殺菌劑技進(jìn)行殺菌是受到國家有關(guān)部門嚴(yán)格管控的，所以現(xiàn)在食品工業(yè)中不會把化學(xué)殺菌直接作用于食品本身[63]。

近年來，研究者們致力于將天然的抑菌劑和防腐劑應(yīng)用于食品中，使天然的化學(xué)殺菌劑直接作用于食品，且不影響食品安全。如Martín-Diana 等[64]通過向橙汁加入殼聚糖（天然抗菌劑）進(jìn)行殺菌來延長貨架期，當(dāng)加入的殼聚糖質(zhì)量濃度高于1 g/L時，微生物總數(shù)減少1 log，但是在此濃度下抗環(huán)血酸的含量將降低，所以建議加入1 g/L 的殼聚糖到橙汁中，不僅可以殺菌，還能保存抗壞血酸。Mosqueda-Melgar 等[65]在橙汁中加入檸檬酸（天然抑菌劑）并與高強(qiáng)度脈沖電場殺菌技術(shù)聯(lián)用來殺菌，在5℃溫度下保存91 天都未檢測到微生物的生長，但橙汁的香氣和口感發(fā)生了變化。雖然天然化學(xué)殺菌劑對柑橘汁中的微生物有抑制作用，但是在保持柑橘汁的營養(yǎng)成分和香氣等方面有明顯的不足，所以在以后可探索更多可直接作用于柑橘汁的化學(xué)殺菌劑，并且提高化學(xué)殺菌后的柑橘汁的品質(zhì)，以及可與其他殺菌技術(shù)相聯(lián)用來彌補(bǔ)化學(xué)殺菌的不足。

2.6 高密度CO2 殺菌

高密度CO2(dense phase carbon dioxide,DPCD)殺菌技術(shù)是通過加壓CO2或超臨界CO2接觸食品，利用其分子效應(yīng)使某些微生物和酶失活[62]，這項(xiàng)技術(shù)所需溫度低，從而避免傳統(tǒng)巴氏殺菌的熱效應(yīng)。在過去60 年該技術(shù)對包括病原體、腐敗菌、酵母菌和霉菌在內(nèi)的各種微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和孢子的影響，以及對食品重要的各種酶的影響已經(jīng)得到證明。許多液態(tài)食品在DPCD 處理后保持了新鮮的感官、營養(yǎng)和物理特性[67]。

Niu 等[68]采用了高密度CO2殺菌技術(shù)處理鮮榨橙汁，并與未經(jīng)處理和熱殺菌處理的鮮榨橙汁進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)經(jīng)高密度CO2處理10 min 和20 min后的橙汁比熱殺菌處理后的橙汁在其揮發(fā)性成分上更接近鮮榨橙汁。Boff 等[69]對橙汁分別進(jìn)行了熱處理，高壓處理和高壓與CO2聯(lián)合處理，與熱處理后的橙汁相比，高壓處理和高壓與CO2聯(lián)合處理后的橙汁的揮發(fā)性成分損失較低。而且高壓與CO2聯(lián)合處理后的橙汁比熱處理后的橙汁具有更高的抗壞血酸保留率。Paniagua-Martínez 等[43]利用超臨界CO2輔助超聲波連續(xù)處理方式對橙汁進(jìn)行殺菌，與巴氏殺菌處理的橙汁相比，經(jīng)超臨界CO2輔助超聲波連續(xù)處理后的橙汁的褐變指數(shù)和顏色變化更大。綜上所述，高密度CO2殺菌技術(shù)在柑橘汁的揮發(fā)性成分的保留上有明顯的優(yōu)勢，并且也能保留較多的營養(yǎng)成分，特別是高密度CO2殺菌技術(shù)與其他技術(shù)的聯(lián)用使其營養(yǎng)成分的保留率更高，但是如何讓高密度CO2殺菌技術(shù)與其他技術(shù)的聯(lián)用不產(chǎn)生其他負(fù)面作用需要進(jìn)一步的研究。

2.7 紫外照射殺菌

紫 外 線 照 射（ultraviolet irradiation,UV Irradiation）的殺菌機(jī)制是由于微生物的DNA 吸收紫外光從而導(dǎo)致了其DNA 的突變使其死亡[70]。紫外線的波長范圍是100～400 nm，分為4 個波段，但只有UV-C（20～280 nm）具有殺菌能力，且在265～266 nm 處的殺菌能力最強(qiáng)，會破壞微生物DNA 并抑制細(xì)胞增殖[71]。

紫外照射技術(shù)從2000 年被美國FDA 批準(zhǔn)可用于果蔬汁飲料產(chǎn)品的殺菌后，近年來越來越多的企業(yè)將它應(yīng)用于果蔬汁的殺菌工藝環(huán)節(jié)中，同時規(guī)定應(yīng)用低壓汞燈來產(chǎn)生紫外線，且90%的紫外光波長為253.7 nm[72]。Ferrario 等[73]以胡蘿卜–橙汁為原料，采用UV-C 光輔助加熱可以使果汁在24 d 儲藏期內(nèi)保持它的多酚含量和總抗氧化活性以保證飲品達(dá)到消費(fèi)者的要求。Bengi 等[74]采用準(zhǔn)直光束儀對橙汁樣品進(jìn)行了多次紫外線照射，照射強(qiáng)度為1.32 mW/cm2，照射深度為0.153 cm，從而提高了橙汁中腐敗微生物的滅活效果，延長果汁的貨架壽命，但紫外照射對橙汁的顏色沒有影響。Prado 等[75]研究紫外線(UV-C)輻射對工業(yè)化橙汁菌屬的生物膜影響發(fā)現(xiàn)經(jīng)UV-C 處理的不銹鋼和橡膠表面 30 min(26.2 kJ/m2)后生物膜形成明顯減少(約2log cfu/mL)，即UV-C 可以減少生物膜的形成。由此可見，利用紫外線照射技術(shù)不僅可以將柑橘汁的腐敗微生物進(jìn)行滅活，同時還不影響其色澤，但紫外線的穿透能力差，只能在果汁表面穿透很短的距離；因此，需要與其他的殺菌技術(shù)進(jìn)行聯(lián)用而達(dá)到更好的殺菌效果。

3 結(jié)束語

從以上研究中可知，不管是在營養(yǎng)成分的保持還是在感官品質(zhì)和揮發(fā)性香氣成分提升等方面，非熱殺菌技術(shù)的整體效果都優(yōu)于熱殺菌技術(shù)，但工作的連續(xù)性和安全性是技術(shù)瓶頸。雖然有些非熱殺菌具有能耗低、易控制、效率高、無殘留且較環(huán)保等特點(diǎn)，但是大部分的非熱殺菌的成本比熱力殺菌的成本要高[76]；因此，在今后如何提高非熱殺菌效果、降低其成本以及優(yōu)化或強(qiáng)化現(xiàn)有的非熱殺菌技術(shù)，成為實(shí)現(xiàn)非熱殺菌在柑橘汁實(shí)際生產(chǎn)加工運(yùn)用中的關(guān)鍵。兩種殺菌方式的聯(lián)用比某些單個的殺菌方式的效果更好[77]，未來可以考慮以熱殺菌作為初次殺菌，非熱殺菌作為灌裝前的二次殺菌來達(dá)到理想的殺菌效果。