孟建宇， 李 蘅*， 楊鴻儒， 賈麗娟,2

1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010011

2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院草原研究所， 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010

磷是植物體中蛋白質(zhì)、核酸和ATP的重要組分，參與多種理化反應(yīng)的調(diào)節(jié)過(guò)程，是其生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中必需的營(yíng)養(yǎng)元素[1]. 土壤中95%以上的磷是不溶性的磷酸鹽形式，不具生物有效性[2-3]. 為解決土壤含磷量不足、補(bǔ)充植物生長(zhǎng)所需，在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程需施用大量磷肥，但這會(huì)引起食物安全、土壤環(huán)境污染等問(wèn)題[4-5].

解磷細(xì)菌(phosphate-solubilizing bacteria，PSB)是土壤中可將不溶性磷素轉(zhuǎn)化為生物能直接利用的磷的一類功能微生物類群，通過(guò)分泌多種有機(jī)酸、酶類來(lái)活化不溶性磷，提高有效的生物可利用磷含量，促進(jìn)植物的生長(zhǎng)和發(fā)育[6]. 研究發(fā)現(xiàn)，接種PSB后能顯著增加土壤及植株的磷、鉀、鎂等礦質(zhì)元素含量[7-9]，而且PSB還可改善根際微生物群落結(jié)構(gòu)，促進(jìn)土壤叢枝菌根對(duì)植物根系的侵染，提高植物生長(zhǎng)的品質(zhì)[10]. 畢銀麗等[11]將分離得到的PGPR(plant growth promoting rhizobacteria)制成的菌肥施加到荒漠植物的土壤中，不僅提高了有效磷含量，土質(zhì)由酸性變?yōu)橹行裕⑶乙苍鰪?qiáng)了酸性磷酸酶活性，最終加快了植物的生長(zhǎng)發(fā)育. 邢芳芳等[12]分離得到的解磷菌枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)對(duì)白菜有明顯的促生作用，經(jīng)其處理后，白菜葉片數(shù)、葉綠素以及產(chǎn)量都有明顯提高. 不同類型土壤和植物根際土壤中廣泛分布有PSB，其種群、功能和遺傳特性等豐富多樣[13-14]. 目前對(duì)土壤PSB的研究主要集中于玉米、番茄、小麥和油菜等農(nóng)作物[15]，但對(duì)荒漠根際PSB的報(bào)道還較少.

內(nèi)蒙古荒漠區(qū)分布廣泛，其面積約占全區(qū)總面積的51.50%，植被主要有霸王(Zygophyllumxanthonylon)、四合木(Tetraenatnongolica)、沙冬青(Ammopiptanthusmongolicus)、半日花(Helianthemumsoongoricum)和白刺(Nitrariatangutorum)等強(qiáng)旱生、古老孑遺灌木. 它們?cè)诒３滞寥婪€(wěn)定、改善生態(tài)環(huán)境方面起著非常重要的作用，而能產(chǎn)鐵載體的PSB對(duì)灌木生長(zhǎng)又有著積極的促進(jìn)作用. 因此，分析內(nèi)蒙古荒漠灌木根際PSB類群，認(rèn)識(shí)荒漠灌木植物PSB多樣性及其促生特性，豐富功能根際促生細(xì)菌資源庫(kù)以及開(kāi)發(fā)新的改善土壤磷素營(yíng)養(yǎng)途徑，對(duì)于改良和保護(hù)荒漠地區(qū)的生態(tài)環(huán)境具有積極而重大的意義.

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1樣品采集

樣品為內(nèi)蒙古西鄂爾多斯荒漠的霸王、半日花、四合木、白刺和沙冬青5種灌木. 采樣方法：先用工具鏟除去落葉層，再用鐵鏟挖去植物基部的上層覆土，剪下一部分主根和須根，用刷子刮下粘在根段上的土壤，裝入無(wú)菌聚乙烯袋.

1.1.2培養(yǎng)基

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：牛肉膏3.0 g/L，蛋白胨10.0 g/L，氯化鈉5.0 g/L.

LB培養(yǎng)基：胰蛋白胨10.0 g/L, 酵母粉5.0 g/L，氯化鈉5.0 g/L，pH為7.2.

