丁紅萍，季曉燕，陳之陽，黃 江

蘇州大學(xué)附屬第二醫(yī)院眼科，江蘇蘇州 215000

糖尿病(DM)是臨床常見的代謝性疾病，其主要并發(fā)癥為微血管及大血管病變，其中微血管病變的發(fā)生率較高[1]。糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)是最常見的DM微血管并發(fā)癥之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)，超過60%的DM患者會(huì)并發(fā)DR[2]。目前DR的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，有研究表明，一氧化氮(NO)、脂氧素A4(LXA4)、脂肪因子(Apelin)可能與DM及其多種并發(fā)癥的嚴(yán)重程度相關(guān)[3-5]，但目前該3項(xiàng)指標(biāo)與DR的關(guān)系仍鮮有報(bào)道。本研究通過檢測(cè)DR患者血清NO、LXA4、Apelin表達(dá)水平，分析其與DR嚴(yán)重程度之間的關(guān)系，旨在為DR的診斷及病情監(jiān)控提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2017年1月至2019年2月收治的85例DR患者作為觀察組，另選擇同期80例非DR的DM患者作為對(duì)照組，50例體檢健康者作為健康組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者符合2型DM診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)入院前患者無眼部手術(shù)及外傷史；(3)DR患者經(jīng)眼底熒光血管造影檢查確診為視網(wǎng)膜病變；(4)患者年齡≤70歲；(5)患者精神正常并配合本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患者合并惡性腫瘤疾??；(2)患者合并脈絡(luò)膜脫離、青光眼、角膜新生血管等眼部疾??；(3)存在嚴(yán)重心、肝、腎功能異常；(4)患者腦血流圖、CT掃描檢查發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜之外的血管出現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化等并發(fā)癥；(5)存在嚴(yán)重代謝綜合征；(6)主動(dòng)申請(qǐng)退出本研究。觀察組男39例，女46例，平均年齡(60.29±5.38)歲，平均DM病程(21.38±6.49)個(gè)月，平均體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(24.73±2.09)kg/m2，平均收縮壓(124.38±13.28)mm Hg，平均舒張壓(76.59±6.94)mm Hg；對(duì)照組男36例，女44例，平均年齡(60.75±6.14)歲，平均DM病程(21.72±7.13)個(gè)月，平均BMI(24.71±2.13)kg/m2，平均收縮壓(125.23±14.19)mm Hg，平均舒張壓(77.19±7.43)mm Hg；健康組男22例，女28例，平均年齡(61.29±8.32)歲，平均BMI(24.12±1.93)kg/m2，平均收縮壓(121.89±15.12)mm Hg，平均舒張壓(78.19±8.97)mm Hg。受試者組間一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2方法 所有受試者在入組后采集空腹靜脈血，采用硝酸還原酶比色法檢測(cè)血中NO水平(試劑盒，意大利PANERA公司，批號(hào)：AAPR194-1)，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)患者血中LXA4(試劑盒，德國(guó)IBL公司，批號(hào)：IC-LXA4-Ge)、Apelin(試劑盒，武漢CUSABIO公司，批號(hào)：CSB-E14334h-1)水平，檢測(cè)前遵照檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程并使用原廠試劑進(jìn)行操作和質(zhì)控，嚴(yán)格遵照試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)操作并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線行定量分析。并在患者入組后對(duì)觀察組患者DR病情嚴(yán)重情況進(jìn)行評(píng)估，包括Ⅰ期：后極部位中心出現(xiàn)小出血點(diǎn)及微血管瘤；Ⅱ期：出現(xiàn)出血斑及黃白色硬性滲出；Ⅲ期：有白色棉絨斑并伴隨出現(xiàn)出血斑；Ⅳ期：眼底出現(xiàn)纖維增殖和新生血管；Ⅴ期：眼底玻璃體出血，出現(xiàn)纖維增殖和新生血管；Ⅵ期：眼底有纖維增殖和新生血管，并出現(xiàn)視網(wǎng)膜脫離顯像。

2 結(jié) 果

2.13組各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 觀察組NO及Apelin水平明顯高于對(duì)照組和健康組，LXA4水平明顯低于對(duì)照組和健康組，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