無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基：磷酸鈣10.0 g/L，葡萄糖10.0 g/L，硫酸鎂0.3 g/L，氯化鉀0.3 g/L，硫酸銨0.5 g/L，氯化鈉0.3 g/L，硫酸亞鐵0.03 g/L，硫酸錳0.03 g/L，pH為7.0～7.5.

PVK培養(yǎng)基：葡萄糖10.0 g/L，磷酸鈣5.0 g/L，硫酸銨0.5 g/L，氯化鈉0.2 g/L，硫酸鎂0.1 g/L，氯化鉀0.2 g/L，酵母粉0.5 g/L，硫酸錳0.002 g/L，硫酸亞鐵0.002 g/L，0.4%溴酚藍(lán)0.6 g/L，瓊脂18.0 g/L，pH為7.0～7.2.

有機(jī)磷培養(yǎng)基：葡萄糖10.0 g/L，硫酸銨0.2 g/L，氯化鎂5.0 g/L，硫酸鎂0.5 g/L，氯化鉀0.1 g/L，植酸鈣2.0 g/L.

液體發(fā)酵培養(yǎng)基：蛋白胨3.0 g/L，葡萄糖15.0 g/L，可溶性淀粉20.0 g/L，硫酸銨0.5 g/L，氯化鉀0.5 g/L，硫酸鎂0.03 g/L，硫酸錳0.03 g/L，硫酸亞鐵0.04 g/L，磷酸二氫鉀0.02 g/L，pH為5.5.

MSA(蔗糖-天冬氨酸)培養(yǎng)基：蔗糖20.0 g/L，天冬酰胺2.0 g/L，磷酸氫二鉀1.0 g/L，硫酸鎂0.5 g/L，pH為7.0.

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1根際解磷菌的分離

稱取植物根際土壤0.5 g放入49.5 mL無(wú)菌水的三角瓶中振蕩搖勻，按十倍稀釋法用無(wú)菌水稀釋成10-2～10-6梯度的菌懸液，分別涂布于無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基，每個(gè)梯度設(shè)3個(gè)平行，26 ℃下培養(yǎng). 5 d后挑取形態(tài)各異的單菌落進(jìn)一步劃線純化. 將純化的菌株接種到PVK培養(yǎng)基上篩選解無(wú)機(jī)磷細(xì)菌，接種到有機(jī)磷培養(yǎng)基上篩選解有機(jī)磷細(xì)菌.

1.2.2菌株的16S rRNA鑒定及其同源性分析

用CTAB法提取菌株的DNA，16S rRNA基因擴(kuò)增引物為27F和1492R. PCR擴(kuò)增體系：5.0 μL 10×PCR Buffer，4.0 μL 2.5 mmol/L的dNTPs，0.5 μL 20 μmol/L的正反引物，0.3 μL 5 U/μL的Easy Taq DNA聚合酶，2.5 μL的DNA模板，37.7 μL ddH2O. 反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性3 min，94 ℃變性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸1 min，30個(gè)循環(huán)；72 ℃最終延伸5 min. 擴(kuò)增產(chǎn)物用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)后送至生工生物工程(上海)股份有限公司測(cè)序，測(cè)序的序列上傳NCBI，通過(guò)Blast-n與EX-TAXON數(shù)據(jù)庫(kù)中同源序列進(jìn)行比對(duì)，然后用MEGA 6.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù).

1.2.3解無(wú)機(jī)磷能力的測(cè)定

將獲得的純培養(yǎng)物在PVK培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)3 d，挑出劃線部分呈藍(lán)色的菌株，采用鉬銻抗比色法測(cè)定其解無(wú)機(jī)磷能力. 將初篩菌株接種在LB培養(yǎng)基中，28 ℃下?lián)u床振蕩過(guò)夜. 離心獲得菌體后制成一定濃度的菌懸液，取0.5 mL接種于50 mL無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基中，置于30 ℃、170 r/min下培養(yǎng)7 d. 然后在 10 000 r/min下離心10 min，并測(cè)定上清液的pH. 取上清液1.25 mL于比色管中，再加入2.5 mL鉬銻抗比色劑，用去離子水定容，搖勻后靜置30 min，測(cè)定OD730 nm值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線y=2.733x+0.010 7(R2=0.997 5)計(jì)算含磷量.

1.2.4解有機(jī)磷能力的測(cè)定

將菌株接種到LB培養(yǎng)基中，28 ℃下?lián)u床振蕩過(guò)夜，離心獲得菌體后制成一定濃度的菌懸液，取0.5 mL接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，置于30 ℃、170 r/min下培養(yǎng)72 h. 發(fā)酵液于 10 000 r/min下離心10 min，取上清液1 mL，加入5 mmol/L的植酸鈉1 mL，37 ℃下保溫30 min，添加3 mL終止液中止反應(yīng)，然后測(cè)定OD415 nm值. 參照磷標(biāo)準(zhǔn)曲線y=24.389x+0.036 6(R2=0.994 7)計(jì)算酶活性. 酶活性定義：在37 ℃、pH為5.5的條件下，從濃度為8.4 g/L的植酸鈉溶液中每分鐘釋放出1 μmol無(wú)機(jī)磷所需要的植酸酶量為1 IU/mL.

1.2.5產(chǎn)鐵載體能力分析

用滅菌的牙簽挑取單菌落，點(diǎn)接在CAS檢測(cè)平板上，28 ℃下恒溫培養(yǎng)96 h. 記錄橙色暈圈的有無(wú)，并對(duì)暈圈直徑(D)及菌落直徑(d)進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算二者比值(D/d)，該值越大，表明產(chǎn)鐵載體能力越強(qiáng)，對(duì)篩選到的產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)菌株參考Payne[16]的方法進(jìn)行定量分析. 將可產(chǎn)生暈圈的菌株接種到MSA培養(yǎng)基中，置于30 ℃、15 r/min下培養(yǎng)48 h. 取2 mL 菌液于離心管中，6 000 r/min下離心10 min，取1.5 mL上清液加上1.5 mL CAS檢測(cè)液，充分混勻靜置1 h 后測(cè)定OD630 nm值(As)，以雙蒸水作為對(duì)照. 另取1.5 mL CAS檢測(cè)液加1.5 mL未接菌的MSA培養(yǎng)基上清液混勻后測(cè)定OD630 nm值，作為參比值(Ar). 用As/Ar表示鐵載體的相對(duì)含量，數(shù)值越低，表示鐵載體的含量越大.As/Ar值在0～1.0之間以0.2為間隔，每減小0.2，增加一個(gè)“+”，As/Ar值低于0.5時(shí)產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)(+++)[17].

2 結(jié)果與分析

2.1 根際解磷菌的分離及多樣性分析

從內(nèi)蒙古西鄂爾多斯荒漠5種灌木根際土壤中分離到62株細(xì)菌，其中半日花15株、白刺3株、霸王9株、四合木26株，沙冬青9株. 根際解磷菌分類類群(見(jiàn)表1)和系統(tǒng)發(fā)育分析(見(jiàn)圖1)表明，62株解磷細(xì)菌分屬于α-變形菌綱(α-proteobacteria，占比為22.58%)、β-變形菌綱(β-proteobacteria，占比為17.74%)、γ-變形菌綱(γ-proteobacteria，占比為8.07%)、芽孢桿菌綱(Bacilli，占比為17.74%)、放線菌綱(Actinobacteria，占比為32.26%)和噬纖維菌綱(Cytophagia，占比為1.61%). 其中，放線菌綱為最優(yōu)勢(shì)類群，α-變形菌綱是次優(yōu)勢(shì)類群. 在屬水平上，分屬于21個(gè)屬，分別為短波單胞菌屬(Brevundimonas，1株)、鞘氨醇單胞菌屬(Sphingomonas，5株)、蒼白桿菌屬(Ochrobactrum，3株)、中華根瘤菌屬(Sinorhizobium，4株)、根瘤菌屬(Rhizobium，1株)、馬賽菌屬(Massilia，9株)、Prolinoborus(1株)、產(chǎn)堿桿菌屬(Alcaligenes，1株)、單胞菌屬(Stenotrophomonas，2株)、假單胞菌屬(Psedumonas，3株)、芽孢桿菌屬(Bacillus，11株)、鏈霉菌屬(Streptomyces，9株)、紅球菌屬(Rhodococcus，3株)、分枝桿菌屬(Mycobacterium，1株)、冢村氏菌屬(Tsukamurella，1株)、諾卡氏菌屬(Nocardia，1株)、Nocardioide(2株)、短桿菌屬(Brevibacterium，1株)、細(xì)桿菌屬(Microbacterium，1株)、韓國(guó)生工屬(Kribbella，1株)和Dyadobacter(1株). 其中，芽孢桿菌屬為第一優(yōu)勢(shì)菌屬，占總菌數(shù)的17.74%，其次為馬賽菌屬和鏈霉菌屬，均分別占總菌數(shù)的14.52%. 在不同灌木中分離到的PSB多樣性差異較明顯，如半日花的優(yōu)勢(shì)菌屬為鞘氨醇單胞菌屬和馬賽菌屬(各占20.00%)，霸王的優(yōu)勢(shì)菌屬是紅球菌屬和中華根瘤菌屬(各占22.22%)，沙冬青的優(yōu)勢(shì)菌屬為馬賽菌屬和芽孢桿菌屬(各占22.22%)，四合木的優(yōu)勢(shì)菌屬為芽孢桿菌屬和鏈霉菌屬(各占23.07%). 其中，芽孢桿菌屬和馬賽菌屬分布較廣，分別存在于4種灌木的根際土壤中；有些屬僅分布于一種灌木的根際土壤中，如短波單胞菌屬、韓國(guó)生工屬和Dyadobacter只在半日花根際土壤中分離到，產(chǎn)堿桿菌屬、根瘤菌屬、冢村氏菌屬和分枝桿菌屬只在四合木根際土壤中分離到，細(xì)桿菌屬和Prolinoborus只在霸王根際土壤中分離到，短桿菌屬和諾卡氏菌屬只在沙冬青根際土壤中分離到.