2.2觀察組不同病情嚴(yán)重程度患者各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較 Ⅰ～Ⅲ期DR患者NO及Apelin水平明顯低于Ⅳ～Ⅵ期患者，LXA4水平明顯高于Ⅳ～Ⅵ期患者，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 觀察組不同病情嚴(yán)重程度患者各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比較

2.3DR嚴(yán)重程度與NO、Apelin及LXA4表達(dá)水平的相關(guān)性分析 DR嚴(yán)重程度與NO和Apelin的表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.863、0.541，P<0.001)，與LXA4表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.869，P<0.001)，見表3。

表3 DR嚴(yán)重程度與NO、Apelin及LXA4表達(dá)水平的相關(guān)性分析

3 討 論

DR是常見的DM微血管并發(fā)癥之一，其臨床癥狀主要有視物模糊、視力下降等，嚴(yán)重者會(huì)出現(xiàn)失明[6]。眼底檢查是臨床常用的確診方法，但普及率較低[7]。隨著血清學(xué)檢查技術(shù)在疾病診斷中的應(yīng)用越來越廣泛，探尋與DR病情相關(guān)的血清特異性指標(biāo)對(duì)DR的篩查具有重要意義[8]。

DR病情的發(fā)展主要體現(xiàn)為微血管內(nèi)皮基底膜變厚以及微循環(huán)發(fā)生障礙。研究表明，毛細(xì)血管管腔變窄會(huì)導(dǎo)致血流改變，從而使視網(wǎng)膜出現(xiàn)缺氧缺血狀態(tài)并促進(jìn)新生血管的形成[9-10]。有研究發(fā)現(xiàn)，抑制NO可以避免視網(wǎng)膜出現(xiàn)缺血損傷，提示NO可能參與DR的發(fā)生發(fā)展[11]。Apelin在葡萄糖穩(wěn)態(tài)維持、免疫調(diào)節(jié)等方面均發(fā)揮重要作用，而LXA4具有較強(qiáng)的抗炎作用[12-13]。

本研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組和健康組相比，觀察組NO及Apelin水平升高，而LXA4水平顯著降低，提示患者NO、Apelin以及LXA4水平對(duì)DR的發(fā)生發(fā)展具有一定的影響。進(jìn)一步對(duì)DR患者進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，隨著患者病情加重，其血清NO及Apelin水平逐漸升高，而LXA4水平則明顯降低，相關(guān)性分析結(jié)果顯示，DR嚴(yán)重程度與血清NO及Apelin水平呈正相關(guān)(r=0.863、0.541，P<0.001)，而與LXA4水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.869，P<0.001)。NO作為血管活性物質(zhì)，屬于內(nèi)皮依賴性血管收縮因子和血管舒張因子，有研究表明，DR患者血清NO水平異常升高可能導(dǎo)致患者體內(nèi)一氧化氮合酶活性增加，加速患者視網(wǎng)膜出現(xiàn)缺血性損傷[14]。有研究報(bào)道，血清Apelin與血管緊張素Ⅱ通過影響氧化應(yīng)激對(duì)血管內(nèi)皮造成損傷，導(dǎo)致血管腔狹窄，限制視網(wǎng)膜組織血流，最終導(dǎo)致DR的發(fā)生以及病情加重[15]，與本研究結(jié)果一致。此外，有研究報(bào)道，LXA4水平的降低則可能導(dǎo)致核因子κB水平被有效抑制，導(dǎo)致血管生成相關(guān)細(xì)胞因子被進(jìn)一步調(diào)控，進(jìn)而使患者病情加重[16]。有學(xué)者指出，LXA4可有效調(diào)節(jié)體內(nèi)多種物質(zhì)的釋放和表達(dá)，對(duì)DM的發(fā)生發(fā)展起到重要的調(diào)節(jié)作用[17]。本研究結(jié)果顯示，隨著患者病情加重，其血清LXA4水平也顯著降低，與既往研究結(jié)果一致。

綜上所述，DR嚴(yán)重程度與血清NO及Apelin水平呈正相關(guān)，而與LXA4水平呈負(fù)相關(guān)，臨床上可通過檢測(cè)患者血清NO、LXA4、Apelin水平對(duì)患者病情進(jìn)行評(píng)估。但本研究臨床樣本量較小，且并未對(duì)患者進(jìn)行長(zhǎng)期隨訪，有待后續(xù)進(jìn)一步研究。