表1 分離所得根際解磷菌屬水平上的歸類

圖1 基于16S rRNA基因序列的根際解磷菌分離株的系統(tǒng)發(fā)育分析

2.2 解無(wú)機(jī)磷能力

對(duì)能使PVK平板變色的23株細(xì)菌的解無(wú)機(jī)磷能力進(jìn)行測(cè)定，各菌株的解無(wú)機(jī)磷能力為4.20～33.99 μg/mL(見(jiàn)表2). 其中，有8株菌的解無(wú)機(jī)磷能力大于20 μg/mL，占菌株總數(shù)的30.8%；13株菌的解無(wú)機(jī)磷能力為10～20 μg/mL，占50%；其余5株的解無(wú)機(jī)磷能力為4～10 μg/mL，占19.23%；解無(wú)機(jī)磷能力最強(qiáng)的是霸王SP0205，為33.99 μg/mL.

表2 培養(yǎng)液pH及解無(wú)機(jī)磷能力

2.3 解有機(jī)磷能力

該研究中，既能在無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，又能在有機(jī)磷培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的PSB共有32株，分屬于鏈霉菌屬(5株)、馬西利亞菌屬(4株)、芽孢桿菌屬(4株)、假單胞菌屬(3株)、蒼白桿菌屬(2株)、中華根瘤菌屬(2株)、寡養(yǎng)單胞菌屬(2株)、產(chǎn)檢桿菌屬(1株)、根瘤菌屬(1株)、鞘氨醇單胞菌屬(1株)、分枝桿菌屬(1株)、細(xì)桿菌屬(1株)、紅球菌屬(1株)、韓國(guó)生工屬(1株)、類諾卡氏菌屬(1株)、短波單胞菌屬(1株)和短桿菌屬(1株). 其中，鏈霉菌占比(15.62%)較高，其次是芽孢桿菌和馬西利亞菌，各占12.5%. 這32株解有機(jī)磷菌的解有機(jī)磷能力如表3所示，有4株菌的解有機(jī)磷能力高于100 IU，占菌株總數(shù)的10.53%；有7株菌的解有機(jī)磷能力為50～100 IU，占18.4%；有17株菌的解有機(jī)磷能力為10～50 IU，占44.74%. 其中，解有機(jī)磷能力最高的菌株是SP0110-2，高達(dá)191.03 IU，具有很好的應(yīng)用價(jià)值.

表3 菌株的解有機(jī)磷能力

2.4 產(chǎn)鐵載體分析

利用CAS檢測(cè)平板對(duì)篩選出的根際PSB的產(chǎn)鐵載體能力進(jìn)行定性測(cè)定，其中有22株P(guān)SB的菌落有明顯的橙黃色暈圈，SP0412的D/d值最大，為4.83. 定量測(cè)定結(jié)果(見(jiàn)表4)顯示，這些菌株的As/Ar范圍為0.47～0.99；As/Ar為0.4～0.6的有7株(SP0412、SP0403、SP0610、SP0115-2、SP0306、SP0203和 SP0201)，產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)；As/Ar為0.6～0.8的有10株，占供試菌總數(shù)的45.45%，產(chǎn)鐵載體能力中等；As/Ar為0.8～1.0的有5株，占供試菌株總數(shù)的22.73%，產(chǎn)鐵載體能力比低. 產(chǎn)鐵載體菌株占所分離PSB菌株的35.48%，產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)者的比例為31.82%.

表4 產(chǎn)鐵載體的根際解磷菌

3 討論

細(xì)菌是根際土壤微生物中數(shù)量最多的類群，在維持根際土壤的生態(tài)循環(huán)方面起著重要作用[18]. 由于植物根系的分泌物和根的脫落物均會(huì)影響植物根部的微生物群落，致使不同植物根際的微生物組成也有很大差別，這也勢(shì)必影響PSB的種群結(jié)構(gòu)[19]. 目前已報(bào)道的PSB約有30多個(gè)菌屬[10]. 該文從內(nèi)蒙古荒漠灌木植物根際分離到62株P(guān)SB，分屬6綱21屬，說(shuō)明內(nèi)蒙古荒漠灌木有著多樣性高、種類豐富的根際微生物資源. 根際土壤中一些常見(jiàn)的屬種，如芽孢桿菌屬、假單胞菌屬、根瘤菌屬、中華根瘤菌屬、鞘氨醇單胞菌屬及馬西利亞菌屬等在所分離的PSB菌株中都有發(fā)現(xiàn)，大部分都是已報(bào)道過(guò)對(duì)植物有促進(jìn)生長(zhǎng)作用的細(xì)菌類群，包括解磷、產(chǎn)鐵載體的屬種[10,20]；也有較少報(bào)道的屬種，如韓國(guó)生工屬、冢村氏菌屬. 有研究[21-23]表明，不同植物根際土壤微生物優(yōu)勢(shì)菌門(mén)(如變形菌門(mén)、放線菌門(mén)等)組成具有高度相似性. 筆者也發(fā)現(xiàn)，放線菌綱是內(nèi)蒙古荒漠灌木根際解磷菌的最優(yōu)勢(shì)類群，但放線菌的數(shù)量則很少，這與程冬梅等[20]對(duì)新疆胡楊林根際微生物類群的研究結(jié)果一致. 該研究中，芽孢桿菌屬是最優(yōu)勢(shì)菌屬，占總分離菌株總數(shù)的17.74%，這與已有報(bào)道[24-25]的根際優(yōu)勢(shì)菌屬相同，該屬種的菌株是最早發(fā)現(xiàn)的也是解磷效果最好的并且應(yīng)用最廣泛的PSB類群[26]. Kumar等[27]發(fā)現(xiàn)，印度Haryana干旱半干旱地區(qū)的優(yōu)勢(shì)菌類群分別屬于厚壁菌門(mén)(Firmicutes)和芽孢桿菌屬，這與干旱區(qū)的內(nèi)蒙古荒漠灌木根際PSB菌群有一定差異，而且不同灌木間根際PSB組成差異明顯，這或許與荒漠灌木種類及所處的自然環(huán)境和生態(tài)條件有關(guān)，但尚需進(jìn)一步驗(yàn)證.

PSB具有較強(qiáng)的根際效應(yīng)分布，不同土壤類型下PSB的數(shù)量及其解磷能力也不同. 與其他生境植物發(fā)現(xiàn)的根際PSB相比，內(nèi)蒙古荒漠灌木根際PSB的解無(wú)機(jī)磷能力處于中低等水平，遠(yuǎn)低于相關(guān)報(bào)道結(jié)果[28-29]. 筆者發(fā)現(xiàn)，PSB的解磷量與培養(yǎng)液的pH雖然呈負(fù)相關(guān)，但相關(guān)性并不顯著，這與已有報(bào)道結(jié)果[30]一致，說(shuō)明非酸類代謝物質(zhì)可能是所分離菌株解磷的主要機(jī)制[31]. 筆者還發(fā)現(xiàn)，雖然有一些PSB能在無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基上產(chǎn)生比較明顯的溶磷圈，但定量測(cè)定的溶磷量則較低甚至出現(xiàn)負(fù)數(shù)，這可能是PSB在分解難溶的Ca3(PO4)2過(guò)程中，由于溶解產(chǎn)生的可溶性磷被PSB自身細(xì)胞吸收或貯藏利用所導(dǎo)致.

對(duì)于有機(jī)磷降解菌的報(bào)道多為芽孢桿菌和假單胞菌[32]. 該研究篩選出的32株解有機(jī)磷菌中鏈霉菌最多(15.62%)，其次為芽孢桿菌和假單胞菌(12.5%)，與上述報(bào)道相似. 這32株解有機(jī)磷PSB的解有機(jī)磷能力高于100 IU的有4株，在50～100 IU之間的有7株，解有機(jī)磷能力最強(qiáng)的菌株是SP0110-2，高達(dá)191.03 IU，遠(yuǎn)高于相關(guān)報(bào)道結(jié)果[33-34]，處于較高水平. 該研究中發(fā)現(xiàn)具有解有機(jī)磷能力的菌株有32株，達(dá)到所篩菌株總數(shù)的51.62%，共分屬于17個(gè)菌屬，表明荒漠環(huán)境下的解有機(jī)磷PGPR具有豐富的多樣性，這與荒漠灌木的耐貧瘠、耐干旱的能力息息相關(guān).

在低鐵環(huán)境中，許多PGPR可產(chǎn)生鐵載體，可以螯合環(huán)境中溶解的鐵加以吸收，有效限制了土壤中可溶性鐵的供應(yīng)，致使病原真菌產(chǎn)生鐵缺乏，引發(fā)麥角甾醇合成途徑受阻，抑制細(xì)胞膜合成，產(chǎn)生物質(zhì)滲漏[35]，使其死亡. 所以具有產(chǎn)鐵載體能力的細(xì)菌不僅具有植物促生能力，還能增強(qiáng)植物抗病原菌能力. 對(duì)具有產(chǎn)鐵載體能力的PSB的研究表明，來(lái)自不同灌木植物根際的產(chǎn)鐵載體PSB有著明顯的多樣性. 在系統(tǒng)發(fā)育上，22株產(chǎn)鐵載體菌株分屬于14個(gè)菌屬，占全部供試菌總數(shù)的35.48%，芽孢桿菌屬有6株，占總產(chǎn)鐵載體菌株數(shù)量的27.27%，為優(yōu)勢(shì)菌屬，不同于朱彭玲等[36]的研究結(jié)果. 目前，有關(guān)解有機(jī)磷細(xì)菌具有產(chǎn)鐵載體能力的報(bào)道還較少[32]，而筆者篩選到的具產(chǎn)鐵載體能力的有機(jī)磷降解菌多達(dá)18株，占菌株總數(shù)的81.82%，且產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)的菌株(占總數(shù)的31.82%)全部是解有機(jī)磷細(xì)菌. 這些研究結(jié)果表明，內(nèi)蒙古荒漠可成為具有多種植物較高促生長(zhǎng)能力的解有機(jī)磷根際促生菌的重要來(lái)源.

4 結(jié)論

a) 內(nèi)蒙古荒漠地區(qū)蘊(yùn)藏著較為豐富的PSB菌種資源. 從西鄂爾多斯荒漠5種灌木根際分離到62株P(guān)SB，分屬α-變形菌綱、β-變形菌綱、γ-變形菌綱、芽孢桿菌綱、放線菌綱和噬纖維菌綱，其中放線菌綱為最優(yōu)勢(shì)菌綱；分屬21個(gè)菌屬，其中芽孢桿菌屬為最優(yōu)勢(shì)菌屬；不同灌木間PSB組成差異比較明顯，四合木根際PSB種類最為豐富，而白刺根際PSB種類最少.

b) 分離到的PSB解無(wú)機(jī)磷能力處于中低等水平，解無(wú)機(jī)磷能力在4.20～33.99 μg/mL之間；解有機(jī)磷的PSB菌株占比較大，且大部分(解有機(jī)磷能力高于50 IU的占比為47.83%)解有機(jī)磷能力較強(qiáng)，最高可達(dá)191.03 IU，處于較高等水平；有22株具有產(chǎn)鐵載體能力，且產(chǎn)鐵載體能力較強(qiáng)的菌株(占比為31.82%)全部為解有機(jī)磷細(xì)菌，是解有機(jī)磷PGPR的重要來(lái)源之一.